何首乌饮对运动性疲劳大鼠睾丸组织17β-羟基类固醇脱氢酶表达的影响

目的 探讨何首乌饮对运动性疲劳大鼠睾丸组织17β-羟基类固醇脱氢酶(17β-HSD)的影响.方法 50只雄性SD大鼠随机分为5组,A组为安静对照组;B组为安静何首乌饮组;C组为模型组;D组为何首乌饮治疗组;E组为何首乌饮预防组,每组10只.C、D和E组大鼠复制运动性疲劳动物模型,其中E组每天训练前给予何首乌饮20g/(...     

何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织P450胆固醇侧链裂解酶和类固醇激素急性调节蛋白的影响

目的 探讨何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)和类固醇激素急性调节蛋白(StAR)的影响.方法 60只雄性SD大鼠,随机分为安静对照组(A组)、安静何首乌饮组(B组)、模型组(C组)、自然恢复组(D组)、何首乌饮治疗组(E组);何首乌饮预防组(F组),每组10只.C、D、E和F组大鼠复制运动疲劳动物模型,其中F组每天训练前给何首乌饮20g/(kg·d)(含生药4.8kg/L)灌胃60 d.模型成功后E组给何首乌饮20 g/(kg·d)(含生药4.8kg/L)灌胃治疗60 d.采用美国Beckmancoulter Unicel Dxl 800仪器测定睾酮水平; 采用RT-PCR、Western blotting和免疫组织化学法检测各组睾酮合成限速酶P450scc和StAR的表达变化.结果 P450scc免疫组织化学阳性颗粒主要表达于间质细胞及精母细胞,B组和F组表达最强,C组最弱,与其余各组相比差异有统计学意义.P450scc蛋白和mRNA表达变化为B、F组明显高于E、D和A组(P<0.05),C组明显低于A组(P<0.05),A组和D组以及B组和F组两两之间差异无显著性;StAR免疫组织化学阳性颗粒主要表达于睾丸间质细胞胞质,阳性强度表现为E组和F组最强,C组最弱.StAR蛋白和mRNA表达变化为E和F组明显高于A、D组(P<0.05),C组明显低于A组(P<0.05),A、D组之间无差异.结论 何首乌饮可以提高睾酮合成限速酶P450scc和StAR的表达.     

何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织黄体生成素受体的影响

目的:探讨何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织黄体生成素受体(LHR)的影响.方法:复制运动疲劳动物模型,测定睾酮水平,采用RT-PCR、免疫印迹和免疫组织化学法检测各组睾丸组织LHR的表达变化.结果:LHR免疫组化阳性颗粒主要表达于间质细胞以及精母细胞胞膜和胞质,何首乌饮预防组和何首乌饮治疗组阳性信号较强,模型组最弱.LHR蛋白和mRNA表达变化为:何首乌饮预防组、何首乌饮治疗组明显高于对照组和何首乌饮组,模型组明显低于对照组.结论:何首乌饮可以提高大鼠睾丸组织LHR的表达.     

糖皮质激素代谢酶11β-羟基类固醇脱氢酶Ⅰ型在新生大鼠脑内的分布与表达

目的　观察新生大鼠脑发育成熟过程中糖皮质激素代谢酶 11β 羟基类固醇脱氢酶Ⅰ型 (11β HSD1)的变化。　方法　免疫组织化学和Western印迹杂交的方法。　结果　免疫组织化学染色表明 ,11β HSD1分布于新生大鼠大脑皮层的各个层次 ,但以Ⅱ层 (外颗粒层 )含量为最高、Ⅲ (锥体细胞层 )、Ⅳ (内颗粒层 )层 11β HSD1的含量次之。海马的各个区域和齿状回也均有 11β HSD1的分布。Western印迹杂交分析表明 ,新生鼠顶叶皮层、海马和下丘脑 11β HSD1的表达在出生后 2周内表达一直比较高 ,第 15d时其表达开始下降。　结论　提示新生鼠大脑 11β HSD1的表达可能与糖皮质激素促进脑组织的发育和成熟有关。     

糖皮质激素代谢酶11β-羟基类固醇脱氢酶I型在新生大鼠脑内的分布与表达

目的 观察新生大鼠脑发育成熟过程中糖皮质激素代谢酶11β-羟基类固醇脱氢酶I型(11β-HSD1)的变化。方法 免疫组织化学和Western印迹杂交的方法。结果 免疫组织化学染色表明，11β-HSD1分布于新生大鼠大脑皮层的各个层次，但以Ⅱ层(外颗粒层)含量为最高、Ⅲ(锥体细胞层)、Ⅳ(内颗粒层)层11β-HSD1的含量次之。海马的各个区域和齿状回也均有11β-HSD1的分布。Western印迹杂交分析表明，新生鼠顶叶皮层、海马和下丘脑11β-HSD1的表达在出生后2周内表达一直比较高，第15d时其表达开始下降。结论 提示新生鼠大脑11β-HSD1的表达可能与糖皮质激素促进脑组织的发育和成熟有关。     

何首乌饮对大鼠睾丸间质细胞类固醇激素合成急性调节蛋白和细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶蛋白表达的影响

目的探究何首乌饮影响大鼠睾丸间质(Leydig)细胞类固醇激素合成急性调节蛋白(St AR)和细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)蛋白表达的变化。方法选用10~20 d的幼年雄性Wistar大鼠,分离、培养Leydig细胞,然后收集。采用氧化损伤的方法建立Leydig细胞衰老模型。实验分组:间质细胞衰老模型组,何首乌饮处理组,首乌丸处理组,正常组和何首乌饮对照组。结果衰老模型组Leydig细胞St AR和P450scc的免疫组织化学染色强度明显低于正常组和何首乌饮对照组(P0.01)。另一方面,何首乌饮和何首乌丸干预组St AR和P450scc的免疫组织化学染色强度明显高于衰老模型组(P0.05),何首乌饮组好于何首乌丸组。结论何首乌饮可提高睾丸Leydig细胞St AR和P450scc蛋白的表达,提高睾酮的合成能力,从而延缓Leydig细胞衰老。     

何首乌饮对衰老大鼠精子质量的影响

目的:探讨何首乌饮对衰老大鼠精子质量的影响。方法:荧光显微镜观察附睾尾精子质膜和DNA完整性、线粒体功能并计数200个精子中正常精子的百分数。生物化学发光法检测各组大鼠血清睾酮的浓度,计算睾丸指数。结果:自然衰老组大鼠质膜和DNA完整性精子数量明显减少,线粒体功能异常的精子明显增多,血清睾酮含量明显下降,与青年对照组比较差异有统计学意义;而何首乌饮和何首乌丸组正常精子数量比自然衰老组大鼠显著增多,血清睾酮含量明显增加,且用药60 d何首乌饮组显著多于其余各组。结论:何首乌饮能够明显提高衰老大鼠血清睾酮含量,改善精子质量,对精子起到保护作用。     

硒对胃癌大鼠肾上腺皮质3β-HSD和SDH组织化学的影响

目的：观察硒在预防大鼠实验性胃粘膜癌变过程中肾上腺皮质组织化学的变化。方法：用断乳雄性Wistar大鼠，分为盐水对照组、N-甲基N—硝基—亚硝基胍(MNNG)和Selenite十MNNG组，用组织化学和图像分析方法观察大鼠肾上腺皮质的变化。结果：补硒组大鼠肾上腺皮质束状带和网状带细胞内琥珀酸脱氢酶(SDH)和3β—羟基类固醇脱氢酶(3β—HSD)的组化反应减弱，与MNNG组相比有显著性差异，与对照组相比略有增加，但无统计学意义。MNNG组大鼠SDH和3β—HSD的反应增强，与对照组相比有显著性差异。结论：硒在预防大鼠实验性胃癌过程中，可能参与了肾上腺皮质功能的调节。     

11β-羟基类固醇脱氢酶1与代谢综合征

11β-羟基类固醇脱氢酶(11betahydroxysterioddehydrogenase,11β-HSD)作为皮质激素的代谢酶,介导生物活性的皮质酮(氢化可的松)和无活性的脱氢皮质酮(可的松)之间的相互转化。目前发现有2种同工酶(11β-HSD1和11β-HSD2),其中11β-HSD1具有氧化和还原双重作用,调节局部糖皮质激素的活性,参与胰岛素抵抗、肥胖、2型糖尿病和高血压等的病理生理过程,为代谢综合征可能的原因之一。     

贵州某白酒对大鼠睾丸间质细胞内类固醇激素急性调节蛋白表达及血清睾酮水平的影响

目的探讨摄入贵州某54°白酒后,不同时程及不同剂量对大鼠睾丸间质细胞内类固醇激素急性调节蛋白(St AR)表达及血清睾酮水平的变化,以期为科学饮酒提供基础资料。方法正常成年雄性SD大鼠69只,随机分为正常对照组(n=15)及实验组(n=54)。实验组分为低剂量组0.8ml/(kg·d)、中剂量组1.6ml/(kg·d)及高剂量组2.4ml/(kg·d),实验组大鼠每日灌胃2次。分别于第4周末、第8周末、第12周末采血清,取睾丸组织。采用免疫组织化学SABC法、图像分析、Western blotting检测睾丸组织St AR的表达,采用化学发光法检测大鼠血清睾酮水平。结果各实验组的血清睾酮水平与正常对照组比较未见明显异常,差异无统计学意义(P0.05)。St AR免疫组织化学阳性产物存在于睾丸间质细胞胞质内;与正常对照组比较,4周、8周、12周各剂量组St AR免疫染色及平均吸光度均有所增强(P0.05);Western blotting检测,4周、8周、12周各剂量组St AR蛋白表达水平增强(P0.05)。结论在本实验设定的剂量和时程内用该白酒灌胃后,大鼠睾丸间质细胞内St AR表达水平有所增强,血清睾酮水平并无明显变化。     

中药何首乌饮抗大鼠卵巢组织衰老的机理

目的探讨何首乌饮抗大鼠卵巢组织衰老的机理。方法36只SD大鼠随机分为3组:正常组、模型组、预防组。采用D-半乳糖连续腹腔注射法制造雌性大鼠亚急性衰老模型,预防组在造模的同时以中药方剂何首乌饮灌胃。应用逆转录聚合酶连反应(RT-PCR)方法检测各组大鼠卵巢组织p53、p19ARF、Rb及p16基因的表达,用Western blotting方法检测各组大鼠卵巢组织Rb及p16蛋白的表达情况。结果何首乌饮明显抑制了衰老大鼠卵巢组织中p53、p19ARF、Rb以及p16基因表达的上调趋势(P<0.05),且明显降低了衰老大鼠卵巢组织中Rb及p16蛋白的表达(P<0.05)。结论何首乌饮抑制衰老途径中关键的调节因子p53、p19ARF、Rb及p16的表达,从而起到抗大鼠性腺衰老的作用。     

何首乌饮对衰老大鼠睾丸组织细胞Rb/p53信号转导通路的影响

目的 通过检测Rb、p16、p53、p19、p21在衰老大鼠睾丸组织中的表达,探讨何首乌饮抗大鼠睾丸组织衰老的机制。 方法 选用8周龄SD雄性大鼠84只,随机分为正常组、模型组、何首乌饮高、中、低剂量组、何首乌丸剂组、自然恢复组,每组12只,采用D-半乳糖连续腹腔注射建立亚急性衰老大鼠模型。采用免疫组织化学、Western blotting和RT-PCR法检测磷酸化Rb蛋白（pRb）、p16、p53、p19、p21在大鼠睾丸组织的表达差异。 结果 模型组大鼠睾丸组织Rb、p53、p16、p19、p21表达明显增加,pRb表达明显减少（P<0.05）;何首乌饮、何首乌丸组能显著提高pRb的表达,降低Rb、p53、p16、p19、p21表达（P<0.05）,何首乌饮高剂量组调节作用大于其他各组（P<0.05）。 结论 何首乌饮通过调节睾丸组织Rb/p53信号转导通路相关基因和蛋白表达起到延缓衰老的作用。     

补肾中药何首乌饮对衰老大鼠睾丸组织表皮生长因子及其受体表达的影响

目的:观察何首乌饮对衰老雄性大鼠睾丸组织表皮生长因子(EGF)及其受体(EGFR)表达的影响.方法:选用D-半乳糖连续腹腔注射建立亚急性衰老大鼠模型,并用补肾中药何首乌饮进行干预,采用免疫组织化学和免疫印迹观察各实验组大鼠EGF、EGFR在睾丸组织表达的变化.结果:与正常对照组大鼠比较,模型组、自然恢复组大鼠睾丸组织EGF、EG-FR表达减少,而何首乌饮可以提高睾丸组织EGF、EGFR表达,与模型组和自然恢复组比较差异有统计学意义.结论:何首乌饮能够提高衰老大鼠睾丸组织EGF、EGFR表达,具有一定延缓睾丸组织衰老作用.     

何首乌饮延缓大鼠睾丸间质细胞衰老与调控胰岛素/胰岛素样生长因子-1信号通路的关系#br#

目的 探讨何首乌饮延缓大鼠睾丸间质（Leydig）细胞衰老与调控胰岛素/胰岛素样生长因子-1（IGF-1）信号通路的关系。方法 采用氧化损伤的方法建立大鼠Leydig细胞衰老模型。用流式细胞术检测各组细胞周期的变化。应用Real-time PCR、免疫荧光和Western blotting技术检测Leydig细胞胰岛素/IGF-1信号传导通路关键基因的表达水平，并运用胰岛素受体/IGF受体特异性抑制剂BMS-754807处理细胞，用流式细胞术检测细胞凋亡水平。结果 与正常组相比，衰老组β-半乳糖苷酶阳性细胞率可达60%（P＜0.05），G1 期所占比重明显增加， S期所占比重明显减少（P＜0.05）。胰岛素/IGF-1信号传导通路关键基因表达变化：衰老组胰岛素受体（INSR），胰岛素受体底物（IRS1）、IRS2、IGF1表达水平明显低于正常组（P＜0.05），胰岛素样生长因子结合蛋白3（IGFBP3）的 mRNA表达明显高于正常组（P＜0.05），何首乌饮可逆转上述现象。用 BMS-754807处理衰老的Leydig细胞后，Bcl-2 mRNA表达水平低于衰老组（P＜0.05），用何首乌饮和BMS-754807同时处理衰老的Leydig细胞，细胞凋亡率高于何首乌饮组（P＜0.05）。结论 何首乌饮通过调控胰岛素/IGF-1信号传导通路延缓Leydig细胞衰老。     

何首乌饮对衰老大鼠生精细胞线粒体凋亡通路关键基因表达的影响

目的探讨何首乌饮对衰老大鼠睾丸生精细胞线粒体凋亡通路关键基因表达的影响。方法选用12月龄Wistar雄鼠45只,随机分为3组:青年对照组、自然衰老组、何首乌饮组,每组15只,何首乌饮组和自然衰老组于16个月开始分别灌胃何首乌饮和等量蒸馏水,连续60d。青年对照组于12月龄,其余两组于18月龄分别进行实验,通过Real-time PCR、免疫荧光染色和免疫印迹法,观察各组大鼠睾丸组织线粒体凋亡通路关键基因DR6、BAX、Caspase-3、Cyt-C、14-3-3σ的表达变化。结果自然衰老大鼠线粒体凋亡通路关键基因14-3-3σ表达明显低于青年对照组,DR6、BAX、Caspase-3、Cyt-C表达明显高于青年对照组;而何首乌饮用药后能明显逆转上述现象。结论何首乌饮提高衰老大鼠精子质量与线粒体凋亡通路有关。     

慢性脑血流低灌注对大鼠脑内β-淀粉样肽的影响

目的 研究慢性脑血流低灌注对大鼠脑内β-淀粉样肽(Aβ)及淀粉样前体蛋白(APP)表达和分布的影响. 方法双侧颈总动脉结扎大鼠制作慢性脑血流低灌注动物模型,应用免疫组织化学方法检测皮质和海马CA1区APP、Aβ1-40、Aβ1-42的表达与分布;刚果红染色检测血管的淀粉样变;放射免疫分析法检测手术后10d、30d、90d和180d大鼠脑皮质及海马的Aβ含量;免疫印迹法检测大脑皮质和海马的APP含量. 结果 免疫组织化学染色显示低灌注90d模型组海马CA1区APP、Aβ1-40的表达较对照组明显增加(两者均P<0.05),低灌注180d模型组皮质和海马CA1区APP、Aβ1-40和Aβ1-42的表达均增加(除皮质Aβ1-40P<0.01外,其余均P<0.05);Aβ1-40阳性反应产物均匀分布于胞质内,Aβ1-42阳性反应产物在神经元胞质内呈颗粒状聚集.刚果红染色显示,术后180d脑实质内小血管发生淀粉样改变.放射免疫分析法和免疫印迹法结果显示,大鼠术后90d海马Aβ和APP含量开始增高(两者均P<0.05),180d皮质Aβ和APP的含量增高(Aβ P<0.05,APP P<0.01). 结论 慢性脑血流低灌注可引发大鼠脑内Aβ含量的升高,可能在阿尔茨海默病(AD)早期发病过程中有重要意义.     

葡萄糖上调胰岛β细胞系NIT-1 11β-羟类固醇脱氢酶1型的表达

目的　探讨葡萄糖对胰岛β细胞系NIT-1上11β-羟类固醇脱氢酶1型（11β-HSD1）的表达及其功能的影响。方法　用细胞免疫化学染色、RT-PCR和Western blot法检测NIT-1细胞11β-HSD1mRNA及蛋白表达。分别用含10、15、20和25mmol/L葡萄糖的Ham's F12培养液培养NIT-1细胞72h,检测11β-HSD1mRNA和蛋白表达水平,用葡萄糖刺激释放（GSIS）试验评价胰岛β细胞功能。结果 (1) 胰岛NIT-1细胞胞质里有棕黄色阳性染色颗粒,并有11β-HSD1mRNA和蛋白表达,(2) 15、20和25mmol/L葡萄糖组11β-HSD1表达增加(P＜0.05,P＜0.01),葡萄糖刺激胰岛素分泌减少(P＜0.05,P＜0.01)。结论 11β-HSD1在胰岛NIT-1细胞上有表达,糖皮质激素可能参与胰岛β细胞胰岛素分泌功能。     

喉癌组织中5α—还原酶和17β—羟类固醇脱氢酶的活性

目的：了解性激素对喉癌的影响。方法：测定２０例喉癌和非喉癌组织的５α－还原酶（５αＲ）和１７β－羟类固醇脱氢酶（１７β－（ＯＨ）ＳＤＨ）的活性，此两酶分别涉及睾酮转化为二氢睾酮和雌二醇转化为雌酮。结果：５αＲ的活性在两种组织中没有差别。相反，１７β－（ＯＨ）ＳＤＨ活性在喉癌组织中明显降低，仅为非喉癌组织的５０％。结论：促进喉癌发展的可能是雌激素而非雄激素     

何首乌饮对衰老大鼠卵巢增殖与凋亡的影响

目的探讨中药方剂何首乌饮对衰老大鼠卵巢增殖与凋亡的影响。方法 D-半乳糖连续腹腔注射致亚急性衰老动物模型,造模后灌胃何首乌饮连续60天后,大鼠断头取卵巢。采用免疫组织化学分析方法和原位末端标记法（TUNEL）检测大鼠卵巢组织PCNA,细胞凋亡情况。结果模型组大鼠卵巢PCNA阳性细胞数低于正常对照组大鼠（P〈0.05）。何首乌饮各剂量组PCNA阳性细胞数高于模型组（P〈0.05）。模型组大鼠卵巢组织TUNEL阳性细胞数高于正常对照组大鼠（P〈0.05）。何首乌饮各剂量组TUNEL阳性细胞数均低于模型组（P〈0.05）。并呈现一定的剂量依赖性。差异有统计学意义（P〈0.05）。结论何首乌饮可明显提高衰老大鼠卵巢的增殖能力并抑制其凋亡,具有一定的延缓衰老作用。     

何首乌饮减轻β-淀粉样蛋白诱导的海马神经元损伤的作用机制

目的 探讨何首乌饮对β 淀粉样蛋白（Aβ）诱导的大鼠原代培养海马神经元损伤保护作用及可能机制。方法 采用新生24h 内的SD大鼠进行原代培养海马神经元,将培养10d的海马神经元分为模型组、何首乌饮保护组、何首乌饮治疗组、何首乌饮对照组及空白对照组。Hoechst33258染色观察海马神经元的凋亡率;免疫组织化学、Western blotting和RT-PCR检测各组海马神经元硫氧还蛋白1（Trx1）蛋白和mRNA的表达情况。 结果 模型组细胞凋亡率增高（P<0.05）,Trx1蛋白和mRNA的表达量明显减少（P<0.05）;与模型组相比,何首乌饮治疗组和预防组的凋亡率明显降低（P<0.05）,Trx1蛋白和mRNA的表达量明显增加（P<0.05）。 结论 何首乌饮可明显减轻Aβ诱导的海马神经元的损伤,其机制可能与增加抗氧化蛋白Trx1的表达有关。