粉防己碱对增生性瘢痕成纤维细胞体外凋亡的影响

目的观察粉防己碱对培养的人增生性瘢痕成纤维细胞的凋亡影响。方法培养人体增生性瘢痕的成纤维细胞,设实验组和对照组,实验组加入粉防己碱,用流式细胞仪和原位末端酶标记法观察比较两组之间的细胞凋亡率和阳性细胞率。结果细胞凋亡率实验组为18.62±2.41,对照组为10.55±2.50,两组比较差异有统计学意义(P<0.01);阳性细胞率实验组为9.52%,对照组为4.28%,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论粉防己碱能促进成纤维细胞的凋亡,可能具有防治瘢痕的作用。     

Echistatin对人增生性瘢痕成纤维细胞的作用研究

目的研究Echistatin对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡及Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响。方法体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞,设Echistatin处理组和对照组,MTT法、流式技术及RT-PCR法检测人增生性瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡及Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达。结果Echistatin可明显抑制人增生性瘢痕成纤维细胞增殖,促进凋亡,降低Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达。结论Echistatin可作为防治增生性瘢痕的筛选药物。     

瘢痕成纤细胞整合素表达实验研究

目的：了解在体外培养的瘢痛及正常皮肤来源的成纤维细胞整合素表达情况。方法：应用β１及α１￣α４整合素单克隆抗体对成纤维细胞进行整合素原侠ＥＬＩＳＡ检测，观察不同培养时期瘢痛成纤维细胞的β１及α１￣α４整合素表达水平，辅以正常皮肤成纤维对细胞做对照。结果：培养的瘢痛成纤维细胞整合素各亚型表达均明显高于同期培养的正常皮肤成纤维细胞表达水平（Ｐ〈０．０１）；细胞经较长时间培养后，整合素的表达均有所下降，     

川芎嗪抑制瘢痕成纤维细胞增殖及胶原的合成

目的：研究川芎唪治疗增生性瘢痕的机制。方法：对增生性瘢痕成纤维细胞进行体外培养,通过ＭＴＴ法检测成纤维细胞细胞的增殖生,用羟脯氨酸（ＨＰ）比色法测定细胞胶中成含量。结果：ＭＴＴ法显示川芎嗪增生性瘢痕成纤维细胞的增殖活性,可以减少成纤维细胞的胶原合成使细胞形态学发生改变。结论;川芎唪可以抑制增生性瘢痕成纤维细胞的增殖及胶原合成。     

透明质酸刺激因子对增生性瘢痕成纤维细胞透明质酸合成的影响

目的　了解兔源性透明质酸刺激因子 (HASF)对体外单层及三维培养条件下增生性瘢痕成纤维细胞 (FB)透明质酸 (HA)合成的影响 .方法　从胎兔羊水及血清中提纯HASF分别作用于单层及三维培养的 FB细胞 ,用放免法测定上清液中 HA浓度 .结果　在单层培养条件下 ,随着 HASF剂量由 0 .1m g· L- 1增至 0 .1g· L- 1 ,HA浓度也由 (495±37) mg· L- 1 增至 (914± 75 ) mg· L- 1 ,在一定范围内呈剂量依赖性 (P<0 .0 1) .继续增加 HASF剂量 ,HA浓度并不成比例增加 ,呈显出饱和性 .随 HASF作用时间由 3d延长至 7d,HA浓度也呈时间依赖性的增加 (P<0 .0 1) .在三维培养条件下 ,随 HASF剂量的增加 ,HA浓度也由 (90± 2 5 ) mg· L- 1增至 (2 93± 6 3) mg· L- 1 ,也呈剂量依赖性 (P<0 .0 1) ,且明显低于单层培养条件下 HA的浓度 (P<0 .0 1) .结论　 HASF对单层及三维培养的 FB有明显的促 HA合成作用 ,并呈剂量和时间依赖性 .     

透明质酸刺激因子对增生性瘢痕成纤维细胞生长增殖的影响

目的：了解兔源性透明质酸刺激因子（ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃ ａｃｉｄ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ,ＨＡＳＦ）对人增生性产痕成纤维细胞生长增殖的影响。方法：将ＨＡＳＦ作用于体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞,测定＾３Ｈ－ＴｄＲ参入量、ＭＴＴ反应Ａ值及上清液中有质酸（ＨＡ）的含量。结果：１×１０＾－３～１×１０＾－２ｇ／Ｌ值降低,ＨＡ含量明显增加（Ｐ〈０．０１）。结论：兔源性ＨＡＳＦ在体外能促进人增     

醋酸曲安缩松及丝裂霉素对瘢痕成纤维细胞整联蛋白表达的影响

目的：了解醋酸曲安缩松、丝裂霉素对瘢痕成纤维细胞整联蛋白表达的影响,初步探讨两种药物抗瘢痕增生的作用机制。方法：体外培养瘢痕组织成纤维细胞,利用β１,α１～４整联蛋白单克隆抗体,通过原位ＥＬＩＳＡ技术检测瘢痕成纤维细胞在不同质量浓度醋酸曲安缩松（１,１０,５０,１００μｇ／ｍｌ）和丝裂霉素（１,５,１０,２０μｇ／ｍｌ）作用下整联蛋白的表达水平。结果：醋酸曲安缩松、丝裂霉素均能不同程度地抑制瘢痕成纤维细胞整联蛋白的表达,抑制效果在实验范围内随药物浓度的增加而提高。其中醋酸曲安缩松对β１,α１～４整联蛋白表达的最大有效抑制浓度（μｇ／ｍｌ）分别为５０,１００,１００,５０,１００,抑制率分别达１６．４４％,３４．７４％,１５．９２％,３７．９５％和３２．１７％;丝裂霉素对它们的最大有效抑制浓度（μｇ／ｍｌ）分别为     

脂多糖对正常人皮肤成纤维细胞胶原合成的影响

目的:研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对正常人皮肤成纤维细胞胶原合成的影响,以阐明LPS在皮肤创伤愈合中的可能作用.方法:体外培养正常人皮肤成纤维细胞,采用3H-脯氨酸掺入法观察不同浓度(0、0.005、0.01、0.05、0.1、0.5和1.0 μg·ml-1)的LPS对成纤维细胞胶原合成的影响.结果:LPS刺激浓度在0.005 μg·ml-1时,皮肤成纤维细胞胶原蛋白合成增加;随着刺激浓度增加,刺激作用增强;但当LPS浓度为0.5 μg·ml-1时,促胶原合成作用开始降低;当浓度达到1.0 μg·ml-1时则呈现抑制效应.结论:在一定浓度范围内LPS促进成纤维细胞胶原合成,表明LPS在皮肤创伤愈合中可能具有重要作用.     

增生性瘢痕成纤维细胞生长特性的研究

目的：研究增生性瘢痕成纤维细胞与正常皮肤成纤维细胞生长特性的差异。方法：应用消化法建立成纤维细胞系，在倒置相差显微镜下观察细胞形态，应用细胞计数方法绘制细胞生长曲线，测定细胞生长速度。结果：增生性瘢痕成纤维细胞比正常皮肤成纤维细胞胞体大，形态不规则。前者细胞倍增时间约为6d，后者细胞倍增时间为3d。细胞融合后前者细胞数为后者的56％。结论：增生性瘢痕成纤维细胞与正常皮肤成纤维细胞是两种不同基因表现型的细胞。     

透明质酸刺激因子对三维培养的增生性瘢痕成纤维细胞收缩特性的影响

目的：了解透明质酸刺激因子（ＨＡＳＦ）对三维培养的瘢痕成纤维细胞收缩特性的影响．方法：将提纯的兔源性ＨＡＳＦ加入以人皮肤胶原为支架的人增生性瘢痕成纤维细胞三维培养系统（ＦＰＣＬ）,通过计算ＦＰＣＬ的收缩指数,用放免法测定其中ＨＡ的含量,就ＨＡＳＦ对三维培养的瘢痕成纤维细胞收缩性,快速收缩和ＨＡ合成的影响及其相关性进行初步研究．结果：三维培养系统中ＨＡＳＦ浓度≥１×１０－３ｇ／Ｌ时,ＨＡＳＦ与细胞介导的ＦＰＣＬ最大收缩指数有明显的剂量—效应关系,ＦＰＣＬ的收缩指数与对照组之间的差异非常显著（Ｐ＜０．０１）;ＨＡＳＦ对ＦＰＣＬ的快速收缩无影响（Ｐ＜０．０５）;ＦＰＣＬ中ＨＡ含量随ＨＡＳＦ浓度升高呈剂量依赖性升高;ＦＰ－ＣＬ的最大收缩指数与其中ＨＡ含量呈正相关（ｒ＝０．９８７５,Ｐ＜０．０１）．结论：ＨＡＳＦ能促进三维培养的瘢痕成纤维细胞的收缩,这种作用可能是通过刺激其合成ＨＡ实现的．     

大肠杆菌脂多糖对皮肤成纤维细胞数量及增殖周期的影响

目的:观察大肠杆菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激后,皮肤成纤维细胞数量和增殖周期的变化规律。方法:体外培养正常人皮肤成纤维细胞,加入不同浓度(0.005~1.0μg/m l)的大肠杆菌LPS(E.coli055:B5),通过细胞计数法连续观察1~9 d细胞数量的变化;于LPS加入后第6天细胞处于对数生长期时,采用流式细胞术观察细胞增殖周期。结果:LPS刺激浓度在0.005~0.1μg/m l时,细胞数量和S期细胞比例随着刺激浓度增加而增高,且呈浓度依赖性;当LPS浓度为0.5μg/m l时,上述作用开始降低,但仍高于对照组;当浓度达到1.0μg/m l时,细胞数量和S期细胞比例均低于对照组。结论:在一定浓度范围内LPS促进皮肤成纤维细胞增殖,而过高浓度LPS则呈现抑制效应。     

不同幅度牵张力对正常皮肤成纤维细胞向增生性瘢痕成纤维细胞转化的诱导作用

目的 分析不同幅度牵张力对正常皮肤成纤维细胞(NSFB)向增生性瘢痕成纤维细胞(HSFB)转化的诱导作用.方法 体外培养增生性瘢痕患者的NSFB和HSFB.加载牵张力的NSFB作为实验组,分N10％组、N15％组和N20％组3组,分别加载幅度为10％、15％、20％的周期性牵张力24 h,不加载牵张力的NSFB和HSFB作为对照组(N0组和H0组).通过观察细胞形态,以细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖,实时定量荧光PCR法检测整合素β1、P130Cas、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原a1链(COL1A1)、Ⅲ型胶原a1链(COL3A1)的基因表达,酶联免疫吸附(ELISA)法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1蛋白表达,分析NSFB的转化程度.结果 机械牵张力刺激NSFB增殖,N10％组细胞增殖水平显著高于N20％组(0.91±0.09比0.8±0.07,P＜0.05).牵张力作用下各个基因表达上调,N10％组整合素β1、P130Cas、TGF-β1、COL1A1、COL3A1的mRNA表达水平均显著高于N20％组(3.14±0.24、5.01±0.49、1.55±0.08、2.38±0.08、1.37±0.11比1.78±0.32、3.07±0.41、1.18±0.05、1.97±0.05、1.26±0.19,均P＜0.05).机械牵张力引起TGF-β1蛋白表达上调,N10％组TGF-Jβ1的蛋白表达水平显著高于N20％组[(459±12.96)比(372±10.49) pg/ml,P＜0.05].实验组Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达水平均显著高于N0组,但低于H0组(均P＜0.05);N10％组Ⅰ型胶原蛋白表达水平显著高于N20％组[(12.66±1.16)比(11.23±0.75)ng/ml,P＜0.05].结论 10％幅度牵张力对NSFB有明显的诱导转化作用,能够使NSFB表现出HSFB的部分生化特征.     

正、反义VEGF基因转染对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖行为的影响

目的探讨正、反义血管内皮生长因子(VEGF)基因对人增生性瘢痕成纤维细胞(HHSFb)增殖行为的影响。方法采用组织块法获取HHSFb,行细胞免疫化学鉴定。构建靶向VEGF基因pcDNA3.1(+)/hVEGF165(正义组)、pcDNA3.1(-)/hVEGF165(反义组)和空质粒pcDNA3.1(+)(空载体组)转染人成纤维细胞,以及未行转染处理的人成纤维细胞(对照组),共设为4组。经G418筛选获得阳性转染细胞克隆。逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)显示VEGF基因在细胞内的表达,上清行酶联免疫吸附反应(ELISA)检测VEGF蛋白表达水平,MTT测定细胞体外生长情况。结果成功构建正、反义VEGF基因表达载体。经统计学分析,与对照组和空载体相比,正义组VEGF mRNA表达增强,蛋白表达增强;反义组VEGF mRNA表达明显减弱,蛋白表达明显降低。MTT结果显示,转染前后细胞体外生长速度基本一致。结论正义VEGF基因重组质粒对HHSFb内源性VEGF的表达有促进作用,反义VEGF基因重组质粒可有效抑制HHSFb内源性VEGF的表达。     

氢化可的松对体外培养的皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的:研究激素对体外培养的成纤维细胞增殖及分泌功能的影响,初步探讨其治疗瘢痕的作用机制.方法:采用MTT比色法和3H-脯氨酸掺入法,观察氢化可的松对体外培养的皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响.结果:氢化可的松(0.1 g/L)能够抑制体外培养成纤维细胞增殖(MTT值0.523±0.051 vs 0.347±0.036,P<0.05)及分泌胶原的功能[3H-脯氨酸掺入量(248±6) Bq vs (181±6) Bq,P<0.05],并呈剂量依赖性(r=-0.8208).结论:氢化可的松可通过抑制瘢痕成纤维细胞增殖及胶原的合成,从而达到治疗瘢痕的作用.     

He-Ne激光重复照射抑制培养增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成的实验研究

目的 探讨Ｈｅ－Ｎｅ激光重复照射对培养增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成的抑制作用。方法 以不同功率密度（１０、５０、１００和１５０ｍＷ／ｃｍ＾２）Ｈｅ－Ｎｅ激光照射培养增生性瘢痕成纤维细胞３０ｍｉｎ,１／ｄ,连续照射３ｄ,在３ｄ重复照射后２４ｈ用＾３Ｈ－脯氨酸掺入法和斑点杂交法分别检测成纤维细胞胶原合成和Ⅰ型前胶原基因表达。结果 培养增生性瘢痕成纤维细胞的胶原合成、Ⅰ型前胶原基因表达水平在１０、５０ｍ     

中药马勃对大鼠皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

［摘 要］ 目的：中药马勃作用于体外培养大鼠皮肤的成纤维细胞,观察大鼠成纤维细胞增殖及胶原合成的能力,探讨马勃有效组分在细胞水平上促皮肤患处愈合的作用机制。方法：运用体外细胞培养技术对新生大鼠乳鼠皮肤的成纤维细胞进行培养,实验分为对照组（不给药组）和马勃有效组分37.5、75.0、150.0及300.0 mg/L组;实验组于传代培养24 h后加入不同浓度的药物,继续培养24、48、72 h后收集细胞。采用MTT比色法测定细胞增殖,生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法测定细胞胶原含量。结果：与对照组比较,37.5、75.0、150.0及300.0 mg/L实验组的成纤维细胞增长率和成纤维细胞胶原合成能力均显著性升高（P＜0.01）。在药物作用时间方面,与对照组比较,在24、48和72 h观察细胞增殖率和胶原合成能力均显著增强,72 h最强,差异有统计学意义（P＜0.01）。结论：在不同剂量马勃有效组分作用下,大鼠成纤维细胞活化增殖,胶原合成的能力增强。     

碱性成纤维细胞生长因子对兔皮肤成纤维细胞增殖的作用

目的：评价碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对兔皮肤或成纤维细胞增殖的影响。方法：在培养的兔皮肤成纤维细胞中添加浓度为10^-1-10^2μg/L的bFGF，应用甲基噻唑基四唑（MTT）法测定细胞增殖情况。结果与结论：10^-1－10^2μg／L的bFGF对兔皮肤成纤维细胞增殖有促进作用，且以50μg／L浓度作用最佳。     

美洲大蠊提取物对人胚胎皮肤成纤维细胞增殖的影响*

目的 研究美洲大蠊提取物Ento-A、Ento-B、Ento-C、Ento-D、Ento-E、Ento-F对体外培养人胚胎皮肤成纤维细胞（CCC-ESF-1）增殖的影响。方法 在不同时间用不同浓度的美洲大蠊提取物作用CCC-ESF-1,同时设不加药的阴性对照组（含等量细胞重悬液）和只加培养液的空白组。结果 与阴性对照组比较,3和 10?μg/ml的Ento-A、Ento-B、Ento-C、Ento-D、Ento-E对CCC-ESF-1细胞的增殖抑制作用效果较好,300?μg/ml Ento-F对CCC-ESF-1细胞的增殖有抑制作用。3?μg/ml Ento-A作用24?h时对CCC-ESF-1细胞的增殖抑制作用效果最好,3、10?μg/ml Ento-B、Ento-C、Ento-D、Ento-E作用72和96?h时对CCC-ESF-1细胞的增殖抑制作用效果较好,Ento-F对CCC-ESF-1细胞的增殖抑制作用不佳,均弱于其他5种。结论 美洲大蠊提取物能抑制体外CCC-ESF-1细胞的增殖。     

Differences between the gap junctional communication function of fibroblasts derived from pathological scars and normal skin

Keloid is a fibrotic disease Of the hUInan dends thattakes the form of benign fibIOus tumors resulting from anabnolmal response to wound. Unlike hyperplastic scarewith which keloid is freqUently collfused, keloid lesionusually extends beyond the bountyyes of the originalwound by invasive growth without rendssion with time,which is diffictilt to cormct s~cally and does not proVOke scar .on~tionll'2].It is noted that there ~ vallous patterns of intereellular interachon, as junchonal interoell…