天然ABO抗体缺失的分子机制研究

目的 从ABO基因水平探讨正常人群血型鉴定中出现天然抗体缺失的机制.方法 部分或全部缺失抗体导致ABO血型正反定型不一致的15个正常健康个体运用检验红细胞表面血型抗原最为敏感的方法-吸收放散试验未能检测出其抗原性.PCR扩增后直接序列分析ABO基因全长编码区及5'端调控(CBF/NF-Y)增强子区域多态性.结果 在常规的血清学反向定型实验中,这15个标本的血清中部分或全部缺失抗体,吸收放散实验与A或B型红细胞反应均为阴性.12个标本的ABO基因分析定型、增强子区域多态性与血清学结果相符合,1个O表型的标本中存在B101等位基因,2个B表型标本中检测出A102等位基因.结论 天然ABO抗体缺失的分子机制可能部分被揭示:ABO基因编码少量表达抗原,按照天然抗体产生规律,导致不能产生相应的ABO抗体.ABO基因分型在正反定型不符的疑难血液标本鉴定中,是血清学方法 非常有益的补充手段,是正确鉴定血型的有效方法.     

天然ABO抗体缺失的分子机制研究

目的 从ABO基因水平探讨正常人群血型鉴定中出现天然抗体缺失的机制.方法 部分或全部缺失抗体导致ABO血型正反定型不一致的15个正常健康个体运用检验红细胞表面血型抗原最为敏感的方法-吸收放散试验未能检测出其抗原性.PCR扩增后直接序列分析ABO基因全长编码区及5'端调控(CBF/NF-Y)增强子区域多态性.结果 在常规的血清学反向定型实验中,这15个标本的血清中部分或全部缺失抗体,吸收放散实验与A或B型红细胞反应均为阴性.12个标本的ABO基因分析定型、增强子区域多态性与血清学结果相符合,1个O表型的标本中存在B101等位基因,2个B表型标本中检测出A102等位基因.结论 天然ABO抗体缺失的分子机制可能部分被揭示:ABO基因编码少量表达抗原,按照天然抗体产生规律,导致不能产生相应的ABO抗体.ABO基因分型在正反定型不符的疑难血液标本鉴定中,是血清学方法 非常有益的补充手段,是正确鉴定血型的有效方法.     

Detection of anti-B antibodies in a patient with A1B blood group: A case report and literature review

ABO antibodies occur naturally and usually exist as alloantibodies. They are the most clinically significant in cases of transfusions. However, there are very few reports on auto-anti-A or B. A 58-year-old man visited our hospital for evaluation of an inguinal mass. Blood typing was performed, while preparing the patient for an excisional biopsy. Forward and reverse typing showed a typical AB and A pattern. Results of the direct antiglobulin and unexpected antibody screening tests were negative. The serum did not react with AB3 cells. The biopsy revealed a diffuse large B-cell lymphoma. After completing four cycles of R-CHOP chemotherapy, the patient achieved complete remission. There were no anti-B antibodies found on repeat ABO typing. This report shares our experience on unexpected anti-B antibody findings in a patient with an A1B blood type. To the best of our knowledge, this is the first report of anti-B antibodies in a patient with an A1B blood type in Korea.     

83例疑难ABO血型鉴定及分析

目的检测和鉴定ABO疑难血型,为安全输血提供质量保障。方法采用血型血清学方法进行盐水介质正、反定型;对盐水介质正、反定型不合者使用聚凝胺法检测和不规则抗体检测;采用吸收试验和放散试验进行ABO血型的检测,以准确鉴定ABO疑难血型。结果 83例标本ABO血型检测结果为,AB亚型9例、B亚型1例、弱A抗原7例、弱B抗原6例、低抗-A效价2例、低抗-B效价3例、不规则抗体阳性7例、无抗体O型4例、低抗-B效价O型2例、无抗-B抗体A型5例;37例标本经盐水介质和Polybrine法检测,正、反定型结果符合。结论用聚凝胺法、吸收试验和放散试验进行ABO疑难血型检测,能准确、及时鉴定ABO疑难血型。     

双精子嵌合体致ABO血型正反定型不符1例简

目的 对1例正定型呈混合凝集的ABO正反定型不符样本进行鉴定.方法 采用微柱凝胶法进行ABO、RhD血型鉴定、直接抗球蛋白试验和不规则抗体筛查,PCR-SSP法进行ABO基因分型,并分析外周血染色体核型.结果 先证者ABO正定型为红细胞混合凝集,反定型检出抗-A1;母亲和父亲分别为O型和AB型.先证者ABO基因座位存在O1、A201和B三个等位基因,其中O1来自母亲,A201和B来自父亲.核型分析显示先证者血液中存在46,XX和46,XY两种细胞,而父母核型正常.结论 先证者为孤雌分裂产生的两个相同的卵子被两个精子受精后所产生的嵌合体.     

15例ABO亚型的血型血清学分析

目的了解ABO亚型在怀化地区的分布情况。方法对正反定型不符及疑难配血的标本通过红细胞抗原、血浆抗体及唾液中血型物质检测以及红细胞吸收放散试验进行亚型鉴定。结果 15例可疑标本共检出A亚型4例,B亚型11例,亚型种类为A2、A3、Ael、B3、AB3和Bx。结论鉴定血型亚型对临床安全输血至关重要。     

中国汉族人群检出B(A)803C→G等位基因并引起重度新生儿溶血病的研究

目的研究ABO血型系统中血清学定型违反一般血型遗传规律的家系中基因型的遗传学基础，并分析引起重度新生儿溶血病（HDN）的原因。方法对一母亲为O型、父亲为AB型、新生儿为AB型的家系进行研究。利用亲子鉴定，血清学实验，PCR-序列特异性引物（SSP）法和ABO基因第6及第7外显子直接测序的方法进行基因定型，揭示此家系的血型基因分子生物学背景。同时采用微柱凝胶技术做HDN检查，并对新生儿的主要生化和血常规指标进行动态观察。结果亲子鉴定结果显示三代AB型家系成员有亲子关系，本AB型家系成员血型血清学表现为红细胞与多种不同厂家的单克隆抗-A、抗-B和人源性抗-A、抗-B均发生强凝集（4＋）；反定型血清中不含有抗-A和抗-B抗体。PCR-SSP法未检出三代AB型家系成员的A和B型基因。ABO基因第6及第7外显子直接测序方法检测到三代AB型家系成员均有B（A）803C→G的变异基因存在。新生儿发生重度HDN。结论本家系遗传学基础是B（A）803G血型基因能够合成同时具有A和B双功能活性的糖基转移酶。首次报道了因B（A）血型新生儿红细胞上同时有大量A和B抗原而引起重度ABO系HDN。     

罕见开米拉A_3B_3血型的分子生物学研究

目的一例ABO表型鉴定困难的个体及其家系的分子遗传背景的研究。方法用常规血清血型方法,对其ABO血型分型;PCR-SSP法进行基因分型;同时通过ABO基因直接测序及克隆测序、HLA分型、以及15个常染色体位点短串联重复序列检测对该研究对象进行家系研究。结果患者血清学分型定为A3B3型,其ABO基因分型、序列测定、HLA-B、DR基因分型、和STR-PCR特异性检测的vWA和D8S1179位点均有两个以上的单倍体存在。结论该研究对象认定是一例罕见的开米拉血型,清晰提示此罕见血型的分子基础,有助于深入认识此种分子遗传的方式。     

婴儿ABO血型的鉴定及应用于临床输血

为了研究6个月内婴儿ABO血型正确定型方法及影响因素，采用常规血清学法、凝胶柱法及PCR-SSP3种方法对6个月以内的婴儿进行血型鉴定。结果表明：在使用不同方法检测婴儿ABO血型结果不符的33例中，常规血清学方法32例红细胞定型与血清定型不符，1例是由细菌感染产生类B抗原所致的假相合。凝胶柱法可正确定型27例，正确率84.4%。PCR-SSP法可对所有标本做出正确定型。凝胶柱法与PCR-SSP法有显性差异。结论：对6个月以内的婴儿进行ABO血型鉴定，推荐采用凝胶柱技术。凝胶柱法红细胞定型与血清定型相符的婴儿输血采用同型输注，但若婴儿患有感染性疾病时，应考虑到类B抗原引起的假相合。凝胶柱法红细胞定型与血清定型不符的婴儿输血时使用O型洗涤红细胞等成分血，待PCR-SSP法分型结果做出后，改为同型输血。     

PK7300全自动血型分析仪测定ABO血型抗体效价的初步研究

目的：探索使用PK7300全自动血型分析仪测定ABO血型抗体效价的方法,探讨献血者血型检测中与ABO血型抗体效价相关的影响因素及注意事项。方法仪器微板法测定抽样标本的ABO血型抗体效价;仪器微板法及手工试管法测定各血型混合血浆的ABO血型抗体效价;统计分析该中心2013年5～7月检测出的ABO血型抗体效价降低的情况。结果A型献血者与B型献血者的ABO血型抗体效价比较,差异无统计学意义（P＞0．05）,O型献血者的ABO血型抗体效价明显高于A型或B型献血者（P＜0．05）;手工试管法的灵敏度明显优于仪器微板法,而手工试管法二的灵敏度又明显优于手工试管法一（P＜0．05）;ABO血型抗体效价降低的A型献血者明显多于B型或O型（均P＜0．01）,ABO血型抗体效价降低的男性献血者明显多于女性（P＜0．01）。结论仪器微板法测定ABO血型抗体效价操作简便、结果判读客观、重复性好,1∶1～1∶80的稀释比例范围能满足绝大多数标本的测定需要,采用梯度稀释有助于减小测定误差;血型、性别、年龄、亚型等因素可能与献血者ABO血型抗体效价降低相关。     

昆明地区无偿献血者ABO亚型的分子遗传学分析

目的研究无偿献血者中昆明地区ABO亚型的分子机制。方法对26名无偿献血者正反定型不符的标本ABO基因第6、7外显子及侧翼内含子进行测序分析。结果 26例标本中共检测到2个O等位基因(O01、O02)、4个A等位基因(A101、A102、A105、A201)、9个B等位基因(B101、B(A)02、B305、Bel03、Bx02、Bw03、Bw11、Bw17、Bw19)以及1个新的B等位基因。该新等位基因基因第6外显子上检测到255CT,为同义突变。结论本研究揭示了昆明地区献血者ABO血型亚型的分子遗传学背景。ABO基因第6外显子255CT突变未见报道。     

276例6月龄以下婴儿ABO血型IgM抗体分析

本研究探讨6个月以下婴儿ABO血型IgM抗体产生频率。选取我院6个月龄以下住院患儿309例，采集EDTAK3抗凝静脉血标本，依据患儿年龄不同分为5组：出生1周以内的早期新生儿为Ⅰ组；出生8天至2周的新生儿为Ⅱ组；出生15天至1个月新生儿为Ⅲ组；2个月至3个月龄的婴儿为Ⅳ组；4个月至6个月龄的婴儿为Ⅴ组。应用单克隆抗A、抗B血清、A细胞、B细胞及O细胞进行试管法血型检定。结果表明：在检测新生儿及婴儿标本309例中舍去AB型标本33例，其余276例标本中Ⅰ组患儿46例，其中29例检出抗体，正反定型符合率63％（29／46）；Ⅱ组患儿64例，其中41例检出抗体，正反定型符合率64％（41／64）；Ⅱ组患儿74例，其中47例检出抗体，正反定型符合率63％（47／74）；Ⅳ组患儿45例，其中28例检出抗体，正反定型符合率62％（28／45）。Ⅴ组患儿47例，其中40例检出抗体，正反定型符合率85％。结论：有相当一部分新生儿和6月龄以下婴儿体内已产生ABO血型IgM抗体，这可作为婴儿ABO血型检定的重要佐证。     

肿瘤患者疑难血型鉴定和基因分型的相关探讨

血液病和恶性肿瘤的部分患者,尤其是白血病和多发性骨髓瘤患者,常因病情及治疗导致ABO血型正反定型不符,表现为ABO血型的抗原或抗体减弱。本研究分析正反定型不一致的原因,进行正确的红细胞分型和基因分型,对12份肿瘤患者正反定型不一致血液样本进行的血型血清学试验和吸收放散试验。对存在疑问的标本进行PCR扩增第6、7外显子和5-7内含子,对外显子序列进行基因测序。结果表明,9例标本通过血型血清学、吸收放散定型,6例为A型,2例为O型,1例为B型;3例血型血清学和吸收放散无法鉴定其血型的标本,经测序分别定型为O46,B108和A102型,其中有2例因为PCR扩增效果差或者测序结果矛盾,未能给出ABO基因型。结论：对ABO血型正反定型不一致无法定型的肿瘤患者的血液样本,可以采用血型血清血方法、基因分型及吸收放散的方法正确鉴定ABO血型,以保证输血的安全性和有效性。     

1例罕见B（A）血型鉴定及其临床安全输血策略初探

目的 鉴定罕见B（A）血型并探讨其临床安全输血策略。方法 利用全自动血型分析仪检测ABO血型,发现正反定型不符的一位患者,利用血型血清学和分子生物学方法对该患者及其家系中9位成员进行血型鉴定和ABO血型基因测序,分析该家族血型的遗传特点;并对该血型的患者进行临床输血探讨,确保临床输血安全。结果 患者为B（A）血型,与B101基因序列比对,均为nt640A>G,基因型鉴定为B(A)04/O01,B(A)型血清与同型红细胞以及O型、B型红细胞不凝集,B(A)型红细胞与同型以及AB型血清不凝集。结论 血型血清学方法可以对正反定型不符的B（A）血型做出初步判断,分子生物学技术可以进一步准确判断该血型;临床输血应采取自体输血、同型输注及配合相容性输血。     

人血液经56℃孵育处理后溶血率及血型抗原抗体变化

目的 为降低传染风险,对疑似或确诊新型冠状病毒(SARS-Cov-2)患者血样,部分实验室采用56℃孵育30分钟后再进行血型血清学检测,该处理方法对输血前检测的影响未见评估研究.本研究对血液样本经56℃孵育后的溶血率、红细胞A、B、D抗原凝集强度及其抗体效价进行评估.方法 从上海地区随机抽取正常献血者A型20例,B型2...     

Analysis of ABO grouping discrepancies among patients from a tertiary hospital in Korea

BackgroundAccurate ABO typing is essential for preventing ABO incompatibility reactions. However, the causes of ABO grouping discrepancy has not been sufficiently studied, and it may vary among different ethnic populations. Thus, the aim of this retrospective study was to investigate the causes of ABO discrepancy in the East Asian population.Materials and methodsA retrospective observational study on ABO typing discrepancy among patients in a tertiary hospital was carried out using the electronic medical record database of Samsung Medical Center (Seoul, Korea) between July 2016 and May 2019.ResultsABO grouping was performed on 551,959 blood samples during the study period; 1468 events of serologic ABO discrepancy were determined from 1334 (0.24 %) samples. A total of 134 samples (0.02 %) presented multiple causes of ABO discrepancy. Weak/missing serum reactivity (594, 40.5 %) was the most frequent reason for ABO discrepancy, followed by extra serum reactivity (370, 25.2 %), weak/missing red cell reactivity (267, 18.2 %), mixed-field red cell reactivity (176, 12.0 %), and extra red cell reactivity (61, 4.2 %). In the category of weak/missing red cell reactivity, ABO subgroup was the most common reason, and using ABO genotyping, 26.2 % of the cases genotyped were found to be related to the cis-AB allele.ConclusionsOur results suggest that the incidence and cause of ABO typing discrepancies vary among institutes and ethnic groups. Our data helps to better understand and facilitate the resolution of ABO typing discrepancies in patients.     

α-1,3半乳糖基转移酶基因c.1055G＞A突变导致ABO亚型ABw07的分子生物学研究

目的 探讨1例ABO血型系统ABw07亚型的分子生物学机制.方法 选择2014年3月12日于青岛市中心血站献血的1例ABO正反定型不符的疑难血型无偿献血者为研究对象.采用试管法对其进行血型血清学检测;采用PCR-序列特异性引物(SSP)法对其ABO基因进行分型,并且对其ABO基因第6、7外显子扩增后,进行直接测序及克隆测序,确定其ABO基因型.结果 ①本例献血者血型血清学检测结果显示,正定型为AB型,反定型为A型.②本例献血者ABO基因第6、7外显子的直接测序结果显示,ABO基因第261位脱氧核糖核苷酸无缺失,存在c.297A＞G、c.467C＞T、c.526C＞G、c.657C＞T、c.703G＞A、c.796C＞A、c.803G＞C、c.930G＞A及c.1055G＞A杂合突变.③单克隆测序结果显示,本例献血者的ABO基因存在c.1055G＞A突变,导致密码子由CGG突变为CAG,所编码的第352位氨基酸精氨酸突变为谷氨酰胺(p.Arg352Gln),ABO基因型为A102/Bw07.结论 α-1,3半乳糖基转移酶基因(B基因)c.1055G＞A(p.Arg352Gln)突变可能导致产生ABw07亚型,该亚型血型个体的血清中存在抗-B.     

新生儿脐血ABO血型正反定型及交叉配血实验结果分析

目的探讨婴幼儿ABO正反定型的符合情况及交叉配血试验在婴幼儿输血时的局限性。方法选2010名新生儿的脐血标本,用微柱凝胶血型卡进行正定型,用试管法和纸片法做反定型,用微柱凝胶技术选择异型血与脐血进行交叉配血。结果正定型为A型700份标本中,499份检出抗B,但有39例反应弱,201例未检出抗B,抗B检出率为71.28%(499/700)。正定型为B型的510例标本中,373例检出抗A,但有23例反应弱,137例未检出抗A,抗A检出率为73.13%(373/510)。正定型为O型的800例标本中,只有571例同时检出了抗A和抗B,检出率为71.37%(571/800),131例未检出抗A、抗B,占16.38%(131/800),另有53例仅检出抗A,45例仅检出抗B。选用反定型完全没有凝集的新生儿A、B型的血清各40例分别进行相反血型交叉配血试验,即A(B)型血清 B(A)型红细胞,在这80例的配血结果中:盐水配血法全部阴性,聚凝胺配血法有2例弱阳性,微柱凝胶技术配血法发现有8例弱阳性。结论新生儿ABO血型鉴定中大部分已正反定型相符,在新生儿常规血型检查时反定型的价值不可忽视。微柱凝胶抗人球蛋白技术能有效地发现微弱的血型抗体,是一种较为敏感、安全的方法。     

α-1,3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶基因742C>T突变导致A2亚型

本研究探讨2例ABO亚型A2B的分子机制。利用单克隆抗体检测先证者红细胞ABO血型抗原,用标准A、B、O细胞检测先证者血清中的ABO抗体,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术扩增先证者ABO基因的第5至7外显子序列,其PCR产物经酶切后直接测序分析。同时,PCR产物经TOPO TA克隆到质粒载体中获得单链,对所得克隆进行ABO基因第6、7外显子双向测序分析。结果表明,先证者红细胞有A、B抗原,同时其血清中存在抗A1抗体。直接测序分析发现,第261位无缺失,第297位A/G、467C/T、526C/G、657C/T、703G/A、742C/T、796C/A、803G/C、930G/A杂合。克隆测序得到B101和1个新的A等位基因。与A102相比,新A等位基因仅在第742位C→T突变,导致第248位精氨酸变成色氨酸,新等位基因已被正式命名为A213。结论 :α-1,3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶基因第742位C→T突变导致产生A2表型,表型个体血清中可含有抗A1抗体。     

南宁地区疑难输血患者红细胞不规则抗体的分析

目的对南宁地区疑难输血患者中红细胞不规则抗体检出情况进行分析,以了解本地区患者红细胞不规则抗体的发生情况。方法对2008—2018年间南宁市各医院送检的疑难配血案例标本1 463例,应用盐水法、凝聚胺法、抗球蛋白法、微柱凝集法、酶法、吸收放散法检测红细胞不规则抗体。结果共鉴定确认红细胞不规则抗体335例,发生率为22.90%(335/1463)。主要涉及6个血型系统:Rh系统55.52%(186/335),Kidd系统2.69%(9/335),MNS系统18.21%(61/335),Lewis系统4.48%(15/335),P系统5.07%(17/335),Rh合并Lewis系统0.30%(1/335),Rh合并P系统0.60%(2/335),Rh合并MNS系统5.97%(20/335),Rh合并Kidd系统5.67%(19/335),Rh、MNS合并Kidd系统1.19%(4/335),Rh、Kidd合并Duffy系统0.30%(1/335)。结论从南宁地区疑难输血患者红细胞不规则抗体检出情况分布看,以Rh和MNS血型系统为主,以Rh合并MNS血型系统的不规则抗体比率最高,尤其是Rh...