母儿中HLA-G 14bp插入/缺失多态性在早发型、晚发型重度子痫前期和正常妊娠中分布的差异

目的：探讨早发型、晚发型重度子痫前期和正常妊娠中母儿HLA-G 14bp插入/缺失多态性分布的差异。方法：（1）分析早发型重度子痫前期31例,晚发型重度子痫前期25例,正常妊娠组30例;（2）采用聚合酶链反应技术（PCR）,对3组母儿进行HLA-G基因第8外显子14bp插入/缺失多态性的等位基因分型,分别比较3组母亲之间和3组新生儿之间等位基因及基因型的频率分布,通过母/儿基因型配伍,比较3组间基因型配伍频率分布的差异。结果：（1）早发型重度子痫前期组母/儿基因型配伍为母缺失纯合子（-/-14bp）/儿杂合子（＋/-14bp）出现的几率要高于晚发型组（χ2=5.034,P=0.025）,其和正常妊娠组相比有升高的趋势（χ2=3.685,P=0.055）;早发型重度子痫前期组母/儿基因型配伍为母杂合子（＋/-14bp）/儿缺失纯合子（-/-14bp）出现的几率要低于正常妊娠组（χ2=3.985,P=0.046）;（2）正常妊娠新生儿组HLA-G 14bp缺失多态性等位基因频率分布高于早发型组（χ2=6.270,P=0.012）,缺失纯合子（-/-14bp）基因型频率分布高于早发型组（χ2=6.139,P=0.013）。结论：（1）早发型重度子痫组母/儿HLA-G 14bp插入/缺失多态性基因型配伍的不同可能引起母儿之间免疫耐受异常,导致了早发型重度子痫前期的发生;（2）胎儿HLA-G 14bp缺失多态性可能降低了早发型重度子痫前期的发生。     

海南地区汉、黎族重度子痫前期与HLA-G 14bp基因多态性的对比分析

目的:探讨人类白细胞抗原(HLA)-G第8外显子14bp基因多态性在海南汉、黎族重度子痫前期(sPE)中的意义。方法:收集2016年1月至2017年7月在海南省人民医院产科分娩的正常妊娠妇女128例(汉族68例和黎族60例)及sPE患者102例(汉族55例和黎族47例)的血标本,应用PCR及直接测序法对HLA-G的14bp位点的等位基因及基因型进行分型,比较两个民族组间该位点的等位基因及基因型频率分布是否存在差异。结果:各组14bp位点可检测出3种基因型:即+14bp/+14bp型、+14bp/-14bp型和-14bp/-14bp型。不同民族间比较:汉族正常对照组与黎族正常对照组,汉族sPE组和黎族sPE组的HLA-G 14bp等位基因和基因型频率比较,差异均无统计学意义(P0.05)。相同民族间比较:汉族sPE组HLA-G 14bp等位基因和3种基因型频率与汉族正常对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。黎族sPE组-14bp等位基因频率低于黎族正常对照组(54.4%vs 64.3%,P0.05)。黎族sPE组HLA-G-14bp/-14bp基因型频率低于黎族正常对照组(22.2%vs 42.9%,P0.05),而-14bp/+14bp基因型频率高于黎族正常对照组(64.4%vs 42.9%,P0.05),两组+14bp/+14bp基因型频率比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:HLA-G基因第8外显子14bp缺失多态性的存在可能有利于降低孕妇PE的发生发展,可能与种族差异有关。     

双胎胎盘HLA-G第8外显子多态性与妊娠结局的相关性研究

目的探讨双胎胎盘HLA-G第8外显子基因多态性分布与妊娠结局的关系。方法收集2003年11月至2005年12月在中山大学附属第一医院分娩的双胎病例共125例。采用多聚酶链反应-序列特异性引物法(PCR-SSP)检测双胎胎盘HLA-G该位点14bp插入缺失多态性,并通过基因测序证实,对照双胎妊娠结局进行分析。结果①125例双胎病例中,以2胎HLA-G14bp等位基因出现的总频数进行分组:总频数为0(14-bp/14-bp及14-bp/14-bp组合)47对(37.6%),总频数为1(14-bp/14+bp及14-bp/14-bp组合)21对(16.8%),总频数为2(14-bp/14+bp及14-bp/14+bp组合或14+bp/14+bp及14-bp/14-bp组合)44对(35.2%),总频数为3(14+bp/14+bp及14+bp/14-bp组合)7对(5.6%),总频数为4(14+bp/14+bp及14+bp/14+bp组合)6对(4.8%);②2胎儿14+bp等位基因出现总频数与在子痫前期双胎病例中分布有显著性差异,子痫前期发生率与2胎14+bp等位基因总频数有关(95%可信区间0.189～0.288,P0.05);③双胎其他常见妊娠合并症发生率(如早产、双胎输血综合征、双胎不同一性等)与HLA-G第8外显子多态性分布无显著性关联(P0.05)。结论双胎胎盘HLA-G第8外显子14+bp等位基因出现总频数可能与子痫前期发生有关,但与双胎其他常见合并症发病未见明显关联。     

人类白细胞抗原G蛋白在胎盘组织中的表达及其基因多态性与妊娠肝内胆汁淤积症发病的关系

目的探讨人类白细胞抗原G（HLA-G）蛋白在胎盘组织中的表达及其基因多态性与妊娠肝内胆汁淤积症（ICP）发病的关系。方法选取2004年4月至10月间,在四川大学华西第二医院产科及四川省妇幼保健院产科行剖宫产分娩的晚孕妇女60例,其中ICP孕妇30例（ICP组）,根据妊娠期是否接受过地塞米松治疗又将ICP组分为治疗组（15例）和非治疗组（10例,因未治病例少）;正常晚孕妇女30例为对照（根据检测指标不同分为对照1组,15例;对照2组,30例）。采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接（SP）法,检测HLA-G蛋白在对照1组、治疗组及非治疗组孕妇胎盘组织中的表达情况（以平均吸光度值表示）;同时采用聚合酶链反应-序列特异性引物（PCR-SSP）法,检测HLA-G基因外显子8上14bp缺失多态性在ICP组及对照2组孕妇外周血及新生儿脐血中的分布。结果（1）非治疗组胎盘组织中,HLA-G蛋白的平均吸光度值为56±8,明显低于对照1组的70±10及治疗组的66±9,分别比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）;治疗组与对照1组胎盘组织中HLA-G蛋白的平均吸光度值比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。（2）HLA-G基因外显子8上14bp缺失多态性检测结果显示,对照2组及ICP组母儿的等位基因频率及基因型频率比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论ICP患者胎盘组织中HLA-G蛋白表达下调可能是ICP发病机制之一;地塞米松对胎盘组织中HLA-G蛋白的表达具有上调作用;HLA-G基因外显子8上14bp缺失多态性可能与ICP的发病无关。     

父源性HLA-A基因与子痫前期相关性的研究

目的:探讨父源性人类白细胞分化抗原HLA-A基因与子痫前期的相关性。方法:采用序列特异性引物技术(PCR-SSP)对53对子痫前期患者及其配偶和51对正常孕妇及其配偶进行HLA-A等位基因分型,比较其基因频率,并对两组夫妇HLA-A等位基因型别配伍进行比较分析。结果:子痫前期患者和正常晚孕者中检出14个HLA-A等位基因,配偶中检出13个HLA-A等位基因。子痫前期组配偶HLA-A24基因频率显著低于正常晚孕组(P0.05);两组孕妇及其配偶的其它HLA-A基因型别无显著差异。子痫前期组夫妇均携带HLA-A11基因的频率显著高于正常晚孕组(P0.05);子痫前期组妇不携带HLA-A24而夫携带HLA-A24基因的频率显著低于正常晚孕组(P0.05);子痫前期组夫妇均不携带HLA-A24基因的频率显著高于正常晚孕组(P0.05)。结论:夫妇间的某些特定HLA-A基因配伍模式与子痫前期的发病相关。     

骨保护素基因多态性与重度子痫前期发病的关系

目的 探讨骨保护素基因启动子区163A/G和950T/C位点的多态性与重度子痫前期发病的关系.方法 选择2007年7月-2009年3月在四川大学华西第二医院就诊的成都市汉族孕妇共166例.其中重度子痫前期孕妇85例(重度子痫前期组),健康足月孕妇81例(对照组).应用PCR限制性片段长度多态性(RFLP)技术测定两组孕妇骨保护素基因启动子区163A/G和950T/C位点的基因型及等位基因频率,对两组中不同等位基因孕妇的血压、血肌酐、24 h尿蛋白定量、新生儿出生体质量等临床指标进行比较.结果(1)骨保护素基因启动子区163A/G、950T/C位点的基因型及等位基因频率在两组孕妇中的分布均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律.163A/G位点的基因型为AA、AG、GG,等位基因为A、G;950T/C位点的基因型为TT、TC、CC,等位基因为T、C.(2)重度子痫前期组孕妇163A/G、950T/C位点的基因型、等位基因频率与对照组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).(3)重度子痫前期组中163A/G位点AG+ GG基因型孕妇血肌酐水平[(76±24)μmol/L]明显高于AA基因型孕妇[(56±18)μmol/L],而新生儿出生体质量[(2040±721)g]显著低于AA基因型孕妇[(2520±810)g],两者比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).对照组中163A/G位点的AG+ GG基因型孕妇血尿素、血肌酐、新生儿出生体质量、新生儿身长等临床指标与AA基因型孕妇比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).(4)重度子痫前期组中950T/C位点的TT基因型孕妇收缩压[(153±16)mm Hg(1 mm Hg =0.133 kPa)]、24 h尿蛋白定量[(4.0±2.5)g]均显著高于TC+ CC基因型孕妇[分别为(145±17)mmHg及(2.9±1.8)g],两者比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);而对照组中950T/C位点的不同基因型孕妇各临床指标之间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 携带163A/G位点的G等位基因孕妇比携带A等位基因者更具有重度子痫前期遗传易感性;携带950T/C位点的T等位基因孕妇比携带C等位基因者也更具有重度子痫前期遗传易感性.提示骨保护素基因多态性可能与重度子痫前期的发病有关.     

人类白细胞抗原G的表达与子痫前期发病的关系

目的 通过检测子痫前期孕妇相关组织中人类白细胞抗原G (HLA-G)的表达,探讨其与子痫前期发病的关系.方法 选择2009年3月至12月在陕西省妇幼保健院产科住院分娩的子痫前期孕妇30例,根据病情分为轻度子痫前期组8例,重度子痫前期组22例.选择同期健康孕妇30例为对照组.3组孕妇均以剖宫产方式分娩.采用ELISA法检测孕妇外周血、脐血及羊水中的可溶性HLA-G(sHLA-G)水平;采用蛋白印迹法检测胎盘、胎膜及脐带组织中HLA-G蛋白的表达.结果 (1)各组孕妇外周血、脐血、羊水中sHLA-G水平:轻、重度子痫前期组孕妇外周血sHLA-G水平分别为(50±14)、(30±6) μg/L,新生儿脐血中sHLA-G水平分别为(34±10)、( 26±8)μg/L,均明显低于对照组的(100±16)、(70±9) μg/L,分别与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);重度子痫前期组与轻度子痫前期组比较,差异也有统计学意义(P＜0.01).重度子痫前期组新生儿脐血中sHLA-G水平虽低于轻度子痫前期组,但差异无统计学意义(P＞0.05).轻、重度子痫前期组孕妇羊水中sHLA-G水平分别为(26±7)、( 25±5) μg/L,均低于对照组的(27±6)μg/L,但分别与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);轻度子痫前期组与重度子痫前期组比较,差异也无统计学意义(P＞0.05).(2)各组孕妇胎盘、胎膜及脐带组织中的HLA-G蛋白表达:对照组胎盘组织中HLA-G蛋白表达水平为1.59±0.36,胎膜组织中表达水平为0.42±0.09,胎盘组织中的HLA-G蛋白表达水平明显高于胎膜组织,两者比较,差异有统计学意义(P＜0.05);对照组脐带组织中HLA-G蛋白表达水平为0.24±0.17,分别与胎盘及胎膜组织中的HLA-G蛋白表达水平比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).轻度子痫前期组胎盘组织中HLA-G蛋白表达水平为0.78±0.21,重度子痫前期组为0.29±0.17,分别与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).轻、重度子痫前期组孕妇胎膜及脐带组织中均未检测出HLA-G蛋白的表达.结论 与健康孕妇相比,HLA-G在子痫前期孕妇外周血、脐血及胎盘组织中呈明显低表达,HLA-G表达水平的异常可能与子痫前期的发病有关.     

HLA-G单核苷酸多态性与重度子痫前期的关联研究

目的:检测人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)-G单核苷酸多态性(SNPs)位点在重度子痫前期患者及正常孕妇中的分布,了解重度子痫前期患者HLA-G SNPs的变化,以期进一步明确HLA-G在子痫前期免疫发病机制中的作用。方法:收集重度子痫前期组67例和对照组37例血液样本,提取基因组DNA,选取HLA-G外显子(Exon)2、3为实验研究区域,合成荧光标记引物,聚合酶链反应(PCR)、测序进行片段序列SNPs分析。统计分析所测SNPs位点与重度子痫前期的关联程度。结果:在HLA-G Exon2发现2个SNPs,为C374T及G476A;Exon3发现3个SNPs,为C810T、C859A及G954A。HLA-G Exon2、3 SNPs在重度子痫前期组及正常孕妇组间的分布差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:(1)在HLA-G Exon2、3共发现5个SNPs位点,均为同义突变,与重度子痫前期无相关性。(2)C374T和G954A为新发现的HLA-G SNPs,向db SNP提交后获得NCBI Assay Id(ss#)119994701和119994702,Reference SNP Id(rs#):rs77474325和rs75783850。     

子痫前期患者内皮素受体A基因G-231A多态性的研究

目的:探讨内皮素受体A(EDNRA)G-231A基因多态性与子痫前期有无关联。方法:用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法(PCR-RFLP),对成都地区220例子痫前期患者(其中轻度71例,重度149例)和270例健康对照组孕妇EDNRA基因G-231A多态性进行检测。结果:子痫前期组和正常孕妇组EDNRA基因G-231A位点A等位基因频率分别为35.9%、31.3%,两组之间等位基因频率分布无显著差异(P>0.05);重度子痫前期组与轻度子痫前期组比较,A等位基因频率分别为36.3%、35.2%,二者无显著差异(P>0.05)。此外,子痫前期组和正常孕妇组不同基因携带者收缩压和舒张压水平无统计学差异(P>0.05)。结论:本研究未发现EDNRA基因G-231A多态性与子痫前期发病有关联。     

HLA-G 14bp基因多态性及HLA-G mRNA表达水平与原因不明复发性流产的关系

目的:探讨人类白细胞抗原G 14bp(HLA-G 14bp)基因缺失或插入多态性与原因不明复发性流产(URSA)的相关性,了解HLA-G mRNA在URSA患者中的表达水平和意义。方法:选择URSA患者39例(URSA组)和有1次以上正常分娩史并行人工流产的妇女52例(正常对照组)为研究对象,采用聚合酶链反应(PCR)检测14bp基因多态性和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组人群绒毛组织中HLA-G mRNA的相对表达量,并进行分析。结果:URSA组14bp基因杂合子(-14bp/+14bp)的基因频率(64.1%)明显高于正常对照组(42.3%)(χ2=6.511,P=0.039);而插入纯合子(+14bp/+14bp)的基因频率(7.7%)低于正常对照组(26.9%)(χ2=5.425,P=0.020);缺失纯合子(-14bp/-14bp)的基因频率(28.2%)与正常对照组(30.8%)比较,差异无统计学意义(χ2=0.070,P=0.791)。URSA组HLA-G mRNA表达水平(-3.018±1.005)明显低于正常对照组(-1.072±0.436)(t=9.681,P=0.000)。结...     

子痫前期孕产妇胎盘组织中过氧化氢对人类白细胞相关抗原G表达的影响

目的 探讨子痫前期孕产妇胎盘组织中氧化应激产物过氧化氢(H2O2)对胎盘滋养细胞中的人类白细胞相关抗原G(HLA-G)表达的影响.方法 选择2008年10月-2009年10月南京医科大学第一附属医院住院的产妇40例,其中子痫前期组20例,健康妊娠组20例.采用比色法检测两组产妇胎盘组织中H2O2水平;采用蛋白印迹法检测两组产妇胎盘组织中HLA-G蛋白的表达水平;并对胎盘组织中H2O2水平与HLA-G蛋白表达水平进行相关性分析.人绒毛膜癌细胞株JEG-3细胞培养24 h后贴壁完全,分为两组,干预组加入浓度为175 μmol/L的H2O2,对照组不加H2O2,两组细胞培养24及48 h后,采用蛋白印迹法和细胞免疫荧光法检测JEG-3细胞中HLA-G蛋白表达水平和强度的变化.结果 (1)子痫前期组产妇胎盘组织中H2O2水平为(105±13)nmol·mg-1·prot-1,健康妊娠组产妇胎盘组织中H2O2水平为(62±18)nmol·mg-1·prot-1,子痫前期组较健康妊娠组明显升高,且差异有统计学意义(P<0.05).(2)子痫前期组产妇胎盘组织中HLA-G蛋白表达水平为0.20±0.08,健康妊娠组为1.67±0.65,子痫前期组比健康妊娠组下降了88%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05).(3)两组产妇胎盘组织中H2O2水平与HLA-G蛋白表达水平呈显著负相关(r=-0.895,P=0.000).(4)H2O2干预JEG-3细胞24 h后,JEG-3细胞中HLA-G蛋白表达水平为1.95±0.25,干预48 h后为0.65±0.08;与未干预细胞中的3.21±0.33比较,分别下降了39%和80%,干预24、48 h分别与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);干预48 h与干预24 h比较,HLA-G蛋白表达水平下降了67%,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05).H2O2干预JEG-3细胞48 h后荧光显微镜下显示,干预组细胞中HLA-G表达强度明显弱于对照组.结论 子痫前期产妇胎盘滋养细胞中的高水平H2O2能下调胎盘滋养细胞中HLA-G蛋白的表达,从而参与子痫前期的发病.     

人白细胞抗原G1及G5在重度子痫前期患者胎盘组织中的表达

目的 探讨重度子痫前期(sPE)患者胎盘组织中人白细胞抗原(HLA)G1及G5表达的变化.方法 选取早发型及晚发型sPE患者各10例、早产及正常足月妊娠产妇各10例,通过蛋白印迹法及免疫组化方法检测胎盘组织中HLA-G1及G5蛋白的表达.结果 与早产产妇相比,HLA-G1蛋白在早发型sPE患者的胎盘组织中表达量明显减少,分别为2.9±1.1、2.4±0.6,两者比较,差异有统计学意义(P＜0.05);与正常足月妊娠产妇相比,晚发型sPE患者的胎盘组织中HLA-G1蛋白的表 达量明显减少,分别为4.2±2.4、3.5±2.1,两者比较,差异有统计学意义(P＜0.05).与正常足月妊娠产妇相比,HLA-G5蛋白在晚发型sPE患者的胎盘组织中表达量增加,分别为1.1±0.9、1.8±1.1,两者比较,差异有统计学意义(P＜0.05);与早产产妇相比,HLA-G5蛋白在早发型sPE患者胎盘组织中的表达量无明显变化(分别为1.4±0.7、1.6±0.9,P＞0.05).HLA-G1蛋白在早产产妇胎盘组织中的表达量较正常足月妊娠者减少(P＜0.05);HLA-G5蛋白在早产及正常足月妊娠产妇胎盘组织中的表达量无明显差异(P＞0.05).HLA-G1及G5蛋白主要在胎盘的绒毛外细胞滋养细胞中有表达,在血管周围及胚外中胚层中也有高表达.结论(1)HLA-G1在早发型及晚发型sPE患者胎盘组织中的表达均减少.(2)HLA-G5在早发型及晚发型sPE患者胎盘组织中的表达均增加,这一增加趋势在晚发型sPE患者中更为明显.(3)在妊娠晚期,HLA-G1在早产产妇胎盘组织中的表达较少.(4)胎盘组织中能够检测到HLA-G1及G5的表达,其主要位于胎盘的绒毛外细胞滋养细胞中.     

血浆同型半胱氨酸与子(癎)前期发病的关系

目的 研究孕妇血浆同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)水平和亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)基因C677T的多态性,以探讨其在子癎前期发病中的作用.方法 选取子癎前期孕妇50例(子痴前期轻度14例,子癎前期重度36例),正常孕妇40例为研究对象.采用荧光偏振免疫法测定血浆Hcy水平,PCR法检测MTHFR基因C677T的多态性.结果 研究组Hcy水平显著高于对照组[(12.00±4.59)μmol/L和(7.85±1.51)μmol/L,P<0.05];轻度子癎前期组Hcy水平[(8.63±3.94)μmol/L高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05),重度子癎前期组Hcy水平(13.30±2.06)μmol/L]明显高于对照组(P<0.01);子痢前期组MTHFR基因677位点CT、TT基因型频率分布(C/T:42.0%;T/T:14.0%)和子癎前期组总的突变T等位基因频率(T:35.0%)均显著高于对照组(P<0.05).结论 血浆Hey水平升高可能是子瘸前期发病机制中的重要因素,而MTHFR基因C677T多态性影响了Hcy的代谢途径.可能是子癎前期的病因学机理之一.     

Relationship between HLA-G polymorphism and susceptibility to recurrent miscarriage: A meta-analysis of non-family-based studies

Purpose

The HLA-G 14-bp insertion/deletion polymorphism had been inconsistently associated with recurrent miscarriage (RM) risk. We examined the association by performing a meta-analysis.

Methods

Eligible articles were searched in PubMed, EMBASE and CNKI without language limitation. We included all the articles about two or more miscarriages associated with HLA-G 14-bp polymorphism. The odds ratios (ORs) with 95 % confidence intervals (CIs) were used to assess the strength of associations. Statistical analyses were performed by the STATA10.0 software.

Results

17 studies were included, representing 1786 cases and 1574 controls. The current meta-analysis showed that 14-bp polymorphism was not associated with RM risk in all genetic models and allele contrast(+14 bp vs. −14 bp: OR = 1.13; 95 % CI, 0.96,1.32; +14 bp/+14 bp vs. −14 bp/−14 bp: OR = 1.16, 95 % CI, 0.85, 1.59; +14 bp/−14 bp vs. −14 bp/−14 bp: OR = 1.21, 95 % CI, 0.92,1.58; dominant model: OR = 1.33; 95 % CI, 0.99,1.78; recessive model: OR = 1.06; 95 % CI, 0.79,1.43). Moreover, a significant heterogeneity was evident across studies. On the other hand, the subgroup analysis demonstrated that there was a significant association between HLA-G 14-bp polymorphism and patients with three or more miscarriages(+14 bp vs. −14 bp: OR = 1.27; 95 % CI, 1.04, 1.55; dominant model: OR = 1.52; 95 % CI, 1.16, 1.99; and model +14 bp/−14 bp versus −14 bp/−14 bp: OR = 1.51; 95 % CI, 1.15, 1.97;).

Conclusions

Our comprehensive meta-analysis indicated that there was insufficient evidence to demonstrate a conclusive association between the HLA-G 14-bp insertion/deletion polymorphism and the risk of RM. But HLA-G 14-bp insertion/deletion polymorphic variation was associated with RM risk in patients with three or more miscarriages. Larger and well-designed studies may eventually provide a better, comprehensive understanding of the association between the HLA-G 14-bp insertion/deletion polymorphism and RM in the future.