白藜芦醇对糖尿病大鼠肾脏足细胞nephrin表达的研究

目的 观察白藜芦醇对糖尿病大鼠足细胞nephrin表达的影响.方法 SD大鼠分为正常对照组、糖尿病肾病(DN)组、白藜芦醇(Res)组.SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,正常对照组注射等量枸橼酸缓冲液.造模成功后Res组给予Res(75 mg/kg)灌胃.12周后取肾组织行常规病理检查,观察各组血糖(BS)、肾功能、24 h尿白蛋白排泄率(UAER)、单肾重/体重等,光镜下观察肾脏结构变化,Western blot分析技术检测肾脏足细胞nephrin的表达.结果 ① 与正常对照组相比,DN组UAER、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)均显著上升(P<0.05),Res组上述指标除BS外较DN组均有改善(P<0.05);② 与正常对照组相比,DN组足细胞相关分子nephrin蛋白表达下调,组间比较差异有统计学意义 (P<0.05);Res组nephrin表达较DN组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05).结论 Res对糖尿病大鼠肾脏具有保护作用,其机制可能与恢复肾组织足细胞nephrin表达有关.     

高脂喂养加单侧肾切除制作小鼠糖尿病肾病模型研究

目的 探讨高脂喂养加单侧肾切除制作糖尿病肾病（DN）模型的可行性.方法 8 周龄的MKR 小鼠（骨骼肌特异性Insulin/IGF-1 双受体缺失的转基因小鼠）60 只,雌雄各半,随机分为3 组,每组20 只.空白组（基础饲料喂养）,高脂组（高脂饲料喂养）,模型组（高脂饲料喂养＋单侧肾切除组）.造模后第1、2、4、6、8 周测体质量、空腹血糖、尿微量白蛋白（UmAlb）.8 周后心脏采血处死各组小鼠留取血标本及肾组织分别进行血肌酐（Cr）、血尿素氮（BUN）的检测及光镜和电镜下观察肾脏病理学改变.结果 与空白组比,8 周时,高脂组、模型组两组血糖明显升高（P〈0.01）,而两组之间比较,血糖无明显变化（P〉0.05）.模型组UmAlb、Cr、BUN 较空白组、高脂组明显升高,差异有显著统计学意义（P〈0.01）,且肾质量（KW）,肾/体质量（KW/BW）较空白组显著增大,病理变化明显.结论 高脂饲料喂养加单侧肾切除的MKR 小鼠是一个良好的糖尿病肾病模型.     

糖尿病大鼠肾组织Nephrin mRNA与Podocin mRNA表达的研究

目的观察糖尿病大鼠肾组织中nephrinmRNA、podocinmRNA蛋白表达与分布，探讨nephrin和podocin分子在糖尿病肾病蛋白尿中的可能作用。方法采用健康雄性Sprague—Dawley大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组，第4、8周任取6只大鼠，收集血、尿标本测定生化指标。大鼠肾组织分别作组织学、超微结构、应用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）观察nephrinmRNA、podocinmRNA在肾组织中的表达。结果在4周、8周，糖尿病组血糖、肌酐清除率、尿白蛋白排泄率较正常对照组均有不同程度的升高。糖尿病组大鼠肾组织nephrinmRNA和podocinmRNA和蛋白表达较正常对照组明显降低。尿白蛋白排泄率与nephrin、podocin表达量呈负相关，nephrin与podocin表达量呈正相关。结论糖尿病大鼠肾小球上皮细胞足突nephrin、podocin蛋白表达的减少可能是糖尿病肾病蛋白尿发生的机制之一。     

血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对早期糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的影响

目的 观察血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对糖尿病肾病(DN)模型大鼠足细胞去氧肾上腺素(nephrin)、肌间线蛋白(desmin)表达的影响,探讨其在DN治疗中发挥肾保护作用的机制.方法 应用链脲佐菌素建立大鼠DN模型,将DN模型大鼠随机分为2组:厄贝沙坦组、模型对照组;另设正常对照组.各组分别干预8周后,利用光镜、电镜观察肾脏病理改变,应用免疫组化技术观察足细胞nephrin、desmin表达的变化情况.结果 应用厄贝沙坦干预后,DN大鼠肾脏病理改变显著减轻、足细胞nephrin、desmin的表达量明显减少.结论 血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对DN的肾保护作用机制可能与调节足细胞nephrin的表达量有关,通过延缓或抑制nephrin的损伤、维护足细胞结构和功能的完整而发挥减少尿蛋白、延缓DN进展的作用.     

左归降糖益肾方对2型糖尿病肾病小鼠的肾脏保护作用及基于Rho/ROCK信号通路改善足细胞损伤的影响

【立论依据】 观察左归降糖益肾方对2型糖尿病肾病(DN)小鼠血糖、血肌酐、尿素氮、尿微量白蛋白及Rho、ROCK蛋白表达的影响研究左归降糖益肾方对2型糖尿病肾病小鼠的肾脏保护作用及基于Rho/ROCK信号通路改善足细胞损伤的影响。 【设计思路】 MKR转基因2型糖尿病小鼠给予高脂饮食联合右侧肾切除建立糖尿病肾病模型。观察左归降糖益肾方对DN小鼠血糖、肾功能及Rho、ROCK蛋白表达等的影响研究其是否具有保护DN肾脏的作用及是否通过抑制Rho／ROCK信号通路改善足细胞损伤。 【实验内容】 8周龄MKR小鼠50只随机分为5组,空白组(A组)、DN组(B组)、DN＋左归降糖益肾方组(C组)、DN＋Rho/ROCK信号通路抑制剂Y-27632组(D组)、DN＋糖适平＋贝那普利组(E组)。B、C、D、E组给予高脂饮食联合右侧肾切除造模。手术后2周开始给药。C组小鼠给予中药提取液灌胃治疗30 d。D组小鼠给予Y-27632腹腔注射15 d(隔天注射)。E组给予糖适平＋贝那普利灌胃治疗30 d。A、B组则以等体积蒸馏水灌胃。30 d后处死小鼠。电化学法检测小鼠空腹血糖,全自动生化仪检测尿素氮、血肌酐,ELISA法测定尿微量白蛋白,免疫组化及蛋白质印迹法测定肾脏组织Rho、ROCK蛋白表达,光镜观察肾小球形态结构,电镜观观察足细胞形态结构。 【材料】 MKR小鼠、左归降糖益肾方、贝那普利、糖适平、Y-27632、高脂饲料等。 【可行性】 课题组前期研究表明高脂饮食联合右侧肾切除的MKR转基因2型糖尿病小鼠是良好的糖尿病肾病模型;左归降糖益肾方具有改善糖尿病肾病的作用。国内外研究中均表明抑制Rho／ROCK信号通路具有保护糖尿病肾脏的作用。故本实验基于Rho／ROCK信号通路研究左归降糖益肾方对糖尿病肾病的作用机制具有可行性。 【创新性】 (1)MKR转基因2型糖尿病小鼠给予高脂饮食联合右侧肾切除建立糖尿病肾病模型。(2)近年来研究发现Rho／ROCK信号通路在糖尿病肾病发生发展过程中起重要作用。本实验基于Rho／ROCK信号通路探讨左归降糖益肾方对糖尿病肾病足细胞损伤的影响。     

检测肾病综合征患者尿中足细胞的临床意义

目的:探讨尿中肾小球上皮细胞(足细胞)检测在人局灶节段性肾小球硬化症(focal segmental glomerulosclerosis,FSGS)诊断中的意义.方法:病例选自我科经肾活检病理证实的FSGS患者12例,微小病变性肾小球病(minimal change disease,MCD)20例,8例健康人作对照.取晨尿离心,沉渣甩片,间接免疫荧光法检测尿中足细胞特异蛋白Podocalyxin(PCX)阳性染色细胞.采用免疫荧光法检测肾小球足细胞PCX的表达.结果:FSGS组尿中足细胞阳性8例(阳性率66.67%),MCD组和正常对照组中尿足细胞均为阴性.FSGS患者中,尿足细胞阳性者临床上呈肾病综合征表现.FSGS患者肾活检标本中,肾小球内均可见足细胞特异标记蛋白PCX表达呈节段性缺失,并与肾小球节段硬化部位一致;而MCD患者肾活检标本的肾小球中,上述标记蛋白表达完整.结论:在肾病综合征中,尿足细胞检测可作为FSGS与MCD鉴别的一项可靠、方便、无创性的辅助手段.     

坎地沙坦对糖尿病肾病大鼠足细胞保护作用的研究

目的 探讨糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠足细胞超微结构及其相关分子nephrin表达的变化,以及坎地沙坦对其干预的影响,为DN的防治提供理论依据.方法 选择健康雄性SD大鼠36只,按随机数字表法分为A组(正常对照组)、B组(DN组)和C组(DN+坎地沙坦组),每组12只.B、C组尾静脉注射链脲佐菌素(30 mg·kg-1)制备DN大鼠模型,于DN模型成模1周后将3组大鼠分别在代谢笼中喂养,C组给予坎地沙坦5 mg·kg-1·d-1灌胃,A组及B组给予等量生理盐水灌胃.用药后第4周和第7周检测各组大鼠的血糖、体质量、24 h尿蛋白和内生肌酐清除率(Ccr),于第7周取肾组织行光学显微镜及电子显微镜观察肾脏病理改变、RTPCR法检测nephrin-mRNA表达.结果 与A组比较:B组24 h尿蛋白排泄增多(P＜0.05),Ccr在7周时下降(P＜0.05);肾组织内nephrin-mRNA表达下调(P＜0.05);肾组织足细胞足突宽度增加并出现融合,肾小球基底膜增厚.与B组比较:C组24 h尿蛋白排泄量降低(P＜0.05),Ccr升高(P＜0.05);肾组织内nephrin-mRNA表达增加(P＜0.05),足细胞足突宽度及肾小球基底膜厚度变小.结论 DN时存在足细胞分子nephrin表达异常和超微结构改变,坎地沙坦对肾脏的保护作用机制可能是通过增加nephrin表达、改善足细胞超微结构而实现.     

2型糖尿病大鼠肾脏相关细胞因子表达与足细胞损伤关系

目的 探讨转化生长因子β1（TGF-β1）、骨形态发生蛋白7（BMP-7）、结缔组织生长因子（CTGF）、nephrin在2型糖尿病肾病（DKD）大鼠肾脏组织表达变化,及其与肾脏足细胞损伤的关系。方法 雄性SD大鼠50只,随机分为正常对照组（NC组,20只）和模型组（DKD组,30只）,DKD组给予高糖高脂饲料喂养8周建立2型糖尿病模型,建模成功后空腹状态下给予小剂量链脲佐菌素（STZ,30 mg/kg）一次性腹腔注射;NC组给予常规饲料喂养,腹腔注射等量枸橼酸缓冲液,继续喂养8周。于8周末检测两组24 h尿清蛋白（UAL）、空腹血糖（FBG）、血肌酐（Scr）、尿肌酐（Ucr）,电镜观察肾小球足细胞超微结构的变化,光镜检测肾小球硬化指数（GSI）,免疫组化、实时定量PCR检测肾组织nephrin、BMP-7、CTGF、TGF-β1的表达。结果 与NC组比较,DKD组大鼠UAL、GSI明显升高,肾小球足细胞nephrin、BMP-7表达下调,而CTGF及TGF-β1表达上调,差异均有显著性（t=3.20-41.17,P〈0.01）。光镜下观察,DKD组大鼠肾小球肥大,系膜细胞增生,细胞外基质增多。电镜下观察,DKD组大鼠肾脏足细胞肿胀,足突融合消失,足细胞损伤。结论 DKD 大鼠肾小球存在足细胞损害,其机制可能与 BMP-7 表达下调及 CTGF、TGF-β1 过度表达有关。     

二甲双胍对2型糖尿病模型大鼠肾组织nephrin表达的影响

目的 观察不同剂量二甲双胍( MET)对2型糖尿病(T2DM)模型大鼠肾组织nephrin 表达的影响,了解其对肾小球足细胞的保护作用. 方法 高脂饲料喂养结合腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)建立T2DM大鼠模型,给予不同剂量[150、300、500 mg/(kg·d)]MET干预治疗(MET1组、MET2组、MET3组),并设立糖尿病模型组(T2DM组)和正常对照组(NC组). 8 周后,观察各组大鼠血糖(BG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、尿素氮(BUN)、尿白蛋白和尿nephrin排泄的情况以及肾脏组织病理改变和nephrin表达的变化. 结果 8 周末, MET 三组 BG、HbA1c、尿白蛋白/尿肌酐(UACR)、基底膜厚度(GBMT)和足突融合率(FRFP)明显低于T2DM 组,高于 NC 组(P <0. 05);MET2、MET3 组低于MET1 组( P <0. 05 ). MET 组血 BUN、尿 nephrin/尿肌酐(UNER)低于T2DM组(P<0. 05),MET3与MET1组差异有统计学意义(P<0. 05). MET组肾组织nephrin蛋白和mR-NA表达较T2DM 组显著升高(P<0. 05),但是低于 NC组( P<0. 05 );各MET组间nephrin蛋白表达差异无统计学意义,MET3 组nephrin mRNA表达高于MET1 组( P<0. 05 ).结论 MET可减轻T2DM模型大鼠肾组织nephrin表达的减少和保护足细胞,并有一定的剂量依赖性.     

紫癜性肾炎患儿肾组织podocalyxin 的表达及其与尿足细胞数的相关分析

目的：分析肾脏足细胞特异蛋白podocalyxin(PCX) 的表达和尿足细胞数在紫癜性肾炎(Henoch-Schönlein purpura nephritis,HSPN) 病理进展过程中的变化。方法：56 例HSPN 患儿为病例组,根据肾脏病理改变分为4 组：HSPN II (IIa+IIb) 级组(n=10),III (IIIa+IIIb) 级组(n=21),Ⅳ级组(n=16) 和Ⅴ级组(n=9);另取非肾脏疾病死亡病例尸检切取的肾脏标本4 例作为正常肾组织对照组;同时收集8 例健康儿童的晨尿作正常尿液对照组。应用免疫荧光方法检测PCX 在4 例正常肾组织及56 例HSPN 肾组织中的表达,并对其结果进行定量分析;同时检测8 例健康儿童及56 例HSPN 患儿尿足细胞阳性的发生率和尿足细胞数。结果：在正常对照组和HSPN II (IIa+IIb) 级组的肾组织中,PCX 表达完整,2 组之间肾组织PCX 阳性面积占肾小球面积的百分比差异无统计学意义(P>0.05);在HSPN III(IIIa+IIIb) 级﹑Ⅳ级和Ⅴ级组的肾组织中,PCX 表达均有不同程度缺失,从III (IIIa+IIIb)~V 级其表达依次下降,各组间比较差异有统计学意义(P<0.01);病理分级在III (IIIa+IIIb)级以上的HSPN,尿中有PCX 的阳性表达,提示尿中有足细胞存在;肾组织PCX 荧光阳性面积占肾小球的百分比与尿中足细胞数呈负相关(r=-0.637,P<0.01)。结论：足细胞损伤在儿童HSPN 病理进展中发挥一定作用;可以在一定程度上反映HSPN 的病理损伤程度。     

足细胞超微结构及其相关分子表达变化在糖尿病肾病发病中的作用

目的:探讨足细胞超微结构改变及其相关分子表达变化在糖尿病肾病(DN)发病中的作用.方法:将20只大鼠随机分为正常对照组和糖尿病肾病大鼠模型组,于第4,8周检测24h尿蛋白量等生化指标、用免疫组织化学和RT-PCR方法检测肾皮质nephrin,podocin蛋白及mRNA表达,用透射电镜检测足细胞超微结构变化.结果:糖尿病肾病大鼠24h尿蛋白排泄增多(P＜0.01),第4周即发现足细胞数减少、足突增宽(均P＜0.01),nephrin,podocin蛋白及其mRNA表达均减少(均P＜0.01);24h尿蛋白排泄量与nephrin和podocin蛋白表达呈负相关(均P＜0.01).结论:糖尿病肾病大鼠早期即出现足细胞数减少、足突增宽及nephrin和podocin表达均减少,随着病变加重,这种变化愈明显.足细胞病变不仅导致大量蛋白尿的发生,而且还与肾小球硬化和肾功能损伤的发生有关.     

辛伐他汀对2型糖尿病肾病患者足细胞损伤修复的影响

目的 探讨辛伐他汀对糖尿病肾病患者足细胞损伤的保护及修复作用.方法 将89名糖尿病肾病患者随机分为对照组及辛伐他汀治疗组（实验组）.检测各组患者在入组时及3个月后血糖、糖化血红蛋白（HbA1c）、血胆固醇、甘油三酯、血肌酐、尿素氮、尿白蛋白、Podocalyxin（PCX）等指标的变化,并采用尿足细胞特异性标记蛋白Podocalyxin （PCX） ELISA试剂盒对糖尿病肾病患者首次尿标本进行检测;同时,采用抗人足细胞标记蛋白Podocalyxin （PCX）抗体进行间接免疫荧光染色,对尿沉渣中足细胞进行检测.结果 实验组应用辛伐他汀治疗3个月,患者的总胆固醇、甘油三酯及尿podocalyxin水平及24 h尿蛋白定量水平较对照组均显著降低（P＜0.01或＜0.05）.结论 在糖尿病肾病早期即出现肾小球足细胞的损伤,随着病情的逐渐加重,这种变化愈发明显.足细胞病变不仅导致了大量蛋白尿的出现,而且还与肾小球硬化和肾功能损伤的发生有关.辛伐他汀对糖尿病肾病肾脏具有一定的保护作用.     

厄贝沙坦对糖尿病大鼠肾脏足细胞保护作用的研究

目的探讨厄贝沙坦对糖尿病大鼠尿蛋白以及足细胞、足突顶膜区主要的带负电荷跨膜蛋白Podocalyxin的影响。方法采用链脲佐菌素(streptozotocin STZ,65mg/kg)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。将30只雄性SD大鼠随机分为3组:正常组、糖尿病模型组和厄贝沙坦(ARB)治疗组。连续监测血糖8周,8周后处死各组大鼠的前一天行24小时尿蛋白定量和肾功检查了肾组织;处死大鼠后取行苏木素伊红染色(hematoxylin and eosin stain,HE)观察其病理变化;透射电镜观察足细胞、裂孔隔膜等变化。采用Western蛋白印迹从蛋白水平观察nephrin蛋白水平的表达。结果模型组大鼠镜下见肾小球体积增大,基底膜增厚(P<0.05)及系膜物质增多,足细胞与正常对照组比较明显减少(P<0.01),肾小球内可见散在炎细胞浸润。部分毛细血管腔受压变窄,部分肾小管上皮细胞胞浆疏松,轻度水肿。治疗组与模型组分别比较,肾小球基底膜未见明显增宽,足细胞数明显增加(P<0.05)。模型组大鼠血糖、24h尿蛋白、血肌酐水平明显升高,与对照组相比差异显著(P<0.05)。治疗组与模型组相比,上述生化指标均有所改善(P<0.05)。West-ern蛋白印迹结果表明,与正常组相比,模型组nephrin蛋白水平明显下降,经过厄贝沙坦干预后nephrin表达明显上调。结论厄贝沙坦能改善糖尿病肾病大鼠足细胞及肾脏的病理损害,显著减少糖尿病大鼠24h尿蛋白,上调nephrin的表达,具有一定的肾保护作用。     

Correlation between podocyte excretion and proteinuria in diabetic nephropathy patients

Objective： To observe the podocyte injury in diabetic nephropathy （DN） patients by identifying the urinary podocytes and the situation of detached podocytes in glomeruli and to demonstrate the correlation between podocyte excretion and proteinuria, blood glucose, serum creatinine in different phases in DN patients. Methods： Urinary podocytes and the podocalyxin （PCX） expression state of podocytes in glomeruli were identified and observed by indirect immunofluorescent method. The DN patients were divided into three groups according to the volume of proteinuria, namely small, medium and large volume proteinuria groups. The podocytes in the urine of every group were calculated. The DN patients were divided into five groups according to the chronic kidney disease （CKD） phases, then the positive podocytes in urine were calculated. Meanwhile, the 24-hour protein in urine, fasting blood glucose （FBG） and the serum creatinine of DN patients were tested. The correlations among the proteinuria, serum creatinine, FBG and the number of positive podocytes in the urine of DN patients were statistically analyzed. Results： Urinary positive podocytes were found in 88% of the patients with DN, whereas podocytes were found in 0% of patients with minimal changed disease （MCD） and healthy cases. The expression of PCX was absent in DN patients. In contrast, PCX was expressed integrally in MCD patients. The positive podocytes was 1.49±0.95/ml in small-volume proteinuria group, 2.15±0.70/ml in the medium-volume proteinuria group, and 3.48±1.27/ml in the large-volume proteinuria group. There was no significant difference between the small- and medium- volume proteinuria groups, and there were significant differences between other groups （P〈0.05）. The positive podocyte number tended to increase as proteinuria was increased. By Pearson analysis, the correlation between podocyte number and proteinuria was podocytes in urine from different groups of DN patients, CKD pc I sitive statistically. The difference of the number of positive -V group was significant statistically. The correlation between serum creatinine of CKD Ⅰ -Ⅲ group and positive podocytes in urine was positive statistically. The correlation between serumcreatinine of CKD Ⅳ- Ⅴ group and positive podocytes in urine was not significant statistically. The correlation between FBG and positive podocytes in urine was not significant either. Conclusion： The mechanism of the podocyte injury in DN patients is present. The podocyte injury in DN may positively correlate to proteinuria and serum creatinine of CKD Ⅰ -ⅢDN patients, but not to the FBG and serum creatinine of CKD Ⅳ-Ⅴ patients.     

糖肾康颗粒对糖尿病肾病患者尿蛋白的影响

目的:观察糖肾康颗粒对糖尿病肾病患者PCX、Nephrin、Podocin表达的干预作用。方法:72例糖尿病肾病患者随机分为观察组和对照组各36例,最终完成69例,观察组35例,对照组34例。观察组与对照组均给予基础治疗,观察组加服糖肾康颗粒口服,每日3次,每次10g。两组疗程均为8周。观察两组的临床疗效、中医证候积分变化、治疗前后UACR、24hUPr及尿中PCX、Nephrin、Podocin蛋白的变化情况。结果:观察组临床疗效和中医证候疗效均优于对照组(P<0.05)。两组治疗后中医证候积分、UACR、24hUPr较治疗前均显著下降(P<0.01),但观察组均显著优于对照组(P<0.01)。两组治疗前尿PCX、Nephrin、Podocin水平均高于正常组(P<0.01);治疗后两组尿PCX、Nephrin、Podocin水平均较治疗前降低(P<0.05或P<0.01),但观察组均显著优于对照组(P<0.05)。结论:糖肾康颗粒可有效改善糖尿病肾病患者的临床症状,减少尿蛋白,其作用机制可能与保护足细胞而降低尿中PCX、Nephrin、Podocin蛋白的表达有关。     

肝细胞生长因子与糖尿病肾病的关系

目的探讨肝细胞生长因子（HGF）在糖尿病肾病发生、发展中的作用。方法检测正常对照组、单纯糖尿病组、微量白蛋白尿组和蛋白尿组受检者的空腹血糖、糖化血红蛋白（HbA1c）、尿蛋白、尿微量白蛋白和血清HGF水平，并分析HGF与HbA1c尿蛋白、尿微量白蛋白的关系。结果单纯糖尿病组、微量白蛋白尿组和蛋白尿组空腹血糖、HbA1c水平与正常对照组比较，差别均有统计学意义（P〈0．05）。蛋白尿组尿蛋白水平与其他3组比较，差别均有统计学意义（P〈0．05）。微量白蛋白尿组和蛋白尿组患者尿微量白蛋白和血清HGF水平与正常对照组、单纯糖尿病组比较，差别均有统计学意义（P〈0．05）。血清HGF水平与尿微量白蛋白及HbA1c呈正相关（P〈0．01）。结论HGF与糖尿痛肾病的发生、发展有关．检测血清HGF水平可能有助干旱期诊断和评估糖尿病肾病。     

盐酸贝那普利对早期糖尿病大鼠肾组织足糖萼蛋白表达的影响

目的观察盐酸贝那普利对早期糖尿病大鼠肾组织足糖萼蛋白(PCX)表达的影响,初步探讨其对糖尿病大鼠肾脏保护作用及其可能的机制。方法将健康雄性SD大鼠随机分为正常对照(NC)组和实验组。实验组大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型。造模成功后,随机分为糖尿病(DM)组和盐酸贝那普利干预(DT)组,每周检测各组大鼠血糖。4周后,检测大鼠尿白蛋白(UALB)、尿视黄醇结合蛋白(URBP)、尿足细胞特异性标志蛋白PCX(UPCX)、尿肌酐(UCR)、肾脏肥大指数(KI)及糖化血红蛋白(HbA1C)。采用免疫组化及RT-PCR法检测肾脏组织PCX蛋白及mRNA的表达。结果 DM组大鼠血糖、UALB、URBP、UPCX、KI、HbA1C均高于NC组(P<0.01),肾组织病理改变较重,肾组织PCX蛋白及mRNA的表达显著降低(P<0.01);DT组除血糖及HbA1C外,生化指标均明显低于DM组(P<0.01),肾组织病理改变亦减轻,肾组织PCX蛋白及mRNA的表达显著增高(P<0.01)。结论 PCX表达减少可能是糖尿病肾病发病机制之一,盐酸贝那普利可通过减轻尿液PCX排泄,上调肾组织PCX蛋白及mRNA的表达。     

糖尿病大鼠尿nephrin 的检测及意义

目的:建立糖尿病大鼠模型,探讨糖尿病大鼠尿中nephrin的检测、动态变化及意义。方法:SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素制成糖尿病模型,正常对照组注射等量枸橼酸缓冲液,动态检测各组大鼠24 h尿微量白蛋白及肾功能,以Western-Blot方法动态检测尿中nephrin。结果:正常大鼠尿中无nephrin排泄,而糖尿病大鼠尿中可检测出nephrin,诱模早期(2周)即可出现,随着病程的延长,nephrin逐渐增多,8周达高峰后,nephrin的排泄又逐渐减少。结论:糖尿病肾病早期nephrin即可从尿中排泄,尿nephrin可作为糖尿病肾病的早期诊断指标之一,还将有助于监测、判断糖尿病肾病的病程进展。