热休克蛋白70在脑梗死中的作用

目的 通过观察VEGF基因治疗大鼠脑梗死前后HSP70表达的变化，进一步研究HSP70在脑梗死中的作用。方法 采用改进的线栓法制成Wistar大鼠永久性大脑中动脉闭塞(MCAO)模型，将质粒载体与VEGFl65基因构成的重组DNA经颅骨注入到梗死区，7d后断头取脑，用免疫组化的方法显示脑中的HSP70的表达情况：用HE染色显示梗死区，用图像分析仅测定梗死面积。结果 治疗组HSP70表达显增高，梗塞体积明显缩小。结论 VEGF基因可诱导HSP70的表达，HSP70在脑梗死中起着一中神经保护作用。     

蛋白酶体抑制剂MG-132对心肌梗死大鼠早期心功能及热休克蛋白70、热休克蛋白70羧基端相互作用蛋白的影响

目的：研究蛋白酶体抑制剂MG-132对心肌梗死大鼠心脏结构、功能的影响及其分子机制。方法：建立大鼠心肌梗死模型,干预组静脉注射MG-132（0.75mg/kg）,对照组及假手术组注射生理盐水,观察各组大鼠心脏心肌结构、功能及心肌热休克蛋白70（Hsp70）、热休克蛋白70羧基端相互作用蛋白（CHIP）的变化。结果：与心梗对照组比较,MG-132干预组心肌坏死减少,左室舒张末压和血清脑钠肽水平减低（P〈0.01）,同时心肌组织Hsp70、CHIPmRNA和蛋白质表达水平显著升高（P〈0.05）。结论：蛋白酶体抑制剂MG-132能够减轻心肌梗死、改善心功能,其机制与上调Hsp70、CHIP水平有关。     

黄芩素调控热休克蛋白70表达对溃疡性结肠炎大鼠的影响

目的研究黄芩素调控热休克蛋白70(HSP70)表达对溃疡性结肠炎大鼠的影响。方法用三硝基苯磺酸(TNBS)法构建溃疡性结肠炎大鼠模型,将建模成功的大鼠随机分为模型组、实验组及对照组,各15只,另外选取10只大鼠为正常组。实验组建模后第2天灌胃50 mg·kg^-1黄芩素,对照组灌胃0.42 g·kg^-1美沙拉嗪缓释颗粒,正常组与模型组则灌胃等量生理盐水,每天1次,连续干预2周。每天记录各组大鼠体重变化,进行疾病活动指数(DAI)评分;以苏木精-伊红染色观察大鼠结肠组织病理学形态;以免疫组化、蛋白质印迹法及实时荧光定量聚合酶链式反应检测结肠黏膜组织HSP70表达。结果治疗后,正常组、模型组、实验组和对照组大鼠DAI评分分别为0,(3.15±0.21),(0.89±0.14),(0.75±0.12)分,结肠黏膜组织损伤评分(CMIS)分别为(0.14±0.03),(2.86±0.23),(1.59±0.11),(1.35±0.10)分,结肠黏膜组织HSP70蛋白相对表达量分别为0.93±0.16,0.43±0.11,0.86±0.12,0.75±0.11,HSP70 mRNA相对表达量分别为1.32±0.23,0.21±0.06,0.78±0.11,0.65±0.08,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论黄芩素可有效减轻溃疡性结肠炎大鼠炎性反应及结肠黏膜组织炎性病理损伤,其作用机制可能与有效上调结肠黏膜组织HSP70表达相关。     

脐带间充质干细胞治疗CIA大鼠的疗效观察

目的：观察间充质干细胞（MSC）治疗胶原诱导关节炎（CIA）大鼠的效果。方法：Ⅱ型胶原酶诱导关节炎大鼠,给予MSC尾静脉输注治疗,设MSC治疗组、甲氨蝶呤为阳性对照组、模型组与空白组,实验过程中每3天进行关节评分,实验结束后ELISA法测定各组大鼠血清中白介素-17（IL-17）、NF-κB 配位体受体活化剂(RANKL)、可溶性蛋白骨保护素(OPG)和转化生长因子-β（TGF-β）水平,HE染色法观察关节破坏情况。结果：MSC与甲氨蝶呤作用相似,均能够有效缓解胶原诱导的关节肿胀;与模型组相比,MSC能够显著降低RANKL、TGF-β的水平,升高OPG的水平（P<0.05）,而对IL-17影响不显著;组织学检验结果提示,MSC对CIA大鼠关节具有保护作用。结论：MSC能够提高通过抑制RANKL、TGF-β分泌,提高OPG水平,发挥对关节的保护作用,减轻CIA的关节肿胀程度,其治疗效果与甲氨蝶呤相似。     

热休克蛋白70在牙髓中的作用的研究进展

热休克蛋白又称应激蛋白,是普遍存在于生物体细胞中在热休克状态下启动的一系列特殊基因编码合成的蛋白质。它是由真核细胞产生的,在正常生理条件下低水平表达,当细胞暴露于特殊环境下时表达增高。因其在体内与多种多肽和蛋白质形成复合体,生理状态下在蛋白质的折叠与伸展,多肽     

热休克蛋白70调节突触融合蛋白Syntaxin 1在哮喘中的表达

目的探讨热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)对突触融合蛋白Syntaxin1(SYX1)在哮喘大鼠肺组织中表达水平的调节及相互作用。方法 30只健康Wistar大鼠按随机原则分为对照组、哮喘组、哮喘+地塞米松组,每组10只。通过卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏、激发建立哮喘大鼠模型,采用免疫组织化学、逆转录PCR及蛋白免疫印迹检测3组间HSP70及SYX1基因和蛋白表达水平,免疫共沉淀技术检测HSP70与SYX1的相互关系。结果与对照组比较,哮喘组HSP70及SYX1基因和蛋白表达水平均增加,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.05);与哮喘组比较,哮喘组+地塞米松组HSP70及SYX1基因与蛋白表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.05),但与正常对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05,P>0.05)。免疫共沉淀结果显示在哮喘大鼠肺组织中HSP70与SYX1存在相互作用。结论 HSP70及SYX1在哮喘肺组织中表达水平均明显增高,HSP70通过调节SYX1表达水平及相互作用共同参与哮喘的发病机制,且其表达受地塞米松的抑制,为临床寻找药物干预新的靶点提供了理论依据。     

热应激和短暂心肌缺血对大鼠心肝组织热休克蛋白70表达的影响

目的探讨热应激及短暂心肌缺血对大鼠心、肝组织损伤及热休克蛋白（HSP70）表达的影响。方法24只雄性SD大鼠随机分为：对照组、假手术组、热休克组和短暂心肌缺血组,每组6只,应激后20h取心、肝组织,采用Western blotting、免疫组化及HE染色方法,观察大鼠心、肝组织的病理变化和HSP70的表达。结果（1）热应激及短暂心肌缺血后大鼠心、肝组织均有病理改变且HSP70表达与对照相比均显著增加（P〈0．05）;（2）短暂心肌缺血后心肌中HSP70表达量显著高于热应激后的表达量（P〈0．05）,而肝脏在两种刺激后HSP70表达量差异无统计学意义（P〉0．05）。结论短暂心肌缺血对心脏组织中HSP70表达的影响强于热应激,而对肝脏的影响两者无显著差异,这可能与不同刺激引起心、肝组织中HSP70表达机制不同有关。     

热休克蛋白70在大鼠急性肺损伤中的表达

目的:探讨急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织热休克蛋白70(HSP70)的表达。方法:雌性Wistar大鼠36只,随机分为两组:急性肺损伤组(A组)、对照组(B组),大鼠尾静脉注射脂多糖(LPS)复制ALI模型。所有的动物于注射LPS后2,4,6 h处死,测定肺组织HSP70的表达、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)的含量。结果:A组同B组相比,各时间点肺组织HSP70表达均增多,以2,6 h升高明显(P<0.01),MDA含量增高(P<0.05),SOD活性明显降低(P<0.05)。结论:HSP70在ALI后的表达增多可能与其参与LPS所致肺损伤后的组织保护有关。     

脑缺血缺氧后大鼠外周血淋巴细胞热休克蛋白70的表达

目的 研究大鼠缺氧缺血性脑损伤后海马区脑组织病理学损伤变化和外周血单个核细胞的热休克蛋白(HSP)70的表达.方法 建立大鼠脑缺氧缺血模型,苏木素-伊红(HE)染色,光镜下观察脑组织病理学损伤的变化,采用流式细胞术(FCM)检测外周血淋巴细胞HSP70.结果 在缺氧缺性脑损伤后, 外周血淋巴细胞的HSP70水平迅速升高,24 h达到高峰51.05±2.27,其后逐渐降低14.13±1.04至正常水平(P＜0.01),与脑组织病理损伤的时序变化相一致.结论 运用FCM检测外周血淋巴细胞HSP70水平可以作为反映缺氧缺血后脑损伤的辅助指标.     

HSP70对组织细胞的保护

1962年科学家Ritossa在研究果蝇唾液腺的染色体中首次发现了热休克蛋白（heatshockprotein，HSP）。HSP是指所有生物细胞在应激原诱导下所产生的高度保守的一组蛋白质，根据其分子量大小可将HSP分为HSP110、HSP90、HSP70、HSP60和sHSP等5个家族。其中最重要的家族之一是HSP70，在正常生理状态下HSP70表达水平很低，而理化刺激（热、重金属、辐射和药物等）、病理刺激（感染、氧化应激、肿瘤、心脑血管系统疾病和神经系统疾病等）和生理刺激（细胞分裂生长、分化、组织器官发生和饥饿）等应激原均能显著诱导其表达，提高细胞应激能力，保护细胞不被刺激损伤。目前认为HSP70在应激中具有诸多作用，是一种非特异性组织细胞保护蛋白，对各脏器组织细胞均有保护作用。     

Protective effects of heat shock protein70 induced by geranylgeranylacetone in atrophic gastritis in rats

Aim： To investigate the effect of geranylgeranylacetone （GGA） on the progression of atrophic gastritis in rats and its potential mechanism. Methods： Atrophic gastritis was induced in Sprague-Dawley rats with 0.1% ammonia solution, 60% ethanol, and 20 mmol/L deoxycholic acid for 24 weeks. Accompanied by the induction of atrophic gastritis, 200 mg/kg GGA was administered by oral gavage for 8 weeks （weeks 17-24）. The histological changes in gastric mucosa were quantitated by the index of inflammation, the gastric mucosal thickness, and the amount of glands of 1 mm horizontal length in antrum. Endogenous heat shock protein （HSP）70 levels and distribution were determined by immunoblotting and immunohistochemistry in gastric mucosa. Results： GGA alleviated the pathological progression of atrophic gastritis with inflammation relief （inflammation index： 1.40 in the GGA group and 1.65 in the atrophic gastritis group） and glandular restoration （mucosal thickness and quantity of glands： 194.3 μn and 38.7 mm in the GGA group; 123.3 lain and 32.7 mm in the atrophic gastritis group; P〈0.05）. GGA significantly induced HSP70 synthesis （P〈0.05）. Moreover, quercetin, an inhibitor of HSP70 expression, aggravated the infiltration of inflammatory cells and glandular loss in the antrum. Conclusion： GGA prevented the progression of atrophic gastritis in rats via the induction of HSP70 expression.     

茶多酚对胶原性关节炎大鼠免疫调节作用研究

目的：研究茶多酚（tea polyphenols）对胶原性关节炎大鼠的免疫调节作用。方法采用Ⅱ型胶原加弗氏完全佐剂法建立类风湿性关节炎（collagen-induced arthritis,CIA）大鼠模型。记录大鼠体重,测量大鼠足趾容积,测量大鼠胸腺和脾脏指数,酶联免疫法（ELISA）检测大鼠血清促炎因子 IL-6、TNF-α水平。结果与模型组比较,茶多酚（200 mg·kg －1·d －1）可明显降低 CIA 大鼠足趾肿胀率（P ＜0．05）、胸腺和脾脏指数水平（P ＜0．05）,茶多酚治疗组大鼠血清促炎因子 IL-6、TNF-α水平明显低于模型组（P ＜0．05）。结论茶多酚对 CIA 大鼠有治疗作用,其作用机制可能与调节大鼠免疫系统功能有关。     

热休克蛋白70对缺血性脑卒中的保护作用

热休克蛋白70（heat shock protein 70, Hsp70）是生物体产生的一种可增强细胞对损伤的耐受程度、维持细胞正常代谢功能并提高细胞生存率的高度保守的应激蛋白。本文回顾了近几年有关Hsp70与缺血性脑卒中相关的报道,发现Hsp70可能通过提高细胞抗氧化应激能力、抑制炎症反应以及抑制细胞凋亡,在缺血性脑卒中发挥保护作用。本文对Hsp70在缺血性脑卒中进程中的保护作用及其机制进行了概述。     

热休克蛋白70在内毒素血症大鼠心肌中的表达及已酮可可碱的影响

目的：探讨热休克蛋白70在内毒素血症大鼠心肌组织中的表达及已酮可可碱的影响。方法：采用直接注射内毒素的方法建立大鼠急性内毒素血症模型。18只Wistar大鼠随机分成3组，假手术组，内毒素组和PTX组。分别采用免疫组织化学法和免疫印迹法检测心肌组织HSP70蛋白。结果：内毒素组免疫组织化学法与免疫印迹法检测心肌组织HSP70蛋白水平与假手术组比较都明显增强（P〈0．01）；予PTX干预后，免疫组织化学法与免疫印迹法检测心肌组织HSP70蛋白水平与内毒素组比较也都明显增强（P〈0．01）。结论：内毒素血症大鼠心肌组织内的HSP70蛋白表达可明显增高，PTX干预可以进一步增高内毒素血症大鼠心肌组织内的HSP70蛋白表达，从而进一步加强对心肌的保护作用。     

芍药苷对胶原性关节炎大鼠滑膜细胞G蛋白偶联信号的调节作用

目的研究芍药苷(paeoniflorin,Pae)对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠滑膜细胞G蛋白偶联信号转导的调节作用。方法用鸡Ⅱ型胶原诱导胶原性关节炎。在免疫后d16~23,胶原性关节炎大鼠灌胃给予Pae(25、50、100mg·kg-1)。通过足爪肿胀和关节炎指数评价关节炎。采用Western blot技术检测滑膜细胞中抑制性G蛋白(Gi)表达。用放免法检测滑膜细胞中cAMP水平,用激酶发光分析法测定滑膜细胞中蛋白激酶A(PKA)的活性。结果胶原性关节炎大鼠出现明显的继发性炎症反应。滑膜细胞中Gi蛋白表达增加,而cAMP水平和PKA活性明显降低。Pae抑制胶原性关节炎大鼠的炎症应答。在100mg·kg-1,Pae抑制Gi的表达。在50mg·kg-1和100mg·kg-1剂量,Pae提高cAMP水平和PKA活性。体外研究发现,Pae(2·5、12·5、62·5mg·L-1)降低滑膜细胞中Gi的表达,而提高降低的cAMP水平和PKA活性。结论胶原性关节炎大鼠滑膜细胞中G蛋白偶联的信号转导与滑膜炎病理机制密切相关;Pae对胶原性关节炎大鼠的抗炎作用是通过调节G蛋白偶联的信号转导实现的。     

PKC/HSP70通路介导白藜芦醇对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的：探讨白藜芦醇（resveratrol,RSVL）对心肌细胞缺氧/复氧损伤（anoxia/reoxygenation injury,ARI）的保护作用及机制。方法：分离、纯化SD乳鼠原代心肌细胞,建立缺氧/复氧损伤模型,采用随机数字量表法分为6组：正常对照（CON）组、ARI组、ARI+不同浓度RSVL（25,50,75 μmol·L^-1）预处理组、ARI+RSVL（75 μmol·L^-1）+PKC抑制剂白屈菜红碱（1 μmol·L^-1）组。倒置相差显微镜观察心肌细胞生长形态,自发搏动频率和节律;Hoechst 33258染色计算细胞凋亡率;比色法测定细胞培养液中LDH、CK漏出量及细胞内Ca²⁺-ATPase活性;荧光分光光度计测定细胞内游离钙离子浓度;Western blot检测心肌细胞PKC、HSP70及Ca²⁺-ATPase蛋白水平。结果：不同浓度RSVL与ARI组相比,心肌细胞折光性好,搏动有力而规则,频率在90~115次/分（P<0.01）;呈剂量依赖性减少细胞凋亡（P<0.01）,降低培养液中LDH和CK漏出量（P<0.05或P<0.01）,提高心肌细胞Ca²⁺-ATPase活性及降低细胞内[Ca²⁺]_i量（P<0.05或P<0.01）;心肌细胞PKC、HSP70及Ca²⁺-ATPase蛋白表达增加（P<0.05或P<0.01）。而RSVL的保护作用可被PKC抑制剂白屈菜红碱所取消（P<0.05或P<0.01）。结论： RSVL可能通过PKC/HSP70通路产生对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。     

茶多酚对胶原诱导性关节炎大鼠足爪组织MMP-2蛋白表达水平的影响

目的：探讨茶多酚对Ⅱ型胶原乳化剂诱导关节炎大鼠的治疗作用及机制。方法 SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、地塞米松对照组（2 mg·kg－1·d－1）和茶多酚治疗组（200 mg·kg－1·d－1）,采用Ⅱ型胶原弗氏完全佐剂法（collagen-in-duced arthritis,CIA）建立类风湿性关节炎大鼠模型。记录大鼠足趾体积的变化,酶联免疫法（ELISA）检测大鼠血清IL-1β、PGE2水平,免疫组化法检测大鼠足爪组织基质金属蛋白酶2（MMP-2）蛋白水平的表达。结果与模型组比较,茶多酚治疗组大鼠踝关节肿胀明显减轻（P＜0．05）,大鼠血清IL-Iβ、PEG2水平明显降低（P＜0．05）,足爪组织细胞中MMP-2蛋白表达明显下降（P＜0．05）。结论茶多酚对CIA大鼠关节炎有抑制作用,其机制可能与抑制炎症介质IL-1β、PEG2,下调MMP-2蛋白表达有关。     

颅内注射c-fos反义寡聚核苷酸对急性期脑出血周边组织的HSP70表达的影响

目的：研究c-fos基因对于急性期脑出血周边组织的影响及其作用机制。方法：采用在血肿中心微量注射、免疫组织化学法、原位末端标记的方法在大鼠脑出血模型上观察c-fos反义寡脱氧核苷酸（antisense obligodeoxynucleotides．antisenseODNs）对HSP70表达的影响。结果：antisense ODNs能够抑制脑出血周边组织的C-fos阳性细胞表达（P〈0．01），加重了血肿周边神经元的损伤。同时．HSP70的表达也有下降的趋势（P〈0．01）．而且在c-fos表达的区域也有HSP70的表达。结论；HSP70基因的表达对急性期脑出血周边神经元起保护作用；HSP70基因的表达可能部分通过c-fos调控。