胚胎冷冻时间对冻融胚胎移植结局的影响

目的：探讨玻璃化冷冻保存卵裂期胚胎的时间对冻融胚胎移植结局的影响。方法：回顾性分析2017年1月—2020年12月山西医科大学第一医院生殖医学中心进行卵裂期胚胎玻璃化冷冻复苏移植的3 847个周期,包括8 767枚冻融胚胎。根据胚胎冻存时间分为5组,≤1年组,（1~2]年组、（2~3]年组、（3~4]年组和>4年组,比较各组患者的一般情况、胚胎解冻复苏情况及临床结局的差异,并采用二分类Logistic回归分析取卵年龄、移植年龄、冻存时间、移植胚胎数和优质胚胎数对移植结局的影响。结果：各组患者取卵年龄、移植年龄、移植胚胎数、临床妊娠率及活产率比较,差异有统计学意义（P<0.05）。Logistic回归分析显示取卵年龄、移植年龄、冻存时间对临床妊娠、活产无影响（P>0.05）,移植胚胎数及优质胚胎数对临床妊娠、活产有影响（P<0.05）。结论：玻璃化冷冻保存卵裂期胚胎的时间对胚胎复苏及妊娠结局没有显著影响。     

玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床初步应用

目的：探讨玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床应用效果。方法：对22例患者应用玻璃化冷冻保存技术冻存的82枚4～16细胞期的早期胚胎进行了解冻和移植。结果：82枚冷冻胚胎经解冻,存活65枚,存活胚胎均予移植,种植10枚,种植率为15.38%（10/65）,共进行了25个冷冻胚胎移植周期,获得8例妊娠,妊娠率32%（8/25）。结论：玻璃化冷冻保存技术是一种冷冻保存人类早期胚胎的有效方法,临床应用效果良好。     

细胞松弛素B在人类体外成熟卵子冷冻中的作用

目的:探讨细胞松弛素B在人类体外成熟卵子玻璃化冷冻中的作用。方法:收集常规胞浆内单精子显微注射-胚胎移植(ICSI-ET)周期中未成熟卵母细胞234枚(包括生发泡期即GV期和第1次减数分裂中期即MⅠ期),在体外培养24～48 h,181枚卵母细胞成熟(排出第2极体),随机分成3组并行玻璃化冷冻。A组(43枚)用细胞松弛素B(CB)预处理30 min后行玻璃化冷冻;B组(66枚)用CB预处理20 min后行玻璃化冷冻,C组(72枚)未用CB预处理直接行玻璃化冷冻。D组为对照组30枚体内成熟卵子未用CB处理直接玻璃化冷冻。各组卵子冷冻3周后解冻,复苏的卵子行ICSI辅助授精,观察各组成活率、受精率、卵裂率及囊胚形成率。结果:冻融后的体外成熟卵子,其成活率、受精率、卵裂率及囊胚形成率均显著低于体内成熟卵子(P<0.05)。A组的成活率显著低于B、C两组(P<0.05),A、B、C 3组间的受精率、卵裂率差异无统计学意义(P>0.05),A、B两组未获囊胚,C组仅有1枚囊胚。结论:冻融体外成熟卵子,成活率、受精率、卵裂率均下降,囊胚形成率低,胚胎后期发育潜能显著降低。CB预处理未能提高卵子冷冻的成活率、受精率、卵裂率及胚胎的发育潜能。     

不同冷冻方案对人早期胚胎发育潜能的影响

目的:比较开放式、封闭式玻璃化冷冻技术及程序化慢速冷冻法对辅助生殖技术人早期胚胎冷冻复苏的效果.方法:回顾性分析622例胚胎冷冻复苏资料,将体外受精-胚胎移植(ⅣF-ET)患者第3天需要冷冻的胚胎,分别采用开放式、封闭式麦管玻璃化法及程序化慢速冷冻法冷冻,比较3组胚胎复苏率、空泡出现率、胚胎完整率、植入率、临床妊娠率、周期取消率、胚胎丢失率及流产率.结果:开放式冻存组共复苏280个周期、627个胚胎,胚胎复苏率、胚胎完整率、植入率和临床妊娠率分别为97.13％、94.89％、28.90％、52.61％,与程序化冷冻组(复苏165个周期、477个胚胎)胚胎复苏率(73.79％)、胚胎完整率(70.02％)、植入率(16.75％)和临床妊娠率(35.44％)相比差异有统计学意义(P＜0.05),与封闭式冻存组(复苏177个周期、400个胚胎)相比差异均无统计学意义(P＞0.05),3种冷冻组空泡出现率、周期取消率、胚胎丢失率及流产率差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:两种玻璃化冷冻法能获得同样的冷冻效率,且均优于程序化冷冻法;封闭式麦管玻璃化法能更好地保存胚胎复苏后的发育潜能,是冻存人早期胚胎较为理想的方法.     

玻璃化冷冻法在未成熟卵子冷冻技术中的应用

目的:探讨玻璃化冷冻法在未成熟卵子冷冻方面的应用价值。方法:选取GV期卵母细胞744枚,随机分为5组,A组(128枚),GV期卵子直接进行未成熟卵母细胞体外培养(IVM);B组(220枚),GV期卵子直接行玻璃化冷冻;C组(155枚),GV期卵子直接行IVM,待培养至MⅡ期,再行玻璃化冷冻;D组(112枚),GV期卵子去除冠-丘细胞,行玻璃化冷冻;E组(129枚),GV期卵子保留除冠-丘细胞行玻璃化冷冻。比较各组卵母细胞的存活率、成熟率、受精率、卵裂率及囊胚形成率。结果:与A组相比,B组和C组的成熟率、受精率、卵裂率和囊胚形成率均降低(P<0.05);B组与C组间存活率、成熟率、受精率、卵裂率和囊胚形成率无差异(P>0.05)。E组的成熟卵子率较D组提高(P<0.05),但两组在解冻卵子存活率、受精率、2细胞数和>2细胞数方面无差异(P>0.05)。结论:未成熟卵子的玻璃化冷冻保留冠-丘细胞可显著提高冻融效果。     

OPS法玻璃化冷冻未成熟卵母细胞的效果观察

目的:探讨OPS(open pu lled straw,开放式拉细麦管)法玻璃化冷冻技术冻存未成熟卵母细胞的效果。方法:小鼠GV期卵母细胞用OPS法玻璃化冷冻复苏后行体外成熟培养(in-vitro m aturation,IVM)或直接行IVM,所获成熟卵行体外受精(IVF)和胚胎的体外培养(IVC)。以体内成熟卵行IVF/IVC作为in-vivo对照组。结果:GV期卵冻融后65.11%存活,IVM后成熟率为52.86%,其成熟率显著低于IVM对照组。冻融卵成熟后受精、卵裂率(33.78%、76.00%)低于IVM对照组和in-vivo对照组,培养后未见囊胚形成。结论:OPS法玻璃化冷冻技术可有效冻存GV期卵母细胞,复苏后可发育成熟,但卵的受精和继续发育能力欠佳。     

人未成熟卵玻璃化冷冻初步实验探讨

目的:对人未成熟卵母细胞玻璃化冷存保存技术进行初步实验探讨。方法:采用OPS玻璃化冷冻方法,对未成熟的卵子进行冷冻,解冻后体外成熟培养,ICSI受精,观察胚胎培养情况,并对某些影响因素进行探讨。结果:冷冻了GV期卵62个,M I期卵40个。两期卵细胞复苏后存活率、成熟率、受精率和卵裂率分别为:80.65%、77.50%,52.00%、41.94%,57.69%、61.54%,60.00%、62.50%,两组间比较无统计学差异(P>0.05);采用HTF或G-Mops两种缓冲液配制玻璃化冷冻液冷冻解冻未成熟卵效果无统计学差异(P>0.05);未成熟卵解冻后置于含性激素的TCM199与单纯IVF30中成熟培养效果无统计学差异(P>0.05)。结论:应用OPS玻璃化冷冻方法能够有效冻存未成熟卵母细胞。     

睾丸新鲜精子与冷冻复苏精子临床妊娠结局的比较

目的 比较无精子症患者睾丸穿刺取精(testicular aspiration, TESA)与睾丸显微取精(microdissection testicular speron extraction, m-TESE)新鲜与冷冻复苏精子进行卵胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection, ICSI)治疗的结局,以及新鲜、冷冻复苏胚胎移植的妊娠结局。方法 选取2019年6月至2021年3月在华中科技大学同济医学院生殖医学中心接受ICSI助孕的1 116个周期,常规超排卵和经阴道B超引导下取成熟卵子进行ICSI,梗阻性无精子症(obstructive azoospermia, OA)患者行TESA,非梗阻性无精子症(nonobstructive azoospermia, NOA)患者行m-TESE,比较TESA新鲜精子组和冷冻复苏精子组,m-TESE新鲜精子组和冷冻复苏精子组的受精率、卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率、流产率和活产率,以及OA、NOA患者新鲜和复苏胚胎移植的临床妊娠率、流产率和活产率。结果 在受精率方面,TESA新鲜精子组明显高于TESA冷冻...     

玻璃化冷冻的卵母细胞在卵母细胞捐赠中的应用

目的：分析玻璃化冷冻的卵母细胞在供卵周期中的临床结局,以期为卵母细胞捐献的临床应用提供参考。方法：回顾性分析2006年2月—2014年10月南京医科大学第一附属医院临床生殖医学中心216个供卵周期的玻璃化冷冻的卵母细胞,比较解冻后的复苏率、行体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET）的正常受精率、累计临床妊娠率、种植率和累计活产率等临床结局。结果：解冻玻璃化冻存的卵母细胞的复苏率为82.0% （899/1 097）,二原核（2PN）受精率76.9%（691/899）。在216个周期中,胚胎种植率为21.4% （84/393）,累计临床妊娠率为33.3% （72/216）,累计活产率达27.3%（59/216）。每解冻1枚卵母细胞获得活产儿的概率为6.5%（71/1 097）。结论：卵母细胞玻璃化冻融技术在卵母细胞捐赠的临床应用上可以获得较好的临床结局。     

妇科手术过程中取卵行生育力保存的初步研究

目的探讨妇科手术过程中取卵行生育力保存的方法, 为不宜经阴道取卵行生育力保存的患者提供实验依据。方法研究对象为2020年4月至6月期间于山东大学附属生殖医院拟行腹腔镜手术的多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)患者和妇科手术中拟行生育力保存的肿瘤患者。本研究为回顾性研究, 经患者知情同意后对23例拟行输卵管手术的PCOS不孕症患者进行卵巢表面小卵泡穿刺取卵, 获卵后送入辅助生殖实验室进行体外培养, 获得优质胚胎冷冻保存。对拟行生育力保存的6例肿瘤患者妇科手术同时卵巢表面卵泡穿刺进行卵子体外培养。根据获卵、成熟、受精及胚胎培养等指标评价妇科手术过程中取卵的可行性。结果对于PCOS患者, 腹腔镜引导下卵巢表面卵泡穿刺的每周期获卵率为52.17% (12/23), 获卵患者的获卵数为(2.00±1.48)枚, 其中可培养卵数为(1.50±1.00)枚, 卵子成熟率为22.22% (4/18), 受精2枚, 卵裂1枚。拟行生育力保存的肿瘤患者妇科手术每周期获卵率为100.00% (6/6), 获卵数为(3.00±1.27)枚, 卵子成熟率为38.46%...     

Clinical outcome of emergency egg vitrification for women when sperm extraction from the testicular tissues of the male partner is not successful

The development of an effective oocyte cryopreservation system will have a significant impact on the clinical practice of reproductive medicine. However, the important option of emergency oocyte cryopreservation has yet to be well documented. In this report, we review the cases of 15 women with male partners who were diagnosed with nonobstructive azoospermia and for whom testicular sperm extraction on the day of oocyte retrieval failed. Emergency oocyte vitrification was performed and after two months, the vitrified oocytes were warmed and the surviving oocytes inseminated with frozen-thawed donor sperm by intracytoplasmic sperm injection (ICSI). A total of 117 mature oocytes from the 15 women were vitrified and warmed. The post-warming survival rate was 84.6% (99/117), and the fertilization rate following ICSI was 83.8% (83/99). We selected 30 embryos for transfer to 15 patients, 8 of whom became pregnant. The clinical pregnancy rate was 53.3% (8/15) and the implantation rate was 30.0% (9/30). Nine healthy live births resulted from 8 pregnancies. These results indicate that emergency oocyte vitrification is an effective rescue technique that can be applied clinically with acceptable pregnancy and live birth rates when testicular sperm extraction from the male partner failed on the day of oocyte retrieval. These results also highlight another important option for oocyte cryopreservation through the use of vitrification technology.     

Clinical outcome of emergency egg vitrification for women when sperm extraction from the testicular tissues of the male partner is not successful

The development of an effective oocyte cryopreservation system will have a significant impact on the clinical practice of reproductive medicine. However, the important option of emergency oocyte cryopreservation has yet to be well documented. In this report, we review the cases of 15 women with male partners who were diagnosed with nonobstructive azoospermia and for whom testicular sperm extraction on the day of oocyte retrieval failed. Emergency oocyte vitrification was performed and after two months, the vitrified oocytes were warmed and the surviving oocytes inseminated with frozen-thawed donor sperm by intracytoplasmic sperm injection (ICSI). A total of 117 mature oocytes from the 15 women were vitrified and warmed. The post-warming survival rate was 84.6% (99/117), and the fertilization rate following ICSI was 83.8% (83/99). We selected 30 embryos for transfer to 15 patients, 8 of whom became pregnant. The clinical pregnancy rate was 53.3% (8/15) and the implantation rate was 30.0% (9/30). Nine healthy live births resulted from 8 pregnancies. These results indicate that emergency oocyte vitrification is an effective rescue technique that can be applied clinically with acceptable pregnancy and live birth rates when testicular sperm extraction from the male partner failed on the day of oocyte retrieval. These results also highlight another important option for oocyte cryopreservation through the use of vitrification technology.     

赠卵体外受精供受双方临床疗效及影响因素分析

目的:探讨赠卵体外受精-胚胎移植(IVF-ET)供受双方的治疗结局和影响因素。方法:回顾分析2005年4月至2009年12月在河北医科大学第二医院生殖中心行IVF-ET并自愿捐卵的17例供卵患者及同期接受赠卵的16例受卵患者,共19周期的临床资料。供卵组(17例)采用控制性超排卵行IVF-ET;受卵组(16例)采用自然周期或激素替代治疗准备子宫内膜,并分析供、受双方的受精率、妊娠率和种植率。结果:16例患者19周期共接受赠卵108枚,平均每周期接受卵子(5.68±0.82)枚,21个解冻移植周期,8周期妊娠,周期妊娠率为38.1%,累计妊娠率50.0%。供卵的17例患者,10个新鲜胚胎移植周期,2周期妊娠;19个解冻胚胎移植周期,12周期妊娠,冷冻移植周期的妊娠率为63.16%,累计妊娠率64.71%。供、受双方受精率、冷冻胚胎移植周期的妊娠率、累积妊娠率均无统计学差异(P0.05)。结论:受卵IVF-ET是治疗卵巢功能不良等不能生育健康后代妇女的有效方法;自然周期、激素替代周期可使种植率和临床妊娠率可以达到良好的结局;供卵者提供6个左右的卵子既不影响供卵者的妊娠,也能为受卵者提供一个良好的妊娠机会。     

人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻研究

目的:研究人类成熟卵母细胞玻璃化的方法和冷冻液,探讨人类卵母细胞玻璃化冷冻保存的方法及临床应用价值。方法:运用cryoleaf进行人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻保存,复苏后行胞浆内单精子注射-胚胎移植或培养至囊胚形成,观察复苏后卵母细胞受精及发育能力。根据冷冻方法分为程序化冷冻组和玻璃化冷冻组,又将玻璃化冷冻组分为自配液冷冻组和成品液冷冻组,比较各组存活率、受精率、卵裂率及囊胚形成率。结果:程序化冷冻组和玻璃化冷冻组间存活率、卵裂率、囊胚形成率均无显著性差异(P>0.05),但是受精率存在显著性差异(P<0.05);程序化组与自配液组、成品液组间存活率、卵裂率均无显著性差异(P>0.05),但受精率存在显著性差异(P<0.05)。成品液组与自配液组、程序化组间囊胚形成率存在显著性差异(P<0.05)。程序化组移植4例,获得临床妊娠并分娩1例,玻璃化组移植7例,获得1例生化妊娠。结论:程序化冷冻与玻璃化冷冻法均可应用于人类成熟卵母细胞,冻融后卵母细胞具备正常受精能力及卵裂能力。玻璃化冻存人类卵母细胞具有更大发展趋势。     

精卵孵育时间对体外受精的围产儿结局的影响

目的比较精卵孵育时间对体外受精的围产儿结局的影响。方法回顾分析2013年1月—2014年12月在广西壮族自治区妇幼保健院生殖中心行常规体外受精的3 323例患者,共3 368个取卵周期,根据精卵孵育时间分成2组,精卵相互作用时间3～4 h者为孵育时间缩短组,传统受精组为传统受精方式,精卵过夜孵育16～18 h。比较两组的胚胎发育情况、妊娠结局及新生儿健康状况。结果孵育时间缩短组的正常受精率、优胚率、囊胚率及胚胎利用率分别为70.1%、49.7%、46.0%、52.1%,高于传统受精时间组(分别为:68.2%、48.4%、30.3%、50.9%,P0.05)。但孵育时间缩短组的临床妊娠率、种植率、活产率虽稍高于传统受精组,但未达到统计学差异,两组单胎和双胎在孕周、出生体重、低出生体重儿和极低出生体重儿发生率、身长、Apgar评分上差异也无统计学意义,两组出生畸形率比较亦无统计学差异(P0.05)。结论缩短精卵孵育时间能有效提高胚胎的发育潜能及胚胎的利用效率,但对围产儿未见明显影响。     

人精子存活试验对辅助生殖技术实验室质量控制的评价

目的:评价人精子存活试验对辅助生殖技术实验室的质量控制。方法:对在该院生殖医学中心1年多来购进的培养液进行18次精子存活试验,并就其实验室的质量评价进行回顾性分析。结果:不同批号卵母细胞洗涤液、受精液、分裂期胚胎培养液及胚胎囊胚期培养液通过精子存活试验,平均存活指数分别为:97.2%&96.5%、98.0%&97.8%、98.3%&98.1%及98.3%&97.5%,与对照组(已知合格培养液)相比较,无明显差异(P>0.05);变形率方面,两组间也无显著差异(P>0.05);全部18个批次培养液用于IVF或ICSI过程,分别获得63.25%&66.41%、95.83%&91.69%、53.14%&35.26%和50.98%&37.5%的受精率、卵裂率、优质胚胎率及临床妊娠率。结论:人精子存活试验确实能衡量IVF实验室的质量以及保证IVF-ET的成功率的稳定性。     

卵巢低反应中胚胎移植时间与临床妊娠率的关系

目的:探讨在卵巢低反应周期中,不同胚胎移植时间对临床妊娠率的影响。方法 :回顾性分析卵巢低反应患者行IVF-ET治疗74个周期的资料,比较受精方式、优质胚胎数、可利用胚胎数、卵裂球的细胞数,48 h组与72 h组的获卵数、受精率、卵裂率、优胚率、可利用胚胎率、临床妊娠率。结果:48 h(IVF20个周期与ICSI13个周期)组与72 h(26/IVF与15/ICSI)组间的年龄、不育年限、用药方案等差异均无统计学意义(P>0.05);两组受精率、卵裂率比较差异无统计学意义(P>0.05);优胚率48 h组较72 h组有所提高,但组间比较差异无统计学意义(P>0.05);可利用胚胎率、ET胚胎数、临床妊娠率两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 :卵巢低反应周期,48h胚胎移植不仅能提高优质胚胎率、可利用胚胎率,还能增加移植胚胎数及临床妊娠率,减少周期取消率。     

人工授精及继用体外受精-胚胎移植助孕临床结局分析

目的:分析宫腔内人工授精(IUI)助孕及继用体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕的临床结局。方法:回顾性分析本中心接受夫精人工授精(AIH)助孕1038例患者(年龄<40岁)的1657周期资料以及继用IVF-ET助孕的384例临床资料。结果:接受AIH患者临床妊娠率13.88%(230/1657),年龄、单侧或双侧输卵管通畅及助孕周期各组间妊娠率无差异(P>0.05),继发不孕妊娠率高于原发不孕(P<0.05),注入精子数量(10～20)×106组妊娠率最高(P<0.05)。继用IVF-ET助孕妊娠率52.34%(201/384),根据AIH助孕失败次数分组,各组内Gn用量、获卵数、移植胚胎数、优质胚胎数、受精率、临床妊娠率无差异(P>0.05)。结论:对于<40岁患者行AIH时,其不孕类型、注入精子数量是影响治疗妊娠的重要因素。根据患者年龄和不孕年限行AIH治疗不宜超过3周,年龄较大、不孕年限较长患者可提前继用IVF-ET助孕治疗。     

EVIDENCE THAT SPERM WITH LOW HYPOOSMOTIC SWELLING SCORES CAUSE EMBRYO IMPLANTATION DEFECTS

A previous prospective study using matched samples found that sperm with low hypoosmotic swelling (HOS) scores had no adverse effect on fertilization rates but markedly reduced pregnancy and implantation rates. The present study attempted to corroborate or refute the aforementioned study by comparing pregnancy rates in donor-recipient pairs using shared oocytes where the sperm of one of the two males had low HOS scores. The results found no pregnancies from the sperm with low HOS scores versus a 41% live delivered rate for those with normal scores. However, fertilization rates were not affected. This retrospective study thus confirms that sperm with low HOS scores cause implantation defects of the embryos that are formed without affecting fertilization rate, embryo cleavage rate, or embryo quality.     

短时受精结合ICSI技术在临床中的应用(综述)

受精是一个复杂的过程,在常规体外受精与胚胎移植(IVF-ET)治疗周期中,不可避免的会发生卵子完全不受精或低受精现象。随着短时受精技术的发展,通过早期观察及时判断受精情况,并对未受精的卵子行补救性单精子卵胞浆内显微注射技术(ICSI)已成为广大生殖医学工作者的研究热点,短时受精缩短了精卵共浴的时间,提高胚胎质量和种植潜能;早期补救可以挽救部分常规体外受精周期中受精失败的患者,从而降低周期取消率,改善妊娠结局。