遗传性脊髓小脑型共济失调7型三家系临床特征及分子生物学研究

目的研究中国人遗传性脊髓小脑型共济失调7型（SCA7）的临床和分子生物学特征。方法应用聚合酶链反应、聚丙烯酰胺凝胶电泳、毛细管电泳等技术,检测临床诊断为脊髓小脑型共济失调（SCA）的184个家系245例患者和71例散发SCA患者以及163名正常人的SCA7基因内CAG三核苷酸重复次数,对异常等位基因片段进行DNA测序,并对其中一个大家系进行连锁分析。结果检出3个SCA7家系（15例患者）,阳性率为1．6％,测序证实异常等位基因的CAG重复次数为38-71次,其他SCA患者以及正常人的SCA7等位基因CAG重复次数为6-15次。其中2个家系存在遗传早现现象,特别在父系遗传时更明显。对其中一个家系进行连锁分析结果在微卫星标记D3S1300处获得两点最大LOD值为2．82（θ=0．00）。结论SCA7是少见的SCA亚型。SCA7基因异常重复突变是SCA7的致病原因,38次CAG重复是目前国内报道的SCA7最小的病理性扩增。     

脊髓小脑型共济失调三核苷酸重复频率的检测

遗传性脊髓小脑型共济失调（ｓｐｉｎｏｃｅｒｅｂｅｌａｒａｔａｘｉａ，ＳＣＡ）是一组小脑、脊髓及脑干的神经元变性疾病，多为常染色体显性遗传，临床上以进行性小脑性共济失调为主要症状。国外自１９９３年起相继发现ＳＣＡ相关基因，包括ＳＣＡ１、ＳＣＡ２、ＳＣＡ...     

脊髓小脑型共济失调的研究进展

脊髓小脑型共济失调(spinocerebellar ataxias,SCAs)是累及人类神经系统的主要遗传疾病之一,也是遗传性共济失调的主要类型,作为动态突变的遗传特征而备受关注。尽管共济失调是所有SCA的主要症状,但是对每一种特定SCA而言,其临床表现却是多种多样的:SCAs具有极强的遗传异质性和     

脊髓小脑性共济失调12型的分子遗传学诊断及临床分析

[目的]研究分析脊髓小脑性共济失调12型(SCA12)的分子诊断及临床表现特征.[方法]对临床诊断为脊髓小脑性共济失调(SCA)的36个家系43例患者、38例散发患者、60名家系"健康"个体及44名正常对照,通过聚合酶链反应(PCR)对SCA12基因含有CAG三核苷酸重复片段进行扩增,并利用ABI 373测序仪对异常等位基因片段进行DNA测序,聚丙烯酰胺凝胶电泳并以图像分析软件计算其长度,推算所有正常和异常扩增等位基因内CAG重复次数.[结果]正常我国南方汉族人群SCA12等位基因CAG重复数目为22～27.检出1个家系患者1例,症状前患者2例,两个等位基因中一个异常等位基因内CAG重复数目为68次.[结论]SCA12比较罕见,CAG三核苷酸重复异常扩增是其致病原因,分子遗传学分析可确证临床诊断和症状前诊断,并可为遗传咨询提供依据.该例为国内首次报道.     

脊髓小脑性共济失调分子遗传学研究进展

遗传性共济失调是一类由于遗传因素造成的单基因神经系统变性疾病,不同位点的三核苷酸重复扩增导致不同的遗传亚型。现已发现20余种亚型的脊髓小脑性共济失调,多数是由于致病基因内存在CAG重复片段异常扩增,导致含有多聚谷氨酰胺链的突变蛋白在细胞核内沉积形成核内包涵体。     

安徽地区脊髓小脑性共济失调患者不同基因亚型分布频率的研究

目的 研究安徽地区脊髓小脑性共济失调(SCA)患者各基因亚型的分布频率.方法 以临床诊断为SCA的15个家系39例患者和20例散发患者为研究对象,PCR扩增SCA1、SCA2、SCA3和SCA6基因的三核苷酸重复(TNR)片段并行变性聚丙烯酰胺凝胶电泳估算TNR片段的重复次数,对异常者行DNA克隆测序证实.结果 SCA...     

脊髓小脑性共济失调7型的分子遗传学诊断及临床分析

目的 研究分析脊髓小脑性共济失调7型(SCA7)的分子遗传学诊断、应用以及临床表现特征。方法 对临床诊断为SCA的36个家系43例病人、38例散发SCA患者、60名家系“健康个体”以及44名非家系正常对照人员,通过PCR及聚丙烯酰胺凝胶电泳等技术检测SCA7基因位点内CAG三核苷酸重复扩增次数,并利用ABI373测序仪对异常等位基因片段进行DNA测序。结果 我国南方正常人群SCA7等位基因CAG重复数为9~19。检出2个家族性、1个散发性共3例SCA7患者,测序证实其异常等位基因内CAG重复数目分别为65、65、63。结论 SCA7基因内部CAG三核苷酸重复异常扩增是该病致病原因,利用分子遗传学分析可进行基因诊断,为症状前诊断及遗传咨询提供依据。     

中国人遗传性脊髓小脑型共济失调患者三核苷酸突变频率的分布

目的评价ＳＣＡ１、ＳＣＡ２、ＭＪＤ／ＳＣＡ３ＣＡＧ三核苷酸扩增突变（ＣＡＧ）ｎ在中国人遗传性脊髓小脑型共济失调（ＳＣＡ）患者的分布频率。方法应用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）和变性聚丙烯胺凝胶电泳技术，检测分析了５０名中国人常染色体显性遗传ＳＣＡ家系（其中患者７９例）的ＳＣＡ１、ＳＣＡ２、ＭＪＤ／ＳＣＡ３（ＣＡＧ）ｎ。结果在５０个ＳＣＡ家系中，１个ＳＣＡ家系有ＳＣＡ１（ＣＡＧ）ｎ突变，３个ＳＣＡ家系有ＳＣＡ２（ＣＡＧ）ｎ突变，２４个ＳＣＡ家系有ＭＪＤ／ＳＣＡ３（ＣＡＧ）ｎ突变，阳性率分别为２．０％、６．０％、４８．０％。２例ＳＣＡ１患者ＣＡＧ三核苷酸重复数为５３和６２次，而正常人为１２～３６次。７例ＳＣＡ２患者ＣＡＧ三核苷酸重复数４３～４７次，而正常人为２２～３０次。４２例ＭＪＤ／ＳＣＡ３患者ＣＡＧ三核苷酸重复数６３～７８次，而正常人为１５～３８次。另有２２个ＳＣＡ家系２８例患者，ＳＣＡ１、ＳＣＡ２、ＭＪＤ／ＳＣＡ３（ＣＡＧ）ｎ突变检测在正常范围内。结论中国ＳＣＡ主要为ＭＪＤ／ＳＣＡ３型，属于非葡萄牙型ＭＪＤ；而ＳＣＡ１型、ＳＣＡ２型少见。     

河南汉族一脊髓小脑性共济失调家系基因突变检测

目的检测和分析河南汉族一脊髓小脑性共济失调(SCA)家系亚型分型。方法采用聚合酶链式反应(PCR)技术和DNA直接测序法分析该家系患病者SCA1、SCA2、SCA3、SCA6、SCA7、SCA12、SCA17共7种常见SCA亚型基因序列,并与家系中其他正常个体及50例健康个体基因序列进行比较分析。结果检测到该家系4例患者及家系中2例健康成员SCA3基因的1个等位基因三核苷酸序列CAG异常重复扩增,异常重复次数在71~81次。其余6种亚型基因检测无异常。结论该家系SCA患病表现为中国人常见的SCA3亚型,家系中2例健康成员可能为症状前患者。     

脊髓小脑性共济失调12型的分子遗传学诊断及临床分析

[目的]研究分析脊髓小脑性共济失调12型(SCA12)的分子诊断及临床表现特征。[方法]对临床诊断为脊髓小脑性共济失调(SCA)的36个家系43例患者、38例散发患者、60名家系“健康”个体及44名正常对照，通过聚合酶链反应(PCR)对SCA12基因含有CAG三核苷酸重复片段进行扩增，并利用ABI373测序仪对异常等位基因片段进行DNA测序，聚丙烯酰胺凝胶电泳并以图像分析软件计算其长度，推算所有正常和异常扩增等位基因内CAG重复次数。[结果]正常我国南方汉族人群SCA12等位基因CAG重复数目为22～27。检出1个家系患者1例，症状前患者2例，两个等位基因中一个异常等位基因内CAG重复数目为68次。[结论]SCA12比较罕见，CAG三核苷酸重复异常扩增是其致病原因，分子遗传学分析可确证临床诊断和症状前诊断，并可为遗传咨询提供依据。该例为国内首次报道。     

中国甘肃青海5个民族群体STR基因座遗传多态性及其应用研究

目的：研究中国甘肃青海地区5个少数民族群体（土族、撒拉族、东乡族、保安族、裕固族）STR基因座的遗传多态性及其应用。方法：选择9个STR基因座（D3S1358,VIVA,FGA,TH01,TPOX,CSF1PO,D5S818,D13S317,D7S820）,采用STR复合扩增及荧光标记STR基因扫描技术,用ABI377全自动测序仪进行基因分型,同时检测5个少数民族群体的606个健康无关个体血液样本,计算5个少数民族群体的多态信息量、杂合度、个体识别力以及非父排除率等遗传多态性指标。结果：9个STR位点的基因型在5个少数民族群体中的分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律。5个少数民族群体9个STR位点的多态信息量范围在0．6054～0．8735之间;杂合度在0．6158～0．8736之间;个体识别力在0．7964～0．9691之间;非父排除率在0．4610～0．8838之间。采用基于基因频率的聚类分析发现,甘肃青海地区的土族、撒拉族、保安族及东乡族在起源上较为接近,而裕固族则相对较远;5个民族群体与中国南北方民族各群体之间有明显的基因交流现象。结论：在5个少数民族群体中,9个STR位点均为高度多态性遗传性标记,可用于群体遗传学、法医学等领域的研究,具有较高的应用价值。     

骨痂延长术治疗股骨大段骨缺损

目的：探讨骨痂延长术治疗儿童股骨干大段病理性骨缺损的临床疗效。方法：对39例股骨化脓性骨髓炎导致的大段病理性骨缺损进行双侧、单侧外固定支架或髓内骨痂延长术,术后延长速度2～2．5cm／m。结果：随访时间13～57月,经临床检查与影像学观察显示所有骨缺损均已愈合;骨延长9～31cm,延长率平均49％;延长段愈合指数为30d／cm,骨不连接处愈合时间平均约134d;无骨髓炎复发及再骨折。结论：骨痂延长术治疗股骨化脓性骨髓炎后大段骨缺损是一种疗效确切、手术简单、适应性强,可动态调节肢体长度,减少肢体畸形的方法。     

MMP-3,OPN和TIMP-1在白内障形成中的作用

目的：研究基质金属蛋白酶-3（matrix metalloproteinase-3，MMP-3）、骨桥蛋白（osteopontin，OPN）和金属蛋白酶组织抑制因子-1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1）在白内障晶状体上皮细胞中的表达及意义。方法：采用免疫组织化学方法测定MMP-3，OPN和TIMP-1在31例前囊下性白内障，28例核性白内障和12例正常晶状体上皮细胞中的表达。结果：MMP-3在前囊下性白内障的表达高于核性白内障、正常晶状体（Χ^2=31．49，34．479；均P=0．000），而在核性白内障与正常晶状体中无明显差剐（f=2．449，P=0．118）；OPN在前囊下性白内障的表达高于核性白内障和正常晶状体（0=29．450，15．889；均P=0．000）；TIMP-1表达在3组晶状体上皮细胞中差异均无统计学意义（P〉0．05）；前囊下性白内障MMP-3和OPN的表达水平相关（r=0．381，P=0.035），而MMP-3和OPN与TIMP-1的表达水平不相关（r=0.121，-0．289；P=0．516，0．114）。结论：MMP-3和OPN的表达增强及MMP-3／TIMP-1的表达失衡可能与前囊下性白内障的形成密切相关。     

白松片对大鼠慢性应激抑郁模型的抗抑郁实验研究

目的：探讨慢性应激抑郁模型大鼠神经生化、神经内分泌的变化及白松片对其的干预作用。方法：60只SD雄性大鼠随机分为正常对照组（NC组）、模型对照组（MC组）、氟西汀对照组（FC组）和白松片治疗组（BST）,每组15只。采用长期轻度不可预见性应激＋孤养复制大鼠抑郁模型,用高效液相色谱仪法检测海马5-羟色胺（5-HT）、谷氨酸（Glu）、γ-氨基丁酸（GABA）含量;放射免疫方法测定大鼠血浆促肾上腺皮质素释放激素（CRH）、促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质醇（CORT）的水平;应用逆转录聚合酶联反应方法测定大鼠下丘脑和大脑皮质CRH mRNA表达水平;免疫组织化学法测定海马脑源性神经营养因子、酪氨酸羟化酶的表达。结果：与NC比较,模型大鼠海马5-HT,GABA含量显著降低;血浆CRH,ACTH,CORT及海马Glu含量增加;脑内CRH mRNA表达显著升高（P〈0．01）;与MC组比,BST组和FC组大鼠海马5-HT,GABA含量升高（P〈0.01,或P〈0.05）;血浆CRH,ACTH,CORT及海马Glu含量降低;脑内CRH mRNA表达下降（P〈0．01）。结论：慢性轻度不可预见性应激可使大鼠神经内分泌、神经生化发生异常改变,白松片对此具有一定调节作用。     

形觉剥夺性近视视网膜细胞的凋亡及c-myc的表达

目的：研究形觉剥夺性近视眼（FDM）中视网膜细胞的凋亡及c-myc蛋白在视网膜的表达。方法：孵化2d的雏鸡，右眼眼睑缝合4，8，12周后检影验光，眼底视网膜照片和光镜观察，TUNEL（TdT-mediated biotin—duTP nick—end labelling，TUNEL）检测及流式细胞术检测视网膜的凋亡细胞，免疫组织化学法及流式细胞术定量测定．c—myc蛋白的表达。结果：12周时缝合眼中出现漆裂纹样眼底改变，视网膜内、外核层发现凋亡细胞，出现明显凋亡峰。8，12周视网膜c-myc蛋白表达高于对照组。结论：鸡眼近视形成伴眼底改变时，视网膜细胞出现凋亡，c—myc在近视视网膜细胞的凋亡过程中发挥重要作用。     

双侧牙槽嵴裂动物模型的建立及对上颌骨生长发育的影响

目的:建立双侧牙槽嵴裂大动物模型,研究其对上颌骨发育的影响。方法:选用8只1 2周龄的同窝实验犬,随机分成正常对照组和实验动物模型组,对实验组的动物采用外科手术的方法建立裂隙程度一致的双侧上颌牙槽嵴裂,术后1 2周处死动物,通过实体标本、三维CT等对两组动物行头颅测量。结果:实验模型组牙槽嵴裂裂隙为(1 0.8 1±0.4 1)mm,其上颌骨长度、前部宽度和前部高度较正常对照组明显缩小(P<0.0 5)。结论:牙槽嵴裂对上颌骨生长发育具有一定的影响。     

冠心病患者外周血炎症相关指标及ox-LDL和ox-LDL抗体的检测及其临床意义

目的：检测不同类型冠心病及非冠心病患者炎症相关指标可溶性CD40配体（sCD40L）、中性粒细胞胶原酶-8（MMP-8）、妊娠相关性血浆蛋白-A（PAPP—A），脂质过氧化和自身免疫指标氧化型低密度脂蛋白（ox—LDL）、氧化型低密度脂蛋白抗体（ox—LDLAb）水平，探讨其与急性冠脉综合征的相关性。方法：酶联免疫吸附法测定109例冠心病患者（包括急性心肌梗死组36例，不稳定心绞痛组38例，稳定心绞痛组35例）和非冠心病对照组36例外周血sCD40L，MMP-8，PAPP—A，ox—LDL和ox-LDLAb浓度。结果：急性冠脉综合征（包括急性心肌梗死和不稳定心绞痛）患者外周血中sCD40L，MMP-8，PAPP-A，ox-LDL和ox—LDLAb水平均高于稳定心绞痛患者（P〈0．05）和非冠心病对照患者；急性冠脉综合征中急性心肌梗死患者和不稳定心绞痛患者以上各指标水平的差异无统计学意义（P〉0．05）；与对照组相比，稳定心绞痛组各指标水平除PAPP—A外均高于对照组（P〈0．05）。各指标对于急性冠脉综合征都有一定的诊断价值（ROC曲线下面积0．7～0．9）。结论：外周血sCD40L，MMP-8，PAPP—A，ox-LDL和ox-LDLAb水平升高，参与了急性冠脉综合征的发生，可作为动脉粥样硬化斑块不稳定的血清学标志。     

CSI在成人靶控输注异丙酚麻醉诱导中的监测及评价

目的：评价麻醉深度指数（cerebral state index,CSI）在靶控输注异丙酚麻醉诱导过程中预测患者麻醉深度的精确程度。方法：40例成人全麻手术患者,ASA（American Society of Anesthesiologists）Ⅰ-Ⅱ级,靶控输注异丙酚诱导,最初血浆靶浓度设置在0．5mg／5min增加0．5mg／L,直至改良清醒镇静（modified observer＇s assessment of alertness／sedation,MOAA／S）评分为0后5min停止。试验中监测患者CSI、平均动脉压（mean arterial pressure,MAP）、心率（heartrate,HR）、MOAA／S评分、靶控输注系统预测效应部位浓度值。结果：（1）CSI值随MOAA／S评分下降而下降,在MOAA／S评分为0至1,1至2,3至4,4至5时CSI值下降均有统计学意义（P〈0．05）。MAP在MOAA／S评分3至2时下降有统计学意义（P〈0．05）。HR在各级MOAA／S评分时差异无统计学意义（P〉0．05）。（2）CSI,MAP,HR与MOAA／S评分的等级相关系数分别为0．929,0．421,0．085。CSI,MAP,HR在区分不同MOAA／S评分时的预测概率（prediction probability,Pk）分别为0．94,0．67,0．54。（3）CSI与异丙酚靶控输注预测效应部位浓度存在线性回归关系（决定系数R^2=0．833,P〈0．01）。结论：在成人患者靶控输注异丙酚平稳麻醉诱导状态下,CSI能够准确地区分清醒和麻醉后的不同意识水平,可靠地预测麻醉深度。