甲状腺结节性病变中组织因子途径抑制剂-2、跨膜丝氨酸蛋白酶和基质金属蛋白酶-1蛋白的表达及意义

组织因子途径抑制剂-2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)可与基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)及MMPs前体结合,抑制MMPs及跨膜丝氨酸蛋白酶(transmembrane protease serine 4,TMPRSS4)等对细胞外基质的破坏作用[1-2].本研究采用免疫组化(IHC)方法检测结节性甲状腺肿、甲状腺滤泡状腺瘤和甲状腺乳头状癌中TFPI-2、TMPRSS4和MMP-1的表达及意义.     

甲状腺结节性病变中组织因子途径抑制剂-2、跨膜丝氨酸蛋白酶和基质金属蛋白酶-1蛋白的表达及意义

组织因子途径抑制剂-2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)可与基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)及MMPs前体结合,抑制MMPs及跨膜丝氨酸蛋白酶(transmembrane protease serine 4,TMPRSS4)等对细胞外基质的破坏作用[1-2].本研究采用免疫组化(IHC)方法检测结节性甲状腺肿、甲状腺滤泡状腺瘤和甲状腺乳头状癌中TFPI-2、TMPRSS4和MMP-1的表达及意义.     

甲状腺结节性病变中组织因子途径抑制剂-2、跨膜丝氨酸蛋白酶和基质金属蛋白酶-1蛋白的表达及意义

组织因子途径抑制剂-2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)可与基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)及MMPs前体结合,抑制MMPs及跨膜丝氨酸蛋白酶(transmembrane protease serine 4,TMPRSS4)等对细胞外基质的破坏作用[1-2].本研究采用免疫组化(IHC)方法检测结节性甲状腺肿、甲状腺滤泡状腺瘤和甲状腺乳头状癌中TFPI-2、TMPRSS4和MMP-1的表达及意义.     

缬沙坦对兔自体移植静脉内膜增生及基质金属蛋白酶-2、组织基质金属蛋白酶抑制剂-2表达的影响

目的观察缬沙坦对兔颈部自体移植静脉内膜增生、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、组织基质金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）表达的影响，探讨AT1受体拮抗剂干预移植静脉再狭窄的作用和机制。方法雄性新西兰大白兔20只行颈部自体静脉移植手术，对照组予普通饲料饲养，缬沙坦组予普通饲料＋缬沙坦10mg／（kg·d）饲养。4周后取出静脉移植物行血管形态学检查；图像分析系统计算血管腔内膜的厚度、面积及中膜的厚度、面积；免疫组织化学方法检测MMP-2、TIMP-2表达情况。结果对比对照组，缬沙坦组移植静脉新生内膜厚度及面积明显降低，MMP-2表达降低，TIMP-2表达增加。结论缬沙坦可以抑制兔自体移植静脉新生内膜的形成，其机制可能与抑制内膜MMP-2表达、促进TIMP-2表达有关。     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子、基质金属蛋白酶-2和膜联蛋白Ⅱ在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)属于免疫球蛋白超家族,主要通过诱导基质金属蛋白酶(MMPs)的分泌加速肿瘤的发展.基质金属蛋白酶-2(MMP-2)作用基底膜上的Ⅳ型胶原,促进肿瘤细胞突破基底膜屏障发生侵袭转移.     

垂体肿瘤转化基因1、基质金属蛋白酶-2及基质金属蛋白酶-9在胃癌组织中表达的意义

目的:检测垂体肿瘤转化基因1(pituitary tumor-transforming gene 1,PTTG1)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)及MMP-9在胃癌中的表达,分析三者在胃癌表达中的相关性,探讨他们在胃癌发生、发展、转移、预后中起的重要作用.方法:采用免疫组织化学SP法检测80例胃癌组织中PTTG1、MMP-2及MMP-9的表达情况并分析三者表达与胃癌临床病例参数的关系及三者的相关性.结果:PTTG1、MMP-2及MMP-9的表达均与胃癌的组织学分级、临床分期及淋巴结转移密切相关(均P0.05),而与年龄、性别及组织学类型无关(均P0.05).三者在胃癌中的表达强度呈显著正相关(P0.05).结论:PTTG1、MMP-2及MMP-9的表达在胃癌的发生发展侵袭和转移中起着重要的作用,均可作为判定胃癌恶性程度,评估其侵袭性及转移的分子生物学指标.     

基质金属蛋白酶-9和组织金属蛋白酶抑制剂-1在食管鳞癌中的表达

目的探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和组织金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）在食管鳞癌中的表达及其临床意义。方法用免疫组化和Western blot法分别检测41例食管鳞癌患者的癌及相应正常组织中MMP-9和TIMP-1的表达变化。结果食管鳞癌组织中MMP-9阳性表达率与食管癌淋巴结及静脉转移有关；MMP-9的阳性表达率与表达量均显著高于TIMP-1；MMP-9和TIMP-1的表达呈负相关。结论MMP-9与食管鳞癌的侵袭转移有关，其机制可能与食管鳞癌组织中的MMP-9／TIMP-1平衡失调有关；MMP-9与TIMP-1联合检测有助于食管鳞癌生物学行为的判断。     

基质金属蛋白酶组织抑制剂在心脏中的表达及意义

基质金属蛋白酶组织抑制剂在心血管疾病发生发展过程中的变化是近年来心血管领域研究的热点之一。现就基质金属蛋白酶抑制剂的分类和结构及在心肌重构、心力衰竭、心肌缺血再灌注损伤等的表达及作用作一综述。     

大黄素对糖尿病大鼠肾组织基质金属蛋白酶-2及金属蛋白酶组织抑制剂-2表达的影响

目的探讨大黄素对糖尿病大鼠肾组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)/金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)表达的影响。方法实验大鼠随机分为健康对照(NC)组、糖尿病模型(DM)组及大黄素治疗(DM+Emodin)组(40mg/kg),各12只。至36周时处死所有大鼠,收集血、尿标本,检测生化指标和24hUAlb;取肾组织标本,采用RT-PCR和Western blot检测相关mRNA及蛋白。结果 36周时,与NC组比较,DM组和DM+Emodin组血糖[(6.44±0.83)vs(33.11±3.02),(32.39±2.78)mmol/L]、HbA1c[(5.6±0.6)%vs(18.0±3.2)%,(20.1±3.3)%]、SBP[(108±9)vs(131±14),(131±8)mmHg]、肾重/体重比[(5.3±0.6)vs(11.5±1.0),(10.4±1.3)]、eGFR[(5.9±1.2)vs(12.9±2.2),(11.2±1.2)ml/(min·173m2)]及UAlb[(3.3±1.8)vs(52.8±30.1),(26.6±10.5)mg/24h]升高(P0.001),DM+Emtin组肾重/体重比、eGFR及UAlb均低于DM组(P0.05或P0.01)。与DM组比较,DM+Emodin组MMP-2 mRNA[(1.43±0.36)vs(1.13±0.19),P0.05]、TIMP-2 mRNA[(1.70±0.27)vs(1.23±0.18),P0.001]上调现象被抑制,且MMP-2[(2.45±0.24)vs(2.98±0.55),P0.01]、TIMP-2[(2.07±0.30)vs(1.59±0.37),P0.001]蛋白表达水平下调。结论大黄素可以减少糖尿病大鼠肾组织中MMP-2/TIMP-2表达,减少蛋白尿,可能延缓DN进展。     

基质金属蛋白酶2、9及基质金属蛋白酶组织抑制因子1在肺间质纤维化实验中的表达

细胞外基质(ECM)合成和降解失衡是引起ECM积聚导致肺间质纤维化的重要病理生理因素。基质金属蛋白酶（MMPs）及其抑制物（TIMPs）是调节ECM降解的重要体系。我们以博莱霉素诱导的肺间质纤维化大鼠为模型,观察肺间质纤维化发生过程中基质金属蛋白酶2、9（MMP-2、 MMP-9）及基质金属蛋白酶组织抑制因子1（TIMP-1）基因表达的变化,探讨MMP-2、9和TIMP-1在肺间质纤维化发病中的作用。 材料与方法 (1) 动物模型制备：雌性Wistar大鼠60只(沈阳军区医学专科学校动物实验中心提供),体重(215±20)g,随机分为：模型组、对照组,每组各30只。模型组吸入乙醚麻醉后,颈前暴露气管,一次性气管内注入0.4%博莱霉素A5(天津华北制药厂)生理盐水注射液（5 mg/kg）,制成动物模型。然后分别于第1、3、7、14、28天处死6只大鼠,心脏取血。对照组同样方法注入等量生理盐水,同样天数各处死6只。(2)酶谱分析：根据刘煜等［1］介绍的方法,对标本进行MMPs酶谱分析。(3) Northern Blot：取5 μg大鼠肺组织总RNA,行RT-PCR,引物序列为：MMP-2：5′-AGTGGGACA AGAATCAGATCACAT-3′（上游）, 5′-TCGGTGGTACAGCTGT TGTAAGAG(下游);MMP-9：5′-AAGCAGACATTGTCAT CCAGTTTG-3（上游）,5′-GACAGAAACCCCACTTCTTGTCAG-3′(下游);TIMP-1：5′-CTCATCGCGGGCCGTTTAAG-3（上游）,5′-GAAGGCTTCGGGTCATCGAG-3′(下游),geneclean纯化回收PCR产物制备探针,随机引物法行α-32P-dCTP标记。20 μg RNA 样品经甲醛变性电泳、转入尼龙膜、65 ℃预杂交1～3 h、65 ℃杂交18 h,常规洗膜及放射自显影。     

基质金属蛋白酶组织抑制剂-1在胃癌中的表达及临床意义

在肿瘤转移过程中 ,基底膜基质的降解或多或少地与各种类型的基质金属蛋白酶 ( MMPs)和相应的基质金属蛋白酶组织抑制剂 ( TIMPs)的活性相关。一般来说 ,MMPs降解细胞外基质而促进肿瘤的侵袭转移 ,而 TIMPs通过抑制 MMPs活性对细胞外基质的降解过程起负性调控作用 [1] ,从而抑制肿瘤细胞的侵袭转移。将基质金属蛋白酶组织抑制剂 - 1( TIMP- 1 )基因导入小鼠肿瘤细胞可遏制肿瘤的进展[2 ] 。但亦有些研究显示 ,TIMP- 1与 MMPs之间存在复杂关系 ,TIMP- 1并不抑制肿瘤的进展 ,它作为一种生长因子 ,可促进正常粘膜细胞抑或恶性细胞…     

他汀类药物对基质金属蛋白酶-1及组织型基质金属蛋白酶抑制剂-1的影响

目的观察阿托伐他汀(立普妥)、普伐他汀(普拉固)对大鼠腹腔巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及组织型基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的影响。方法培养的大鼠腹腔巨噬细胞中先加入10ng/ml的白介素-1β(IL-1β),促进MMP-1的分泌,24h后加入不同浓度的阿托伐他汀、普伐他汀(1×10-7mmol/L、1×10-6mmol/L、1×10-5mmol/L、1×10-4mmol/L),继续孵育24h后,采用酶联免疫吸附法(ELISA法)测培养上清液中的MMP-1及TIMP-1的浓度;取阿托伐他汀10-5mmol/L浓度,分别在6h、24h、48h测培养上清液中的MMP-1的浓度。结果随着药物浓度的增加(1×10-7mmol/L、1×10-6mmol/L、1×10-5mmol/L、1×10-4mmol/L),阿托伐他汀对大鼠腹腔巨噬细胞分泌MMP-1的抑制作用逐渐增强(加药组MMP-1分泌较对照组分别减少17.36%、19.40%、26.54%、33.70%),与对照组有显著统计学差异,而不同浓度的普伐他汀虽使大鼠腹腔巨噬细胞分泌MMP-1略有降低,但与对照组比较无统计学差异,且各组间也无统计学差异;两组他汀使大鼠腹腔巨噬细胞TIMP-1的分泌均略有降低,但与对照组比较,均无统计学意义;随着药物作用时间的延长(6h、24h、48h),阿托伐他汀(1×10-5mmol/L)对大鼠腹腔巨噬细胞分泌MMP-1的抑制作用逐渐增强(加药组MMP-1分泌较对照组分别减少11.96%、26.54%、32.77%),与对照组有显著统计学差异。结论阿托伐他汀呈时间剂量依赖性抑制IL-1β介导的大鼠腹腔巨噬细胞分泌MMP-1,而对TIMP-1的分泌无影响;普伐他汀对IL-1β介导的大鼠腹腔巨噬细胞分泌MMP-1无影响,对TIMP-1的分泌也无影响。     

慢性阻塞性肺疾病患者肺组织中基质金属蛋白酶抑制剂-1及基质金属蛋白酶-9与细胞黏附因子表达的关系

目的 研究COPD患者肺组织中基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、细胞黏附因子-1(ICAM-1)蛋白和mRNA的分布和表达,探讨其与气流阻塞的关系及吸烟对其影响.方法 取39例因肺癌行肺叶切除的癌旁肺组织标本,其中不吸烟不伴COPD组(A组)9例、吸烟不伴COPD组(B组)11例、吸烟伴COPD组(C组)19例.用免疫组化和逆转录聚合酶链反应方法检测TIMP-1、MMP-9、ICAM-1的蛋白和mRNA表达,并进行相关性分析.结果 MMP-9表达于肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞、血管平滑肌细胞、肺泡巨噬细胞、间质细胞,C组MMP-9免疫组化阳性细胞数(54.0±15.0)明显高于A组和B组(1.2±0.7和1.4±0.8);TIMP-1蛋白表达的主要部位为肺泡巨噬细胞、肺泡上皮细胞、毛细血管内皮细胞、血管平滑肌细胞,C组弱表达,A组和B组无表达;ICAM-1主要表达于肺泡上皮细胞,C组ICAM-1免疫组化阳性细胞数(52.1±13.4)明显高于A组和B组(2.1±1.1和4.5±2.4).C组MMP-9、TIMP-1、ICAM-1的mRNA平均吸光度值(0.71±0.16、0.47±0.10、0.62±0.15)明显高于A组(0.17±0.05、0.20±0.06、0.37±0.11)和B组(0.20±0.08、0.26±0.08、0.44±0.12).C组肺组织TIMP-1、MMP-9与ICAM-1的mRNA表达水平呈直线正相关,MMP-9与ICAM-1蛋白表达水平呈显著正相关.MMP-9和ICAM-1的mRNA及蛋白表达水平、TIMP-1的mRNA表达水平与FEV1占预计值%、FEV1/FVC占预计值%均呈显著负相关.结论 TIMP-1、MMP-9和ICAM-1在促进炎性细胞迁移进入细胞外基底膜及气道上皮细胞,导致肺组织破坏和重塑,引起及加重COPD患者的气流阻塞中起着重要作用.     

基质金属蛋白酶-1、基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-3在溃疡性结肠炎患者肠黏膜的表达

目的了解部分基质金属蛋白酶(MMPs)在溃疡性结肠炎(UC)患者肠黏膜的表达,为明确MMPs在UC发病机制的作用奠定基础。方法肠镜下取25例UC患者的病变肠黏膜及20例对照组肠黏膜,采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和金属蛋白酶抑制剂(TIMP-1)mRNAs的表达量。结果UC患者肠黏膜的MMP-1、MMP-2和MMP-3 mRNAs的表达量分别为0.37±0.19、0.40±0.16和0.24±0.13,而对照组肠黏膜的表达分别为0.18±0.15、0.16±0.13和0.09±0.13,二组比较均有显著性差异(P<0.05)。结论溃疡性结肠炎的炎症性病变肠黏膜中,基质金属蛋白酶尤其是MMP-1和MMP-3的表达均明显高于正常的肠黏膜,提示MMPs在UC的发病机制中起重要作用。     

结肠腺癌中组织蛋白酶D和基质金属蛋白酶-7的表达及意义

目的检测结肠腺癌中组织蛋白酶(Cath)-D、基质金属蛋白酶(MMP)-7的表达及其临床意义。方法 59例结肠腺癌根治术患者术后的蜡块组织作为观察组,结肠黏膜高级别上皮内瘤变术后的蜡块组织25例作为对照组1,结肠黏膜低级别上皮内瘤变钳检后的蜡块组织25例作为对照组2,非肿瘤性结肠黏膜组织25例作为对照组3。应用免疫组化方法检测四组中Cath-D和MMP-7的表达。结果观察组中Cath-D和MMP-7的表达明显高于其他三组,观察组中Cath-D和MMP-7的表达与肿瘤的脉管累犯、淋巴结转移均相关,观察组中Cath-D的表达与肿瘤的浸润深度密切相关。观察组中Cath-D的表达与淋巴结转移数量密切相关。相关分析显示观察组中Cath-D和MMP-7的表达无相关性。结论结肠腺癌中Cath-D和MMP-7高表达可以促进病变的形成和进展,Cath-D和MMP-7之间无明显协同作用。     

丙型肝炎病毒核心蛋白上调基质金属蛋白酶组织抑制因子-1的表达

目的研究丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白对基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1基因表达的影响,以探讨HCV的致肝纤维化机制。方法聚合酶链反应(PCR)扩增TIMP-1的启动子DNA片段,克隆至真核报告载体pCAT3-basic中,构建pCAT3-TIMP-1p报告载体;将该质粒转染人肝癌细胞系HepG2细胞,以酶链免疫吸附试验(ELISA)检测氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性;将构建的pCAT3-TIMP-1p与HCV核心蛋白真核表达载体PcDNA3.1(-)-HCVcore共转染入人肝星状细胞系LX-2细胞,同时平行设立pCAT3-basic阴性对照组、pCAT3-control阳性对照组、pCAT3-TIMP-1p单独转染组,用ELISA法检测各组CAT的表达活性。结果成功获得TIMP-1基因启动子DNA片段,构建的pCAT3-TIMP-1p具有转录活性,与PcDNA3.1(-)-HCVcore共转染LX-2细胞后,ELISA法检测结果显示pCAT3-TIMP-1p吸光度值为0.833±0.040,同期单独转染LX-2细胞的pCAT3-TIMP-1p吸光度值为0.677±0.049,方差分析各组差异有统计学意义(F=132.401,P<0.05)。结论 HCV核心蛋白通过上调TIMP-1启动子的活性,促进TIMP-1基因的表达。     

组织型基质金属蛋白酶抑制剂-1、基质金属蛋白酶-9在老年女性压力性尿失禁患者阴道壁中的表达及意义

目的观察组织型基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1和基质金属蛋白酶(MMP)-9在女性压力性尿失禁(SUI)患者阴道壁中的表达情况及其机制。方法随机选取25例SUI患者作为观察组,25例盆底器官脱垂症(POP)患者作为脱垂组,25例妇科良性疾病患者作为对照组。取所有受试者阴道壁结缔组织制成切片,采用免疫组织化学法对切片进行染色,采用RT-PCR法检测所有组织中TIMP-1和MMP-9 mRNA的表达情况。结果观察组和脱垂组TIMP-1、MMP-9蛋白的表达及TIMP-1、MMP-9 mRNAΔCt值差异显著(P0.05),对照组TIMP-1蛋白表达显著高于观察组和脱垂组,而MMP-9蛋白表达显著低于观察组和脱垂组(P0.05)。结论在SUI和POP患者的阴道壁组织中,MMP-9呈现高表达,TIMP-1呈现低表达,二者可能参与了SUI和POP的发病过程。     

氟化钠对大鼠长骨组织基质金属蛋白酶-13和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1 mRNA表达的影响

目的 观察亚慢性氟中毒大鼠长骨组织中基质金属蛋白酶-13(MMP-13)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)mRNA的表达和变化,分析亚慢性氟中毒骨组织基质降解的分子机制.方法 将雄性Wistar大鼠按体质量随机分成两组,氟化钠组每日饮用含150mg/L氟离子(F-)的水溶液.对照组饮用自来水,共饲养24周,每4周处死一批动物,每组8只.透射电镜观察骨组织中破骨细胞的超微结构病变特点.RT-PCR法检测骨组织中MMP-13 mRNA和TIMP-1 mRNA的表达情况.结果 电镜观察可见破骨细胞溶酶体数量减少并伴有溶酶体酶的合成减少.第4、8、12、16、20、24周时,氟化钠组大鼠骨组织MMP-13相对表达量(1.87±0.67、1.87±0.75、1.90±0.73、1.93±0.86、1.88±0.61、1184±0.53)明显高于对照组(1.24±0.39、1.19±0.27、1.07±0.22、1.15±0.17、1.17±0.18、1.20±0.62),两组比较差异均有统计学意义(t值分别为2.29、2.41、3.07、2.52、3.15、2.22,P<0.05);氟化钠组大鼠骨组织TIMP條相对表达量(1.89±0.77、1.70±0.85、1.61±0.82、1.81±0.84、1.70±0.74、2.06±0.96)亦明显高于对照组(1.07±0.39、0.87±0.49、0.71±0.48、0.99±0.43、0.95±0.46、0.89±0.57),两组比较差异均有统计学意义(t值分别为2.69、2.19、2.68、2.46、2.43、2.96,P<0.05).结论 高剂量氟可以持续诱导MMP-13 mRNA和TIMP-1 mRNA的表达,参与氟中毒骨转换过程.     

白藜芦醇对动脉粥样硬化兔心肌纤维化和基质金属蛋白酶2、组织型基质金属蛋白酶抑制剂2表达的影响

目的 观察白藜芦醇对动脉粥样硬化兔心肌间质胶原纤维变化和基质金属蛋白酶2及组织型基质金属蛋白酶抑制剂2表达水平的影响.方法 33只新西兰白兔随机分为对照组、模型组和白藜芦醇干预组.观察心肌间质胶原纤维的变化,测量心肌间质胶原容积分数.逆转录聚合酶链反应检测心肌组织基质金属蛋白酶2及组织型基质金属蛋白酶抑制剂2 mRNA水平.结果 与对照组相比,模型组胶原纤维明显增多、增粗、排列紊乱,呈不规则网状或粗块状沉积于心肌间质,胶原容积分数和基质金属蛋白酶2表达增多,组织型基质金属蛋白酶抑制剂2表达减少(P<0.01).白藜芦醇干预能显著减少上述指标的改变.结论 动脉粥样硬化进程中,存在着心肌纤维化、基质金属蛋白酶2表达增多和组织型基质金属蛋白酶抑制剂2表达减少等现象,白藜芦醇能减轻基质金属蛋白酶2/组织型基质金属蛋白酶抑制剂2表达的失衡,改善心肌纤维化.