长春花叶片愈伤组织诱导及培养过程中生物碱合成类型的变化和调节及有关

在４种不同培养基上诱导长春花叶片愈伤组织的过过程中,叶片中含量较高的文多灵和长春质碱迅速降解有低水平,而叶片中含量较低的阿玛码和蛇根碱的合成却逐渐增加,同时酸性和碱性过氧化物酶活性呈上升趋势,尤其碱性过氧化物酶与蛇根碱和阿玛碱的相关性较密切。     

真菌诱导子对长春花愈伤组织中吲哚生物碱积累的影响

目的 研究分别来源于镰刀菌Fusarium solani和黑曲霉Aspergillum niger的真菌诱导子(fungal elicitors)对长春花愈伤组织中吲哚生物碱积累的影响。方法 用真菌诱导子对长春花愈伤组织进行诱导处理后提取吲哚总碱，并用RP—HPLC法测定其中阿玛碱和长春质碱含量。结果 两种真菌诱导子对吲哚总碱及其中阿玛碱和长春质碱的积累均有较明显的正向调节作用，并且确立了真菌诱导子最佳处理时间。结论 这两种真菌诱导子对长春花愈伤组织中吲哚生物碱的积累有显著影响。     

蛇床愈伤组织形态发生过程中过氧化物酶的变化规律研究

目的:研究蛇床愈伤组织形态发生过程中过氧化物酶活性的变化与过氧化物酶同工酶的差异。方法:采用分光光度法测定过氧化物酶活性,采用聚丙烯酰胺凝胶平板电泳分析过氧化物同工酶。结果:已分化愈伤组织的酶活性高于未分化愈伤组织,未分化愈伤组织、产生胚状体的愈伤组织及分化芽和根的愈伤组织的酶活性成线性递增关系。不同分化类型愈伤组织的过氧化物酶同工酶谱有明显的差异。三类愈伤组织都有酶带1和2,分化的愈伤组织都有3和5,分化芽和根的愈伤组织还有酶带4,分化芽和根的愈伤组织的酶带3比形成胚状体的愈伤组织的酶带3要宽,着色也深。结论:过氧化物酶活性与愈伤组织分化程度呈正相关;酶带1和2显示的两种同工酶与愈伤组织的增殖有关,酶带3和5是与分化有关的特异性蛋白质。酶带4可能催化器官发生特有反应,且对过氧化物酶的活性影响较大。     

盐胁迫对长春花愈伤组织生长及阿玛碱积累的影响

目的 研究盐胁迫对长春花愈伤组织生长及阿玛碱积累的影响。方法 用浓度为0、50、100、150 mmol/L的NaCl处理长春花愈伤组织,测定其鲜质量、干质量、丙二醛（MDA）量、光合速率、呼吸速率等生理指标和阿玛碱的量。结果 盐胁迫显著地降低了长春花愈伤组织的鲜质量和干质量,提高了MDA量、光合速率和呼吸速率;在含有不同浓度NaCl的培养基上生长30 d后,愈伤组织的阿玛碱量随NaCl浓度的增加而逐渐降低;用不同浓度的NaCl溶液喷洒生长27 d的愈伤组织,发现3 d后50 mmol/L处理的愈伤组织中阿玛碱量比对照高出近1倍。结论 长期盐胁迫能够抑制长春花愈伤组织的生长,同时引起阿玛碱积累的减少;低浓度NaCl喷洒处理则对长春花细胞中阿玛碱的积累有较大的促进作用。     

叶下珠愈伤组织的诱导与培养

目的建立叶下珠愈伤组织培养方法。方法采用组织培养方法,比较不同外植体、蔗糖、植物生长物质及其配比对叶下珠愈伤组织诱导的影响。结果茎段的诱导率最高,为55.56%,叶片诱导不出愈伤组织。6-BA是叶下珠愈伤组织形成的主要影响因素,2,4-D、NAA、蔗糖次之。结论叶下珠愈伤组织诱导及继代的适宜培养基为MS 2,4-D0.5mg/L 6-BA1.0mg/L NAA0.1mg/L 蔗糖10g/L。     

诱导八角莲愈伤组织的研究

目的:探讨八角莲诱导愈伤组织的过程,为快速繁殖幼苗奠定基础。方法:以八角莲的根茎、叶片为外植体,采用MS培养基,附加不同的植物激素进行实验。结果:以八角莲的叶片为外植体,在培养基MS NAA1.0mg/L 2,4-D2.0mg/L 6-BA0.5mg/L,愈伤组织诱导率可达55.0%。结论:通过合理配制培养基和激素,可以诱导八角莲的愈伤组织。     

芸香科植物飞龙掌血愈伤组织细胞培养物生物碱成分的研究

目的：为研究芸香料各亚科及属之间的亲缘关系及化学分类。方法：对药用植物飞龙掌血（Ｔｏｄｄａｌｉａａｓｉａｔｉｃａ）愈伤组织进行诱导生长和继代培养，收获培养７周的组织块，甲醇和乙酯提取物通过多次硅胶柱层析和ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ－２０凝胶柱层析等方法进行生物碱等化学成分的分离与结构鉴定。结果：为采用药用植物飞龙掌血愈伤组织细胞培养的方法制备喹啉呋喃类药用生物碱提供依据。     

EMS诱变的长春花细胞系突变研究

目的 通过化学诱变的手段筛选生长快且吲哚碱含量高的长春花突变细胞系。方法 用不同浓度的甲基磺酸乙酯(EMS)处理长春花愈伤组织，挑选成活愈伤组织块继代扩大培养，比较其与对照愈伤组织生长速率、吲哚总碱积累等方面的差异。结果 用EMS处理的长春花愈伤组织与对照相比，不仅生长快，并且吲哚总碱含量高。结论 EMS处理的愈伤组织发生了变异，变异种是所期望的比较理想的细胞系。     

麻黄愈伤组织的诱导研究

麻黄草质茎纤维性比较强,诱导愈伤组织比较困难。研究结果说明:诱导麻黄愈伤组织以幼嫩、深绿色、较粗壮的草质茎节间部分为外植体较好;在MS+NAA1.0(mg/l)+2,4-D0.2(mg/l)和MS+NAA0.1(mg/l)+6-BA0.1(mg/l)培养基上愈伤组织的诱导率均可高达100%。     

柴胡愈伤组织生长和不定根诱导的研究

目的探讨柴胡愈伤组织生长和其不定根诱导的适宜培养条件。方法以无菌苗为外植体诱导获得愈伤组织后,对不同种类和不同质量浓度的生长素进行实验,并对光和温度对柴胡愈伤组织生长和其不定根诱导的影响进行了研究。结果柴胡的愈伤组织适宜于在MS NAA4mg/L KT0.2mg/L培养基或MS NAA2mg/L KT0.2mg/L培养基上继代培养。诱导其不定根时宜采用的培养基为MS IBA2mg/L KT0.2mg/L。25℃条件下,黑暗培养既有利于柴胡愈伤组织的生长又有利于其不定根的诱导。结论比较适宜于柴胡愈伤组织生长的生长素为NAA,而有利于不定根诱导的生长素为IBA。温度对愈伤组织的生长影响非常明显,光照是其发根的限制因素。     

提高长春花冠瘿细胞中吲哚生物碱含量的研究

研究了长春花冠瘿细胞接种物年龄与接种量对悬浮物培养细胞生物产量的影响,探讨了以大丽花轮枝孢菌的匀浆物为外源刺激物处理冠瘿细胞,对细胞生长和吲哚生物碱积累的作用,确立了外源刺激物产生效应的最适条件。     

生物技术在长春花研究中的应用

长春花为重要的抗癌药用植物,对细胞组织培养,Ti和Ri质粒遗传化等生物技术在长春花研究中的应用作一综述,并对长春花的开发利用和长春花生物磁的工业化生产存在问题和前景作了分析.     

长春花突变细胞生理特征的研究

目的研究以秋水仙碱处理的长春花突变细胞在继代培养过程中的生长规律、吲哚生物碱积累的规律及营养成分的适宜浓度等方面的特征,期望得到适于工业化细胞培养的理想材料。方法将突变细胞培养于MS固体培养基上,定期称取其鲜质量,用有机溶剂萃取吲哚生物碱,应用RP-HPLC法检测药用成分阿玛碱和长春质碱。结果突变细胞培养至第30代时,生长速度和吲哚总碱积累得最快,培养至第45代时,两者均明显下降。而药用成分的量于第20代达到最高;在培养基中添加适量的色氨酸能提高药用成分的量;培养基中Ca2 和Zn2 的质量浓度分别为1760和12.6mg/L时,明显促进了药用成分的积累。结论长春花突变细胞可能是一种适于工业化细胞培养的理想材料。     

长春花叶片中吲哚生物碱增产的研究

目的探讨乙烯利、乙酰水杨酸、色氨酸3种试剂对长春花植株中药用成分积累的影响。方法用不同质量浓度的3种试剂溶液分别处理温室盆栽长春花植株,2d后,测定叶片中的总吲哚生物碱含量,并采用RP-HPLC法测定长春碱和长春质碱的含量。结果3种试剂处理后吲哚总碱、长春碱、长春质碱的积累均有明显的提高,并确定了最适的处理质量浓度。结论3种试剂对长春花植物中吲哚生物碱的产生有明显的促进作用。     

长春花中长春碱含量测定方法的研究

研究了薄层扫描法及薄层－紫外分光光度法测定长春花中长春碱含量的两种方法,在硅胶Ｆ２５４－ＣＭＣ－Ｎａ碱性板上（ＮａＯＨ浓度为０．１ｍｏｌ／Ｌ）,以氯仿－甲醇－石油醚（９：１：５）为展开剂,分离了长春花提取液中长春碱和长春新碱等１４种成分。前法采用双波长薄层扫描,λｓ＝２８０ｎｍ,λＲ＝３５０ｎｍ,线性范围在２￣１０μｇ。后法采用薄层分离后,样品带用甲醇洗脱后,紫外分光光度法测定含量。后法在５￣２５     

一株产长春新碱内生真菌的初步研究

目的 通过长春花叶内生真菌的分离，筛选产生长春新碱的菌株。方法 从长春花叶中分离内生真菌，对其发酵提取物进行TLC和HPLC分析。结果 从长春花叶中分离筛选到一株无孢菌群菌株：97CY3。它能产生长春新碱，HPLC测定其长春新碱含量约为0.205μg／L。结论 长春花内生真菌中，有的菌株可产生与宿主所产相同的抗癌物质长春新碱。     

不同来源长春花药材中文多灵的含量比较

目的建立长春花中文多灵的含量分析方法,比较不同来源长春花药材中文多灵的含量。方法采用高效液相色谱法,以依利特C18柱为分析柱,甲醇：水（体积比64：36,以二乙胺和磷酸调pHI1）为流动相,流速为1mL／min;220nm为检测波长。结果红色长春花、白色长春花以及恩平、阳江、广州紫色长春花样品中文多灵含量分别是1．561、0．390、0．982、0．622、0．587mg／g。结论不同来源的长春花中文多灵的含量差异较大。     

长春花内生真菌的分离及其发酵产生药用成分的初步研究△

首次报道从长春花Ｃａｔｈａｒａｎｔｈｕｓ ｒｏｓｅｕｓ （Ｌ．）Ｇ．Ｄｏｎ茎的韧皮部中分离出尖孢镰刀菌Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏ－ｒｕｍ。为该植物的一种内生真菌,并用ＴＬＣ和ＨＰＬＣ对该菌的９７ＣＧ３菌株培养物进行了分析。初步结果表明该真菌能产生抗癌药长春新碱成分。