Fusarium sacchari转化三七茎叶皂苷的稀有抗肿瘤成分

大量现代药理研究证实,五加科植物如人参、三七、西洋参等的摄入对抑制肿瘤的生长具有明显的作用,且这些植物的抗癌活性是通过其体内含有的特殊活性成分——达玛烷型三萜皂苷中的稀有次生皂苷成分实现的[1,2],如人参皂苷Rg3、人参皂苷Rh2、人参皂苷C-K和原人参二醇等。利用生物     

野山参叶中人参皂甙的分离与鉴定

从野山参叶中分离并鉴定了5个化合物，经测定理化常数和波谱分析，分别鉴定为人参皂式-Rh2、－Rh1、－Rg2、－Rg1和-Re。     

HPLC-ELSD法测定人参茎叶中人参皂苷Rg1、Re、Rd的含量

目的 建立HPLC-ELSD法测定人参茎叶中人参皂苷Rg1、Re、Rd含量的方法 . 方法 采用Diamonsil(钻石)C18柱(200 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:乙腈(A)和水(B)按不同体积比混合,梯度洗脱程序:0-30 min,21%A;30-35 min,21%-33%A;35-60 min,33%A;60-65 min,33%-21%A;65-70 min,21%A;流速为1.0 ml/min,雾化温度35℃,蒸发温度50℃,载气N2,压力1.5 Bar. 结果 人参皂苷Rg1、Re、Rd分别在1.06-7.95 μg、1.94-14.55 μg、1.26-9.45 μg范围内呈良好的线性关系.3种人参皂苷的平均回收率分别为96.75%(RSD=1.99%)、97.77%(RSD=1.33%)、96.30%(RSD=1.26). 结论 本方法 灵敏、简便、准确,可用于人参茎叶中人参皂苷的含量测定.     

人参茎叶皂苷对失血性休克大鼠糖皮质激素受体的影响

目的 观察人参茎叶皂昔(ginsenosides，GSS)对失血性休克大鼠糖皮质激素受体(GR)的影响，并分析其作用机制，为研制及时抢救失血性休克患者的天然药物制剂提供实验依据。方法 雄性SD大鼠随机分为失血性休克组和对照组，失血性休克组分别每日ig200，100，50mg／kg GSS水溶液，对照组和模型组ig蒸馏水2mL，共10d。以[^3H]地塞米松为配体，用一点分析法测脑和肝胞液GR结合活性(Rs)、半定量RT—PCR方法测肝胞液GR mRNA水平、放免法测血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质酮(GC)浓度。结果 GSS组大鼠脑和肝胞液的GR结合活性高于单纯失血性休克组，其中以中剂量组最明显(P＜0．01)；GSS组大鼠肝胞液GR mRNA表达水平高于单纯失血性休克组；GSS组大鼠血浆ACTH和GC浓度和单纯失血性休克组没有明显差别。结论 GSS可减轻失血性休克大鼠GR结合活性的下降幅度，作用机制可能与其促进了GR mRNA表达有关，并可能存在一个最佳剂量。     

Fusarium sacchari转化三七茎叶皂苷中新化合物的分离和鉴定

目的 利用甘蔗镰孢 Fusarium sacchari对三七茎叶皂苷进行生物转化,以发现新的稀有抗肿瘤活性成分。方法 转化产物通过硅胶、凝胶及液相色谱进行分离,得到化合物结构经波谱鉴定。结果 分离得到了1个单体化合物,命名为三七皂苷-LZ(notoginsenoside-LZ),鉴定其化学结构为20(S)-3β-hydroxy-12β,23-epoxy-dammar24-ene20-O-β-D-xylopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranoside。结论 三七皂苷-LZ(notoginsenoside-LZ)为一新化合物。     

HPLC法测定西洋参茎叶总皂苷降解物中20(S)-人参皂苷Rh2的含量

20(S)-人参皂苷Rh2对多种癌细胞具有较强的抑制作用,且能使癌细胞在其增殖过程中产生一种诱导作用,诱导癌细胞逆转为正常细胞.但20(S)-人参皂苷Rh2在自然界存在甚少,红参中仅为十万分之一.为了获得大量20(S)-人参皂苷Rh2,一般采用总皂苷提纯,制备二醇组皂苷,再进行降解制备20(S)-人参皂苷Rh2.本文采用HPLC法测定西洋参降解物中20(S)-人参皂苷Rh2的含量,取得满意结果.     

高架十字迷路课题中人参根和茎叶皂苷抗焦虑效果的研究

目的：研究人参根和茎叶皂苷抗焦虑效果。方法：高架十字迷路法。结果：中枢兴奋药咖啡因40－80mg/kgig给药能使小鼠在开放通路中连续停留时间缩短,在封闭通路中停留时间延长。而中枢抑药定定1．5－3．0mg/kg却能明显地延长小鼠在开放通路中的停留时间,人参根和茎叶皂苷50－200mg/kgig给药后同样地使小鼠在开放通路中连续停时间延长,并且能使小鼠在开放路中往返次数增加。结论：人参根和茎叶皂苷有明显的抗焦虑效果。     

人参根及茎叶皂苷对群养及隔离孤独饲育小鼠神经药理作用的研究

人参根及茎叶皂苷５０－２００ｍｇ／ｋｇ能使群养小鼠的自发运动量明显增加,８周隔离局育小鼠比群养小鼠自发运动量明显增加,人参根皂苷能使其剂量依赖性能降低,而人参茎叶皂苷影响不明显;对戊巴比妥钠所致睡眠试验中,隔离孤独饲育小鼠经群养小鼠睡眠时间明显缩短,人参极皂苷５０－２００ｍｇ／ｋｇ使孤独饲育小鼠的睡眠时间随一增加而延长,２００ｍｇ／ｋｇ组与对照组比较,ｔ＝３．６６５,Ｐ〈０．０１。并能使８周隔离饲     

人参茎叶总皂苷对培养的人胚视网膜色素上皮细胞增生的抑制作用

目的:研究人参茎叶总皂苷(GSL)对体外培养的视网膜色素上皮细胞(RPE)增生的直接抑制作用及机制.方法:通过活细胞计数法与MTT比色法分别检测不同浓度(400、300、200、100、50、10 mg*L-1)的GSL和GSL 300 mg*L-1在不同作用时间(6、12、24、36、48、72、96和120 h)对RPE细胞增生及代谢的影响.结果:GSL组细胞增殖受抑并出现细胞脱落,GSL 400 mg*L-1具有最强的抑制效应,明显抑制效应在6 h出现,96 h达高峰.GSL组A值明显低于对照组,RPE细胞生存率下降.结论:GSL可能通过阻滞钙通道、干扰RPE细胞代谢对RPE细胞增殖具有剂量-效应和时间-效应关系的抑制作用.     

人参根和茎叶皂苷对孤独饲养小鼠自发运动及攻击行为的影响

目的 研究人参根和茎叶皂苷对孤独饲养小鼠自发运动及攻击行为的影响。方法 小鼠孤独饲养4周后,分别以人参根及茎叶皂苷溶液灌胃,按高剂量100 mg·kg^-1,低剂量25 mg·kg^-1给药,并以生理盐水为空白对照,观察两者对小鼠自发运动及攻击行为的影响。结果 人参根皂苷可减少小鼠的自发运动及攻击行为(P<0.01),人参茎叶皂苷可增加小鼠的自发运动及攻击行为。结论 人参根皂苷具中枢镇静的功效,而人参茎叶皂苷作用相反。     

人参茎叶皂苷对热损伤大鼠不同脏器糖皮质激素受体的影响

目的:观察人参茎叶皂苷(ginsenosides,GSS)对热损伤大鼠不同脏器糖皮质激素受体(glucocorticoidreceptor,GR)的影响,并探讨其作用机制。方法:雄性SD大鼠随机分为:(1)正常对照组,室温下饲养,蒸馏水灌胃;(2)GSS治疗组,室温下饲养,GSS灌胃;(3)热损伤模型组,蒸馏水灌胃,制作热损伤模型;(4)热损伤模型GSS治疗组,GSS灌胃,制作热损伤模型。采用放射配体结合法检测大鼠脑、胸腺、肺和肝细胞液GR结合活性;逆转录聚合酶链反应法测定脑、肝细胞液GRmRNA的水平;放射免疫法测定血浆促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropin,ACTH)和皮质酮(corticosterone,CS)的浓度。结果:热损伤模型GSS治疗组大鼠脑、肺和肝细胞液GR结合活性以及脑和肝细胞液GRmRNA表达水平均明显高于单纯热损伤模型组(P<0.05或P<0.01);热损伤模型GSS治疗组大鼠血浆ACTH和CS浓度与单纯热损伤模型组比较则无明显差异。结论:GSS可缓解热损伤大鼠不同脏器GR结合活性的下降幅度,其作用机制可能与促进GRmRNA的表达有关。     

人参茎叶皂苷对热损伤大鼠糖皮质激素受体的影响

热应激可导致糖皮质激素受体 (GR)结合活性下降 [1 ] 。以往的研究 [2 ,3]证实 ,中医方剂“生脉饮”可降低热损伤时 GR结合活性的下降幅度。人参是“生脉饮”的君药 ,其主要有效成分是人参根皂苷。人参茎叶原为废弃物 ,但其所含的皂苷与人参根皂苷化学成分和药理活性基本一致 [4 ] 。人参茎叶皂苷 (GSS)是否也有调节 GR结合活性的作用 ?其作用机制是什么 ?本实验对这些问题进行了初步研究 ,现报告如下。1　材料和方法1.1　药物　 GSS(黑龙江东宁制药厂提供 ) ,纯度为91.6 7% ,配成 2 0、10、5 mg/ml 3个剂量的溶液待用。1.2　动物分组…     

野山参的加工与保存

野山参为五加科植物人参的干燥根,多生于东北茂密的山林中,性喜阴湿,植株高约60cm。野山参的果实成熟时呈鲜红色(俗称亮红顶)易于被发现,每年8月和9月为采集期。1　野山参的加工野山参依加工方法不同,一般可以分为糖参、掐皮参和生晒参3种。(1)糖参　首先用冷水冲洗鲜山参,用细毛刷轻轻刷净泥土,置于沸水中煮透(以针扎之不滞为度)。然后用特制的针(骨针、石针和竹针等非金属制品均可)沿参体平行及垂直的方向扎小孔,节处及侧根的腋部细扎之,进行第1次浸糖。溶糖时,先加入适量的水没过糖,加热并搅拌,使糖完全溶解。糖汁浓度为100ml水中溶有135…     

两性霉素B与人参茎叶皂苷联合抗念珠菌生物膜作用的研究

目的 探讨人参茎叶皂苷（Ginseng stem-leaf saponins, GSLS）联合两性霉素B(amphotericin B, AMB)对念珠菌生物膜的体外抑制活性。方法 采用ITS及β-tubulin基因部分测序对临床分离的31株经形态学鉴定为念珠菌菌株进行分子鉴定;按照美国标准化实验室与研究所（CLSI）推荐的M27-A3微量液基稀释法对收集的临床菌株及标准菌株进行体外抗念珠菌生物膜联合药敏试验;使用甲基四氮盐（XTT）减低法和结晶紫分光光度法分别对生物膜的活性和生物膜总量测定。结果 31株临床念珠菌中,其中白念珠菌16株、近平滑念珠菌6株、热带念珠菌8株、季也蒙念珠菌1株。两性霉素B联合人参茎叶皂苷对所有试验菌株的FICI值均小于等于0.5（FICI≤0.5）。相对于单独用药,二者联合能更有效地抑制菌株生物膜的形成和活力,单药与两药联合的生物膜形成量的差异有统计学意义（P<0.05）。结论 两性霉素B与人参茎叶皂苷在体外联用对几种念珠菌生物膜以协同作用为主。     

酶法修饰人参茎叶总皂苷及其HPLC图谱研究

目的研究生物酶制剂对人参茎叶总皂苷的修饰及其修饰前后HPLC图谱的变化。方法利用复酶制剂A对人参茎叶总皂苷进行酶法修饰,采用TLC法鉴别修饰前后的变化,并比较修饰前后的HPLC图谱的变化。结果在设定的积分事件下,复酶制剂A修饰人参茎叶总皂苷后色谱特征峰由34个减至16个,其中有13个特征色谱峰相对峰面积和相对峰高均明显降低,21个色谱峰检测不到相应信号,产生4个明显增加或新色谱峰。结论复酶制剂A能够有效地修饰人参茎叶总皂苷,采用HPLC图谱能够很好的监测其变化。     

人参茎叶总皂苷中大孔吸附树脂残留物的测定

目的 采用顶空气相色谱法测定人参茎叶皂苷中大孔树脂残留物的质量浓度。方法 色谱柱初始温度60 ℃,保持22 min,以50 ℃/min升至200 ℃,保持6 min,氢火焰离子检测器温度为260 ℃,进样口温度220 ℃;用质量分数为40%的N, N-二甲基甲酰胺作溶剂,载气为氮气。结果 正己烷、苯、甲苯、对二甲苯、苯乙烯、对二乙基苯6种大孔树脂残留物在各自的质量浓度范围内呈良好的线性关系,且回收率符合要求。结论 该方法操作简便快速,灵敏度高,准确度好,可作为人参茎叶总皂苷中大孔树脂有机溶剂残留量的测定方法。     

人参根及茎叶皂苷对群养及隔离孤独饲育小鼠神经精神药理作用的研究

人参根及茎叶皂苷 ５０～２００ ｍｇ／ｋｇ能使群养小鼠的自发运动量明显增加,８周隔离饲育小鼠比群养小鼠自发运动量明显增加,人参根皂苷能使其剂量依赖性降低,而人参茎叶皂苷影响不明显;对戊巴比妥钠所致睡眠试验中,隔离孤独饲育小鼠比群养小鼠睡眠时间明显缩短（ｔ＝４．３５６,Ｐ＜０．００１）。人参根皂苷 ５０～２００ ｍｇ／ｋｇ使孤独饲育小鼠的睡眠时间随剂量增加而延长,２００ ｍｇ／ｋｇ组与对照组比较,ｔ＝３． ６６５,Ｐ＜０．０１。并能使 ８周隔离饲育的小鼠 ２０ ｍｉｎ内连续攻击时间有意义地下降（ｔ＝４．５４０,Ｐ＝０．００１）,但人参茎叶皂苷效果不明显。证明人参根及茎叶皂苷具有中枢兴奋作用,同时人参根皂苷还具有中枢镇静作用。     

灵芝菌液体发酵人参茎叶总皂苷化学成分变化及其抗肿瘤活性

目的：研究灵芝菌液体发酵人参茎叶总皂苷前后化学成分的生物转化规律,为人参茎叶药性菌质的进一步开发奠定基础。方法：采用灵芝菌种对人参茎叶总皂苷进行液体发酵,薄层色谱法分析发酵前后其化学成分的变化;紫外分光光度法检测发酵前后人参茎叶总皂苷水平;高效液相色谱法检测发酵前后人参皂苷Rb₁、Rg₃、Rd、CK、Re、Rg₁和Rh₁水平。将人肝癌SMMC-7721细胞株分为空白对照组,低、中和高剂量人参茎叶总皂苷组,低、中和高剂量人参茎叶药性菌质组。低、中和高剂量人参茎叶总皂苷和人参茎叶药性菌质组给药剂量分别为5、10和20 mg·L^-1,MTT法检测人参茎叶总皂苷发酵前后SMMC-7721细胞株的生长抑制率（IR）。结果：薄层色谱检测,发酵前后皂苷之间发生了相互转化;发酵前人参茎叶总皂苷水平为749.98 mg·g^-1,发酵后人参茎叶总皂苷水平为602.26 mg·g^-1。发酵前人参二醇组皂苷中人参皂苷Rb1、Rg3、Rd和CK水平分别为24.54、2.21、87.22和0 mg·g^-1,人参三醇组皂苷中人参皂苷Re、Rg1和Rh1水平分别为151.34、77.02和3.06 mg·g^-1;发酵后人参二醇组皂苷中人参皂苷Rb1水平降低了61.45%,Rg3水平增加了238.91%、Rd水平增加了34.43%、CK水平增加了268.00%,人参三醇组皂苷中人参皂苷Re水平降低了63.75%、Rg1水平降低了64.41%,Rh1含量增加了408.88%。中剂量人参茎叶药性菌质组SMMC-7721细胞株的IR高于中剂量人参茎叶总皂苷组（P<0.05）,高剂量人参茎叶药性菌质组SMMC-7721细胞株的IR高于高剂量人参茎叶总皂苷组（P<0.01）。结论：以灵芝菌液体发酵人参茎叶总皂苷可明显改变其化学成分,发酵后组分对SMMC-7721细胞株具有更强的抗增殖活性。     

HPLC法测定西洋参茎叶总皂苷降解物中20(S)-人参皂苷Rg3的含量

西洋参 Panax quinquefolium L.为五加科人参属植物 ,根部入药。 1 998年尹建元等从野山参茎叶皂苷中首次分离得到人参皂苷 Rg3 [1] 。 2 0 0 2年孟勤等从西洋参叶中首次分离得到人参皂苷 Rg3 [2 ] 。人参皂苷 Rg3 具有明显抑制乙酰胆碱刺激牛肾上腺素嗜铬细胞分泌儿茶酚胺的作用 [3 ] ,并且人参皂苷Rg3 毒性小 ,生物活性强 ,是很具有开发价值的天然活性成分 ,但人参皂苷 Rg3 在自然界存在甚少。为了获得大量人参皂苷 Rg3 ,我们采用西洋参茎叶提纯总皂苷并制备二醇组皂苷[4] ,再将二醇组皂苷进行降解制备人参皂苷 Rg3 。本实验采用 HPL…