抗氧化剂与钙离子拮抗剂联合应用预防大鼠睾丸纤维化实验研究

目的 :研究抗氧化剂与钙离子拮抗剂联合应用对大鼠睾丸纤维化的防治效果 ,以探索防治睾丸纤维化发生的理想药物。　方法 :将正常雄性Wistar大鼠 80只分为正常对照组 (n =10 ) ,高 (n =2 0 )、中 (n =2 0 )、低 (n =17)预防睾丸纤维化组和睾丸纤维化模型组 (n =13) ,采用王涛等建立的大鼠睾丸纤维化模型的方法略加改进。从第 1次免疫的次日起 ,高剂量组给予维生素E、C合剂 90mg/ (kg·d)、维拉帕米 5 0mg/ (kg·d)灌胃 ,中剂量组给予维生素E、C合剂 90mg/ (kg·d)、维拉帕米 2 5mg/ (kg·d)灌胃 ,低剂量组给予维生素E、C合剂 90mg/ (kg·d)、维拉帕米 12 .5mg/ (kg·d)灌胃 ,共 15 0d。纤维化模型组未予干预措施。正常对照组未加任何处理。检测精子计数、精子畸形率、睾丸长度、精曲小管直径 ,光镜和透射电镜观察睾丸间质及精曲小管生精细胞的变化。　结果 :高、中剂量组对于预防大鼠睾丸纤维化效果显著 ,睾丸精曲小管直径、基膜厚度与正常对照组相比差异无显著性。低剂量组精曲小管界膜略增厚 ,生精细胞损伤较重 ,但病变仍轻于模型组。模型组睾丸间质增生显著 ,间质中、精曲小管的管周及睾丸被膜下可见肥大细胞增多 ,精曲小管的界膜显著增厚 ,生精上皮空泡变。　结论 :抗氧化剂与钙离子拮抗剂联合应用 ,     

邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯对小鼠胎鼠睾丸及睾丸引带的影响

目的:研究邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)对小鼠胎鼠睾丸与睾丸引带形态结构及功能的影响,探讨隐睾发生的可能机制。方法:30只健康KM孕鼠随机均分为3组:空白对照组、玉米油对照组、DEHP组。DEHP组以剂量500mg/(kg.d)的DEHP灌胃作用于怀孕12～19d(GD12～GD19)的KM母鼠,观察DEHP对每胎胎鼠数、雌雄性胎鼠比例、雄性胎鼠体重、睾丸重量、睾丸引带形态结构、位置、睾丸到膀胱颈之间的相对距离(TBD)、颅侧悬韧带残留情况、引带内雄激素受体(AR)、雌激素受体(ER)、肌动蛋白、增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平的影响。结果:DEHP对每胎胎鼠数、雌雄性胎鼠比例、雄性胎鼠体重无明显影响;DEHP可影响胎鼠睾丸重量及TBD;DEHP组睾丸均有一定程度的下降不全,睾丸引带形态结构无明显差异;光镜下见DEHP组睾丸生精小管、支持细胞存在明显的发育障碍,睾丸Leydig细胞明显增生;DEHP组睾丸引带AR阳性表达率降低(P<0.01)。结论:DEHP可通过抗雄激素效应导致睾丸引带功能障碍,使睾丸下降发生异常而诱导小鼠隐睾;同时造成睾丸Ser-toli细胞、睾丸Leydig细胞和生精细胞的发育障碍和功能改变。     

邻苯二甲酸二(2-乙己基)酯致小鼠睾丸基因组DNA甲基化水平变化分析

目的:探讨增塑剂邻苯二甲酸二(2-乙己基)酯(DEHP)作用于怀孕小鼠后,其仔代睾丸基因组DNA甲基化水平的改变情况。方法:妊娠KM小鼠随机分为3组:正常对照组、玉米油对照组和DEHP实验组。自妊娠12.5 d到生后第3天分别持续经口予以玉米油和DEHP[500 mg/(kg.d)],于生后第7天取仔代睾丸,应用甲基敏感扩增多态性(MSAP)技术,对仔鼠睾丸组织DNA进行EcoRⅠ/MspⅠ和EcoRⅠ/HpaⅡ两种酶切反应,经ABI 3730DNA自动测序仪电泳及检测后,运用Genescan3.1分析扩增谱带。结果:对CCGG位点,DEHP实验组小鼠仔代睾丸组织DNA甲基化程度明显增高,其甲基化水平为(34.03±3.05)%;而正常对照组和玉米油对照组小鼠仔代睾丸组织基因组DNA甲基化程度分别为(28.37±2.37)%和(28.58±2.45)%。DEHP实验组与正常对照组和玉米油对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:DEHP作用孕鼠后可导致仔代睾丸基因组DNA甲基化水平改变,影响基因组表观遗传修饰改变,可能是导致生殖系统损害的重要毒理机制之一。     

“生精宝”对小鼠少精子症模型的作用及其机制探讨

目的:研究"生精宝"对小鼠少精子症模型生精功能的作用并探讨其机制。方法:昆明种雄性小鼠60只随机分4组:"生精宝"组17只(组1),维生素E组17只(组2),空白造模对照组16只(组3),正常空白对照组10只(组4);前3组予腹腔内连续5d注射环磷酰胺造模,前两组于造模次日给药灌胃,组1每只小鼠给予"生精宝"药汤2g/(kg.d),组2给予维生素E75mg/(kg.d),第36d处死各组全部小鼠。用放免法测血清睾酮水平;取一侧附睾制备悬液作精子分析,另一侧睾丸切片行HE染色,计数生精上皮层次和间质细胞,TUNEL法检测生精细胞凋亡。结果:组1血清睾酮,生精上皮层次以及间质细胞计数方面相对于组3有明显改善且高于组2,组1生精细胞凋亡阳性率低于组2和组3,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05),组1各项检测指标与组4比较无显著差异(P>0.05)。结论:"生精宝"可明显增加间质细胞数量,从而分泌高水平睾酮作用于睾丸生精上皮层次,增强生精功能;"生精宝"作用机制可能为抑制生精细胞凋亡,增加上皮层次,促进精子发生;睾酮可能为生精细胞凋亡抑制的诱导因素。     

小鼠隐睾模型中睾丸质量和组织病理学变化及临床意义

目的研究小鼠隐睾模型中睾丸的质量及组织病理学变化,并探讨其临床意义。方法取50只6周龄ICR雄性健康小鼠,随机选取25只,造左侧隐睾模型,视为隐睾组;另外25只小鼠,左侧睾丸适度牵拉仍保持原位置不动,视为假手术组。再随机分成5组,每组包含5只隐睾小鼠,5只假手术小鼠。术后3d、7d、14d、21d和28d分别颈椎离断处死各组小鼠,记录每只小鼠的体质量和两只睾丸的质量,观察睾丸的组织病理学变化并依据Johnsen评分标准进行评分。结果(1)各个时间段隐睾组小鼠与假手术组体质量的比较无统计学意义(P0.05):(2)隐睾组小鼠两侧睾丸脏体比(脏器质量/体质量×1 000)的比较均有统计学意义,假手术组两侧睾丸脏体比的比较无统计学意义(P0.05);(3)隐睾的质量从第7天开始减少并以一种时间依赖方式递减,差异有统计学意义(P0.05)。与此同时,假手术组两侧睾丸质量改变不具有统计学意义(P0.05);(4)Johnsen评分从术后第3天开始,隐睾侧睾丸的评分均低于其对侧睾丸且呈递减趋势;(5)睾丸的组织病理学变化与睾丸的质量变化一致,第7天生精细胞开始凋亡并以一种时间依赖的方式凋亡。结论实验性隐睾小鼠模型表明隐睾在腹腔中以一种时间依赖方式在改变,存在一个时间段,可能是实施干预治疗最恰当的时机,有望更好的恢复睾丸的生精功能。     

Ν-硝基-L-精氨酸甲酯对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的保护作用

目的 :探讨一氧化氮合酶 (NOS)抑制剂N 硝基 L 精氨酸甲酯 (L NAME)对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的保护作用。　方法 :用 2 2dSD雄性大鼠复制单侧隐睾模型。实验分假手术组、隐睾组、隐睾 +L NAME组 [术后腹腔注射L NAME ,10mg/(kg·d) ],每组大鼠各 10只。术后 7d ,用生物素 dUTP/酶标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡 ,用硝酸还原酶法测定睾丸组织中N0含量 ,用化学比色法测定睾丸组织中NOS活性。　结果 :术后第 7d ,与假手术组睾丸相比 ,隐睾组睾丸发生凋亡的生殖细胞数显著增加 ,隐睾 +L NAME组睾丸发生凋亡的生殖细胞数比隐睾组显著减少 (P <0 .0 1) ,隐睾 +L NAME组睾丸组织中NO含量及NOS活性与隐睾组相比显著降低 (P<0 .0 1)。　结论 :隐睾组织中NO和NOS升高是隐睾生殖细胞凋亡增加的病理机制之一 ,L NAME通过抑制NOS活性、减少NO的产生来降低睾丸组织生殖细胞的凋亡发挥其保护作用。     

泛素碳端水解酶L1在邻苯二甲酸二丁酯诱导大鼠睾丸发育异常中的表达变化

目的:利用邻苯二甲酸二丁酯(DBP)诱导大鼠睾丸发育异常,验证泛素碳端水解酶L1(UCHL1)在异常睾丸与正常大鼠睾丸中的差异表达,以进一步探讨UCHL1在DBP导致的大鼠睾丸发育异常中的作用机制。方法:孕SD大鼠40只,妊娠14~18d,随机分为2组,实验组和对照组分别予DBP 800mg/(kg·d)、大豆油5ml/d灌胃,孕期第19d(GD19)和出生后22d(PND22),分别取胎鼠及仔鼠睾丸,定量定位分析UCHL1在胎鼠及仔鼠睾丸中的表达变化。结果:GD19,UCHL1在实验组的相对表达量为0.075±0.02(n=10),对照组为0.150±0.02(n=10),2组差异有显著性(P<0.05),UCHL1在实验组中比正常对照组下降50%;而PND22,UCHL1于实验组隐睾睾丸中的相对表达量为0.344±0.03(n=10),实验组非隐睾睾丸中为0.326±0.02(n=10),对照组为0.322±0.02(n=10),3组间无明显统计学差异(P>0.05)。UCHL1主要定位于睾丸发育时期的精原细胞,初级精母细胞和次级精母细胞的胞质与胞核中。结论:DBP在染毒期间影响了睾丸生精细胞UCHL1的表达,影响了泛素-蛋白酶体系的平衡,从而导致生精小管的变薄,各层生精细胞数目减少的睾丸发育异常现象。     

大鼠血清表皮生长因子和睾丸表皮生长因子受体与精子生成的相关性

目的　探讨血清表皮生长因子 ( EGF)和睾丸组织表皮生长因子受体 ( EGF-R)与大鼠精子生成的关系。　方法　 40只性成熟期雄性 SD大鼠 ,随机分为假手术组( SOG)、去颌下腺组 ( SG)、去颌下腺加腹腔注射 EGF I组 ( SG-EGF I)和 II组 ( SG-EGFII) ,每组 1 0只。SG-EGF I和 SG-EGF II分别腹腔内注射 EGF0 .2 5和 0 .50 μg·kg- 1·d- 1。大鼠常规喂养 48d,断头取血和睾丸。放射免疫法检测血清 EGF水平 ,病理检查睾丸生精功能和免疫组织化学检测睾丸组织 EGF-R的表达。　结果　大鼠血清 EGF水平SG-EGF I组明显下降 ( P<0 .0 5) ,SG组有非常显著下降 ( P<0 .0 1 ) ;睾丸生精功能中、重度障碍 ;间质细胞 EGF-R表达明显减少 ( P<0 .0 5)。补充不同剂量的 EGF对睾丸生精功能有不同影响。 SOG、SG-EGF I和 SG-EGF II大鼠睾丸生精细胞、支持细胞及间质细胞 EGF-R表达无显著性差异 ( P>0 .0 5)。　结论　EGF对精子发生具重要的调控作用 ,血清 EGF水平和睾丸间质细胞 EGF-R高表达与睾丸生精功能呈正相关     

黄芪注射液对镉诱导大鼠精子畸形的拮抗作用

目的 :观察黄芪注射液拮抗氯化镉诱导的大鼠精子畸形作用。　方法 :将 30只SD雄性大鼠随机分成 5组 :低浓度黄芪组 (A1)、高浓度黄芪组 (A2 )、环磷酰胺组 (CP)、氯化镉组 (Cd)和对照组 (C)。预先连续 7d分别给A1组和A2 组大鼠腹腔黄芪注射液 5g/ (kg·d)和 10g/ (kg·d) ,Cd组和CP组大鼠分别腹腔注射等量蒸馏水作对照 ,之后连续 2 1dA1组、A2 组和Cd组大鼠分别同时腹腔注射氯化镉溶液 [0 .2mg/ (kg·d) ]。CP组大鼠给予 5 0mg/ (kg·d)腹腔注射染镉后第 2 2d处死大鼠 ,观察睾丸脏器系数、精子头计数、每日精子生成量、附睾尾精子计数和畸形率以及睾丸和附睾病理学。　结果 :A2 组睾丸脏器系数、睾丸精子头计数、每日精子生成量和附睾精子计数 [(5 .6 8±1.19)、(4 9.0 1± 8.78)× 10 6/g、(10 .2 5± 2 .30 )× 10 6/ (g·d)、(4 7.5 1± 2 2 .5 1)× 10 6/ml]明显高于Cd组 [(3.11± 0 .16 )、(37.5 9± 10 .6 3)× 10 6/g、(5 .31± 0 .32 )× 10 6/ (g·d)、(10 .89± 2 .4 5 )× 10 6/ml](P <0 .0 5或P <0 .0 1) ;A2 组大鼠精子畸形率 [(7.0 4± 0 .12 ) % ]明显下降 ,与Cd组 [(17.81± 1.5 5 ) % ]相比 ,差异有极显著性 (P <0 .0 1)。　结论 :黄芪注射液可拮抗氯化镉对生殖系统的损害作用 ,对防护     

苯甲酸雌二醇诱导小鼠尿道下裂动物模型的建立

目的:建立苯甲酸雌二醇诱导的小鼠尿道下裂模型,为研究雌激素致尿道下裂的分子作用机制提供进一步研究的基础。方法:100只ICR孕小鼠随机分成A、B、C、D、E 5组,每组20只,在孕12~16 d连续5 d各组每只皮下分别注射苯甲酸雌二醇0、0.2、1、5、25 mg.kg-1.d-1,出生时观察仔鼠死亡率。每组取2只母鼠所生的雄性仔鼠,解剖观察仔鼠睾丸位置、前列腺发育情况。出生后4周,观察有无尿道下裂和隐睾。结果:A、B、C、D、E各组仔鼠死亡率分别为21.6%、21.5%、41.4%、56.6%、75.0%。新生鼠解剖,各组均未发现前列腺,C、D、E组睾丸均在下极,A、B组睾丸均在膀胱两侧。仔鼠尿道下裂发生率分别为0、0、3.3%(2/60)、20.0%(8/40)、23.0%(6/26),尿道下裂发生率D、E组与A组间差异有显著性(P<0.05),而D、E组间差异无显著性(P>0.05);隐睾发生率分别为0、0、6.6%(4/60)、30.0%(18/60)、61.5%(16/26),隐睾发生率A、C组间差异无显著性(P>0.05),D、E组与A组间差异有显著性(P<0.05),而D、E组之间差异无显著性(P>0.05)。结论:孕鼠注射大剂量的雌激素可以诱导出仔鼠尿道下裂的模型,C组诱导率较低,D、E组诱导率接近,但是E组母鼠及其仔鼠死亡率均较高,因此5 mg.kg-1.d-1苯甲酸雌二醇用药量为小鼠尿道下裂造模的适宜剂量。     

青春期前己烯雌酚暴露对大鼠性成熟后生精细胞凋亡的影响及其机制初探

目的:研究青春期前己烯雌酚(d iethylstilbestrol,DES)暴露对SD大鼠性成熟后睾丸生精细胞凋亡的影响并初步探讨其机制。方法:30只21日龄雄性SD大鼠,随机分为DES 0.01、0.1、1.0、10.0μg/(kg.d)4个实验组和1个对照组(编码为ADa、ADb、AD c、ADd和AC组,每组6只)。于青春期前[出生后第22 d(postnatal day 22,PND22)至35 d(PND35)],实验组每日皮下注射相应剂量的DES,对照组仅注射溶媒。于大鼠性成熟后(PND 64)处死各组大鼠切取双侧睾丸,采用TUNEL法检测大鼠睾丸生精细胞凋亡,用免疫组化方法检测凋亡相关蛋白Bc l-2和Bax在生精细胞中的表达。结果:与对照组相比,ADa组大鼠性成熟后生精细胞凋亡无明显变化,ADb、AD c和ADd 3组生精细胞凋亡增加,且随DES暴露剂量增加而有增加趋势。AC、ADa组生精细胞Bax相对弱表达而Bc l-2强表达,伴随DES暴露剂量增加,Bax表达逐渐增强而Bc l-2表达逐渐减弱,ADd组Bax强表达而Bc l-2弱表达。结论:青春期前较大剂量DES暴露可使大鼠性成熟后睾丸生精细胞凋亡增加,且随DES暴露剂量增加而有加强趋势。凋亡相关蛋白Bax和Bc l-2参与青春期前DES暴露所致的生精细胞凋亡过程。     

Testicular tumors in mice exposed in utero to diethylstilbestrol

Treatment of pregnant women with diethylstilbestrol (DES) is associated with the subsequent development of reproductive tract abnormalities such as epididymal cysts, retained hypotrophic testes and sperm abnormalities in their male offspring. It recently has been suggested that prenatal DES exposure is associated with development of testicular seminoma in humans. Studies of in utero exposure of laboratory animals to DES are few, but previous reports from our laboratory have described several abnormalities in the reproductive tract of the mouse following prenatal DES exposure. To study the possible association of testicular tumors and prenatal DES exposure in mice, pregnant outbred CD-1 mice were injected subcutaneously with daily doses of DES (100 micrograms./kg.) on days nine through 16 of gestation. DES-exposed and age-matched control male mice were sacrificed at 10 to 18 months of age and examined for testicular lesions. In addition to the nonmalignant abnormalities reported in previous studies such as 91% cryptorchidism and degenerative changes, interstitial cell tumors were observed in nine mice among 277 mice treated prenatally with DES. Two of these lesions were benign tumors and five were interstitial cell carcinomas. Rete testis adenocarcinoma was seen also in 5% of these DES-treated animals and is described in another report. The overall incidence of testicular tumors is 8% in DES-exposed male mice. No comparable lesions were seen in 122 control male mice. These results suggest that the testicular lesions that can occur following prenatal DES exposure include neoplasia. The combined prevalence of DES-induced tumors of the corpus testis and rete testis in mice suggests the male offspring may be more at risk for developing carcinoma of the reproductive tract than the female offspring.     

邻苯二甲酸二乙基己酯对新生小鼠睾丸及Leydig细胞影响的实验研究

目的:探讨邻苯二甲酸二乙基己酯(DEHP)对新生小鼠睾丸及Leyd ig细胞形态结构及功能的影响。方法:DEHP分别以低、中、高3组剂量[100、200、500 mg/(kg.d)]灌胃作用于怀孕12 d到产后3 d(GD12~PND3)的KM母鼠,观察DEHP对新生雄性仔鼠体重、睾丸重量、Leyd ig细胞形态结构和3β-羟基类固醇脱氢酶(3-βHSD)活性、酶反应面积的影响。结果:DEHP作用于母鼠后,其雄性子代幼鼠体重和睾丸重量减轻,睾丸Leyd ig细胞形态、超微结构发生改变;高剂量组Leyd ig细胞数量明显增多;低、中剂量组睾酮合成关键酶3β-HSD酶活性下降,酶反应面积减小,但高剂量组在仔鼠出生后15 d时酶活性降低[(吸光度值(0.154±0.011)vs空白对照组(0.222±0.013),P<0.01],而酶反应面积增大[(6 303.0±745.6)μm2vs空白对照组(5 091.4±214.4)μm2,P<0.01)]。结论:DEHP能影响新生雄性小鼠体重、睾丸重量、Leyd ig细胞的形态结构和3β-HSD活性,具有抗雄激素效应。     

青春期前邻苯二甲酸二丁酯持续暴露对大鼠睾丸发育的影响

目的:研究青春期前邻苯二甲酸二丁酯(DBP)持续暴露对睾丸发育的影响。方法:21日龄断乳青春期前雄性SD大鼠随机分为对照组(n=24)和实验组(n=54),每日分别用玉米油或DBP玉米油溶液灌胃,DBP暴露剂量分别为50mg/(kg.d)(低剂量组,n=18)、200mg/(kg.d)(中剂量组,n=18)和600mg/(kg.d)(高剂量组,n=18),各组动物持续暴露14、21、28d后(即PND35,PND42和PND49)断颈处死。记录大鼠体重变化,检测睾丸重量和体积、附属性器官重量及附睾精子,化学发光免疫分析法检测血清睾酮含量,苏木精-伊红染色观察睾丸组织形态学变化,测量生精小管平均直径及进行睾丸活检评分。结果:低剂量组PND35少量生精小管生精细胞排列紊乱,PND42和PND49睾丸、附属性器官发育及生精功能正常;中剂量组PND35和PND42生精细胞排列紊乱、数目减少,PND49生精小管内可见各级生精细胞及精子,睾丸未见萎缩,附属性器官发育正常;高剂量组大鼠体重增长减缓,血清睾酮水平低下,睾丸生精小管变性萎缩,生精上皮发育阻滞,生精细胞大量凋亡坏死,青春期大鼠睾丸萎缩,无精子,附睾、前列腺和精囊等附属性器官发育迟缓。结论:青春期前DBP持续暴露可损害睾丸组织发育和正常生精功能形成,其毒性效应具有剂量依赖性,高剂量DBP持续暴露引起的睾丸毒性在青春期前发育过程中不可修复,而低中剂量暴露引起的睾丸毒性在PND49之前可完全或部分逆转性恢复。     

出生后注射雌二醇诱导隐睾性不育小鼠模型的实验研究

目的:观察出生后注射雌二醇诱导小鼠隐睾模型的发生率及生精情况。方法:90只雄性新生Balb/C小鼠随机分为实验组(n=60)、溶剂对照组(n=20)和正常对照组(n=10)。实验组进一步随机分为4个亚组,分别于出生后3～28 d(4周组)、3～42 d(6周组)、3～56 d(8周组)、3～70 d(10周组)给予皮下注射17-β雌二醇(5μg/d)。观察停药后2周隐睾发生率及形态学变化。结果:实验组各亚组(4、6、8、10周组)停药后2周隐睾发生率分别为0%、26.7%、60%、60%。而对照组均无隐睾发生。在4周和6周组停药后均出现隐睾自行下降恢复生精的情况,连续注药8周后模型稳定,隐睾生精不恢复。结论:出生后连续注射雌二醇8周能够建立稳定的隐睾性不育小鼠模型。     

青春期前己烯雌酚暴露对SD大鼠睾丸发育及功能的影响

目的:研究青春期前己烯雌酚(DES)暴露对SD大鼠睾丸发育及功能的影响。方法:21日龄雄性SD大鼠90只,随机分为DES0.01、0.1、1.0、10.0μg/(kg.d)4个实验组和1个对照组(分别为Da、Db、Dc、Dd和C组,每组n=18)。于青春期前,即出生后第22d(postnatalday22,PND22)～35d(PND35),实验组每日皮下注射相应剂量的DES,共14d,对照组仅注射溶媒(玉米油)。观察各组大鼠睾丸下降时间。于青春期晚期(PND50)、性成熟后(PND64)和成年期(PND130)分3批(每批n=6)处死各组大鼠取材,测定睾丸重量,观察比较睾丸组织形态学变化,分析PND130大鼠附睾尾精子质量。结果:C、Da、Db、Dc和Dd组睾丸下降时间分别为PND26.17±1.94、26.83±1.47、28.68±1.03、33.50±1.87和41.50±2.74,其中Db、Dc和Dd组较C组明显延迟(P<0.05或P<0.01)。PND50时,C、Da、Db、Dc和Dd组单侧睾丸重量分别为(1.38±0.10)、(1.38±0.12)、(1.30±0.14)、(0.86±0.18)g和(0.73±0.27)g,其中Dc和Dd组较C组显著减轻(P<0.01);与C组比较,Db组仅有少数生精小管生精上皮中的细胞数目稍减少,Dc和Dd组生精小管发育较差、生精上皮中细胞数目减少、精子发生阻滞、间质细胞发育幼稚,其程度随DES暴露剂量增加而加重。PND64时,C、Da、Db、Dc和Dd组单侧睾丸重量分别为(1.60±0.06)、(1.62±0.11)、(1.58±0.08)、(1.47±0.10)g和(0.99±0.37)g,其中Dc和Dd组较C组显著减轻(P<0.05或P<0.01);Dc和Dd组睾丸组织形态学改变与PND50时类似,但总体较PND50有所改善。PND130时,各实验组与对照组比较,单侧睾丸重量差异无统计学意义(P>0.05),睾丸组织形态学改变难以鉴别出明显差异;C、Da、Db、Dc和Dd组大鼠附睾尾精子密度分别为(73.00±16.90)、(68.00±19.67)、(68.67±12.15)、(35.17±15.64)×106/ml和(19.13±5.17)×106/ml,其中Dc和Dd组精子密度较C组明显降低(P<0.01);与C组比较,Dd组精子活动率下降(P<0.01),Db、Dc和Dd组a级精子比例降低(P<0.05或P<0.01),Dd组b级精子比例降低(P<0.01)。结论:青春期前小剂量DES[0.01μg/(kg.d)×14d]暴露对SD大鼠睾丸发育及功能无明显影响,较大剂量DES[1.0～10.0μg/(kg.d)×14d]暴露对大鼠睾丸发育及功能有明显的近期(PND50和PND64)和较远期(PND130)毒性作用,该毒性作用随DES的暴露剂量增加而加重,随鼠龄增长而逐渐减退,其机制可能与间质细胞和支持细胞的发育及功能受损相关。     

大豆异黄酮对不同时期子代雄性大鼠生殖性状及ER-β受体表达的影响

目的:研究大豆异黄酮孕期和出生后暴露对子代雄性大鼠生殖系统发育相关指标以及ER-β受体表达的影响。方法:SD大鼠随机分为对照组(玉米油)、大豆异黄酮50、200、400 mg/kg体重和已烯雌酚(DES)0.1 mg/kg体重组,母鼠从妊娠0 d开始灌胃各组药品,子鼠21 d断奶后开始灌胃直至处死。子代雄性大鼠每组随机取6只分别在49 d、90 d处死,观察生殖系统发育相关指标并检测睾丸组织ER-β受体表达情况。结果:①对于不同年龄段子代雄鼠,大豆异黄酮各剂量组以及DES组每日平均摄食量均无显著性差异,但49～90日龄子鼠大豆异黄酮200 mg/kg体重、400 mg/kg体重组以及0.1 mg/kg体重DES组的食物利用率显著下降。②大豆异黄酮剂量为50 mg/kg体重以上时,不同年龄段的子鼠体重均显著下降(P<0.05)且90日龄子代雄鼠体重变化大于49日龄子代雄鼠。③随着大豆异黄酮剂量的增加,睾丸重量、睾丸精子头计数和每日精子生成量呈显著下降趋势且90日龄子鼠以上指标的变化比49日龄子代雄鼠变化更加明显。④随着大豆异黄酮剂量的增加,不同年龄段子代雄鼠各剂量组ER-β受体表达与对照组比较均呈上升趋势且90日龄子代雄鼠上升趋势大于49日龄子代雄鼠。结论:大豆异黄酮孕期和出生后暴露可干扰子鼠雄性生殖系统的发育,ER-β受体表达变化可能是其机制之一。     

Effects of prenatal flutamide on testicular development, androgen production and fertility in rats

INTRODUCTION: To investigate the effects of blocking prenatal androgen with the anti-androgen flutamide on testicular weight (TW), seminiferous tubular diameter (STD), testicular biopsy score (TBS), testicular testosterone (TT), and fertility. MATERIALS AND METHODS: Ten pregnant Wistar albino rats were injected with flutamide (100 mg/kg) on gestational days 16 and 19. Rats injected with the solvent were used as controls. Male pups from these dams were evaluated for testicular descent on postnatal day 22. The ability of each male to produce offspring was tested when the animals were aged 130 days. The rats were killed when 180 days old, and the testes were removed. RESULTS: Sixteen of the 24 male rats (66.6%) exhibited cryptorchidism (6 unilateral, 10 bilateral) in the flutamide-treated group. Three of the rats with normally descended testicles were fertile, but none of the cryptorchid rats was fertile in flutamide-treated group. The average TW, mean STD, TBS and TT levels of the flutamide-treated rats was significantly lower than in the solvent-injected rats. However, there was no significant difference in these values between descended and undescended testes in flutamide-treated rats. CONCLUSION: Blocking of prenatal androgen with flutamide interferes with testicular development by inhibiting testicular descent, and also effects testicular morphology and function in both the descended and undescended testes of rats.