痹痛灵颗粒对胶原诱导性关节炎大鼠血清及滑膜组织匀浆中IL-2的影响

目的:探索痹痛灵颗粒对胶原蛋白诱导性关节炎大鼠的治疗机理.方法:以牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂对大鼠进行胶原蛋白诱导性关节炎造模,测定大鼠血清及组织匀浆中IL-2的含量.结果:痹痛灵颗粒具有良好的抑制胶原蛋白诱导性关节炎大鼠血清及组织中IL-2含量的作用,且高剂量组最为明显.结论:痹痛灵、颗粒对类风湿关节炎有较好的抑制作用...     

雷公藤多苷片对胶原诱导性关节炎大鼠血清HMGB1和IL-17的影响

目的:观察雷公藤多苷片对胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠血清中高迁移率族蛋白B1(high mobility group box chromosomal protein 1,HMGB1)及白介素17(interleukin 17,IL-17)含量的影响.方法:40只SD大鼠被随机分为正常对照组、模型对照组、甲氨喋呤对照组(3 mg·kg-1)、雷公藤多苷片低、高剂量组(5,10 mg·kg-1).用牛Ⅱ型胶原蛋白加不完全氟氏佐剂诱导大鼠关节炎模型,于免疫12d开始灌胃给药,连续4周.CIA大鼠模型建立后,观察各组大鼠关节指数变化,并采用ELISA法检测各组大鼠血清中HMGB1和IL-17的含量.结果:与正常组比较,模型组大鼠关节肿胀明显,血清中HMGB1和IL-17含量明显升高(P＜0.01或P＜0.05);与模型组比较,各治疗组大鼠关节肿胀程度均有一定程度缓解,甲氨喋呤组和雷公藤多苷片高剂量组大鼠血清中HMGB1和IL-17的含量显著低于模型组(P＜0.01或P＜0.05).结论:雷公藤多苷片治疗CIA大鼠关节肿胀可能与降低血清中HMGB1,IL-17的含量相关.     

痹痛灵颗粒对胶原诱导类风湿性关节炎大鼠关节滑膜组织中VEGF mRNA表达的影响

目的：观察痹痛灵颗粒对胶原诱导类风湿性关节炎大鼠治疗作用及对关节滑膜组织血管内皮细胞生长因子（VEGF）mRNA表达的影响。方法：建立Ⅱ型胶原诱导大鼠类风湿性关节炎模型,通过测量其足踝体积和关节肿胀评分,并以实时荧光PCR法检测关节滑膜组织VEGFmRNA表达量,评价痹痛灵颗粒的治疗作用。结果：痹痛灵颗粒可明显降低造模大鼠关节肿胀度和关节评分,抑制关节滑膜组织VEGFmRNA过量表达。结论：痹痛灵颗粒对胶原诱导大鼠类风湿性关节炎有一定的治疗作用,其作用机理可能是抑制关节滑膜VEGFmRNA过量表达。     

痹痛灵颗粒对胶原诱导关节炎滑膜白介素-17mRNA表达的影响

目的：观察中药复方痹痛灵颗粒对胶原诱导类风湿性关节炎大鼠关节滑膜组织微血管密度及白介素-17（IL-17）mR-NA表达的影响。方法：建立胶原诱导大鼠类风湿性关节炎模型,通过免疫组化测量微血管密度,实时荧光PCR法检测量关节滑膜组织IL-17mRNA表达量,评价痹痛灵颗粒治疗类风湿关节炎抗血管新生的作用机理。结果：痹痛灵颗粒可降低造模大鼠关节滑膜组织微血管密度,下调关节滑膜组织IL-17mRNA过量表达。结论：痹痛灵颗粒对胶原诱导大鼠类风湿性关节炎血管新生有一定的治疗作用,其作用机理与下调关节滑膜IL一17mRNA高表达可能有关。     

痹痛灵颗粒对胶原诱导类风湿性关节炎大鼠原代滑膜细胞的影响

[目的]观察痹痛灵颗粒对胶原诱导类风湿性关节炎(CIA)大鼠关节原代滑膜细胞的影响。[方法]通过测量Ⅱ型胶原诱导大鼠类风湿性关节炎模型的足踝体积和关节肿胀评分,并对CIA大鼠原代滑膜细胞增殖能力的检测及滑膜细胞培养上清液IL-1β、TNF-α含量的测定,观察痹痛灵颗粒对滑膜细胞及滑膜细胞培养上清液IL-1β、TNF-α含量的影响。[结果]痹痛灵颗粒高、中剂量组大鼠滑膜细胞增殖小于模型组,与模型组相比有显著性差异;痹痛灵颗粒高、中、低剂量组与雷公藤多苷片组的细胞培养液中IL-1β、TNF-α水平明显低于模型组,有显著差异。[结论]痹痛灵颗粒通过抑制CIA大鼠滑膜细胞病理性增生,降低滑膜细胞培养液中IL-1β、TNF-α水平,对胶原诱导大鼠类风湿性关节炎产生一定的治疗作用。     

胶原诱导性关节炎大鼠滑膜基因表达谱特征研究

目的:运用基因芯片技术研究胶原诱导性关节炎(collagen-inducing arthritis,CIA)大鼠滑膜基因表达谱特征,探讨CIA相关致病基因。方法:选用健康雄性Wistar大鼠40只,随机分为造模组、正常对照组(n=8,简称正常组),造模组采用牛Ⅱ型胶原乳剂于大鼠尾根部注射,建立CIA模型。在造模成功大鼠中随机选取8只作为模型组(n=8)。于造模成功后30天,提取各大鼠滑膜总RNA,运用Illumina基因表达谱芯片分析每个样本基因变化。结果:正常组与模型组大鼠滑膜差异表达基因有271条,其中上调基因131条,下调基因140条。差异表达基因主要涉及细胞凋亡、基质金属蛋白酶、癌基因、热休克蛋白、骨桥蛋白、细胞周期、代谢、信号传导通路、趋化因子、黏附分子等。结论:CIA是一涉及多基因表达异常的自身免疫性疾病,筛选到的差异基因如上调表达基因Map3k11、Mmp8、OPN5、Rgs5、Hsph1、Ccl20、Robo4、Hyal4及下调表达基因Cabp1等,有利于阐释RA分子机制,提供RA防治新靶点。     

清痹片对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织病理学改变的影响

目的:观察清痹片对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠滑膜组织病理形态学的影响。方法:光镜下对CIA大鼠滑膜炎性细胞浸润、滑膜细胞进行评分,观察其组织形态学的改变。结果:CIA模型组大鼠关节滑膜炎细胞浸润明显;而清痹片各给药组及尼美舒利组其病理改变较模型组明显减轻(P<0.05)。模型组大鼠组织形态学改变明显:关节滑膜高度增生,呈乳头状突起,细胞排列不规则,可见大量的炎性细胞浸润等;而各给药组组织形态学改变显著减轻。结论:清痹片能有效减轻CIA大鼠滑膜组织的病理形态学改变,对RA滑膜增生及关节破坏有一定的抑制作用。     

痹痛灵颗粒对类风湿性关节炎大鼠的影响

目的:观察痹痛灵颗粒对实验性风湿性关节炎大鼠的治疗作用.方法:以完全弗氏佐剂(Freund's complete adjuvant,FCA)造成实验性风湿性关节炎大鼠模型,采用容积法测定大鼠左、右后肢足容积,采用曲线下侣面积观察痹痛灵颗粒对大鼠足跖肿胀度的影响,评价痹痛灵的治疗效果.结果:痹痛灵颗粒具有良好的抑制实验性关节炎大足跖肿胀的作用.结论:痹痛灵颗粒对类风湿性关节炎有良好的治疗作用.     

姜黄对胶原诱导性关节炎大鼠抗炎作用的研究

目的研究姜黄对胶原诱导性关节炎大鼠的作用,并初步探讨其作用机制。方法随机将40只大鼠分为正常对照组、胶原诱导性关节炎模型组(CIA模型组)、阳性对照组及姜黄组(Curcuma-CIA组)。除正常对照组外,余各组采用足趾部皮内注射胶原乳液免疫建立CIA模型。造模3周后开始分组给药,Curcuma-CIA组以姜黄100%水煎液灌胃,阳性对照组给予地塞米松水溶液,正常对照组、CIA模型组等量生理盐水灌胃。观察各组大鼠一般情况、关节肿胀程度、滑膜组织病理特征,EIA法检测血清前列腺素E2(PGE2)表达水平等指标。结果造模后,模型大鼠的踝关节肿胀明显,与正常对照组比较,有显著性差异(P0.01);给药2周后,Curcuma-CIA组与CIA模型组比较踝关节肿胀程度减轻,有统计学意义(P0.05);HE病理切片显示,Curcuma-CIA组较CIA模型组大鼠滑膜组织充血明显减轻,炎性细胞浸润减少。PGE2检测结果显示姜黄能减少造模大鼠血清中PGE2的含量。结论成功建立胶原诱导性关节炎大鼠模型;姜黄对CIA模型大鼠滑膜组织炎症有抑制作用,能够减轻肿胀,减少滑膜组织炎性细胞浸润,其作用机制可能与抑制炎症介质PGE2的表达有关。     

九分散对胶原诱导性关节炎模型大鼠关节病变的影响

目的：探讨九分散对胶原诱导性关节炎（CIA）模型大鼠关节病变的影响。方法：建立大鼠CIA模型,分为正常对照组、CIA模型组、九分散低剂量组、九分散高剂量组、地塞米松组,并给予相应处理。观察大鼠的关节炎指数和足爪肿胀度,于连续给药35d后将大鼠四肢关节拍摄x线片,然后处死大鼠,取踝关节制作切片,行HE染色并进行病理学观察。结果：与模型对照组比较,九分散高、低剂量组和地塞米松组大鼠关节炎症指数、病理评分及关节x线评分均明显降低（P〈0．01）。结论：九分散能明显缓解CIA大鼠症状,控制炎症,减轻关节的病理改变及骨质破坏。     

痹痛灵颗粒对佐剂性关节炎大鼠疗效实验研究

目的观察痹痛灵颗粒对佐剂性关节炎大鼠疗效的影响.方法采用弗氏完全佐剂造模,观察该药对模型鼠关节肿胀度、胸腺、脾重等指标的影响.结果本方能减轻模型鼠关节肿胀度、胸腺、脾重,抑制模型鼠体重减轻.结论痹痛灵颗粒具有抗炎及免疫抑制作用,可能是其对类风湿关节炎有较好治疗作用的机理之一.     

丹皮酚对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护中HMGB1表达的影响

目的:探讨丹皮酚(paeonol,Pae)对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护中HMGB1表达的影响。方法:清洁SD大鼠40只随机分为4组(n=10):假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、丹皮酚低剂量组(PaeLD组)及丹皮酚高剂量组(PaeHD组)。建立大鼠心肌缺血再灌注模型。TTC染色法检测大鼠梗死心肌体积,Tunnel法检测心肌缺血坏死区细胞凋亡;免疫印迹检测缺血坏死组织HMGB1的表达。结果:PaeLD及PaeHD组与I/R组相比,心肌梗死体积减小,凋亡细胞减少;心肌组织HMGB1水平明显减少。其中PaeHD组更明显。结论:丹皮酚能够减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制可能与减轻大鼠HMGB1表达有关。     

通痹灵对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞MCP-1 mRNA表达的影响

目的:探讨中药复方制剂通痹灵(以桂枝芍药知母汤为基础)对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞单核细胞趋化蛋白 1(MCP-1)mRNA表达的影响。方法:采用半定量RT-PCR法测定佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞MCP-1 mRNA表达水平。结果:通痹灵明显抑制了佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞MCP-1 mRNA的表达,提示通痹灵治疗类风湿性关节炎的分子机制与抑制MCP-1基因表达有关。     

丹皮酚对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护中HMGBl表达的影响

目的：探讨丹皮酚（paeonol,Pae）对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护中HMGBl表达的影响。方法：清洁sD大鼠40只随机分为4组（／2=10）：假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（I／R组）、丹皮酚低剂量组（PaeLD组）及丹皮酚高剂量组（PaeHD组）。建立大鼠心肌缺血再灌注模型。TTC染色法检测大鼠梗死心肌体积,Tunnel法检测心肌缺血坏死区细胞凋亡;免疫印迹检测缺血坏死组织HMGBl的表达。结果：PaeLD及PaeHD组与lfR组相比,心肌梗死体积减小,凋亡细胞减少;心肌组织HMGBl水平明显减少。其中PaeHD组更明显。结论：丹皮酚能够减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制可能与减轻大鼠HMGBl表达有关。     

新痹痛灵抗炎作用及其机制

目的:研究新痹痛灵(New Bitongling,NBTL)的抗炎作用,揭示其抗炎作用及机制。方法:体内实验取30只SD雄性大鼠,随机分成模型组、阳性药布洛芬缓释胶囊组(0.054 g·kg-1)以及新痹痛灵高剂量组(11 g·kg-1,简称NBTLH)、低剂量组(2.75 g·kg-1,简称NBTLL);连续ig给药5 d,1次/d;末次给药1 h后,复制组胺致大鼠毛细血管通透性增加模型、采用尾静脉注射伊文斯蓝后提取皮肤中染料、测定提取液590 nm的吸光度反映毛细血管通透性;复制角叉菜胶致大鼠足跖肿胀模型、采用容积测量法观察各组大鼠足跖肿胀度;体外实验以脂多糖(LPS)诱导的RAW 264.7细胞分泌炎性因子复制炎症模型,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定各组细胞上清液中前列腺素E2(PGE2)含量。结果:与模型组比较,布洛芬缓释胶囊组,NBTLH,NBTLL组伊文斯蓝含量明显降低(P0.01);表明均能抑制大鼠毛细血管通透性增加;与模型组相比,在相同时间点,NBTLH组大鼠足跖肿胀度均降低(各时间点P0.05),NBTLL在各个时间点都有抑制趋势,但无显著性差异;与正常组比较,模型组的PGE2表达水平升高(P0.05);与模型组比较,NBTLH,NBTLL组PGE2表达水平显著降低(P0.05,P0.01)。结论:NBTL对炎症有明显抑制作用,其抗炎作用可能与抑制炎症组织PGE2的合成或分泌有关。     

金藤清痹颗粒对胶原诱导性类风湿关节炎大鼠滑膜血管新生的影响

目的：观察金藤清痹颗粒对胶原诱导性类风湿关节炎（CIA）大鼠滑膜血管新生的治疗作用并探讨其作用机制。方法：取60只SD大鼠随机分为空白组,模型组,甲氨蝶呤组,金藤清痹颗粒低、中、高剂量组等6组。以免疫诱导方法建立CIA大鼠模型,每天灌胃1次,空白组和模型组予以等量生理盐水灌胃,共28 d。采用小动物超声影像系统检测各组大鼠右下肢膝关节滑膜增生程度评分与增生面积;酶联免疫吸附试验检测各组大鼠血清中白细胞介素-6（IL-6）、IL-17、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平;苏木精-伊红染色法观察大鼠关节滑膜病理改变;免疫组织化学法检测大鼠关节滑膜组织血小板-内皮细胞黏附分子31（CD31）与血管内皮细胞生长因子受体2（VEGFR2）表达水平。结果：与空白组比较,模型组CIA大鼠右膝关节滑膜区域面积和滑膜增生评分显著增加（P<0.01）;大鼠关节滑膜组织也出现显著病理性改变;血清炎症介质水平升高,同时CD31、VEGFR2表达也显著升高（P<0.01）。与模型组比较,金藤清痹颗粒各剂量组均能明显减小CIA大鼠滑膜增生面积（P<0.01）,金藤清痹颗粒高剂量组大鼠超声滑膜评分显著降低（P<0.01）;金藤清痹颗粒中、高剂量可明显改善大鼠关节滑膜组织病理变化,显著降低IL-6、IL-17、TNF-α水平（P<0.01）,关节滑膜组织CD31、VEGFR2表达也出现一定程度下降（P<0.01）。结论：金藤清痹颗粒能够通过改善CIA大鼠关节滑膜血管新生抑制类风湿关节炎病理进展,达到减轻关节损伤的作用,其机制可能与抑制炎症介质分泌,降低CD31、VEGFR2表达有关。     

防己黄芪汤对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎及血管新生的影响

目的:观察防己黄芪汤对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎(CIA)及血管新生的影响.方法:将DBA/1小鼠按体质量随机分为正常组,CIA组及防己黄芪汤组(5.4 g·kg-1).CIA组及防己黄芪汤组第1天以牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂免疫DBA/1小鼠,于第21天以牛Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂免疫DBA/1小鼠建立CIA模型,...     

胡蜂毒提取物对胶原诱导性类风湿性关节炎大鼠的作用研究

目的建立胶原诱导性类风湿关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠模型来探讨胡蜂毒提取物对大鼠类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的治疗作用。方法将SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组(注射用蜂毒冻干粉,1.25 mg·kg^-1)和胡蜂毒提取物低、中、高剂量(0.125、0.25、0.5 mg·kg^-1)组,除正常组外,其余各组采用多点注射鸡Ⅱ型胶原加完全弗氏佐剂的方法来诱导大鼠RA模型,每7 d一次,共14 d。造模结束后,各给药组于足趾皮下注射对应剂量的药物,连续给药14 d。分别于造模前、造模第14天和给药第14天测量大鼠踝关节直径和周长,并进行AI评分;观察大鼠脏器指数和踝关节组织HE染色的变化;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清中相关炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-8、前列腺素(PG)E-2、环氧化酶(COX)-2和类风湿因子免疫球蛋白(Ig)G、Ig A、Ig M的含量变化;利用流式细胞术检测大鼠脾脏T细胞亚群的变化。结果与模型组比较,胡蜂毒提取物对CIΑ大鼠的关节肿胀(直径及周长)抑制效果显著(P<0.01),能明显降低其AI评分(P<0.01或P<0.05),能不同程度恢复大鼠的脏器指数(P<0.01或P<0.05),改善踝关节组织病理学结构病变,降低大鼠血清中各炎症因子和类风湿因子的表达(P<0.01或P<0.05),调节和改善T细胞亚群比例的紊乱(P<0.01或P<0.05)。结论胡蜂毒提取物对CIA大鼠具有较好的治疗作用,这与其对炎症细胞因子网络的调控和对免疫的调节有关系。     

实验性脾虚痹证的黏膜免疫学机制研究

目的：从黏膜免疫及炎症相关细胞因子的角度探讨脾虚痹证的发病机理。方法：选用Ⅱ型胶原诱导的小鼠关节炎(CIA)作为痹证模型；复合大黄泻下加饥饱失常造成实验动物脾虚；以酶联免疫吸附法测定小鼠血清中肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6、干扰素-7、白细胞介素-10等细胞因子含量，以免疫组织化学方法测定小肠组织中CD4、CD8、分泌型IgA含量，并对肠道集合淋巴结(PEYER’S PATCH，PP结)计数。结果：脾虚组、脾虚痹证组肠道PP结数量明显减少，CIA组变化不明显。CIA组及脾虚痹证组血清中TNF-α、IL-6含量显著升高，CIA组及脾虚痹证组血清中IFN-γ含量显著升高；与空白对照组比较，CIA组、脾虚痹证组CD4、CD8阳性细胞均明显减少，而以脾虚痹证组CD8阳性细胞减少更为明显；正常组、CIA组SIgA阳性细胞较多，脾虚组、辟虚痹证组则明显减少。结论：脾虚时可能是通过下调机体黏膜免疫功能，相对上调全身免疫应答而加重CIA发病。