IL-1β对人肺成纤维细胞增殖及MMP-2表达的影响

目的:建立人肺成纤维(HFL)细胞三维立体培养模型,探讨IL-1β对HFL细胞MMP-2表达及细胞增殖的影响。方法:采用HFL细胞建立三维立体培养模型,随即分成对照组与实验组,对照组用不含IL-1β的DMEM培养,实验组分别加入含不同浓度的IL-1β(10,20 ng/m l)的DMEM培养液,用倒置显微镜观察细胞的形态,培养24、72h后收集培养上清液,应用明胶酶谱法测各组MMP-2的表达情况;利用MMT比色实验观察IL-1β对HFL细胞增殖的影响。结果:观察三维胶原立体培养中细胞生长情况,HFL细胞均悬浮生长于胶原中,细胞在胶原内几乎不分裂,呈单细胞生长。各实验组的HFL细胞在不同浓度的IL-1β作用下,细胞表达的MMP-2有差异(P<0.05),且随着IL-1β浓度的增大,表达MMP-2的量增加。IL-1β可促进HFL细胞的增殖(P<0.05),且具有浓度及时间依赖性,随着IL-1β的浓度升高,其对HFL细胞促增殖的作用越明显。结论:IL-1β可能参与调节肺成纤维细胞合成和分泌MMP-2及细胞的增殖,从而促进肺癌的侵袭和转移。     

肿瘤和间质细胞相互作用对肺癌MMP-2和MMP-9表达的影响

 目的 研究三维立体培养中肺癌H460细胞、胚肺成纤维细胞和单核细胞相互作用对MMP-2、MMP-9 表达的影响。 方法 活性胶原三维立体培养分为：H460细胞和胚肺成纤维细胞共同培养组;H460细胞和单核细胞共同培养组;胚肺成纤维细胞和单核细胞共同培养组;H460细胞、胚肺成纤维细胞和单核细胞共同培养组4组。明胶酶谱法测定各组培养基中MMP-2、MMP-9活性。 结果 H460细胞和胚肺成纤维细胞、胚肺成纤维细胞和单核细胞共同培养时MMP-2酶原和活化酶活性和表达均增强,H460细胞和单核细胞共同培养时MMP-2酶原和MMP-9活性和表达增强,H460细胞、胚肺成纤维细胞和单核细胞共同培养MMP-2活化酶和MMP-9活性和表达明显增强。 结论 肺癌H460细胞、胚肺成纤维细胞和单核细胞相互作用能通过上调MMP-2、MMP-9的表达促进肺癌的侵袭和转移。     

肺癌A549细胞和成纤维细胞相互作用对细胞增殖及MMP-2表达的影响

进细胞增殖及MMP-2的表达和活化.     

MMP-9、MMP-2在非霍奇金淋巴瘤病理组织中的表达及意义

目的探讨非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgk in's lymphom a,NHL)患者病理组织中MMP-9、MMP-2蛋白的表达及其相互关系,分析其临床及预后的意义。方法采用免疫组织化学S-P法,检测了51例NHL、17例良性增生性淋巴结炎中MMP-2、MMP-9的蛋白表达。结果MMP-9、MMP-2蛋白在NHL和良性增生性淋巴结炎中均表达于胞浆,少见于胞核。MMP-9、MMP-2在NHL中的高表达阳性率分别为84.3%和64.7%,均高于良性增生性淋巴结炎的52.9%和54.3%(P<0.05)。Ⅲ、Ⅳ期NHL患者的MMP-9、MMP-2蛋白的高表达阳性率明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者(P<0.05);而MMP-9、MMP-2蛋白的表达与恶性程度、LDH水平、结外病变均无关(P>0.05)。NHL病理组织中MMP-9与MMP-2蛋白的表达呈正相关(rs=0.348,P<0.05)。结论MMP-9、MMP-2蛋白在NHL病理组织中均呈高表达,均与Ann Arbor临床分期有关,可能是预测NHL侵袭转移和预后的相关因素。     

ELL2在人成骨肉瘤中的表达及对MG-63细胞增殖的影响

目的:研究ELL2在人成骨肉瘤中的表达情况以及其对人成骨肉瘤细胞增殖的影响.方法:运用RT-PCR检测ELL2在人成骨肉瘤组织及其正常毗邻组织中的表达,RT-PCR及Western-blot检测ELL2在人成骨肉瘤细胞系及人正常成骨细胞系中的表达.构建ELL2过表达载体,MTT和细胞计数试验检测过表达ELL2对人成骨肉瘤细胞系MG-63增殖的影响.结果:ELL2在人成骨肉瘤组织中的表达显著低于其正常毗邻组织(P=0.001).ELL2在人成骨肉瘤细胞系中的表达相比于人正常成骨细胞系明显下调(P<0.05).过表达ELL2能够显著抑制MG-63细胞的增殖(P<0.05).结论:ELL2在人成骨肉瘤中表达下调,其过表达能够抑制肿瘤细胞的增殖.     

七氟烷对乳腺癌BT549细胞侵袭、迁移及MMP-2、MMP-9表达的影响

目的:探讨七氟烷对乳腺癌BT549细胞侵袭、迁移及基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达的影响。方法:乳腺癌BT549细胞用七氟烷处理后,细胞划痕实验检测细胞迁移,Transwell小室检测细胞侵袭,Western blot检测MMP-2、MMP-9蛋白表达。结果:七氟烷处理后的BT549细胞迁移率由（36.45±3.21）%降低至（14.68±1.52）%,侵袭细胞数目由（136.58±13.36）个减少到（79.95±14.25）个,MMP-2水平由0.48±0.04减少为0.14±0.03,MMP-9水平由0.96±0.07减少为0.22±0.05,两组比较差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论:七氟烷能够抑制乳腺癌BT549细胞迁移和侵袭,降低细胞中MMP-2、MMP-9表达水平。     

粉防己碱通过NF-κB通路抑制肿瘤相关成纤维细胞分泌IL-8阻断肺腺癌细胞的侵袭转移

摘 要：［目的］ 研究粉防己碱（tetrandrine,Tet）通过调控肿瘤相关成纤维细胞（CAF）旁分泌因子的表达抑制肺腺癌细胞侵袭转移的作用效应,探讨NF-κB通路在Tet抑制CAF分泌IL-8促进肺腺癌细胞侵袭转移中的重要作用。［方法］ 采用条件培养基（CM）刺激胚肺成纤维细胞MRC5建立CAF模型,Western blot实验分析Tet作用前后NF-κB通路蛋白IKK、IκB和p65表达和磷酸化水平,ELISA实验检测Tet作用前后CAF分泌IL-8情况,以及Tet对CAF诱导肺腺癌细胞H1975侵袭转移的影响。抗体封闭培养基中游离的IL-8,分析CAF诱导H1975细胞侵袭转移能力的变化,验证IL-8是否Tet调控CAF旁分泌因子的表达抑制H1975细胞侵袭转移的关键因子。［结果］ Tet作用24h,CAF中NF-κB通路蛋白IKK、IκB和p65蛋白的磷酸化水平显著性下降;Tet组培养基上清液中IL-8含量为（151.7±24.8）pg/ml,显著性低于模型组的（384.7±39.5）pg/ml（P<0.001）;模型组诱导H1975细胞迁移的数量为141.7±21.5,Tet组为41.3±11.9（P<0.01）;模型组诱导H1975细胞侵袭的数量为129.7±25.1,Tet组为56.7±14.5（P<0.05）。模型组诱导H1975细胞迁移的数量为152.3±25.5,IL-8封闭（aIL-8）组为61.7±15.5（P<0.01）;模型组诱导H1975细胞侵袭的数量为136.3±14.5,aIL-8组为73.3±12.7（P<0.01）。［结论］ Tet具有抑制CAF诱导肺腺癌细胞侵袭转移的作用效应,其机制与抑制NF-κB通路的活性和CAF分泌IL-8有关。     

肝细胞肝癌组织中Bcl-2核表达及MMP-2和MMP-9表达与术后复发转移及预后的关系

  目的  探讨抗凋亡蛋白Bcl-2、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9在肝细胞肝癌中表达的关联性, 及其与复发、转移和预后的关系。  方法  以石蜡包埋组织切片, 免疫组织化学SP法染色检测97例肝细胞肝癌, 分别在复发与转移组49例和非复发与转移组48例中分析Bc1-2核表达和MMP-2、MMP-9表达的情况。  结果  复发与转移组Bcl-2核表达高于无复发与转移组(x2=7.912, P=0.005), 复发转移组MMP-9表达高于无复发转移组(x2=6.545, P=0.011), Bcl-2核表达阳性细胞率与MMP-9阳性细胞率存在相关性, 而与MMP-2无关Bcl-2核表达组患者生存时间较短, 差异具有统计学意义。  结论  Bcl-2核表达阳性患者更易出现复发与转移, 且与MMP-9过度表达存在关联性, 表明Bcl-2入核可能对肿瘤转移的相关生物学功能具有调节作用, 可作为评价HCC复发与转移、不良生存预后的候选临床标志。      

RNA 干扰MMP-9 表达对人纤维肉瘤细胞系HT1080侵袭转移的影响

目的：探讨MMP-9 高表达对人纤维肉瘤细胞HT1080侵袭和转移能力的影响,及对相关机制进行初步研究。方法：将能与MMP-9 结合的双链RNA转染到HT1080细胞中。结果：人纤维肉瘤细胞HT1080细胞系中的MMP-9 表达减少,可导致细胞迁移抑制、增加细胞粘附和减少肿瘤细胞迁移。此外,MMP-9 敲除后会造成可溶性细胞间粘附分子-1（ICAM- 1）的水平下降,从而导致粘附缺陷与肿瘤转移。结论：MMP-9 在人纤维肉瘤细胞HT1080中具有关键作用,通过改变ICAM- 1 从膜结合形式变为可溶性形式,结果证实MMP-9 将成为一个极具吸引力的肿瘤治疗的靶标。     

单核细胞与肺癌 H460 细胞及肺成纤维细胞三维立体混合培养 IL -1β 与TNF - α 的表达

目的：探讨外周血单核细胞和肺癌H460细胞及肺成纤维细胞相互作用对产生IL-1B与TNF—a的影响。方法：三维胶原立体培养条件下,分为单核细胞、H460细胞、肺成纤维细胞单独培养组,单核细胞和H460细胞共同培养组,单核细胞和肺成纤维细胞共同培养组,H460细胞和肺成纤维细胞共同培养组,单核细胞、H460细胞和肺成纤维细胞共同培养组。培养24、72、96h,收集上清液,用酶联免疫法检测不同时间点各组IL-1B与TNF—a的含量。结果：各组细胞在三维立体胶原培养条件下生长良好,单独培养时,仅单核细胞组分泌少量IL-1B和TNF-a,而H460细胞组、肺成纤维细胞组没有检测到IL-1B和TNF-a。单核细胞和H460细胞共同培养组分泌IL-1B与TNF—a量增高,单核细胞和肺成纤维细胞共同培养组分泌IL-1B与TNF—a．量也有轻微增高,而H460细胞和肺成纤维细胞共同培养组仅检测到少量IL-1B与TNF-仅的表达,单核细胞、H460细胞和肺成纤维细胞共同培养组分泌IL-1B与TNF-0l量明显高于其它组。结论：单核细胞和肺癌H460细胞及肺成纤维细胞相互作用可以促进IL-1B与TNF-a的表达。     

人成纤维细胞生长因子类似表达基因和成纤维细胞生长因子2在上皮性卵巢肿瘤组织中的表达

目的 探讨人成纤维细胞生长因子类似表达基因(hSef)和成纤维细胞生长因子2(FGF-2)在上皮性卵巢肿瘤组织中的表达及二者的关系.方法 采用免疫组化SP法检测31例卵巢恶性上皮性肿瘤(卵巢癌组)、18例卵巢良性上皮性肿瘤(良性组)和10例正常卵巢组织(正常组)中hSef和FGF-2蛋白的表达.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测卵巢癌组、良性组和正常组各24例组织中hSef和FGF-2 mRNA的表达水平.结果 与良性组、正常组相比,卵巢癌组hSef蛋白呈低表达(P＜0.001),而FGF-2蛋白呈高表达(P=0.002).hSef蛋白与FGF-2蛋白的表达呈负相关(rs=-0.324,P=0.012).hSefmRNA在正常组、良性组、卵巢癌组的表达呈下降趋势,而FGF-2mRNA表达呈增高趋势(P ＜0.001).hSef mRNA和FGF-2 mRNA的表达呈负相关(正常组rs=-0.910,P＜0.001;良性组rs=-0.859,P＜0.001;卵巢癌组rs=-0.888,P＜0.001).结论 在卵巢癌组织中,hSef表达下降,FGF-2表达增强.hSef的低表达减弱了FGF-2对细胞的增殖作用,促进了卵巢肿瘤的发生与发展.     

缝隙连接蛋白26在肺腺癌相关成纤维细胞中的表达及临床意义

目的 探讨缝隙连接蛋白26(connexin 26,Cx26)在肺腺癌相关成纤维细胞中的表达及其临床意义.方法 收集2018年11月至2019年5月于广西医科大学附属肿瘤医院6例手术切除肺腺癌癌组织及相应癌旁组织,分离原代肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)和正常肺...     

人淋巴管内皮细胞对人肝癌HepG-2细胞增殖及侵袭的影响

[目的]探讨人淋巴管内皮细胞(HLEC)对人肝癌HepG-2细胞增殖、异质黏附和侵袭能力的影响.[方法]采用Transwell小室建立HepG-2细胞与HLEC共培养系统;台盼蓝拒染法检测HLEC对HepG-2细胞增殖的影响;噻唑蓝染色法(MTT)检测HLEC对HepG-2细胞异质黏附力的影响;Transwell侵袭小室观察HLEC对HepG-2细胞侵袭力的影响.[结果]共培养系统中的HepG-2细胞数147±6/视野,显著高于单独培养的HepG-2细胞数120±3/视野(P＜0.05),表明HLEC可以促进HepG-2细胞的增殖.共培养系统中的HepG-2细胞黏附率(0.98±0.01)显著高于单独培养的HepG-2细胞黏附率(0.87±0.04) (P＜0.05),表明HLEC可以促进HepG-2细胞异质黏附.共培养系统中的HepG-2细胞穿膜数量106±6/视野,显著多于单独培养的HepG-2细胞穿膜数量89±2/视野(P＜0.05),表明HLEC可以促进HepG-2细胞侵袭,呈剂量依赖性.[结论] HLEC通过促进HepG-2细胞的增殖、黏附及侵袭能力参与了肿瘤淋巴道转移.     

EFEMP1通过下调MMP-7表达抑制肺癌细胞生长和侵袭

背景与目的 EFEMP1属于fibulin家族成员,是一种与细胞代谢密切相关的重要的细胞外基质蛋白,其在肿瘤的发生发展中的作用尚不清楚。本研究旨在探讨EFEMP1影响肺癌细胞生长和侵袭转移的生物学作用及其机制。方法 Western blot方法检测肺癌细胞中EFEMP1表达,甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)方法检测EFEMP1在肺癌细胞中启动子区甲基化状态。肺癌细胞中转染EFEMP1后,检测细胞克隆形成及侵袭能力变化,并用Western blot及实时定量PCR检测MMP-7表达,Luciferase实验检测EFEMP1对基质金属蛋白酶7(matrix metalloproteinase-7,MMP-7)报告质粒的影响。结果 Western blot结果显示肺癌细胞中EFEMP1表达下降,MSP分析结果说明A549和H1299中EFEMP1启动子区存在甲基化位点,5-aza-2’-deoxycytidine处理后,EFEMP1表达升高。A549和H1299转染EFEMP1后细胞克隆形成能力以及侵袭活性明显下降,MMP-7蛋白表达下调。Luciferase实验结果显示EFEMP1可以抑制MMP-7报告质粒的表达活性。结论 EFEMP1是一种肺癌生长和侵袭的抑制因子,由于表观遗传学的改变,其在肺癌细胞中表达下降,通过上调MMP-7的表达促进肺癌细胞的侵袭转移。     

新辅助化疗对非小细胞肺癌MMP-2与TIMP-2表达的影响

在肺癌的诸多生物学特性中,侵袭和转移是影响 患者预后的关键因素[1]。肺内的基底膜(basement membrane,BM)中含有大量的Ⅳ型胶原,在维持细胞 外基质(extracellularmatrix,ECM)的稳定,防止肺癌 的侵袭与转移方面具有重要意义[2]。基质金属蛋白 酶 2(matrixmetalloproteinase 2,     

氟化钠对人胚肺成纤维细胞p16基因改变的研究

目的与方法：为研究氟化物的遗传毒性,我们采用ＰＸＣＲ－ＳＳＣＰ和免疫组桦方法从基因和蛋白水平研究氟化钠对人胚肺成纤维细胞抑癌基因Ｐ１６改变的影响。结果与结论：结果未发现氟化钠能引起Ｐ１６基因的改变。     

Annexin a2表达对人乳腺癌细胞增殖迁移和侵袭能力的影响

目的：研究Annexin a2的表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法：采用小干扰RNA技术下调人乳腺癌细胞中Annexin a2的表达,并筛选单克隆细胞株,得到实验组克隆,阴性对照组命名为control。采用Western blot（WB）技术检测Annexin a2蛋白水平的变化,噻唑蓝（MTT）比色法研究其对MDA-MB-231细胞的存活、增殖能力的影响;采用划痕实验、侵袭实验观察其对细胞迁移和侵袭能力的影响; 免疫沉淀法检测与Annexin a2相互作用的蛋白分子。结果：WB检测发现siRNA干扰后MDA-MB-231细胞中Annexin a2的蛋白表达水平明显下降, MTT增殖实验显示Annexin a2下降组细胞克隆在72、96h的增殖能力明显低于亲本和control组细胞 （P均<0.05）, 同时细胞迁移和侵袭能力也显著下降, 差异具有统计学意义 （P<0.05）;免疫沉淀法证实Annexin a2与热休克蛋白27（HSP27）之间存在相互作用。结论：人乳腺癌细胞MDA-MB-231具有较强的迁移和侵袭能力,Annexin a2蛋白水平下降可以明显抑制其增殖、迁移和侵袭能力,研究提示Annexin a2与HSP27的相互作用有可能在乳腺癌的发生、 浸润和转移中起调节作用。     

肺腺癌、鳞癌中CD147与MMP-2的表达及意义

背景与目的 CD147是细胞外基质金属蛋白酶诱导因子,目前研究表明其与肿瘤的侵袭与转移有密切关系。本研究旨在探讨CD147和MMP-2在肺腺癌、鳞癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学方法检测55例人肺腺癌、鳞癌及其相应癌旁正常组织中CD147和MMP-2的蛋白表达,同时分析其与临床病理因素之间的关系。结果 CD147和MMP-2的蛋白表达在人肺腺癌、鳞癌组织中阳性率均明显高于癌旁肺组织。肺腺癌、鳞癌中CD147和MMP-2蛋白表达与年龄、性别及病理组织学分型无明显关系(P>0.05),但与淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05)。肺腺癌、鳞癌中CD147蛋白表达与MMP-2蛋白表达呈正相关。结论 CD147表达可能与肺腺癌、鳞癌侵袭和转移密切相关,可作为判断肺腺癌、鳞癌细胞生物学行为的客观参考指标。     

COX-2和MMP-2蛋白的表达对肺癌预后的影响

背景与目的：研究发现,环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)和基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)蛋白在肿瘤组织中的表达多有增高,而实验和临床研究提示,这两种蛋白的抑制剂可抑制肿瘤的生长、发展。本研究旨在探讨COX-2和MMP-2蛋白在人肺癌组织中的表达及其对患者预后的影响。方法：应用免疫组化方法检测42例肺癌组织中COX-2和MMP-2蛋白的表达情况,通过生存曲线法比较阳性组和阴性组患者的预后情况。结果：COX-2和MMP-2蛋白的阳性率分别为3l％和62％;COX-2蛋白阳性组患者的生存期明显较阴性组短(P=0．019);MMP-2蛋白阳性组淋巴结癌转移的发生率明显较阴性组高(P=0．009),而患者生存期则明显较阴性组短(P=0．001);COX-2蛋白与MMP-2蛋白的表达之间无相关性(P=0．257)。结论：COX-2和MMP-2蛋白的表达与肺癌患者的预后相关,其高表达提示患者预后不良。