白细胞介素-18通过诱导肿瘤细胞凋亡抑制人肺腺癌细胞皮下移植瘤的生长

目的:探讨白细胞介素-18(IL-18)对人肺癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响及抗肿瘤机制。方法:采用荷人肺腺癌A549细胞的裸鼠皮下移植瘤模型,不同剂量(5μg/100μl、50μg/100μl)的IL-18进行腹腔内注射,对照组为磷酸盐缓冲液(PBS溶液),观察瘤细胞生长能力和裸鼠生存期,应用光学显微镜观察肿瘤组织形态学变化,TUNEL法观察肿瘤细胞凋亡情况。结果:与对照组比较,IL-18高剂量组和IL-18常规剂量组明显抑制了皮下移植瘤生长(P<0.05)。IL-18常规剂量组生存期(63±8天)明显延长(P<0.05),IL-18高剂量组(44±5天)与空白对照组(42±6天)生存期无明显差异(P>0.05)。IL-18常规剂量治疗组和IL-18高剂量治疗组肿瘤组织内见大量淋巴细胞及炎细胞浸润,可见肿瘤细胞点、片状坏死;IL-18高剂量组和IL-18常规剂量组的凋亡细胞数均明显高于空白对照组(P<0.01)。结论:IL-18在裸鼠体内具有明显的抗肿瘤作用,其机制可能是刺激淋巴细胞、NK细胞和吞噬细胞等炎细胞分泌各种细胞因子,诱导肿瘤细胞凋亡,发挥抗肿瘤作用。     

白桦脂酸对人宫颈癌裸鼠移植瘤的抑制作用及机制

目的 探讨白桦脂酸（BA）对人宫颈癌HeLa细胞株裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及其机制。方法 将4×10⁶个HeLa细胞接种于裸鼠右肩背部皮下,建立人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,24只荷瘤裸鼠随机分为BA高剂量（80mg／kg）、中剂量（40mg／kg）、低剂量（20mg／kg）组及空白对照组（含溶剂）,每组6只,隔日腹腔注射连续给药21d,停药24 h后处死裸鼠,测量裸鼠体重、移植瘤体积、瘤重,计算抑瘤率;光镜下观察移植瘤组织形态学变化;TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡指数;免疫组化法检测瘤组织内caspase-3、CytoC蛋白表达。结果 裸鼠处死后,BA处理组的移植瘤体积均明显小于空白对照组（P＜0.01）,其中高、中、低剂量组抑瘤率分别为56.2％、40.4％和24.6％ （P＜0.01）;HE染色法显示BA处理组小鼠的移植瘤组织出现明显凋亡及坏死改变;TUNEL检测对照组和BA低、中、高剂量组的凋亡指数分别为（8.36±2.78）％、（20.98±3.01）％、（28.74±4.77）％和（39.34±6.15）％（P＜0.05）;免疫组化法示BA处理组的肿瘤组织caspase-3、CytoC蛋白表达水平较空白对照组明显升高（P＜0.01）。结论 BA对人宫颈癌HeLa细胞移植瘤的生长具有明显的抑制作用,其机制可能与上调caspase-3、CytoC蛋白的表达及诱导细胞凋亡有关。     

IL-27促进人胰腺癌Aspc1细胞凋亡

目的:探讨IL-27基因对人胰腺癌Aspc1细胞凋亡的影响及其体内抗肿瘤作用.方法:重组载体PA317/IL-27转染Aspc1细胞,G418筛选稳定转染IL-27基因的Aspc1细胞(Aspc1/IL-27).ELISA、细胞计数法和流式细胞术分别检测IL-27对Aspc1细胞IL-27表达、细胞增殖和MHC-Ⅰ类分子表达的影响.将Aspc1/IL-27、Aspc1/LXSN(稳定转染空质粒的Aspc1细胞)和Aspc1细胞接种于裸鼠右背部皮下,观察Aspc1细胞移植瘤的生长情况和小鼠的生存期;TUNEL法检测移植瘤细胞的凋亡,电镜观察移植瘤细胞的超微结构变化.结果:成功建立稳定转染PA317/IL-27载体的Aspc1/IL-27细胞株.Aspc1/IL-27细胞高表达IL-27,而Aspc1/LXSN和Aspc1细胞不表达IL-27(P＜0.01).PA317/IL-27载体转染不影响Aspc1细胞表面MHC-Ⅰ类分子的表达(P＞0.05).Aspc1/IL-27组裸鼠移植瘤生长速度明显慢于Aspc1/LXSN组及Aspc1组(P＜0.05),且生存期延长(P＜0.05).Aspc1/IL-27组移植瘤细胞凋亡率明显高于Aspc1/LXSN和Aspc1组[(19.5±2.4)%vs(8.5±0.3)%、(9.1±0.8)%,P＜0.01].结论:IL-27基因转染胰腺癌Aspc1细胞后通过诱导肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤作用.     

促进人胰腺癌Aspc1细胞凋亡

目的： 探讨 IL-27 基因对人胰腺癌Aspc1细胞凋亡的影响及其体内抗肿瘤作用。 方法： 重组载体PA317/IL-27转染Aspc1细胞,G418筛选稳定转染 IL-27 基因的Aspc1细胞（Aspc1/IL-27）。ELISA、细胞计数法和流式细胞术分别检测IL-27对Aspc1细胞IL-27表达、细胞增殖和MHC-Ⅰ类分子表达的影响。将Aspc1/IL-27、Aspc1/LXSN（稳定转染空质粒的Aspc1细胞）和Aspc1细胞接种于裸鼠右背部皮下,观察Aspc1细胞移植瘤的生长情况和小鼠的生存期;TUNEL法检测移植瘤细胞的凋亡,电镜观察移植瘤细胞的超微结构变化。 结果： 成功建立稳定转染PA317/IL-27载体的Aspc1/IL-27细胞株。Aspc1/IL-27细胞高表达IL-27,而Aspc1/LXSN和Aspc1细胞不表达IL-27（P<0.01）。PA317/IL-27载体转染不影响Aspc1细胞表面MHC-Ⅰ类分子的表达（P>0.05）。Aspc1/IL-27组裸鼠移植瘤生长速度明显慢于Aspc1/LXSN组及Aspc1组（P<0.05）,且生存期延长（P<0.05）。Aspc1/IL-27组移植瘤细胞凋亡率明显高于Aspc1/LXSN和Aspc1组\[（19.5±2.4）% vs（8.5±03）%、（9.1±0.8）%,P<0.01\]。 结论： IL-27 基因转染胰腺癌Aspc1细胞后通过诱导肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。     

环磷酰胺LDM联合MTD化疗对乳腺癌抗血管作用的实验研究

目的观察环磷酰胺最大耐受量联合低剂量节律化疗对裸鼠人乳腺癌皮下移植瘤的抗血管生成及促肿瘤细胞凋亡的作用。方法荷瘤裸鼠随机分成4组：LDM组、联合用药组（MTD联合LDM组）、MTD组和对照组。给药21天后,观察各组小鼠瘤质量、瘤体积、白细胞数量,采用免疫组织化学法检测移植瘤MVD、TSP-1表达情况,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡情况。结果联合用药组裸鼠肿瘤的生长速度较其他组明显减慢（P〈0.05）。联合用药组裸鼠的肿瘤重量为（0.35±0.03）g,明显轻于其他组（P〈0.05）。联合用药组MVD表达水平明显低于MTD组（P〈0.05）。联合用药组TSP-1表达水平明显高于MTD组（P〈0.05）。联合用药组肿瘤细胞凋亡率明显高于其他组（P〈0.05）。结论环磷酰胺MTD联合LDM节律化疗可以抑制乳腺肿瘤的生长速度、血管生成,并促进肿瘤细胞凋亡。     

HIF-1α基因沉默对人肺腺癌细胞A549裸鼠移植瘤生长及survivin表达的影响

目的观察缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）基因沉默对肺癌的抑瘤效应和survivin表达的影响。方法将实验用肺腺癌A549细胞分为空白对照组、无意义序列转染组和实验组,接种裸鼠,建立裸鼠荷瘤模型,观测HIF-1α-MiRNA对裸鼠皮下移植瘤的生长抑制作用和对survivin表达的影响。采用免疫组化SP法,检测HIF-1α和survivin蛋白在裸鼠移植瘤中的表达。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测HIF-1α和survivin mRNA的表达。采用原位末端标记（TUNEL）法检测肿瘤组织中细胞凋亡。结果实验组裸鼠肿瘤的生长速度较空白对照组、无意义序列转染组明显减慢（P〈0.05）。接种60 d后处死裸鼠,实验组裸鼠的肿瘤重量为（0.59±0.28）g,明显轻于空白对照组[（1.90±0.18）g]和无意义序列转染组[（1.66±0.24）g,P〈0.01]。实验组肿瘤组织中HIF-1αmRNA和蛋白的相对表达量分别为（0.45±0.04）%和（24.56±5.83）%,survivin mRNA和蛋白的相对表达量分别为（0.32±0.02）%和（29.08±3.99）%,均明显低于空白对照组、无意义序列转染组（P均〈0.05）。但实验组肿瘤组织中凋亡细胞的数量显著高于对照组。结论以HIF-1α为靶点的基因治疗,可能通过下调靶基因survivin的表达促进肺癌细胞凋亡,发挥抑制肿瘤生长的作用。     

YH-16对宫颈癌Hela细胞及其裸鼠皮下移植瘤作用研究

目的：初步探讨YH-16（重组内皮抑素）对宫颈癌Hela细胞及其荷瘤生长抑制作用及作用机制。方法：用MTY法检测YH-16对Hela细胞生长抑制作用；用透射电镜观察YH-16处理Hela细胞后的凋亡情况、流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期；将Hela细胞移植至裸鼠皮下成瘤，观察不同浓度YH-16（0mg／kg、0．4mg／kg、0．75mg／kg和1．5mg／kg）对荷瘤鼠皮下移植瘤生长的影响；TUNEL法观察肿瘤细胞的凋亡；免疫组化方法检测裸鼠移植瘤组织中肿瘤微血管密度（MVD）。结果：YH-16具有体外抑制Hela细胞增殖的作用（P〈0．01）；能诱导Hela细胞凋亡；YH-16能有效抑制裸鼠皮下移植瘤的生长（P〈0.05）；YH-1615mg／kg组的肿瘤MVD计数较对照组和其它治疗组明显降低（P〈0．05）。结论：YH-16具有抑制宫颈癌Hela细胞及其皮下移植瘤生长的作用。     

硫普罗宁对人白血病裸鼠模型IL-2治疗免疫增敏的实验研究

目的 探讨硫普罗宁（TIP）对人白血病KG-1细胞裸鼠移植瘤白细胞介素-2（IL-2）治疗的免疫增敏作用及其可能机制.方法 取对数生长期的白血病KG-1细胞（1×107个/ml）,皮下接种于45只5周龄裸鼠的左后肢腹股沟,当皮下肿瘤直径为8mm左右时,完全随机化分为3组（n=15）：Control组（腹腔内注射磷酸盐缓冲液）、IL-2组（皮下注射IL-2）、IL-2＋ TIP组（皮下注射IL-2＋腹腔注射TIP）.观察TIP联合IL-2对人白血病KG-1细胞裸鼠移植瘤的治疗效果;流式细胞术检测裸鼠外周血中自然杀伤（NK）细胞数量;硝酸还原酶法检测裸鼠外周血清中反应性氮代谢物（RNM）的产量;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测裸鼠外周血清中肿瘤坏死因子-β（TNF-β）、γ干扰素（IFN-γ）的蛋白量;原位末端标记法（TUNEL）分析细胞凋亡情况.结果 IL-2和IL-2＋ TIP两组均可抑制移植瘤的生长,抑瘤率分别为（54.32±4.32）％、（90.15±3.75）％,IL-2＋ TIP组抑制肿瘤的生长更加明显（t=11.893,P＜0.001）.Control组、IL-2组、IL-2＋ TIP组肿瘤重量分别为（0.95±0.05）g、（0.58±0.03）g和（0.27±0.07）g,3组间差异有统计学意义（F =52.716,P＜0.001）,IL-2＋ TIP组的肿瘤重量较IL-2组明显减轻（P=0.008）.治疗后IL-2＋ TIP组NK细胞数量为（0.658 ±0.157）个/L,明显多于IL-2组的（0.452±0.124）个/L（P=0.021）.IL-2＋ TIP组RNM的产量为（42.92±4.68）μmol/ml,明显低于IL-2组的（163.38±5.49） μmol/ml （P=0.007）;IL-2＋TIP组TNF-β3、IFN-γ的蛋白量分别为（247.68±8.24） pg/ml和（185.61±7.58） pg/ml,明显高于IL-2组的（97.48士7.28）pg/ml（P=0.021）和（70.62±8.47）pg/ml（P=0.015）.IL-2＋TIP组肿瘤细胞凋亡率为（47.38±4.25）％,明显高于IL-2组的（21.41±2.79）％ （P ＜0.001）.结论 TIP可以通过清除RNM促进NK细胞的活性,增加NK细胞诱导的肿瘤细胞凋亡,来提高白血病细胞对IL-2免疫治疗的敏感性.     

染料木黄酮对人卵巢癌移植瘤的抑制作用

目的：观察染料木黄酮（GEN）对人卵巢癌裸鼠移植瘤内血管生成及肿瘤细胞的抑制作用。方法：建立20只裸鼠人卵巢癌移植模型．随机分成对照组、低剂量GEN纽、中剂量GEN组和高剂量GEN组.GEN各组分别灌胃5mg（kg·d）^-1（低剂量）、25mg（kg·d）^-1（中剂量）和50mg（kg·d）^-1（高剂量），共4周。对照组同体积去离子水灌胃。测定三组抑瘤率，用Ⅷ因子抗原多克隆抗体测定肿瘤内微血管密度（MVD），用细胞增殖指数（PI）反映细胞增殖状态。并通过电镜进行形态学观察。结果：GEN低剂量、中剂量和高剂量组移植瘤质量抑瘤率分别为1．90％、18．50％和38．07％。GEN中、高剂量组瘤重与对照组有明显差异（P〈0．05）。GEN中、高剂量组的MVD和PI值与对照组比较，差异有显著性（P〈0．05）。电镜观察可见GEN组随GEN剂量增加凋亡细胞、凋亡小体及变性坏死增多，而对照组少见。结论：GEN对人卵巢癌H0—8910PM细胞裸鼠移植瘤有明显抑制作用，并呈现剂量-效应关系；GEN对肿瘤细胞的作用．与抑制肿瘤细胞的增殖和肿瘤区新生血管的生长、阻断肿瘤血供有关。     

双歧杆菌完整肽聚糖对实验性胃癌增殖及凋亡的影响

目的：探讨双歧杆菌完整肽聚糖（whole peptidoglycan,WPG）对实验性胃癌增殖及凋亡的影响。方法：用胃癌MKN-45细胞裸鼠皮下移植瘤模型,观察不同浓度WPG与5-氟尿嘧啶（5-FU）移植瘤的生长情况,原位末端标记（TUNEL）法检测肿瘤细胞凋亡情况,免疫组化法检测bcl-2和bax及增殖细胞核抗原（PC5NA）的表达。结果：连续灌胃100、300及500μg的WPG后,移植瘤的生长速度明显减慢。实验结束时,各组瘤质量明显低于对照组,P〈0．01。但与5-FU组相比差异无统计学意义,P〉0．05。WPG各组及5-FU组的凋亡指数显著高于对照组,P〈0．01。免疫组化结果显示,WPG各组移植瘤的bcl-2与PCNA表达率及与对照组相比均有所降低,P〈0．05;bax的表达情况相反,WPG各组中的bax表达显著高于对照组,P〈0．01。结论：WPG对人胃癌裸鼠移植瘤的生长具有明显的抑制作用,其机制可能与降低肿瘤细胞的增殖活性及增强bax的蛋白表达、下调bcl-2的蛋白表达、诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

熊果酸对人肝癌SMMC-7721裸鼠移植瘤抑制作用的观察

目的：观察熊果酸对人肝癌SMMC-7721裸小鼠移植瘤生长的抑制作用及其强度,为本药的进一步临床应用研究提供基础数据。方法：采用荷瘤裸小鼠作为移植性肿瘤实验动物模型。将裸鼠随机分为3组,每组8只,分别为阴性对照组、环磷酰胺阳性对照组和熊果酸组。阳性对照组给予环磷酰胺20mg/kg,熊果酸组给药剂量为4.5mg/kg,阴性对照组给予等量无菌注射用水,每日一次腹腔注射,连续14天。给药期间定期测定动物体重和瘤体积。实验结束后处死裸鼠,取出瘤体称重,计算肿瘤抑制率。结果：给药期间动物一般状况未见明显改变,饮食未见异常,体重较实验前有所增加。熊果酸组瘤体积缩小,瘤株抑瘤率达53.7%,阳性对照组的抑瘤率为39.2%,两组与阴性对照组比较,均有显著差异（P〈0.05）。熊果酸组和阳性对照组的相对肿瘤体积（RTV）分别为33.16±22.36,21.61±12.88,明显低于阴性对照组（62.09±32.80）（P〈0.05）,两组的相对肿瘤增殖率均小于60%。结论：熊果酸对人肝癌SMMC-7721裸小鼠移植瘤有明显的抑制作用。     

阿霉素联合他莫昔芬对人子宫内膜癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的：分别研究阿霉素、他莫昔芬及两者联合用药对人子宫内膜癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用及相应机制;方法：建立裸鼠活体二次移植肿瘤的动物模型,并随机分为4组,每组5只.分别为阿霉素用药组、他莫昔芬用药组、阿霉素他莫昔芬联合用药组及对照组;用药处理裸鼠移植瘤模型3周.对照组予以注射生理盐水3周.计算各组移植瘤体积、抑瘤率及裸鼠体重情况,肿瘤组织标本进行免疫组化检测Ki67蛋白的表达,并用TUNEL法检测细胞凋亡情况.结果：联合用药组与单独用药组及对照组的瘤体积比较差异均有统计学意义（P＜0.05）;用药前各组裸鼠体重差异无统计学意义（P＞0.05）,用药后对照组与单独用药组及联合用药组的体重比较差异均有统计学意义（P＜0.05）;联合用药组与单独用药组及对照组的抑瘤率比较差异均有统计学意义（P＜0.05）;用药组的Ki67表达阳性率明显低于对照组,联合用药组Ki67表达最低;TUNEL法检测联合用药组肿瘤细胞凋亡率为（32.33 ±3.68）％,明显高于阿霉素组（17.40±2.58）％、他莫昔芬（15.40±6.05）％和对照组（3.50±1.50）％,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论：阿霉素、他莫昔芬均可抑制人子宫内膜癌裸鼠移植瘤的生长,两者联合应用较两药单独应用对人子宫内膜癌裸鼠移植瘤的抑制作用更为显著.     

半人工合成手性多西紫杉醇对肺腺癌细胞株A549的细胞毒性及放射增敏作用

目的：探讨半人工合成手性多西紫杉醇对人肺癌细胞株A549的细胞毒性及放射增敏作用。方法：半人工合成手性多西紫杉醇，测定其对A549细胞的生长抑制作用，观察其对A549细胞的形态学影响及其放射增敏作用和对动物荷瘤模型的作用。结果：不同浓度半人工合成紫杉醇对A549细胞均有抑制作用，可引起A549细胞G2／M期阻滞，抑制荷瘤小鼠模型肿瘤的生长，其中空白对照组、单纯药物组、单纯放射组和联合处理组的肿瘤体积分别为（7780±1050）mm^3、（4610±950）mm^3、（5540±1035）mm^3和（560±112．5）mm^3。各组间有明显差异。结论：半人工合成紫杉醇对A549细胞株具有明显的抑制作用，且与射线照射有协同作用。     

整合NGR肽抗EGFR单链抗体制备及其抗肿瘤活性研究

目的：利用大肠埃希菌表达基于抗表皮生长因子受体（epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR）单链抗体和靶向CD13环状NGR肽的双靶点重组融合蛋白ER（Fv）-NGR,研究其对肿瘤细胞的亲和能力和体内外抑制作用。方法：用基因工程的方法构建重组质粒pET-scfv-ngr,转入大肠埃希菌BL21,IPTG诱导表达带有His-tag标签肽的重组蛋白ER（Fv）-NGR,用Ni离子亲和柱进行纯化。运用细胞免疫荧光检测ER（Fv）-NGR与肿瘤细胞的结合;流式细胞术分析重组蛋白与肿瘤细胞的亲和力;克隆形成实验测定重组蛋白对肿瘤细胞体外增殖的抑制作用;利用人乳腺癌MCF-7裸鼠移植瘤模型对ER（Fv）-NGR的体内抗肿瘤活性进行研究。结果：重组蛋白ER（Fv）-NGR由抗EGFR单链抗体和3个连续的环状NGR肽构成,相对分子质量约为27×10^4,以包涵体形式在大肠埃希菌内表达,表达量约为5mg／L。细胞免疫荧光结果表明,重组蛋白与EGFR和CD13皆高表达MCF-7细胞有较强的结合能力,而与正常HEK293细胞结合较弱。ER（Fv）-NGR与MCF-7细胞结合的解离常数为8．4×10-7nmol／L。ER（Fv）-NGR在体外对肿瘤细胞的增殖有抑制作用,作用于MCF-7和A549细胞的Ic50值分别为1．2×10^-6和4．7×10-mol／L。在体内对人乳腺癌MCF-7裸鼠移植瘤有生长抑制作用,在10mg／kg药物剂量下28d对照组与实验组瘤体积分别为（1．06±0．17）和（0．63±0．11）cm2,F-18．7,P=0．003;瘤质量分别为（0．95±0．12）和（0．52±0．07）g,F=42．7,P〈0．001;抑瘤率为45．4％。结论：成功制备了基于单链抗体和靶向肽的双靶点融合蛋白ER（Fv）-NGR,其对肿瘤细胞具有良好的亲和力和体外增殖抑制作用,能够有效抑制裸鼠移植瘤的生长,为研制新型双靶点抗肿瘤药物提供依据。     

含CpG寡核苷酸在人神经母细胞瘤裸鼠移植瘤模型中的抗肿瘤效应

背景与目的：含有非甲基化CpG二核苷酸的寡脱氧核苷酸（CpG oligonucleotides,CpGODN）序列可以模拟细菌DNA特征,作为“异己信号”刺激机体免疫系统,发挥抗肿瘤作用。本研究探讨在人神经母细胞瘤（neuroblastoma,NB）裸鼠移植瘤模型中,CpGODN是否可以通过调节非特异性免疫来介导抗肿瘤效应。方法：体外WST-1实验明确CpGODN对神经母细胞瘤细胞株SK—N—MC的生长影响,建立NB荷瘤动物模型,当肿瘤生长到皮下可触及时,随机分组后给予不同注射处理（生理盐水、non—CpGODN、CpGODN）、观察各组小鼠肿瘤生长情况,病理组织学方法检测各组肿瘤组织的异同,免疫荧光组化法检测自然杀伤细胞（natural kill cell,NK）和巨噬细胞的浸润。结果：体外实验证明CpGODN对SK—N—MC细胞无明显的直接细胞毒性及生长抑制作用。CpGODN处理组与non—CpGODN、生理盐水组相比,肿瘤细胞生长明显受到抑制[（0．14±0．03）cm^3vs．（2．97±0．40）cm^3、（3．80±1．12）cm^3,（P〈0．01）]。HE染色显示与肿瘤细胞生长活跃的对照组相比,CpGODN处理组肿瘤组织中有较多的炎性细胞浸润及大片坏死灶。免疫荧光染色发现CpGODN处理组与生理盐水组、non—CpGODN组相比较瘤体内有明显的NK、巨噬细胞浸润。结论：具有免疫刺激作用的CpGODN可能通过调节NK、巨噬细胞的活性来抑制NB生长,发挥抗肿瘤作用。     

沙利度胺联合三氧化二砷抑制SMMC7721裸鼠移植瘤生长及毒副反应观察

目的：研究高低剂量沙利度胺（Tha）联合三氧化二砷（AsT）干预SMMC7721裸鼠移植瘤生长,检测移植瘤微血管密度（MVD）和核转录因子（NF—κB）表达,观察毒副反应。方法：取人肝癌细胞株SMMC7721接种于BALB／c裸鼠颈部皮下,随机分为7组。一周后按实验设计开始给药,每周称裸鼠体重,测移植瘤体积,连续给药4周。实验结束处死裸鼠,检测移植瘤MVD及NF-κB表达,鼠肺、肝、肾行HE染色,鼠血行血常规、ALT、cr分析。结果：各组间裸鼠体重差异无统计学意义（P〉0．05）。裸鼠接种成瘤率100％,各组瘤体积：组4〈组5〈组1〈组2〈组3〈PG〈NG,差异均有统计学意义（P〈0．05）。各组移植瘤MVD：组4〈组5〈组1〈组2〈组3〈PG〈NG,差异有统计学意义（P〈0．05）。各组移植瘤NF—κB表达：组4〈组5〈组3〈PG〈组1〈组2〈NG,差异有统计学意义（P〈0．05）。实验组肺、肝、肾组织细胞结构及裸鼠血常规、ALT、Cr检测结果与阴性对照组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：Tha联合AsT能够降低移植瘤MVD,下调NF—κB表达,具有协同抑瘤作用,毒副反应轻微,值得进一步研究。     

As2O3 对ACC-2移植瘤血管生成的影响

目的研究三氧化二砷（As2O3）对人腺样囊性癌ACC-2裸鼠移植瘤生长及血管生成的抑制作用,探讨其抗肿瘤的作用机制。方法通过建立ACC-2裸鼠移植瘤模型,将28只荷瘤鼠随机分为4组：阴性对照组（生理盐水即NS）、阳性对照组[5-Fu10mg／（kg·d）]、低剂量组[As2O3．5mg／（kg·d）]、高剂量组[As2O3 5．0mg／（kg·d）]。连续经腹腔注射用药10天。测量肿瘤的体积和重量,采用HE染色光镜观察,免疫组织化学法检测VEGF、MVD的表达并进行统计学分析。结果高、低剂量As2O3组移植瘤的瘤体积、瘤重均低于两对照组（Ns组和5-Fu组）,且高剂量As2O3组抑瘤最明显,瘤体积抑制率为52．17％,瘤重抑制率为56．04％（P〈0．01）。在移植瘤表面,与两对照组相比,高、低剂量As2O3组血管密度减小,管径变细。高、低剂量As2O3组抑制移植瘤VEGF的表达、降低MVD值,高剂量As2O3组抑制作用最明显。与两对照组比较以及高、低剂量As2O3组之间比较差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论As2O3对人腺样囊性癌ACC-2裸鼠移植瘤及血管生成有明显抑制作用,其作用机制可能为降低VEGF表达及MVD值,此抑制作用与剂量有关。     

贝伐单抗与重组人血管内皮抑素对人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤生长的影响

[目的]探讨贝伐单抗、重组人血管内皮抑素对人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤生长的影响。[方法]建立人乳腺癌裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组、低剂量贝伐单抗组、高剂量贝伐单抗组、低剂量莺组人血管内皮抑素组、高剂量重组人血管内皮抑素组、低剂量联合组以及高剂量联合组,用药3周。检测裸鼠体重、移植瘤体积、移植瘤重量,计算抑瘤率。[结果]与对照组相比,低剂量贝伐单抗组、高剂量贝伐单抗组、低剂量联合组、高剂量联合组裸鼠移植瘤生长曲线较平缓,移植瘤重量明显下降（P〈0．01）,抑瘤率分别为67．69％、68．88％、78.32％和79．26％。低剂量联合组与低剂量贝伐单抗组移植瘤重量存在统计学差异（P〈0．05）。低剂量重组人血管内皮抑素组、高剂量重组人血管内皮抑素组移植瘤生长与对照组无统计学差异（P〉0．05）。[结论]贝伐单抗能抑制人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤生长,低剂量贝伐单抗联合重组人血管内皮抑素能进一步提高抗肿瘤作用。     

Ad．VEGF．siRNA抑制荷人骨肉瘤裸鼠血管生成的形态学研究

背景与目的：血管内皮生长因子是骨肉瘤血管形成重要的促进因子,本研究通过抗血管生成方法,观察其抑制荷人骨肉瘤裸鼠血管生成的形态学表现。方法：取4～8周龄的Balb／c裸鼠作为实验动物,人骨肉瘤细胞株MG63皮下接种法构建骨肉瘤的动物模型。建模成功后将荷人骨肉瘤的裸鼠随机分为3组,每组15只。A组使用自行构建的Ad—VEGF-siRNA干扰新生血管形成;B、C组分别使用等剂量的Ad-EGFP或PBS作为对照。实验维持19d,药物使用后隔日测量肿瘤体积和体重．绘制肿瘤生长曲线：采用常规HE染色、VEGF和CD31相关抗原免疫组化染色观察各组肿瘤标本：各组随机抽取一个标本在透射电镜下观察仿血管发生的超微结构。结果：实验结束时,A组裸鼠瘤体体积为（0．31±0．18）cm^3,重量为（0．75±0．21）g,微血管密度（microvessed density,MVD）为5．79±0．34,VEGF表达为235228．09±123244．41,B、C照组裸鼠瘤体积分别为（1．21±1．29）cm^3、（1．43±0．95）cm^3;瘤重分别为（1．19±0．27）g、（1．19±0．35）g;MVD分别为11．00±0．68、10．42±0．10：VEGF表达分别为9641992．40±90479．62、981298．00±213590．50。A组肿瘤体积、重量、MVD和VEGF表达均显著低于B、C组。MVD和VEGF呈正相关关系,相关系数为0．9989。Ad-VEGF—siRNA组仿血管发生数量1．4000±0．5477,明显小于Ad—EGFP和PBS对照组。透射电镜可见肿瘤细胞形成的仿血管。结论：通过宏观和微观的形态学观察,证实Ad—VEGF-siRNA介导的以VEGF为靶向的抗血管生成能够抑制荷人骨肉瘤裸鼠的血管生成。