甲状腺乳头状癌组织中14-3-3σ基因甲基化检测

目的:研究14-3-3σ基因启动子的甲基化与甲状腺乳头状癌发生的关系。方法:采用甲基化特异性聚合酶链反应法(MSP),对48份甲状腺乳头状癌组织和21份甲状腺非癌组织进行14-3-3σ基因甲基化检测。结果:48例甲状腺乳头状癌中,有34例检测到14-3-3σ基因甲基化,甲基化率为70.8%;21例甲状腺非癌组织中检测到10例甲基化,甲基化率为47.6%。14-3-3σ基因启动子的甲基化在甲状腺癌症组和非癌症组间统计学差异没有显著性(P>0.05)。结论:14-3-3σ基因甲基化在甲状腺乳头状癌中的作用还有待于进一步研究。     

甲状腺乳头状癌组织中p16基因甲基化的研究

目的:研究甲状腺乳头状癌组织中p16基因启动子区甲基化状态,探讨其甲基化与临床参数之间的关系。方法:运用甲基化特异性PCR(MSP)技术,对25例甲状腺乳头状癌组织中p16基因的甲基化状况进行分析。结果:甲状腺乳头状癌组织中p16基因甲基化率为36.0%(9/25),而正常甲状腺组织中未检测到该基因的甲基化,两者之间的差异有统计学意义(P<0.05);p16基因甲基化与患者年龄和性别无相关性,但与肿瘤的浸润和转移有关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:p16基因甲基化是甲状腺乳头状癌组织中常见的分子生物学事件,与甲状腺癌的浸润和转移有关,可能参与了甲状腺癌的发生发展过程。     

甲状腺乳头状癌组织中TSHR基因启动子甲基化及其临床意义

摘 要：［目的］ 探讨甲状腺乳头状癌（papillary thyroid cancer,PTC）组织中TSHR基因启动子区甲基化程度及其临床意义。［方法］采用甲基化特异性聚合酶链反应（Methylation-Specific Polymerase chain reaction,MSP）法检测100例PTC组织及其癌旁组织中TSHR基因启动子甲基化状态,并结合患者的临床病理特征和随访信息分析TSHR与PTC进展及预后的关系。［结果］ 100例PTC组织中TSHR基因启动子甲基化率为77%,明显高于癌旁组织的7%（P=0.002）。TSHR基因甲基化程度与患者初诊年龄、原发灶大小、数量、腺外侵犯、淋巴转移、TNM分期呈正相关（P<0.05）;而与患者性别、T分期无关（P>0.05）。单因素生存分析显示TSHR基因甲基化预示更短的无病生存时间,而多因素生存分析显示TSHR基因甲基化不是PTC患者无病生存的独立影响因素。［结论］ TSHR基因启动子区甲基化是PTC组织中频发的分子事件,与肿瘤的进展相关并提示PTC患者的不良预后。     

肝癌组织中1433sigma启动子异常甲基化及基因转录水平检测

 目的探讨肝癌14-3-3σ基因启动子异常甲基化状况及其与转录水平的关系。方法14-3-3σ启动子甲基化用甲基化特异性PCR检测;14-3-3σ mRNA的表达水平用实时定量PCR检测。结果14-3-3σ启动子甲基化在肝癌患者癌旁组织、肝硬化组织和癌组织中的阳性率分别为6.8%(3/44)、56.1%(23/44)和93.2%(41/44)。不同性别、分化程度和乙型肝炎病毒状态的组织中14-3-3σ甲基化频率无显著差异(P>0.05);发生甲基化的组织标本中90.6%(58/64)转录缺失,10.4%转录水平下降,而未发生甲基化的标本14-3-3σ mRNA表达水平基本正常。14-3-3σ甲基化与其mRNA水平明显负相关(P<0.05)。14-3-3σ甲基化与其mRNA表达水平下降密切相关(P<0.05)。结论从癌旁组织、肝硬化组织到癌组织,14-3-3σ基因启动子甲基化频率逐步升高,且与其mRNA表达相关,提示14-3-3σ启动子甲基化可能在肝癌形成过程中是一个早期事件,与肝癌发生有一定关系。     

散发性乳腺癌癌变过程14-3-3σ异常甲基化与其转录水平的关系

背景与目的：抑癌基因启动子异常甲基化是肿瘤发生的重要机理之一，本研究探讨散发性乳腺癌癌变过程14-3—3σ基因启动子异常甲基化状况及其与转录水平的关系。方法：用甲基化特异PCR方法对散发性乳腺癌患者癌组织及正常组织进行14—3-3σ异常甲基化检测；用SYBR green Ⅰ实时定量PCR检测14-3—3σ mRNA的转录表达。结果：68例散发性乳腺癌组织中，14—3—3σ基因启动子异常甲基化率为90％（61／68），部分不典型增生病例检出异常甲基化15％（2／13），而正常组织未检出甲基化．只检出未甲基化的14-3—3σ。14—3-3σ基因启动子异常甲基化与散发性乳腺癌组织分型、分级和淋巴结转移相关（P〈0．05），而与年龄无相关性（P〉0．05）。14—3-3σ甲基化与其转录水平呈负相关性（P〈0．05）。结论：14—3-3σ基因启动子异常甲基化的检测在散发性乳腺癌癌变过程的组织分型、分级和淋巴结转移等方面有一定的应用价值。14-3—3σ基因启动子异常甲基化是其转录下调乃至缺失的重要原因。     

非小细胞肺癌中Reprimo以及14-3-3 Σ基因启动子异常甲基化检测

目的探讨Reprimo以及14-3-3 Σ基因启动子在非小细胞肺癌(NSCLC)中的异常甲基化状态及其与临床病理资料的联系。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation Specific-PCR,MSP)技术检测60例NSCLC以及癌旁正常组织中Reprimo以及14-3-3 Σ基因启动子异常甲基化状态。结果Reprimo以及14-3-3 Σ基因启动子异常甲基化在NSCLC组织中发生频率分别为36.67%(22/60)和28.33%(17/60),与癌旁正常组织具有显著性差异(P值分别为0.000和0.002)。Reprimo基因启动子异常甲基化频率与吸烟习惯以及年龄相关;14-3-3 Σ启动子异常甲基化与年龄、吸烟习惯、性别、病理类型和临床分期以及淋巴结转移等无相关。结论NSCLC中存在Reprimo和14-3-3 Σ等基因启动子较高频率的异常甲基化。     

14-3-3σ蛋白表达对恶性肿瘤诊断和治疗的意义

目前的研究表明,肿瘤从本质上来说是基因病。其中,抑癌基因的基因调控失活很大程度会导致肿瘤发展[1]。在许多癌组织中发现,由于启动子的DNA高度甲基化而致抑癌基因沉默。那些基因包括:FHI T、△Np63、CDH1、RASSFI A、CDH13、sFRP1、RARb、p16、DAPK和14-3-3σ基因[2]。14-3-3     

p53突变型乳腺癌细胞系中14-3-3σ对p73基因稳定性的影响

目的探讨在p53突变的乳腺癌细胞系MDA-MB-231中，14-3-3σ对p73基因稳定性的影响。方法采用基因转染、反转录聚合酶链反应（RT-PCR）、蛋白质印迹检测（Western blot）和放线菌酮（CHX）蛋白抑制分析的方法研究14-3-3σ对p73基因稳定性的影响。结果RT-PCR显示，单独转染1μgp73后，p73与GAPDH的灰度值比为0．635；转染1μgp73＋1μgld-3-3σ和1μgp73＋2μg14-3-3σ后，p73与GAPDH的灰度值比分别为0．643和0．631。Western-blot显示，单独转染1μgp73后，p73与actin的灰度值比为0．333；转染1μgp73＋1μg14-3-3σ和1μgp73＋2μg14&#183;3-3σ之后，p73与actin的灰度值比分别为0．797和0．826。放线菌酮蛋白抑制分析显示：单独转染p73的对照组，放线菌酮处理0、1、2、4、6h后，p73与actin灰度比值分别为0．075、0．166、0．124、0．100和0．092；而共转染p73和14-3-3σ的实验组结果分别为0．963、0．244、0．244、0．234和0．185。结论在转录水平上，14-3-3σ．不影响p73基因的稳定性；而在蛋白表达水平上，14-3-3σ可以增加p73基因的稳定性。     

甲状腺乳头状癌组织中TRIM14的表达及临床意义

目的:探讨三结构域蛋白14（tripartite motif containing 14,TRIM14）在甲状腺良性结节和甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma,PTC)组织中的表达差异,并分析TRIM14表达水平与甲状腺乳头状癌患者各临床病理特征间的关系。方法:收集我院92例手术切除且病理证实为PTC患者的临床病理资料及组织标本以及50例甲状腺良性结节组织标本。用免疫组织化学检测入组标本中TRIM14表达水平,并分析TRIM14表达与患者临床病理特征间的关系。结果:PTC组织中TRIM14表达阳性率为88.04%,甲状腺良性结节中TRIM14表达阳性率为40%,两者差异有统计学意义（P＜0.001）;TRIM14表达与PTC患者T分期及肿瘤危险度分层相关（P＜0.05）。结论:TRIM14高表达于PTC组织中,有望成为新的PTC肿瘤标志物。TRIM14的表达与PTC患者T分期及危险度分层相关,提示TRIM14可能影响PTC发生发展。     

甲状腺乳头状癌雌激素受体的检测

目的：探讨甲状腺乳头状癌雌激素受体阳性表达的临床病理意义。方法：应用免疫组化ＳＰ法对８０太腺乳头状癌,３０例滤泡状癌及５０例癌旁正常甲状腺组织雌激素受体（ＥＲ）进行测定。结果：甲状腺乳头状癌、滤咆状癌及正常组织ＥＲ阳性率分别为６７．５０％（５４／８０）、２３．３３％（７／３０）、６％（３／５０）,乳头状癌ＥＲ阳性率显著滤泡状癌及正常组织,乳头状癌中原发癌ＥＲ阳性率显著高于复发癌,无淋巴结转移者ＥＲ     

乳腺癌中组织14-3-3σ和cyclin B1的表达及其临床意义

目的:探讨14-3-3σ和cyclin B1蛋白在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌临床病理特征之间的关系。方法:选择2006年11月至2009年11月在辽宁医学院附属第一医院手术治疗的乳腺癌患者95例乳腺癌和30例癌旁组织(距癌边缘5 cm)的标本,患者年龄为31～85岁,中位年龄58岁。免疫组织化学PV法和Western blotting检测14-3-3σ和cyclin B1蛋白在乳腺癌和癌旁组织中的表达,分析两者与乳腺癌临床病理特征之间的关系以及两者的相关性。结果:Western blotting与免疫组化实验结果显示,14-3-3σ蛋白在乳腺癌中表达率为22.1%(21/95),显著低于癌旁组织的93.3%(28/30)(P<0.01);14-3-3σ蛋白的表达与乳腺癌组织学分级、TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。Cyclin B1蛋白在乳腺癌中的表达率为69.5%(66/95),显著高于癌旁组织的40%(12/30)(P<0.05);CyclinB1蛋白的表达与乳腺癌淋巴结转移相关(P<0.05)。乳腺癌组织中14-3-3σ和cyclin B1蛋白的表达呈负相关(r=-0.333,P=0.001)。结论:14-3-3σ和cyclin B1蛋白与乳腺癌的发生、转移相关,两者联合检测可为乳腺癌诊断和治疗提供参考。     

宫颈癌组织14-3-3σ蛋白表达及其临床意义

目的:探讨14-3-3σ蛋白在宫颈癌组织中的表达及意义.方法:采用免疫组化ABC法检测14-3-3σ蛋白在80例宫颈癌和20例正常宫颈组织中的表达水平.结果:14-3-3σ蛋白在正常宫颈组织中为表达阳性率为15%,而在宫颈癌组织中为56.25%,两者差异有统计学意义,P<0.05.宫颈癌细胞分化程度低、临床期晚期及有淋巴结转移者14-3-3σ蛋白阳性率高反之则低.结论:14-3-3σ蛋白表达的阳性率与宫颈癌的分化程度、临床分期及有无淋巴结转移密切相关,可能在宫颈癌的发生过程中具有重要作用,它可作为诊断宫颈癌、判断预后的参考指标.     

甲状腺乳头状癌中TSHR基因启动子区5'-CpG岛甲基化研究

目的:探讨促甲状腺素受体(thyroid-stimulating hormone receptor,TSHR)基因启动子区5'-CpG岛甲基化在甲状腺乳头状癌发生发展中的作用,加深对其癌变分子机制的了解.方法:应用实时荧光定量甲基化特异性聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative methylation-specific PCR,qMSP)分别检测90例甲状腺乳头状癌患者癌组织及癌旁正常组织中TSHR基因启动子区5'-CpG岛甲基化情况,并分析其与临床病理参数之间的关系.结果: 在90例甲状腺乳头状癌组织中,TSHR基因启动子区5'-CpG岛发生甲基化的有37例(41.1%,37/90),与之相对应的癌旁正常组织中发生甲基化的有5例(5.6%,5/90),2者差异有统计学意义(P <0.05).TSHR基因启动子区5'-CpG岛甲基化分别与患者的肿瘤大小、病灶多少、局部侵犯、淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05),而与患者的性别、年龄等无关(P>0.05).结论:TSHR基因启动子区5'-CpG岛的甲基化是甲状腺乳头状癌频发的分子事件,这可能是导致甲状腺细胞摄碘率下降的重要原因之一,在甲状腺乳头状癌的发生发展过程中发挥着重要作用.     

14-3-3σ及其在鼻咽癌中的研究进展

14-3-3σ是p53调控的重要肿瘤抑制因子,在细胞周期调控、凋亡、迁移和扩散等过程中起关键作用,影响肿瘤的形成、浸润和转移.14-3-3σ甲基化失活是目前公认的肿瘤发生的重要机制之一,且与鼻咽癌的浸润转移等有关.     

14-3-3σ及其在鼻咽癌中的研究进展

14-3-3σ是p53调控的重要肿瘤抑制因子,在细胞周期调控、凋亡、迁移和扩散等过程中起关键作用,影响肿瘤的形成、浸润和转移.14-3-3σ甲基化失活是目前公认的肿瘤发生的重要机制之一,且与鼻咽癌的浸润转移等有关.

Abstract：

14-3-3σ,an vital tumor suppressor which is regulated by p53,plays a key role in cell cycle regulation, apoptosis, migration and proliferation, affecting tumor formation, invasion and metastasis. The methylation inactivation of 14-3-3σ is widely recognized as one of the mechanisms of tumorigenesis,and be associated with the metastasis of NPC.     

甲状腺乳头状癌中NIS基因启动子区5′-CpG岛异常甲基化状况及其意义

[目的]探讨甲状腺乳头状癌（PTC）钠/碘协同转运体（Na＋/I-symporter,NIS）基因启动子区5′-CpG岛异常甲基化状态及其与临床病理参数之间的关系。[方法]应用实时荧光甲基化特异性聚合酶链反应（real-timemethylation-specificPCR,qMSP）分别检测152例PTC患者癌组织及其癌旁正常组织中NIS基因启动子区域5′-CpG岛甲基化情况,并分析其与临床病理等参数之间的关系。[结果]在152例PTC组织中,NIS基因启动子区域5′-CpG岛甲基化率为30.9%（47/152）,而癌旁正常组织中甲基化率为6.58%（10/152）,两组比较存在显著性差异（P〈0.01）。NIS基因启动子区域5′-CpG岛甲基化与肿瘤病灶数目、淋巴结转移及临床分期有关（P〈0.05）,与肿瘤大小、局部侵犯、性别和年龄等无关（P〉0.05）。[结论]NIS基因启动子区域5′-CpG岛的异常甲基化是PTC频发的分子事件,可能是导致甲状腺细胞摄碘率下降的重要原因之一,在PTC的发生发展过程中发挥着重要作用。     

甲状腺乳头状癌与滤泡状癌的异同探讨

目的　探讨甲状腺乳头状癌与滤泡状癌临床与病理的异同。方法　 42 0例甲状腺癌组织形态学观察、电镜、免疫组化、流式细胞光度术及多参数临床病理分析。结果　甲状腺乳头状癌与滤泡状癌混合型组织结构占绝对优势 ,只是光镜形态不同 ,超微结构观察、免疫组化标记、流式细胞光度测定及临床病理学统计表明两类型未见统计学差异。结论　乳头状癌与滤泡状癌生物学行为相同。     

乳腺癌中14-3-3σ的表达及其与Bcl-2和Bax的相关性研究

目的探讨乳腺癌中及其与Bcl-2和Bax表达的关系,进一步研究乳腺癌中14-3-3σ的表达情况及与14-3-3σ相关的细胞凋亡调控的分子机制。方法应用免疫组织化学方法检测58例乳腺癌组织中14-3-3σ,Bcl-2和Bax的表达情况。对58例乳腺癌组织中14-3-3σ的表达水平与相应临床病理参数进行统计分析,并根据随访资料对患者进行生存分析。应用Spearman相关分析分别统计14-3-3σ表达与Bcl-2和Bax蛋白表达的相关关系。结果 14-3-3σ在乳腺癌组织中阳性表达率为70.7%(41/58),Bcl-2的阳性表达率为62.1%(36/58),Bax的阳性表达率为32.8%(19/58)。14-3-3σ蛋白表达与肿瘤大小、腋窝淋巴结的转移和TNM分期有关。随访的58例乳腺癌病例中,14-3-3σ阳性组的5年累积生存率为51.2%(21/41),14-3-3σ阴性组的5年累积生存率为82.4%(14/17),14-3-3σ阳性组的5年累积生存率明显低于14-3-3σ阴性组,两者差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析结果表明,14-3-3σ蛋白的表达与Bcl-2蛋白的表达呈正相关,而与Bax蛋白的表达呈负相关(P<0.05)。结论 14-3-3σ参与了乳腺癌的发生和发展,并可作为衡量患者预后的新指标。14-3-3σ可能是通过调节凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达,从而参与了抑制肿瘤细胞凋亡的过程。     

14—3—3β基因对卡波氏肉瘤细胞迁移作用的影响

目的：探讨14—3—3β基因（酪氨酸3-加单氧矽色氨酸5-加单氧酶激活蛋白基因）对卡波氏肉瘤（Kaposigsarcoma,KS）细胞迁移的影响。方法：采用脂质体法将14—3—3β基因稳定转染入BCBL—1（HHV-8 positiveand EBV negative human B cells）细胞,Western—Blot检测14—3—3β蛋白的表达,最后利用Transwell法分析14—3—3β基因对BCBL-1细胞迁移的影响（设立空载体组和阴性对照组）。结果：pcDNA3．1／myc—His（-）A-14—3—3β组细胞迁移数目明显高于pcDNA3．1／myc—His（-）A组和阴性对照组,差异具有统计学意义（P〈0．05）;pcDNA3．1／myc—His（-）A组和阴性对照组细胞迁移数目相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：14—3—3β基因能促进KS细胞的迁移。