KIF14在恶性肿瘤中的研究进展

KIF14作为驱动蛋白超家族(KIFS)中的成员,通过调节有丝分裂纺锤体的形成、染色体的分离和胞质分裂的完成,从而促进肿瘤的发生和发展.KIF14的异常已经在人类多种恶性肿瘤中得到证实,其作用的增强可影响有丝分裂的进程而导致肿瘤的发生;其作用降低可导致Akt激酶失活,从而降低细胞的迁移,促进细胞的凋亡.此外,KIF14的缺失也可增强肿瘤对化疗的敏感性.综上所述,KIF14在肿瘤的发生发展过程中起到了重要作用,本文就KIF14与恶性肿瘤的关系做一综述.     

GRK6在胆管癌组织中的表达及对胆管癌细胞增殖和侵袭的影响

目的:检测GRK6在胆管癌组织及相应癌旁正常胆管上皮组织内的表达情况,并探究抑制GRK6的表达对胆管癌细胞克隆增殖及侵袭的影响.方法:通过qRT-PCR及免疫组织化学染色检测GRK6在胆管癌及癌旁正常组织中的表达情况,并分析其与不同临床病理因素之间的关系.通过RNA干扰技术抑制QBC939细胞中GRK6的表达,检测si...     

肝再生磷酸酶-3在肝内胆管癌中的表达及其在肝内胆管癌侵袭转移中的作用

背景与目的探讨肝再生磷酸酶-3(PRL-3)在肝内胆管癌中的表达及其与肝内胆管癌侵袭转移及预后的关系,并进一步研究PRL-3在侵袭转移过程中的作用。     

慢病毒介导的RNA干扰沉默KIF14表达对结肠癌细胞生长和转移的影响

目的:探讨慢病毒介导RNA干扰沉默KIF14表达对结肠癌SW480细胞生长和转移的影响。方法:采用脂质体法将构建的慢病毒靶向siRNA-KIF14干扰载体转入SW480细胞后,采用RT-PCR和Western blot检测KIF14 mRNA和蛋白的表达,MTT法、流式细胞仪和Transwell小室实验分别检测SW480细胞增殖、凋亡和侵袭,Western blot检测上皮-间质转化相关蛋白N-cadherin、E-cadherin和Vimentin的表达。结果:转染SW480细胞后成功下调KIF14 mRNA和蛋白的表达。与未转染细胞相比,下调KIF14的表达可抑制SW480细胞增殖、侵袭和上皮-间质转化,并促进细胞凋亡（P＜0.05）。结论:下调KIF14表达可抑制结肠癌SW480细胞生长和转移。     

KIF14在转移性卵巢癌中的表达及其临床意义

摘 要：［目的］ 探讨KIF14在转移性卵巢癌中的表达及其临床意义。［方法］ 应用免疫组织化学方法及RT-PCR方法检测97例转移性卵巢癌和15例正常卵巢组织中KIF14蛋白及mRNA的表达。统计分析KIF14蛋白表达与临床病理参数及卵巢癌患者总生存（OS）及无进展生存（PFS）的相关性。［结果］ 转移性卵巢癌组织中,KIF14蛋白及mRNA表达水平均高于正常卵巢组织,与肿瘤来源无关;KIF14蛋白表达与PFS和OS均呈负相关,而与患者年龄（P=0.030）、腹水（P=0.019）、肿瘤大小（P=0.014）、受侵范围（P=0.000）、Ki67指数(P=0.022)呈正相关。［结论］ KIF14蛋白及mRNA在转移性卵巢癌中表达上调,且KIF14蛋白的表达与转移性卵巢癌的不良预后密切相关。     

乙肝病毒蛋白和基因在肝内和肝外胆管癌组织中的检测及意义

目的 研究乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染与胆管癌(Cholangiocarcinoma,CC)的关系,并明确其与肝内胆管癌(Intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)和肝外胆管癌(Extrahepatic cholangiocarcinoma,ECC)发生的关系。方法 采用免疫组化、巢式PCR对52例CC(21例肝内胆管癌和31例肝外胆管癌)石蜡包埋组织进行HBV相关蛋白及基因的检测。结果 21例ICC组织中HBsAg阳性表达率为23.8%(5/21),HBcAg阳性表达率为19.0%(4/21),HBV X 基因检出率为33.3%(7/21)。在31例ECC组织中均未检出HBsAg、HBcAg及HBV X基因。结论 HBV感染与ICC发生关系密切,但可能非ECC发生的危险因素。HBV X基因的整合可能参与肝内胆管上皮细胞的癌变过程。     

肝门胆管癌神经周围侵袭的研究进展

肿瘤的神经周围侵袭(perineural invasion,PNI)是一种特殊的恶性肿瘤转移方式,与肝门胆管癌及胰腺癌等多种恶性肿瘤的不良预后相关.肝门胆管癌肿瘤细胞与神经之间的相互作用主要包括细胞形态改变和分子间相互作用.其微环境中的多种分子包括M3毒蕈碱乙酰胆碱受体、趋化因子、神经营养因子-β、MicroRNA及L...     

核转录因子Snail对肝内胆管癌细胞HCCC9810侵袭和迁移能力的影响北大核心CSCD

目的探讨核转录因子Snail对肝内胆管癌细胞HCCC9810侵袭和迁移能力的影响。方法采用小干扰RNA(si-RNA)技术靶向沉默肝内胆管癌细胞HCCC9810中Snail的表达,通过Transwell和划痕实验检测肝内胆管癌细胞侵袭和迁移能力,采用免疫印迹法检测si-RNA处理前后的胆管癌细胞上皮间质转化相关蛋白E-cadherin和Vimentin表达情况。结果 Transwell结果显示靶向沉默Snail后HCCC9810细胞的迁移能力下降(P=0.005),侵袭能力减弱(P=0.007),细胞划痕结果表明细胞迁移能力同样降低(P=0.017),免疫印迹结果表明沉默Snail后E-cadherin表达上调(P=0.004),Vimentin表达下调(P=0.001)。结论 Snail可诱导HCCC9810细胞上皮间质转化,增强其侵袭和迁移能力。     

miR-224-5p靶向调控KIF23通过NF-κB信号通路影响宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的:探索微小RNA-224-5p(miR-224-5p)对驱动蛋白超家族23(KIF23)的靶向关系及对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:采用实时定量PCR(qPCR)检测正常宫颈细胞(H8)和宫颈癌细胞(SiHa、HeLa、MS751、HT-3)中miR-224-5p和KIF23 mRNA表达,选择miR-224-5p表达量最低的HeLa细胞开展后续研究。在HeLa细胞中转染si-KIF23或miR-224-5p,探讨敲减KIF23或过表达miR-224-5p对HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的影响。噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖,Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭,蛋白质印迹法(Western Blot)检测KIF23、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)和NF-κBp65蛋白水平;生物学信息预测和双荧光素酶报告基因实验分析miR-224-5p和KIF23之间的靶向关系;共转染si-KIF23和anti-miR-224-5p,观察miR-224-5p低表达对敲减KIF23诱导的HeLa细胞增殖、迁移、侵袭和NF-κB信号通路活化的影响。结果:miR-224-5p在SiHa、HeLa、MS751、HT-3细胞中表达下调(P<0.05),KIF23 mRNA和蛋白表达上调(P<0.05)。敲减KIF23或过表达miR-224-5p显著降低HeLa细胞存活率、细胞迁移数和侵袭数,并显著抑制CyclinD1、MMP2、MMP9蛋白水平(P<0.05)。另外,敲减KIF23显著降低细胞中NF-κBp65表达量(P<0.05)。miR-224-5p靶向调控KIF23表达。miR-224-5p低表达可以逆转敲减KIF23抑制HeLa增殖、迁移、侵袭及CyclinD1、MMP2、MMP9蛋白表达的作用,以及逆转敲减KIF23抑制NF-κB信号通路活化的作用。结论:miR-224-5p靶向调控KIF23并通过NF-κB信号通路抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭。     

siRNA 靶向沉默 KIF20A 基因对人肝癌 SMMC -7721细胞体外增殖和侵袭迁移的影响

目的：研究 KIF20A 对肝癌 SMMC -7721细胞系增殖和侵袭迁移能力的影响。方法：利用 RNA 干扰技术下调肝癌细胞系 SMCC -7721中 KIF20A 的表达。qRT - PCR 和 Western blot 分别检测细胞 KIF20A 在mRNA 和蛋白水平表达中的变化。CCK -8实验检测增殖能力的改变。Transwell 实验检测迁移、侵袭能力的改变。结果：qRT - PCR 和 Western blot 结果显示 KIF20A - siRNA 能够成功下调 KIF20A 的表达,CCK -8和Transwell 实验分别证实肝癌 SMMC -7721细胞增殖和侵袭迁移能力下降。结论：抑制 KIF20A 的表达能够降低肝癌细胞的增殖和侵袭迁移能力。     

沉默EMI2基因抑制肝内胆管癌HuCCT1细胞的增殖和上皮间质转化

目的:探索早期有丝分裂抑制子2(early mitotic inhibitor 2,EMI2)在肝内胆管癌(intrahepatic cholan-giocarcinoma,iCCA)中的表达及生物学功能,并探讨EMI2对iCCA细胞HuCCT1增殖、侵袭及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal ...     

SALL4 is a novel therapeutic target in intrahepatic cholangiocarcinoma

Intrahepatic cholangiocarcinoma (ICC) is the most common and deadly disease of the biliary tree due to its poor prognosis. Sal-like protein 4 (SALL4), a stem cell marker, has been identified as a potential target for aggressive hepatocellular carcinoma (HCC). In our study, 175 ICC cases with an average age of 55 years were included, and 53% (93/175) were male. And 28 adjacent non-tumor tissues were also collected. The SALL4-positive immunoreactivity was detected in a total of 102 ICC cases (58%), whereas all 28 adjacent tissues showed negative staining. Univariate analysis, showed that the SALL4-positive ICC cases had significantly more frequent lymph nodal metastasis (P = 0.0460), vascular invasion (P < 0.0001), and nerve invasion (P < 0.0001). Furthermore, the strong SALL4-positive cases (n = 7, 5 months) had shorter overall survival, when compared to moderate SALL4-positive (n = 46, 9 months) or SALL4-negative cases (n = 73, 7 months), respectively. Our data also suggest that SALL4 may be involved in the regulation of epithelial-mesenchymal transition (EMT) in ICC. Those results for the first time indicate an oncogenic role of SALL4 in ICC. Therefore, SALL4 may serve as a promising therapeutic target for ICC.     

木香烃内酯对人胆管癌RBE细胞生物学行为的影响及其作用机制

目的：探讨木香烃内酯（costunolide,Cos）对人肝内胆管癌RBE细胞生物学行为的影响及其作用机制。方法：以不同质量浓度（0、2、4、6、8、12、16、20 μg/ml）Cos 作用RBE细胞,通过CCK-8 法、流式细胞术分别检测Cos 对细胞增殖能力和周期分布的影响,Annexin V-FITC/PI 双染法、Transwell 小室实验分别检测Cos 对细胞凋亡和迁移侵袭的影响,qRT-PCR检测与侵袭相关因子MMP2、MMP9 mRNA的表达,Western blotting 检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达。结果：Cos 能够显著抑制RBE细胞的增殖活性（P<0.05 或P<0.01),阻滞细胞周期于S、G2/M期,同时诱导RBE细胞的凋亡(P<0.01)、且呈质量浓度依赖性,Transwell及qRT-PCR 结果显示Cos 能够显著抑制RBE 细胞的侵袭能力、降低侵袭相关转录因子MMP2 和MMP9 mRNA的表达,Western blotting 结果显示Cos 明显抑制p-AKT、Bcl-2、MMP2 及MMP9 的表达,但促进Bax 的表达。结论：Cos 通过抑制PI3K/AKT信号通路降低胆管癌RBE细胞的增殖、迁移及侵袭能力。     

血卟啉光动力对人胆管癌细胞转移潜能影响实验研究

目的：探讨血卟啉衍生物介导的光动力疗法（hematoporphyrinderivative,HPD-PDT）对人胆管癌细胞增殖和侵袭的影响。方法：体外培养人胆管癌细胞系QBC939,经系列浓度的HPD处理,并应用半导体激光治疗仪给予不同强度的光照,CCK-8试剂盒检测HPI〉PDT对人胆管癌细胞增殖的影响;Transwell小室（Matrigel侵袭实验）检测HPD-PDT对人胆管癌细胞体外侵袭能力的影响;酶联免疫吸附试验（enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA）检测细胞培养上清液中分泌的VEGF-C浓度变化;RT-PCR检测细胞中VEGF_CmRNA的表达变化;SP免疫组化染色观察细胞中VEGF-C蛋白的表达变化。结果：CCK-8检测结果显示,HPD-PDT在体外能够抑制QBC939细胞生长,当HPD质量浓度4μg／mL和光照剂量5J／cm2时,实验组A450值为1．54l7±0．0983,明显低于空白对照组的2．0278±0．1986,P〈0．01;细胞生长抑制率达到23．97％,且随着激光能量密度及光敏剂浓度的增加,其抑制作用也越明显。体外侵袭实验结果显示,实验组穿过Matrigel胶的细胞数为13．33±1．155,明显少于空白对照组的31．67±2．517,P〈O,01;ELlSA结果显示,实验组上清液中分泌的VEGF-c浓度为（1558．24l7±97．）143）ng／L,低于空白对照组的（1716．3750±45．0472）ng／L,P〈0．05;RT—PCR结果显示,实验组VEGF_CmRNA／hGAPDH的比值为0．7009±0．1872,明显低于空白对照组的1．5425±0．1078,P〈0．01;SP免疫组化染色结果显示,实验组VEGF—C蛋白表达阳性的细胞百分率为24．52％±2．22％,明显低于空白对照组的56．94％±3．38％,P〈0．01。结论：HPD-PDT能够抑制人胆管癌细胞QBC939的增殖活性及体外侵袭能力,并有可能通过下调VEGF-C因子的表达进一步抑制胆管癌的生长和转移。     

KIF14对肺腺癌A549细胞生物学功能的影响

目的:探讨驱动蛋白超家族蛋白14(KIF14)在肺腺癌(LUAD)中的表达情况及对LUAD细胞生物学功能的影响。方法:通过TCGA、GEO数据库分析KIF14 mRNA在LUAD中表达情况,采用Kaplan-Meier法分析KIF14表达与患者预后的关系。利用单样本基因集富集分析(ssGSEA)和TIMER数据库探索KIF14表达水平与肿瘤免疫浸润的关系。通过功能富集分析注释KIF14在肺腺癌中的生物学功能。进一步进行体外实验和免疫组织化学验证。通过实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot检测KIF14在LUAD细胞系中表达情况;构建KIF14干扰序列并将其转染入A549细胞中,将其分为NC组(转染KIF14阴性对照序列)、siKIF14组(转染靶向KIF14的siRNA序列)。Western blot检测细胞中KIF14沉默效果;CCK-8、平板克隆形成实验检测siKIF14对LUAD细胞增殖能力的影响;TUNEL凋亡实验检测siKIF14对LUAD细胞凋亡能力的影响;Transwell和划痕实验检测siKIF14对LUAD细胞侵袭和迁移能力的影响。结果:生物信息数据...     

The diagnostic and prognostic value of MRP8/MRP14 in intrahepatic cholangiocarcinoma

Myeloid-related protein 8 (MRP8) and 14 (MRP14) are abundantly expressed in several kinds of benign and malignant tumors. However, little is known about their clinicopathological significance in intrahepatic cholangiocarcinoma (ICC), biliary intraepithelial neoplasia (BilIN), intraductal papillary neoplasm of bile duct (IPNB), or inflammatory hepatic biliary ducts epithelium (IHBD). This study aimed to investigate the diagnostic and prognostic values of MRP8 and MRP14 as new biomarkers for ICC. We examined MRP8 and MRP14 expression levels by immunohistochemistry in IHBD (n = 15), BilIN (BilIN1 = 24, BilIN2 = 9, BilIN3 = 5), IPNB (n = 18) and ICC (n = 416). The differential diagnostic and prognosis values were also evaluated. The results showed that the ratio of tumor-infiltrating MRP8 and MRP14 positive immune cells, relative to biliary epithelial cells, was significantly increased in ICC tissues compared with nonmalignant tissues, including IHBD, BilIN1, BilIN2, BilIN3, and IPNB (P value < 0.05). In addition, over-expression levels of MRP8 and MRP14 were correlated with overall survival (OS) and time to recurrence (TTR) by univariate analysis; MRP8/MRP14 combination was an independent prognostic factor for OS and TTR. MRP8 and MRP14 expression might help to identify the benign bile duct diseases from ICC, as high expression of MRP8 and MRP14 suggests a poor prognosis after surgical resection.     

circAGFG1靶向miR-4429对胆管癌QBC939细胞增殖、迁移与侵袭的影响及其可能的机制

目的：探讨circAGFG1对胆管癌QBC939细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法：收集2017年4月至2019年10月于联勤保障部队第九八八医院接受手术的33例胆管癌患者的癌组织及对应癌旁组织,qPCR法检测组织中circAGFG1和miR-4429表达水平。体外培养胆管癌QBC939细胞,分别转染si-circAGFG1、miR-4429 mimic、共转染si-circAGFG1与anti-miR-4429后,采用CCK-8法和克隆形成实验检测对细胞增殖的影响,划痕实验和Transwell法分别检测对细胞迁移和侵袭的影响,WB法检测对细胞中E-cadherin和N-cadherin蛋白表达的影响。双荧光素酶报告基因实验验证circAGFG1和miR-4429之间的靶向调控关系。结果：胆管癌组织中circAGFG1的表达量高于癌旁组织（3.89±0.26 vs 1.00±0.08,P<0.05）,而miR-4429的表达量低于癌旁组织（0.28±0.03 vs 1.00±0.05,P<0.05）。干扰circAGFG1或过表达miR-4429后,QBC939细胞...