野生型Trp-和Glu-鼠疫菌株对Trp和Glu前体产物利用的研究

从我国内蒙古、河北和宁夏长爪沙土鼠鼠疫疫源地分离的鼠疫菌株,在含色氨酸各前体产物的限定培基上生长良好,而从新疆精河和乌苏长尾黄鼠鼠疫疫源地分离的菌株,在相同的限定培基上则不生长。根据Trp~-鼠疫菌株利用色氨酸各前体产物的差别,可将分离自我国不同疫源地的色氨酸依赖型鼠疫菌株区别开。 从我国新疆和田昆仑山山地喜马拉雅旱獭疫源地和洛浦的鼠疫患者、云南家鼠疫源地及内蒙古布氏田鼠疫源地分离的不同营养依赖型Glu~-菌株对谷氨酸前体产物的利用亦有差别。     

吉林西北草原鼠疫菌表型性状的研究

中国白城兵器试验中心场区位于吉林西北部草原，地处吉林、黑龙江和内蒙古３省（区）的交界处，属于松辽平原达乌尔黄鼠鼠疫自然疫源地的一部分，亦是一块古老的鼠疫自然疫源地［１］。研究该场区疫源地的状态和该疫源地鼠疫菌的性状，不仅对该地区鼠疫的监测、防治具有指导意义，在军事上更具有重要的参考价值。本文将该地区分离的鼠疫菌，从不同分离时间、不同宿主挑选出具有代表性的３０株鼠疫菌，对其生化、毒力和营养需求等表型性状进行系统的研究，以便更好的指导该地区的鼠疫防治工作。１ 材料和方法１．１ 菌株 １９５７年以来分离…     

黄土高原A型鼠疫菌株特性的研究

1982年纪树立等将中国各疫源地鼠疫菌分成17个生态型,分自甘宁黄土高原阿拉善黄鼠疫源地的鼠疫菌株被命名为黄土高原A型。1984年笔者等发现该型菌株有两种营养需求类型。为查明这两种营养突变菌株与其它性状的关系,以分析其流行病学意义,进行了本研究。     

吉林西北部草原鼠疫菌表型性状的研究

中国白城兵器试验中心场区位于吉林西北部草原,地处吉林、黑龙江和内蒙古3省(区)的交界处,属于松辽平原达乌尔黄鼠鼠疫自然疫源地的一部分,亦是一块古老的鼠疫自然疫源地[1].研究该场区疫源地的状态和该疫源地鼠疫菌的性状,不仅对该地区鼠疫的监测、防治具有指导意义,在军事上更具有重要的参考价值.本文将该地区分离的鼠疫菌,从不同分离时间、不同宿主挑选出具有代表性的30株鼠疫菌,对其生化、毒力和营养需求等表型性状进行系统的研究,以便更好的指导该地区的鼠疫防治工作.     

我国鼠疫耶尔森菌毒力特征研究

目的 研究我国各疫源地分离的鼠疫耶尔森菌(以下简称鼠疫菌)毒力特征.方法 以1943-2012年我国11块鼠疫自然疫源地不同时间、地区、宿主、媒介体内分离的894株鼠疫菌作为研究对象.将每株菌的37℃24h培养物用灭菌生理盐水制成菌悬液,比浊后稀释为2×101、2×102、2×103、2× 104、2×l05、2× 106、2×107、2×108、2×109个/ml,分别取0.5 ml皮下注射于小白鼠鼠鼷部,每组5只动物,分笼饲养观察14 d,动物死亡后取淋巴、肝、脾、肺、心组织进行细菌培养,以分离出鼠疫菌为特异性死亡,并计算半数致死量(LD50).结果 894株代表性菌株中,87.36％(781/894)属于强毒菌,4.36％(39/894)为中等毒力株,8.28％(74/894)为弱毒菌;对不同生态型鼠疫菌株进行毒力比较,青藏高原喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地的青藏高原型、祁连山型鼠疫菌绝大多数属于鼠疫强毒株,分别占94.42％(457/484)、93.10％(27/29).结论 我国各鼠疫自然疫源地鼠疫菌的毒力特征以鼠疫强毒株为主.     

两株Pst1-野生型鼠疫菌的生物学特性

Pstl 是鼠疫菌产生的一种细菌素,此种物质可抑制血清型1型假结核菌生长。除苏联少数鼠疫自然疫源地循环着 Pstl~-的野生型鼠疫菌外、从世界各疫源地所分离到的野生型鼠疫菌中绝大多数都能产生 Pstl。在我国,到目前为止仅发现两株不产生 Pstl 的野生型鼠疫菌。     

中国鼠疫菌某些生化特征及地理分布

目的 探讨中国鼠疫菌株生化性状及地理分布特征。方法 采用常规方法,研究我国现有11种类型的鼠疫自然疫源地2 370株鼠疫菌酵解麦芽糖、鼠李糖、蜜二糖、阿胶糖、甘油及脱氮反应的变化。结果 根据测定结果,与地理分布生物群落联系起来,可将中国鼠疫自然疫源地鼠疫菌分为新的17个生化型:青藏高原青海田鼠鼠疫自然疫源地分离的鼠疫菌定名为川青高原型,新疆准噶尔盆地大沙鼠鼠疫疫源地鼠疫菌定名为准噶尔型,云南省玉龙县大绒鼠、齐氏姬鼠分离暂定名为玉龙型。青藏高原喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地生化性状较为复杂,含5种类型生化型,其中藏南地区1983年后新增加了27个疫源县,本研究发现青藏高原型菌株不仅只分部在藏北高原,在藏南地区已有分布,且岗底斯山型菌株原来只分布在西南地区的仲巴、普兰,现已延伸到藏南地区。还发现一些鼠疫自然疫源地鼠疫菌生化特性有交串现象,如云南省家、野鼠鼠疫自然疫源地鼠疫菌,内蒙古高原长爪沙鼠、达乌尔黄鼠鼠疫自然疫源地。结论 中国鼠疫菌对糖酵解特性较稳定,鼠疫菌生化型在各疫源地呈明显的地区性分布,与主要宿主、地理气候条件、植被等密切相关,分为17个生化型。     

青海田鼠鼠疫杆菌鼠疫菌素Ⅰ敏感性试验

史书文等(1983)研究证明,中国各鼠疫自然疫源地中大多数生态型鼠疫菌可产生PstI但对PstI不敏感,仅在锡林格勒高原疫源地分离出的鼠疫菌能产生PstI且对PstI敏感,这也是锡林格勒高原布氏田鼠型菌株的一项重要特征[1].四川省石渠县及青海省称多县于1997年和2001年相继被发现为鼠疫自然疫源地以来,李敏等[2]对该疫源地青海田鼠体内分离的鼠疫杆菌其生物学特性进行了分析,初步确定为青海田鼠型鼠疫菌,为了明确该型菌株是否也具有对PstI敏感的特性,所以我们对青海称多及四川石渠两地自青海田鼠及其体外寄生蚤体内分离的鼠疫菌进行了PstI敏感性试验.     

自四川石渠县分离3株野生型鼠疫噬菌体的鉴定

1997年四川石渠县首次被证实为鼠疫疫源地〔1,2〕,在从自毙青海田鼠中分离鼠疫菌的同时 ,获得 3株野生型鼠疫噬菌体 ,并对其生物学特性进行了鉴定 ,结果报告如下。1　材料1 1　噬菌体1 1 1　被试鼠疫噬菌体　自石渠县俄多玛地区的自毙青海田鼠中分离 ,编号分别为 0 4、15 7和 2 12。1 1 2　标准鼠疫噬菌体　由青海省地方病防治研究所生产 ,效价为 10 - 11批号为 980 1。1 2　试验菌株　强毒鼠疫菌 19株 ,其中 14 1标准株 1株 ;自石渠县分离的鼠疫菌 1株 (菌号川 36) ;其余菌株均来自我国各鼠疫疫源地共 17个生态型。鼠疫弱毒株共 5株 ,菌号…     

陕西省鼠疫耶尔森菌MLVA分型研究

目的 掌握陕西省鼠疫耶尔森菌分离株的MLVA基因分型特征,阐明不同疫情年份菌株间的遗传进化关系,为今后陕西省鼠疫的监测防治工作提供科学依据。方法 采用MLVA(14+12)方法,对分离自陕西省鼠疫疫源地的66株鼠疫耶尔森菌进行基因分型,利用BioNumerics(Version7.6)软件对分型结果进行聚类分析。结果 66株鼠疫耶尔森菌分为A、B、C群,根据分离时间聚集成为相应群,A群包含42株菌,其中39株菌分离自2000-2001年,B群包含16株菌,其中15株分离自2006年,C群含8株菌,其中6株分离自1987-1988年。基因型分为19种,8个基因型为多菌株基因型,其他型为单菌株基因型。结论 陕西省鼠疫菌MLVA基因型具有多态性,不同疫情年份菌株主导的基因型不同,MLVA分型能够很好区分陕西省不同年代鼠疫菌株,可用于鼠疫菌株的溯源分析。     

贵州省自然疫源地鼠疫菌毒力试验

贵州省2000年首次在兴义市从跳蚤、黄胸鼠及患者体内分离到鼠疫菌．证实了贵州省存在鼠疫自然疫源地。根据所分离的鼠疫菌株．作者筛选了不同时间、不同宿主所分离的6株鼠疫菌进行毒力试验，现将结果报告如下。     

云南省不同型鼠疫自然疫源地鼠疫菌生化特性比较

目的 通过对云南省不同流行地区、宿主、媒介分离出的鼠疫菌生化特性及毒力因子Pst Ⅰ的鉴定结果,比较云南省家、野鼠型鼠疫自然疫源地及新发现玉龙县鼠疫疫源地鼠疫菌生化特性的差别及疫源地相互之间的联系.方法 采用资料回顾方法,收集用试管法鉴定的云南省218株鼠疫菌生化特性(酵解鼠李糖、甘油、麦芽糖、阿胶糖、密二糖)和毒力因子Pst Ⅰ的结果,利用SAS 8.0统计软件进行汇总,采用双向无序R×C表χ2检验的Fisher确切概毕法对鉴定结果进行分析.结果 收集野鼠型鼠疫疫源地鼠疫菌48株.其中有1株发酵麦芽糖,48株均发酵甘油;收集家鼠型鼠疫疫源地鼠疫菌165株,其中有1株不发酵麦芽糖、发酵甘油,1株脱氮阴性,属变异菌株;收集玉龙县新分离鼠疫菌5株,均发酵甘油、麦芽糖.对不同疫源地鼠疫菌麦芽糖、甘油发酵试验结果进行比较,差异有统计学意义(P<0.01);对鼠疫菌鼠李糖、阿胶糖、密二糖发酵试验和毒力因子Pst Ⅰ进行比较.差异无统计学意义(P>0.01).结论 云南省不同型鼠疫自然疫源地鼠疫菌生化特性不同,其中家、野鼠型疫源地鼠疫菌生化特性有交串现象;玉龙县鼠疫菌生化特性与家、野鼠型疫源地鼠疫菌截然不同,与西藏北部旱獭鼠疫菌的生化特性接近.     

甘肃省鼠疫耶尔森菌多位点可变数目串联重复序列基因分型及地区分布

目的 采用多位点可变数目串联重复序列(MLVA)对甘肃省鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)进行基因分型,探讨甘肃省鼠疫菌地区分布特征。方法 选取1962-2014年间甘肃省各市县(区)不同生态型的鼠疫菌198株,培养并提取基因组DNA。采用14+12对引物进行PCR扩增,产物进行测序,确定每对引物串联重复序列(VNTR)位点的拷贝数。应用BioNumerics 5.10软件对菌株的VNTR位点拷贝数进行聚类分析。结果 甘肃省鼠疫菌分为10个群,群内的菌株依据分离地点继续细化为5-28个分支。10个群分别为:阿拉善黄鼠疫源地菌株聚为1个群;甘南高原疫源地菌株聚成1个群;阿克塞县菌株分成2个群,为当金山群和加尔乌宗村群;肃北县菌株分为3个群,为马场群、党城湾镇群和鱼儿红群;玉门市菌株聚集在肃北县鱼儿红群内;肃南县菌株分为3个群,为大河乡群、马蹄乡群和康乐乡群。结论 MLVA可以清晰地区分甘肃省不同鼠疫疫源地的菌株,将疫源地内菌株继续细分为不同分支,直至精确的分离地点。MLVA分型方法可用于鼠疫菌株的溯源分析。     

四川省德格县2株疑似喜马拉雅旱獭鼠疫菌株的鉴定

目的 通过对四川省德格县自毙喜马拉雅旱獭体内分离出的2株疑似鼠疫菌株进行生化特征、毒力鉴定,确定四川省是否存在旱獭鼠疫自然疫源地.方法 菌株鉴定采用细菌形态染色、培养特性、鼠疫噬菌体裂解试验、生化及糖醇类酵解试验、毒力因子、毒力、营养需求、质粒、基因检测及基因分型方法进行.结果 光镜下,2株被检菌株均为革兰染色阴性,呈球杆状,两极浓染、两端钝圆;在赫氏普通琼脂上24-48 h,被检菌株形态呈中心发暗,有黄褐色粗糙颗粒,边缘不整呈锯齿状、薄而透明的花边;在赫氏血琼脂上,菌落隆起,色泽深,花边消失或残留锯齿状痕迹.2株被检菌株均能酵解阿胶糖、麦芽糖、甘油,不酵解鼠李糖、密二糖,脱氮阳性;毒力因子均为F1+、VW+、Pgm+,Pst I+;携带鼠疫菌常见的质粒,相对分子质量(Mr)为6.0×106、45.0×106、65.0×106,具有鼠疫菌的毒力相关质粒基因Pla、calfl、LcrG;对小鼠的毒力试验,绝对致死量(LD100)均为50个菌;营养需求上,对苯丙氨酸、甲硫氨酸依赖;基因型是Genomovar 5;与假结核菌(PTB)在鉴别培养基尿素、奥腾、枸橼酸盐上有明显区别,含鼠疫菌特有的Pst I和F1抗原,22℃下能被鼠疫噬菌体完全裂解.含有鼠疫菌特有的3a片段.结论 四川省德格县喜马拉雅早獭体内分离的2株疑似菌株均为鼠疫耶尔森菌,具有青藏高原喜马拉雅旱獭型鼠疫菌株的特性,四川省存在喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地.     

青海田鼠鼠疫杆菌鼠疫菌素I敏感性试验

史书文等(1983)研究证明，中国各鼠疫自然疫源地中大多数生态型鼠疫菌可产生PstI但对PstI不敏感，仅在锡林格勒高原疫源地分离出的鼠疫菌能产生PstI且对PstI敏感，这也是锡林格勒高原布氏田鼠型菌株的一项重要特征。四川省石渠县及青海省称多县于1997年和2001年相继被发现为鼠疫自然疫源地以来，李敏等对该疫源地青海田鼠体内分离的鼠疫杆菌其生物学特性进行了分析，初步确定为青海     

青海地区鼠疫菌株毒力特性的研究

本文对青海省喜马拉雅旱獭氨疫自然疫源地内的３８３株鼠疫菌的毒力测定结果进行了分析。有３７３株属于强毒鼠疫菌，７株中等毒力菌，３株为自然界分离的弱毒鼠疫菌。于同一地区不同流行年代、不同宿主分离的鼠疫菌毒力无明显差异，青藏高原型菌株毒力比祁连山型菌株毒力强。缺失Ｐｇｍ、ＶＷ因子的菌株大多毒力减弱，但有的也保持了较强毒力。另有１２株经过长期人工培养基传代保存的菌株毒力明显降低。     

四川省石渠县鼠疫菌脉冲场电泳分析

目的：确定四川省石渠县分离的鼠疫菌株的类型。方法：脉冲场电泳。结果：四川分离的鼠疫菌中出现3个图型。从鼠疫病人分离到的菌株与青海田鼠体分离的菌株明显不同，而与强毒的青藏高原型菌株相似；青海田鼠体分离的菌株与内蒙古布氏田鼠型菌株相似，与其他地区的菌株均不相同。结论：青海田鼠间可能存在一种独立的鼠疫自然疫源地，1999年四川省石渠县发生的人间鼠疫并非由该地占优势的青海田鼠型菌株引起，可能在该疫源地之外感染。     

青藏高原青海田鼠鼠疫自然疫源地的发现与研究

目的：确定该病源地鼠疫主要贮存宿主、主要传播媒介和分离自青海田鼠体内鼠疫菌的生物型;确定青海田鼠鼠疫自然疫源地分布范围,动物鼠疫流行特征。方法：通过现场调查和实验的方法,研究青海田鼠对鼠疫菌的感受性,蚤的媒介效能,鼠疫菌生物学性状及分子生物学特征;研究青海田鼠的分布范围,活动规律,生态学指标以及动物鼠疫流行规律。结果：该地区青海田鼠为鼠疫主要贮存宿主;细钩黄鼠蚤和直缘双蚤指名亚种是主要传播媒介。1997年和2000年从青海田鼠体内分离的鼠疫苗生物型属田鼠型鼠疫菌,并具有鼠疫强毒菌的典型特征,其分子生物学特征与我国其他疫源地中的鼠疫菌株明显不同,提示该地区存在一种新类型的鼠疫自然疫源地,其中的鼠疫菌属于一单独的型别。青海田鼠动物鼠疫流行季节4－9月,流行高峰6月中旬至8月上旬,呈单峰型。目前,已知在四川省石渠县和青海省称多县存在青海田鼠鼠疫自然疫源地,疫源地面积为21000km^2。结论：四川省石渠县鼠疫自然疫源地是青藏高原青海田鼠鼠疫自然疫源地。     

云南鼠疫耶尔森氏菌脂肪酸成分分析

目的利用脂肪酸成分分析方法获得云南鼠疫耶尔森氏菌菌株脂肪酸组成的本底资料,并建立云南鼠疫耶尔森氏菌菌株的数据库。方法选择历年来从云南不同疫源地分离到的146株鼠疫耶尔森氏菌进行了菌体脂肪酸成分分析。结果云南鼠疫耶尔森氏菌菌株的主要脂肪酸成分为16∶0酸,环式17∶0酸,3羟基14∶0酸和ω7 c16∶1酸以及十八碳单烯酸,与宋亚军等的分析结果一致,与M ID I公司Sherlock系统的菌库中的数据存在一些差异。结论建立云南鼠疫耶尔森氏菌菌株的脂肪酸组成数据库。     

我国某些疫源地鼠疫菌的营养突变

本文证实我国宁夏阿拉善黄鼠疫源地鼠疫菌株除 Leu~-外,尚有大量 Leu~+株存在。其分布与宿主、地区无关。宁夏灵武长爪沙土鼠疫源地鼠疫菌株除 Trp~-株外,尚有 Leu~-、Leu~+株存在。青海喜马拉雅旱獭疫源地,地处两山间的沟塘海拔4300公尺以下的玉树的下拉秀、囊谦的党拉、癿扎等地分离的鼠疫菌株为 His~-。地处海拔5000公尺以上的其他地方,则为 His~+。新疆北天山东段灰旱獭疫源地的鼠疫菌株,大部分为 Trp~-Thr~-,尚有少数 Ile~-Glu~-突变株。一般来说,鼠疫菌的营养突变与某种生化特征相关联。