HIV抗体外部对照质控血清的制备及评估

目的 制备HIV抗体弱阳性外部对照质控血清并进行评估.方法 利用HIV抗体试剂盒中的阳性对照与正常人血清按一定比例混合,制备质控血清.ELISA法进行质控效果和稳定性检验.结果 ①在室内质控方面:自制质控血清与万泰公司质控血清有相似的效果.②稳定性检验:质控血清在4℃保存至少稳定2 mo,室温保存稳定1 mo,-20℃冻存至少稳定1 y.③反复冻融和加入硫柳汞对检测结果没有影响.结论 质控血清制备方法简便,易于保存,从质控效果和稳定性两方面评估符合国家质控物要求,可用于HIV抗体检测的室内质控.     

巨细胞病毒IgM抗体自制室内质控血清的应用及评价

目的自制巨细胞病毒IgM抗体(HCMV-IgM)弱阳性外部对照质控血清,评价其临床应用的可行性。方法收集我院HCMV-IgM抗体阳性血清分别与健康人血清混合进行倍比稀释,选择S/CO在1.5~3之间稀释度制备室内质控血清,连续检测20批次,采用"即刻法"分析检测结果,20批次后结果绘制Levey-Jennings质控图,监测室内质控动态。结果自制HCMV-IgM质控血清与北京贝尔有限公司提供的质控血清,两者结果进行对比,CV值比较无统计学差异(P0.05),自制HCMV-IgM质控血清变异系数(CV)均小于20%,稳定性符合国家质控物要求。结论自制HCMV-IgM质控血清有很好的稳定性和精密度,可作为实验室检测HCMV-IgM抗体的室内质控血清。     

自制HBsAg弱阳性外部对照质控血清的应用

目的 制备一种能长期使用的比较稳定的HBsAg弱阳性质控血清.方法 用HBsAg试剂盒中剩余的阳性血清进行稀释,选取合适的稀释倍数稀释一定量的血清,与购买的质控血清同时用于试验中,分别收集20d的质控数据,进行分析比较.结果 自制血清有很好的稳定性、精密度.结论 自制血清能作为日常HBsAg检测中的质控血清.     

自制人类免疫缺陷病毒抗体等质控血清及室内质控方法建立研究

目的用人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体阴性血清梯度稀释HIV抗体酶联免疫试剂盒中阳性对照,制备室内质控血清。建立艾滋病酶联免疫检测的室内质控方法。进行方法可靠性和质控血清稳定性的评价,同时比较两个厂家生产的HIV抗体试剂盒进行自制质控血清室内质控结果以及自制丙型肝炎抗体、乙型肝炎表面抗原血清的室内质控结果的评价。方法将自制的HIV质控品与卫生部HIV质控品按照HIV抗体检测的SOP文件用HIV抗体试剂随患者进行检测,每天测定吸光度,计算S/CO値。连续检测20次计算S/CO值和s,以x±2s为控制限,以x±3s为失控限绘制质量控制框架图。每天随患者标本各加入1份自制质控品和1份卫生部购质控品进行质控将其各自的S/CO描在质控图上,应用多规则质量控制原则分析以发现当天测定批的误差以及误差原因。控制每批次检测的重复性,观察试剂盒间的差异进行两种质控血清质控结果的比对研究。结果自制HIV抗体质控血清方法科学可靠,减少了基质效应,能确保结果的准确性和可靠性。结论稀释阳性对照制备质控品,建立酶联免疫室内质控方法也适用于乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎抗体等其他免疫项目的酶联免疫室内质控。不同厂家试剂用自制质控品进行质控结果无差异。     

自制HIV抗体外部对照质控血清探讨与评估

目的:自制HIV抗体质控血清并评估.方法:利用HIV抗体试剂的阳性对照与正常人血清按比例混合制备质控血清.ELISA法进行质控效果和稳定性检验.结果:与万泰公司质控血清有相似的效果.结论:质控血清制备方法简便,易于保存,质控效果和稳定性评估符合国家要求,可用于HIV抗体检测的室内质控.     

自制抗-HIV临界值质控血清的室内质控及评价

目的 自制抗-HIV临界值质控血清并对其进行评价.方法 收集临床多份健康者血清充分混匀、灭活、离心取上清,并将试剂盒多批号阳性对照倍比稀释,以S/Co约为2.5的稀释梯度配制临界值质控血清,按1年使用量配制,无菌分装,-20℃冷冻保存.每次使用前与临床标本及阴、阳性对照一同严格按试剂盒说明书进行操作.结果 自制质控血清其均匀性测定:x-=2.47,s=0.23,CV=9.27％;批内精密度测定:x-=2.51,s=0.31,CV=12.36％;连续测定一年,其x-在2.39～2.72之间变动,CV在11.63～13.94％之间.结论 自制抗-HIV质控物制备方便,质量可靠,其均一性、稳定性符合要求,可满足临床检测室内质控需要.     

“即刻法”在实时荧光定量PCR检测中的有关问题探讨

“即刻法”长期以来用于检测标本量较少,间隔时间较长,试剂盒同一批号连续测20次难度较大的项目,广泛应用于生化、临检、酶免的室内质控工作中。笔者在实时定量PCR检测HBV的试验中,使用“即刻法”进行室内质控,现报道如下。1材料与方法1.1仪器与试剂HBV-PCR荧光定量检测试剂盒(深圳匹基生物工程股份有限公司,批号20050702);7300型PCR仪(ABI公司)。1.2定值质控血清阳性质控物:用本中心健康人血浆和HBV-PCR阳性血浆混合,使混合血浆的HBV-PCR拷贝数约为(1-3)×104/ml,螺口冷冻管分装(110μl/支),一次分装30支,-20℃保存。阴性质控…     

抗-HIV临界值质控血清的制备及应用

在实际工作中,笔者发现ELISA抗-HIV的检测会被许多因素所影响,导致检测结果出现较大偏差,为克服系统误差(包括试剂盒质量问题,仪器设备的误差如水浴箱和冰箱温度波动过大,酶标仪读数的准确性,配制溶液的水质量的好坏等)和随机误差(偶然误差,即由于操作人员操作不当所造成,如试剂和样品的误加、漏加),在日常的抗-HIV检测中有必要建立起较为完善的质量监控体系,设立阴性和阳性对照且通过阴、阳性对照的优化计算得出一个临界值(cut off),以衡量每一受试对象的光密度值是否超过了cut off值,因此,在实验中加入一个质控物即临界值质控血清,对实验质量进行动态控制.目前定值临界值质控血清需自制,笔者采用阳性对照血清自制临界值血清,在实践中取得了满意的效果.     

自制血清总胆红素质控品研究

目的自制胆红素室内质控品作为测定总胆红素（TBIL）参比血清,评价自制室内质控品是否符合临床要求,降低检验成本。方法收集日常工作中TBIL高、中、低值标本分别混合后分装并加入赋形剂,经低温干燥至干粉,低温避光冷藏,即为自制质控品。结果自制室内质控品在26d内与新鲜混合血清的TBIL比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论自制TBIL室内质控品符合室内质控要求,该分装方法用于自制室内质控品,可降低检验成本。     

自制C反应蛋白室内质控品及其质量评价

目的自制医院日常使用的检测C反应蛋白(CRP)的室内质控血清,评价自制质控品是否符合临床质控要求。方法收集日常工作中CRP增高患者的血清,混合后用灭活的健康体检者血清稀释,用Eppendolf管分装后,-20℃保存备用。结果自制质控品无明显的瓶间差异,复融后常规测定,结果显示其有较好的重复性和稳定性,质控效果良好。结论自制CRP质控品符合临床使用的要求,可作为室内质量监测的质控品。     

乙肝病毒五项血清标志物定值质控血清的制备及临床应用

目的 探讨乙肝病毒五项血清标志物(即HBsAg,HBsAb,HBeAg,HBeAb,HBcAb)定值质控血清的制备方法及在临床免疫实验室室内质控中的应用.方法 收集一年用量的乙肝病毒五项血清标志物检测全部阴性的混合血清,分别加入适量试剂厂家提供的阳性对照血清配比成所需浓度,置-30℃保存.最终浓度由卫生部临床检验中心提供的定值质控血清标定.结果 经过长期实验观察,自制质控血清复融后能稳定3～5 d,-30℃保存能稳定6 mo.结论 自制乙肝病毒五项血清标志物定值质控血清经济、便捷、稳定,可以满足临床免疫实验室室内质控的要求.     

自制血清蛋白质电泳质控品用于室内质控的研究

目的 比较血清蛋白质电泳自制质控品和Helena质控品的性能,探讨自制质控品在血清蛋白质电泳室内质量控制中的应用.方法 用美国Helena SPIFE 2000全自动快速电泳分析系统,分别测定Helena质控品和自制质控品的批内精密度、凝胶板间的差异、自制质控品的日间精密度和稳定期.结果 自制质控品与Helena质控品相关性好,电泳后蛋白质各组分的批内CV均小于5%;2种质控品在琼脂糖凝胶板间的CV也均小于5%;自制质控品的日间CV除α1球蛋白7.36%、β球蛋白5.50%外,其余均小于5%.结论 自制质控品的性能符合室内质量控制的要求,可在常规工作中应用.     

丙酮酸钠在ALT赖氏法检测室内质控中的应用

用ALT赖氏法试剂盒内丙酮酸钠标准液作为ALT赖氏法检测室内质控物,每次随样本一同检测,与购置的质控血清进行比较,结果表明丙酮酸钠优于质控血清,结果稳定可靠,使用方便.     

初筛实验室抗-HIV临界值质控血清的制备及应用

目的掌握抗-HIV弱阳性外部对照质控血清(临界值质控血清)的制备方法。方法用抗-HIV抗体阴性的血清倍比稀释试剂盒中的抗-HIV阳性对照血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各稀释度血清,计算s/A值。依据所需外部对照质控血清的抗-HIV强弱来确定某一稀释度为配制稀释度,按配制稀释度的年需求量来配制抗-HIV弱阳性外部对照质控血清。结果采用倍比稀释法可获得均匀、无菌、稳定的抗-HIV弱阳性外部对照质控血清。结论倍比稀释法是制备抗-HIV弱阳性外部对照质控血清质控物经济方便、快捷、可靠的方法。     

自制复合质控品在α、β-地中海贫血基因检测中的应用价值

目的探讨自制复合质控品在α、β-地中海贫血基因检测中的应用价值。方法将2017年9月至2018年12月检测出α、β-地中海贫血基因的阳性标本等比例混匀,分装,-70℃保存备用。试验前将自制复合质控品取出,室温复溶20 min,和待测标本一起检测,评价其DNA水平及纯度、稳定性、阳性预测值、阴性预测值。结果共检测126次,自制复合质控品DNA水平及纯度均满足试剂盒要求,阳性预测值为100.0%,阴性预测值为0,稳定性良好。结论自制复合质控品制备方法简单,成本低,稳定性良好,可用于α、β-地中海贫血基因检测室内质控。     

乙肝表面抗原室内弱阳性质控物的制备及其应用评价

目的制备长期使用且稳定性好的HBsAg室内弱阳性质控血清。方法以小牛血清磷酸盐缓冲液按不同稀释倍数1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32等比例梯度稀释HBsAg阳性血清;以2种厂家提供不同批号的检测试剂,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体夹心法对HBsAg阳性质控血清进行连续6个月检测,以此对HBsAg阳性质控血清稳定性进行评价。结果以吸光度值/临界值(S/CO)1.0~3.0为参考标准,确定该实验室HBsAg阳性质控血清的最佳稀释度为1∶8[其S/CO值为2.42,变异系数(CV)为4.72];且该质控血清在不同试剂使用稳定性较好(其S/CO范围为2.41~2.82,CV范围为4.24%~8.68%);HBsAg阳性质控血清连续6个月检测结果CV范围为8.71%~9.86%(CV10%)。结论自制HBsAg质控血清具有很好的稳定性和精密度,可作为临床常规HBsAg检测中的室内质控血清。     

人巨细胞病毒IgG抗体质控盘的建立

目的建立人巨细胞病毒IgG抗体质控盘,为以酶联免疫法和化学发光法为原理的人巨细胞病毒IgG抗体诊断试剂盒的性能评价提供可靠的质控物质。方法通过试剂盒筛选出人巨细胞病毒IgG抗体的阳性和阴性血清,将10份不同来源的阳性血清作为质控盘的P1~P10,5份不同来源的阴性血清作为质控盘的N1~N5,5份阳性血清混合制成质控盘的L1~L3。之后,用不同的试剂盒验证建立的质控盘。结果六家公司的试剂盒对本质控盘进行的准确性、特异性和检测限的验证结果均符合要求。对本质控盘的稳定性研究结果表明,质控盘的稳定性良好。成功建立了人巨细胞病毒IgG抗体质控盘。结论本研究建立的质控盘可用于以酶联免疫法和化学发光法等原理的人巨细胞病毒IgG抗体诊断试剂盒的性能评价。     

基层医院室内质控品的自制及应用

目的自制室内质控品作为测定凝血酶原时间（PT）和活化部分凝血活酶时间（APTT）参比血浆，评价自制室内质控品是否符合临床要求，降低检验成本。方法收集日常工作中PT、APTT均正常且常见传染病检测均为阴性的临床样本，混合后分装，置-20℃冷冻备用。结果自制室内质控品（冷冻混合血浆）在60d内与新鲜混合血浆的PT、APTT比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论自制室内质控品符合室内质控要求，此分装方法可用于自制室内质控品，可降低检验成本。     

云南省生化EQA中冻干质控血清与新鲜混合人血清变异度比较与分析

目的为了解冻干质控血清与新鲜混合人血清在该省室间质评(EQA)中的变异度(CV).方法选择4家省级医院、4家地州级医院检验科对两个样品进行生化14项测定,其中新鲜混合人血清同时进行生化14项批内5次测定,并计算其CV进行比较.结果新鲜混合人血清生化14项平均CV较冻干质控血清小,省级医院新鲜混合人血清的单项CV相对下降率为85.7%,地州级医院为50%.结论生化EQA中采用新鲜混合人血清作为质控物的变异度较冻干质控血清小,但只有在参控实验室按要求做好室内质控的前提下才能体现新鲜混合人血清变异度小的优势.     

正常凝血质控血浆质量考察

目的考察自制冻干正常凝血质控血浆的性能。方法测定连续3批自制血浆各凝血因子活性等指标,以考察制备工艺的稳定性与可靠性;以活化的部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)和pH为测定指标,评价正常凝血质控血浆的批内均一性和稳定性;同时以新鲜混合血浆为对照,将自制产品与进口试剂进行比较。结果连续3批自制血浆的APTT、PT、TT均在正常值范围内,pH值稳定,各凝血因子的活性均>0.80IU/ml。变异系数APTT为0.6%(n=20),PT为0.8%(n=20),TT为2.2%(n=20)。血浆复溶后,4℃冰箱和室温下放置,8 h内血浆的APTT、PT、TT及pH均保持了较好的稳定性,其中变化最大的APTT极差为2.26s。冻干血浆4℃及-20℃存放条件下,30个月内血浆的APTT、PT、TT及pH亦保持了较好的稳定性,其中变化最大的APTT极差为3.29s。以新鲜混合血浆为对照,自制的正常凝血质控血浆与新鲜混合血浆其APTT均值相差0.52s,TT均值相差1.0s,PT无明显差别;德国DADE BEHRING正常凝血质控血浆与新鲜混合血浆其APTT均值相差6.82s,TT均值相差3.2 s,PT无明显差别。结论自制的正常凝血质控血浆具有正常凝血特性,产品的稳定性和批内均一性良好,可满足作为凝血试验质控血浆的要求。