用氧化铁磁性纳米颗粒作为基因载体的研究

目的：评价氧化铁磁性纳米颗粒（nanoparticles)作为基因载体的可行性。方法：应用沉淀法制成外包葡聚糖的氧化铁磁性生物纳米颗粒9Dextran Coated Iron Oxide Nanoparticles,DCIONP)。用分光光度计及琼脂糖凝胶电泳分析氧化铁磁性生物纳米颗粒的DNA结合力及抵抗DNASE-Ⅰ消化的作用,以绿色荧光蛋白基因为报道基因,进行用氧化铁磁性纳米颗粒作为基因载体的体外细胞转染实验。结果：电镜检测证实DCIONP的直径在10纳米（nanometer,nm)左右。在酸性条件下,这种纳米颗粒表现出DNA结合力和抵抗DNASE-Ⅰ消化的作用,从而证明DCIONP与DNA的结合是静电引力的作用。在氧化铁磁性生物纳米颗粒表面修饰阳离子聚合物多聚赖氨酸（Dextran Coated Iron Oxide Nanoparticles modified with Poly-L-Lysine,PLL-DCIONP)在中性及碱性的条件下,亦可与带阴性电荷的DNA结合及抵抗DNASE-Ⅰ消化的作用,PLL-DCIONP可作为基因载体将报道基因转染入细胞,用荧光显微镜可观察到发绿色荧光的细胞。在PLL-DCIONP和质粒的质量成一定的比例时,PLL-DCIONP的转染效率高于脂质体。结论：PLL-DCIONP可作为DNA转移载体。     

氧化铁磁性纳米颗粒介导wt-p53基因对肺腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨氧化铁磁性纳米颗粒介导野生型p53基因（wild type p53,wt-p53）对耐顺铂人肺腺癌细胞A549/DDP增殖抑制和凋亡诱导的作用。方法：氧化铁磁性纳米颗粒介导wt-p53转染肺腺癌细胞A549/DDP作为实验组,以纳米颗粒介导空载体pcDNA3转染作为阴性对照组,脂质体介导wt-p53转染作阳性对照组。MTT法和绘制生长曲线观察基因转染对A549/DDP细胞增殖抑制作用,荧光显微镜、流式细胞术观察其对A549/DDP细胞诱导凋亡作用,RT-PCR检测其对A549/DDP细胞Bax mRNA表达的影响。结果：氧化铁磁性纳米颗粒介导wt-p53对人肺腺癌细胞A549/DDP增殖有持续的抑制作用,而以脂质体介导wt-p53对增殖抑制作用持续时间短暂;纳米颗粒介导wt-p53对人肺腺癌细胞A549/DDP诱导凋亡作用明显强于以脂质体载体;同时介导wt-p53上调Bax mRNA表达水平的作用也明显强于以脂质体载体。结论：氧化铁磁性纳米颗粒介导wt-p53转染对人肺腺癌细胞A549/DDP有持续的增殖抑制和诱导凋亡的作用。     

超顺磁性葡聚糖氧化铁纳米颗粒的制备及其作为基因载体的可行性研究

背景与目的：磁性纳米颗粒作为基因载体在肿瘤基因治疗中的应用得到了迅速发展。为了能获得驱动目的基因高效稳定表达、安全无害、靶向性高、简便的新型非病毒型基因导入和治疗系统,本研究探讨超顺磁性葡聚糖氧化铁纳米颗粒(superparamapnetic dextran iron oxide nanoparticles,SDION)的制备及其作为体外基因载体的可行性.方法：采用化学共沉淀法制作SDION,通过丙烯葡聚糖凝胶S-300HR色谱和离心法分离SDION,用透射电镜、粒度分析仪和磁力计对SDION进行分析。以绿色荧光蛋白(GFP-C2)质粒为靶基因,通过氧化还原法构建SDION-GFP-C2复合物,用紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳检测两者的结合率。以脂质体转染作为对照,荧光显微镜分别观察SDION和脂质体体外转染GFP-C2入膀胱癌细胞BIU-87的转染效率。结果：SDION直径在3～8nm之间,有效粒径为59．2nm,比饱和磁化强度为0．23emu／g。分别经10mmol／L的高碘酸钠氧化、0．5mol／L的硼氢化钠还原作用后的sDION和GFP的结合比例最大,sDION对GFPDNA的转染效率为45％左右,明显高于脂质体的转染效率(30％左右)。结论：SDION可通过氧化还原反应与GFP质粒相连,在体外可将GFP基因成功转染入人膀胱癌BIU-87细胞。     

超顺磁性葡聚糖氧化铁纳米颗粒的制备及其作为基因载体的可行性研究

目的磁性纳米颗粒作为基因载体在肿瘤基因治疗中的应用得到了迅速发展。为了能获得驱动目的基因高效稳定表达、安全无害、靶向性高、简便的新型非病毒型基因导入和治疗系统,本研究探讨超顺磁性葡聚糖氧化铁纳米颗粒(superparamagnetic dextran i- ron oxide nanoparticles,SDION)的制备及其作为体外基因载体的可行性。方法采用化学共沉淀法制作SDION,通过丙烯葡聚糖凝胶S-300HR色谱和离心法分离sDl0N,用透射电镜、粒度分析仪和磁力计对SDION进行分析。以绿色荧光蛋白(GFP-C2)质粒为靶基因,通过氧化还原法构建SDION-GFP-C2复合物,用紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳检测两者的结合率。以脂质体转染作为对照,荧光显微镜分别观察SDION和脂质体体外转染GFP-C2入膀胱癌细胞BIU-87的转染效率。结果SDION直径在3-8 nm之间,有效粒径为59.2 nm,比饱和磁化强度为0.23 emtb,g。分别经10 mmol/L的高碘酸钠氧化、0.5 moL/L的硼氢化钠还原作用后的SDION和GFP的结合比例最大,SDUIN对GFP DNA的转染效率为45%左右,明显高于脂质体的转染效率(30%左右)。结论SIION可通过氧化还原反应与GFP质粒相连,在体外可将GFP基因成功转染入人膀胱癌BIU-87细胞。     

氧化铁纳米颗粒作为p53基因载体并转染肺癌细胞的可行性研究

目的:体外评价表面修饰多聚赖氨酸的氧化铁磁性纳米颗粒作为野生型p53基因载体并转染肺癌细胞的可行性。方法:以碱沉淀法制成外包葡聚糖的氧化铁磁性生物纳米颗粒(dextran coated iron oxide nanoparticles,DCIONP),在其表面修饰多聚赖氨酸制成多聚赖氨酸-氧化铁纳米颗粒(dextran coated iron oxide nanoparticles modified with polyL-lysine,pll-DCIONP)。扫描电镜观察其形态特征,用激光粒度检测仪测定其粒度分布和Zeta表面电位;分光光度计及琼脂糖凝胶电泳分析pll-DCIONP与野生型p53基因的结合力及其复合物抵抗DNase-Ⅰ和血清消化的能力;pll-DCIONP作为野生型p53基因载体转染人肺腺癌细胞A549/CDDP,RT-PCR以及Western印迹法分析细胞内p53基因的表达。结果:pll-DCIONP的直径在60~80nm之间,Zeta电位为 19.6 mV;pll-DCIONP无论在酸性、中性及碱性的条件下,均可与野生型p53基因结合,二者质量比为1∶1时结合力最强;pll-DCIONP/wt-p53复合物能抵抗DNase-Ⅰ和血清对野生型p53基因的消化作用;以pll-DCIONP作为野生型p53基因载体转染人肺腺癌细胞,随着时间延长,细胞内p53基因含量持续增高,而以脂质体作为转染载体时随着时间延长细胞内p53基因含量递减。结论:pll-DCIONP可作为野生型p53基因理想的转染载体,并能持续高效地将外源性p53基因转染入肺癌细胞中。     

氧化铁磁性纳米颗粒介导wt p53基因对肺腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的: 探讨氧化铁磁性纳米颗粒介导野生型p53基因（wild type p53,wtp53）对耐顺铂人肺腺癌细胞A549/DDP增殖抑制和凋亡诱导的作用。 方法:氧化铁磁性纳米颗粒介导wtp53转染肺腺癌细胞A549/DDP作为实验组，以纳米颗粒介导空载体pcDNA3转染作为阴性对照     

超顺磁性葡聚糖氧化铁纳米颗粒的制备及其作为基因载体的可行性研究(英文)

目的磁性纳米颗粒作为基因载体在肿瘤基因治疗中的应用得到了迅速发展。为了能获得驱动目的基因高效稳定表达、安全无害、靶向性高、简便的新型非病毒型基因导入和治疗系统,本研究探讨超顺磁性葡聚糖氧化铁纳米颗粒(superparamagnetic dextran i-ron oxide nanoparticles,SDION)的制备及其作为体外基因载体的可行性。方法采用化学共沉淀法制作 SDION,通过丙烯葡聚糖凝胶 S-300HR 色谱和离心法分离 SDION,用透射电镜、粒度分析仪和磁力计对 SDION 进行分析。以绿色荧光蛋白(GFP-C2)质粒为靶基因,通过氧化还原法构建 SDION-GFP-C2复合物,用紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳检测两者的结合率。以脂质体转染作为对照,荧光显微镜分别观察 SDION 和脂质体体外转染 GFP-C2入膀胱癌细胞 BIU-87的转染效率。结果 SDION 直径在3～8nm 之间,有效粒径为59.2nm,比饱和磁化强度为0.23 emu/g。分别经10 mmol/L 的高碘酸钠氧化、0.5mol/L 的硼氢化钠还原作用后的 SDION 和 GFP 的结合比例最大,SDION 对 GFP DNA 的转染效率为45%左右,明显高于脂质体的转染效率(30%左右)。结论 SDION 可通过氧化还原反应与 GFP 质粒相连,在体外可将 GFP 基因成功转染入人膀胱癌 BIU-87细胞。     

内皮祖细胞作为干扰素基因载体靶向肿瘤的实验研究

目的:探讨人间充质干细胞(MSCs)诱导成内皮祖细胞(EPCs),作为携带人伽玛干扰素(hγIFN)基因的载体进行肿瘤免疫治疗的可行性.方法:分离和培养人MSCs,在体外经人血管内皮生长因子(VEGF165,20ng/ml)诱导2周后,用流式细胞仪检测细胞表面标志.用增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因作为报告基因,检测腺病毒载体(Ad5-EGFP)对EPCs的感染效率.AdS-hγIFN转染EPCs(EPcs-hγIFN),ELISA法检测EPCs-hγIFN培养上清液中hγIFN浓度.体外EPCs-hγIFN与Lovo结肠癌细胞混合培养,观察对肿瘤细胞的抑制作用.给荷瘤裸鼠静脉注射EPCs-EGFP,观察EPCs的体内分布特点.给荷瘤裸鼠静脉注射EPCs-hγIFN,观察对移植瘤的抑制作用和对存活期的影响.结果:MSCs用VEGF165诱导2周后,分化成CD133、KDR和CD34阳性的EPCs.AdS-EGFP在感染复数(MOI)为150pfu/EPC时,EGFP阳性的EPCs可达95%以上.EPCs-hγIFN培养液中测得hγIFN,浓度达1400pg/ml以上,而且在一段时间内浓度保持稳定.EPCs-hγIFN与Lovo细胞按照1:5的浓度混合培养4天,对Lovo细胞的抑制率为30.48%±3.78%(P＜0.05).通过静脉注射的EPCs-EGFP主要分布在肿瘤组织,而非其他器官组织.尾静脉注射EPCs-hγIFN可以抑制肿瘤的生长(肿瘤重量:EPCs-hγIFN组0.48±0.78g,空白对照组2.47±2.58g,P＜0.05),而皮下注射hγyIFN和静脉注射EPCs-EGFY对肿瘤无抑制作用.尾静脉注射EPCs-hγIFN延长荷瘤裸鼠的存活时间(中位存活时间:EPCs-hγIFN组为35天,空白对照组为32夭,P＜0.05).结论:EPCs可以靶向性的分布到肿瘤局部,可以作为免疫性基因载体在肿瘤治疗领域进行进一步的研究.     

羧甲基壳聚糖季铵盐作为基因载体及动物体内分布研究

基因疗法是治疗肿瘤的新手段[1-2]。但目前面临的主要障碍是缺乏合适的基因治疗载体[3-4]。由于病毒性基因载体存在导向性差、携带能力低、免疫原性和潜在致瘤性等缺点[5]。因此,针对其缺点研制非病毒载体近来成为研究的热点,主要包括真核细胞表达质粒载体、阳离子聚合     

乙型肝炎病毒衣壳作为肝癌细胞靶向性基因转移载体的研究

Objective

The aim of the study was to observe the transfection efficacy of hepatitis B virus envelope (HBVE) and evaluate its ability as a gene transfer vector for liver cancer cells.

Methods

To obtain HBVE, the supernatant fluid of HepG 2.2.15 cells was mixed with a PEG8000 solution for concentration and was inactivated by β-propiolactone. The acquired HBVE was used to pack pIRES₂-EGFP to test its package ability. Then, we examined its quantity and quality with ELISA, PCR, SDS-PAGE and electron microscopy. The pIRES₂-EGFP was packed with HBVE and obtained the product HBVE-GFP. The pIRES₂-EGFP was packed with liposome and obtained the product liposome-GFP. HBVE-GFP and liposome-GFP were used to transfer HepG 2 cells to study the transfection efficiency. HBVE-GFP was used to transfer HepG 2, A549, HeLa and FB cells to study the targeting ability. The green fluorescent protein (GFP) expression was observed under a fluorescent microscope. The rate of GFP positive cells was determined by flow cytometry.

Results

1. The acquired HBVE could retain the surface protein HBsAg + pre S1 + pre S2 and had no virus DNA. It had good package ability for pIRES₂-EGFP. 2. Transfection efficiency: The GFP could be observed in both the liposome group and HBVE group under the fluorescent microscope. But the HBVE group had a higher fluorescent intensity than liposome group. The transfection rate of liposome group was 49.97% ± 2.37% while the HBVE group was 70.65% ± 3.15% and the fluorescent intensity of the HBVE group was 3–4 times (P = 0.000) for liposome group with the determination of flow cytometry. 3. Targeting ability: The GFP could be observed in the four groups under the fluorescent microscope. The HepG 2 group had the highest fluorescent intensity among the four groups. The transfection rate of HepG 2 group was 71.35% ± 0.03% which was highly expressed than other groups (P = 0.000) and the fluorescent intensity of the HepG 2 group was 2–3 times (P = 0.000) for the other 3 groups with the determination of flow cytometry.

Conclusion

HBVE can be constructed successfully with the methods of PEG8000 and β-propiolactone from the supernatant fluid of HepG 2.2.15 cells. The HBVE can be a candidate gene transfer vector for liver cancer cells.     

内皮祖细胞作为干扰素基因载体的体外抑瘤实验

目的 研究用人骨髓诱导培养内皮祖细胞（EPCs）并以其作为免疫性基因载体治疗肿瘤的可行性。方法 采用梯度离心法从人骨髓中分离单个核细胞,加入人血管内皮生长因子(VEGF165）诱导培养,用流式细胞仪测定细胞表面标志CD133、KDR和CD34的表达情况。以增强型绿色荧光蛋白基因（EGFP）作为报告基因,用流式细胞仪检测携带EGFP基因的腺病毒载体（Ad-EGFP）对EPCs的感染效率。携带人干扰素γ（hγIFN）基因的腺病毒载体（Ad-hγIFN）感染EPCs（EPCs-hγIFN）,ELISA法检测细胞EPCs-hγIFN分泌 hγIFN的情况。将EPCs-hγIFN与肺癌细胞株H460、胃癌细胞株SGC7901、大肠癌细胞株LoVo混合培养,观察EPCs-hγIFN对肿瘤细胞的作用。结果 经过诱导培养2周后,贴壁的单核细胞开始表达CD133、KDR和CD34。Ad-EGFP的感染复数（MOI）为150pfu／EPCs时,感染率达90％以上。EPCs-hγIFN培养上清可以测得浓度稳定且高水平的hγIFN,第1天上清液中的hγIFN浓度为1305.28pg／ml,第14天为1419.10pg／ml。EPCs-hγIFN与H460、SGC7901、LoVo细胞株混合培养4天,肿瘤细胞的生长受到明显的抑制,肿瘤细胞存活率分别为（77.87 ± 6.50）％、（79.36 ± 4.35）％和（69.52 ± 3.78）％, 均显著低于对照组（P＜0.05）。结论携带hγIFN目的基因的腺病毒转染EPCs后基因表达情况良好,体外实验中表现为抑制肿瘤细胞的生长,可作为免疫性基因载体开展进一步的研究。     

基于肿瘤微环境的基因给药纳米载体的研究进展

近年来基因给药系统在肿瘤治疗中的研究备受关注。纳米载体具有增强药物靶向性、增加生物膜通透性、控制药物释放速度、提高生物利用度和可承载生物大分子等优点。由于肿瘤的快速增殖和代谢,形成了具有低pH、高水平谷胱甘肽、高水平活性氧、缺氧性、高表达酶和高水平ATP等特性的肿瘤微环境（TME）。基于肿瘤组织特异性微环境的基因给药纳米载体能同时提高基因药物的胞外稳定性、胞内释放能力和靶向性,可更大程度地提高药物的抗肿瘤作用、减少不良反应的发生。本文对基于TME的pH响应型、还原响应型、活性氧响应型、缺氧响应型、酶响应型、ATP响应型和多智能响应型纳米载体进行综述,总结各类型纳米载体的作用机制、制备、抗肿瘤效果及局限性。基因给药纳米载体可提高基因的转染效率,提高抗肿瘤作用,在抗肿瘤应用中有较好的前景。     

羟基磷灰石纳米颗粒载体介导hGM-CSF基因转染HepG 2细胞及对其生长的影响

目的研究羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)纳米颗粒载体携带人粒-巨噬细胞集落刺激因子(human granulocyte macrophage colony stimulating factor, hGM-CSF)基因转染HepG 2细胞,以及其对细胞生长的影响,为基因修饰的肝癌肿瘤疫苗的临床研究奠定基础.方法采用MTT法检测HA纳米颗粒载体对HepG 2细胞生长的影响;采用HA纳米颗粒载体转染技术,将携带有hGM-CSF基因的表达质粒导入HepG 2细胞中,G 418筛选抗性细胞,限制性稀释法挑选单克隆;RT-PCR法鉴定hGM-CSF的整合和表达,ELISA法测定细胞培养液中的hGM-CSF分泌量和持续的时间;FCM法分析hGM-CSF基因对HepG 2细胞生长的影响.结果MTT结果提示HA纳米颗粒混悬液浓度在80 μg/mL以下对HepG 2细胞生长的影响与对照组比较差异无统计学意义.RT-PCR结果显示hGM-CSF基因在HepG 2细胞中已整合并稳定表达.ELISA检测结果显示转入hGM-CSF基因的HepG 2细胞能稳定分泌hGM-CSF,其分泌量为(216.22± 45.78) ng/106 cells每24 h.FCM检测结果则显示hGM-CSF基因不促进细胞凋亡,且对细胞的生长周期无明显影响.结论HA纳米颗粒载体可以安全地将目的基因hGM-CSF导入HepG 2细胞中且稳定表达,其对细胞的生长无明显影响,为基因修饰的肝癌疫苗的后继研究提供了实验基础.     

叶酸/聚酰胺-胺作为miR-7基因载体的胶质瘤靶向性研究

目的检测叶酸/聚酰胺-胺（FA/PAMAM）作为miR-7基因载体的细胞转染效率及其胶质瘤靶向功能,为研发高效小分子靶向投递药物奠定基础。方法透析法制备FA/PAMAM络合物,透射电子显微镜观察粒子形貌;以其为载体转染miR-7至人脑胶质瘤细胞系U251,荧光显微镜观察络合物转染效率,qRT-PCR方法检测miR-7水平;制作去胸腺小鼠颅内U251胶质瘤模型,分别经尾静脉、颈内动脉及肿瘤原位进行络合物移植,48 h后取脑制作冰冻切片,荧光显微镜观察络合物在肿瘤内的聚集程度;蛋白印记（Western blot）法检测miR-7靶基因EGFR和细胞增殖活性抗原（PCNA）的蛋白表达。结果粒子形貌规整,与U251细胞共培养48 h后可获得高效转染,并显著提高miR-7水平。经尾静脉、颈内动脉及肿瘤原位三种途径移植后获得的冰冻切片中均可发现络合物粒子在肿瘤部位的聚集,但聚集程度为尾静脉<颈内动脉<肿瘤原位。Western blot结果示EGFR和PCNA水平较对照组均有不同程度下降（P<0.05）。结论FA/PAMAM能够高效投递miR-7基因至体内、外胶质瘤细胞,有望成为一种新的高效小分子靶向投递药物进行胶质瘤基因治疗。     

壳聚糖作为基因治疗载体的可行性研究

背景与目的:壳聚糖作为非病毒性基因载体因其带有阳离子特性,近来受到广泛关注。本课题研究壳聚糖-pDNA微粒性质及转染活性,以探讨其作为基因载体的可行性,为今后进一步研究提供依据。方法:质粒DNA通过转化带有目的基因感受态大肠杆菌JM109扩增,按Qiagen公司操作说明提取质粒DNA;复凝聚法制备壳聚糖-pDNA微粒;透射电镜测定壳聚糖-pDNA微粒形态、粒径;紫外分光光度计测定其负载力、负载率及释药实验;凝胶电泳阻滞实验分析pDNA在微粒中位置;体外基因转染实验评价壳聚糖转染活性。结果:壳聚糖-pDNA微粒多呈球形,直径为100～200nm,平均(138±43)nm,其负载力及负载率分别为(46.8±9.0)%和100%;凝胶电泳阻滞实验证明pDNA被完全包裹在壳聚糖-pDNA微粒内部;壳聚糖-pDNA微粒通过突释和缓释两个过程释放pDNA;壳聚糖能有效转染pEGFP基因并使之表达。结论:壳聚糖能有效转染DNA进入哺乳细胞中,能持续释放DNA并使之稳定表达。因此壳聚糖是一种有效的基因治疗载体。     

作为基因转移载体的乙肝病毒衣壳的制备及其功能的初步鉴定

目的〖HT5"SS〗： 构建具有肝脏靶向性的乙型肝炎病毒衣壳基因转移载体。〖HT5W〗方法: 〖HT5"SS〗采用PEG 8 000病毒浓缩法提取HepG 2.2.15细胞上清液中的乙型肝炎病毒,用β丙内酯法制备乙型肝炎病毒衣壳,用它包裹5.3kb的绿色荧光蛋白质粒以测试其装载能力,并用ELISA法、PCR法、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、透射电镜等对它进行定量、定性研究,最后将其转染HepG 2细胞,通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况,通过流式细胞仪检测细胞发光率。〖HT5W〗结果: 〖HT5"S     

作为基因转移载体的乙型肝炎病毒衣壳对肝癌细胞的靶向性

目的: 探讨乙型肝炎病毒衣壳作为基因转移载体对肝癌细胞的靶向性和有效性。方法：采用PEG 8 000病毒浓缩法、β丙内脂法从能持续产生HBV的HepG2.2.15细胞上清液中制备乙型肝炎病毒衣壳(hepatitis B virus envelope,HBVE)，用它包裹绿色荧光蛋白质粒(pIRS2EGFP)后得     

氧化石墨纳米颗粒吸附的5-氟尿嘧啶、抗体和细胞因子的体外生物活性研究

目的 研究氧化石墨纳米颗粒(Graphene Oxide)吸附的化疗药物、抗体和免疫因子体外是否有生物活性。方法 使用氧化石墨纳米颗粒分别吸附5-氟尿嘧啶、干扰素γ和抗白介素10受体抗体,并经光学显微镜、ELISA、Western blot等方法进行检测,在体外验证氧化石墨纳米颗粒吸附的5-氟尿嘧啶、干扰素γ和抗白介素10受体抗体生物学活性。结果 氧化石墨纳米颗粒吸附的5-氟尿嘧啶可以杀死肿瘤细胞并且杀伤效应与剂量呈正相关;氧化石墨纳米颗粒吸附的5-氟尿嘧啶比游离的5-氟尿嘧啶在体外更有效杀死肿瘤细胞;浓度达60 μg/ml氧化石墨纳米颗粒本身不杀死肿瘤细胞,不促进CD11c+树突状细胞表达CD86;氧化石墨纳米颗粒吸附的干扰素γ和抗白介素10受体抗体,可以使LPS刺激的CD11c+树突状细胞分泌更多的白介素12。结论 氧化石墨纳米颗粒吸附的化疗药物和免疫刺激因子体外有生物活性, 有可能成为治疗癌症的新药物。     

乙肝病毒衣壳作为肝癌基因转移载体对肝癌是否有靶向性

背景与目的：乙型肝炎病毒（HBV）具有嗜肝性的主要原因在于病毒衣壳（HBVE）上镶嵌的外衣壳蛋白PreS1,利用此生物特性有可能将HBVE改造成肝癌靶向性基因转移载体.本研究探讨乙型肝炎病毒衣壳作为基因转移载体对肝癌是否有靶向性.方法：采用PEG 8000病毒浓缩法、β-丙内脂法从Hep G 2.2.15细胞上清液中制备乙型肝炎病毒衣壳（HBVE）,用它包裹绿色荧光蛋白质粒（pIRS2-EGFP）后得到基因转移载体复合物HBVE-GFP,用HBVE-GFP分别转染Hep G2、A549、HeLa、FB细胞,通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况,通过流式细胞仪检测细胞发光率.结果：荧光显微镜下观察可见,各组均可见绿色荧光蛋白的表达,Hep G2组较之其他3组具有更高的荧光强度;流式细胞仪检测结果显示,Hep G2组的转染效率为（71.35±0.03）%,显著高于其他3组（P＜0.001）,且其荧光强度是其他3组的3～4倍（P＜0.001）.结论：乙型肝炎病毒衣壳作为载体对肝癌具有较好的靶向性.     

抗肿瘤纳米药物载体的研究进展

目前在临床广泛应用的抗肿瘤药物多数为非选择性药物,为了提高药物疗效,减少毒副作用,人们对其超微粒子靶向、控释体系进行探索。载体材料必须是可生物降解的聚合物,包括天然和合成两类,可以为抗肿瘤药物治疗提供新的具有靶向功能的药物。本文就近年来抗肿瘤纳米药物载体的研究进展作一综述。