高效液相色谱测定水产品中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物残留量的研究进展

孔雀石绿（MG）、结晶紫（CV）等属三苯甲烷类化学物质，许多国家曾将其作为水产养殖业的杀菌剂，用于控制鱼和鱼苗真菌的生长，控制高发的水霉病、原虫病等。但是，MG等进入人类或动物机体后，可产生致癌、致畸、致突变等副作用，因此，近期水产品的国际商贸中，孔雀石绿、结晶紫属类药物成为必检并限制极严的一项指标。测定水产品中孔雀石绿等的方法有多种，其中常见的方法有：液相色谱法、气相色谱法、GC-MS、LC-MS等。其中，液相色谱法因具有快速、高效、高灵敏度等优点，已成为测定孔雀石绿的首选方法。现将近十年来高效液相色谱法“HPLC”的研究综述如下。     

固相萃取-液相色谱法快速测定水产品中的孔雀石绿、结晶紫及其代谢物

目的：采用固相萃取（SPE）净化前处理技术，在线氧化、双通道紫外-可见光检测器检测，高效液相色谱法（HPLC）测定水产品中三苯甲烷类4种染料孔雀石绿（MG）、隐色孔雀石绿（LMG）、结晶紫（CV）、隐色结晶紫（LCV）的方法。方法：提出了用乙腈-醋酸盐缓冲混合液提取、乙腈再提取，二氯甲烷反萃取并浓缩，最后用中性氧化铝固相萃取小柱净化，洗脱液用液相色谱柱分离和在线PbO：柱后氧化后，以双通道在紫外-可见光处测定，外标法定量的分析技术。结果：该检测方法的工作曲线的线性范围为4—100μg／kg，相关系数大于0．997，在5、10、50μg／kg样品加标范围内，方法回收率为67％～90％，相对标准偏差小于8．0％，最低检出浓度2μg/kg。结论：因该方法采用了在线氧化、618nm和588nm双通道检测技术。因此测试方法具有简便、快速的特点。应用本法对106批次的实际样品的测试结果表明：本方法具有良好的准确性和重现性。     

高效液相色谱法测定水产品中结晶紫和隐色结晶紫残留量

目的：建立高效液相色谱法测定水产品中结晶紫和隐色结晶紫残留量的方法。方法：样品经乙腈-乙酸盐混合溶液初提，二氯甲烷重新分配，过中性氧化铝柱净化后浓缩，经0．45μm滤膜过滤，进高效液相色谱分析。结果：结晶紫和隐色结晶紫在0．01～0．5μg/ml范围内线性关系良好，相关系数分别为0．99992、0．99994；本方法3个添加水平的回收率在61．5％-95．2％之间，相对标准偏差在1．5％～5．7％之间，结晶紫和隐色结晶紫的检出限均为2μg／kg。结论：该法简便、快速、定量准确、精密度高，适用于水产品中结晶紫和隐色结晶紫残留量的检测。     

高效液相色谱法测定鱼类产品中孔雀石绿及无色孔雀石绿的残留

目的:研究鱼类产品中孔雀石绿及其代谢产物无色孔雀石绿残留量的高效液相色谱检测方法。方法:采用In-ertsilODS-3(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱、氧化铅柱和二极管阵列检测器,以乙腈+乙酸铵溶液(0.125 mol/L,pH=4.5)=80+20为流动相进行分离分析。结果:孔雀石绿和无色孔雀石绿的回收率分别为83%、85%;相对标准偏差分别为5.93%、4.15%。结论:该方法可用于鱼类产品中孔雀石绿及无色孔雀石绿残留量的检测。     

LC-MS/MS法同时测定水产品中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物残留量

[目的]建立测定水产品中孔雀石绿(MG)、结晶紫(GV)及其代谢产物残留量的液相色谱-串联离子阱质谱仪测定法(LC-MS/MS)。[方法]将样品中残留的MG或GV用硼氢化钾还原为其相应的代谢产物隐色孔雀石绿(LMG)或隐色结晶紫(LGV),经净化预处理,用串联离子阱质谱在电喷雾-全扫描二级质谱(MS/MS)模式进行质谱测定,与HPLC方法测定结果比对验证。[结果]在55件可疑样品中,用本法测定有46件为阳性,9件为假阳性,本法测定结果满意。[结论]采用LC-MS/MS法测定水产品中MG、GV及其代谢产物含量,结果准确,灵敏度高。     

固相萃取净化-超高效液相色谱法测定水产品中孔雀石绿及代谢物

[目的]建立固相萃取净化-超高效液相色谱法测定水产品中孔雀石绿(MG)及其代谢物的方法。[方法]样品用50%乙腈-三氯乙酸(20 g/L)提取,提取液用阳离子交换固相萃取净化。采用ZORBAX Extend C18(2.1 mmid×50 mm,1.8μm)分离,以乙腈-乙酸铵缓冲液梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,二极管阵列检测器检测MG(λ=620nm),荧光检测LMG(激发波长265 nm,发射波长360 nm)。[结果]MG在0.05～2.5 mg/L、LMG在0.01～0.5mg/L范围内线性关系良好(r0.999),检测限为0.34～2.1μg/kg,平均加标回收率为83.2%～87.7%,相对标准偏差4.5%～8.2%。[结论]该方法快速简便,可用于水产品中MG及其代谢物残留量的检测。     

液相色谱-串联质谱法测定水产品中孔雀石绿及其代谢产物隐性孔雀石绿的方法研究

目的：建立液相色谱一串联质谱法快速、灵敏、准确地检测水产品中孔雀石绿（MG）及其代谢产物隐性孔雀石绿（LMG）的方法。方法：样品前处理采用液-液萃取、浓缩过中性氧化铝小柱，吹干定容，以乙腈＋0．05mol／L乙酸胺为流动相，进行梯度洗脱，用Diamonsil C18柱进行分离，同位素氘代孔雀石绿和氘代隐性孔雀石绿作为内标，采用液相色谱-电喷雾串联质谱正离子方式，同时测定孔雀石绿及隐性孔雀石绿。结果：该方法孔雀石绿及隐性孔雀石绿的平均回收率分别为97．1％和106％，相对标准偏差分别为4．6％和3．8％。水产品中孔雀石绿及其代谢产物隐性孔雀石绿检测的线性范围为0．5～10μg／kg，定量检测下限为0．5μg／ks。结论：该方法操作简便，测定准确，灵敏度高。     

湖北省淡水鱼中孔雀石绿、结晶紫监测结果分析

目的 了解湖北省淡水鱼中孔雀石绿、结晶紫残留状况.方法 采用高效液相色谱法-荧光检测器对180份淡水鱼样品进行孔雀石绿、结晶紫检测.结果 180份淡水鱼中分别有22份、1份检测出孔雀石绿、结晶紫,其检出率分别为12.22%、0.56%.结论 部分淡水鱼存在孔雀石绿残留,应加强水产品在养殖、运输和储存等过程的监管.     

水产品中孔雀石绿和隐色孔雀石绿残留量测定的液相色谱法

目的：建立了水产品中孔雀石绿和隐色孔雀石绿残留量的液相色谱法。方法：用乙腈-乙酸盐缓冲混合液提取，乙腈再次提取后，液液分配到二氯甲烷层，最后过中性氧化铝小柱和超高速离心净化，滤液直接上液相色谱进行测定。结果：采用外标法定量，样品中孔雀石绿的浓度在2-50μg／L范围内呈良好的线性关系，孔雀石绿r为0．99993，隐色孔雀石绿r为0．99942。用该方法检验超过600多份水产品，孔雀石绿和隐色孔雀石绿的回收率范围在82．5％-105％。本方法和实验室条件下，检测低限可低于1μg／kg。结论：本方法操作简单、方便、快速、效果好，大大缩短该项目的检验时间，提高工作效率，降低检验成本。     

同位素内标稀释高效液相色谱-质谱法测定鱼体中的孔雀石绿及其代谢物

目的：以同位素内标稀释建立了测定鱼体中孔雀石绿及其代谢物的高效液相色谱-串联质谱法。方法：试样中加入氘代同位素内标，用柠檬酸缓冲液／乙腈提取，液液分配后SCX净化，MRM定量。结果：方法的线性范围为0.5～10μg／L，线性系数为0．9992，检出限为0．1／μg／kg。在1．0、1．5、2．0μ/kg3个浓度水平加标回收率为94％～104％,rsd为4．7％～5．9％。结论：该方法灵敏度高，准确度、精密度好，满足了样品测定的定性、定量要求。     

反相高效液相色谱法测定血清中胆汁酸结合物

本文叙述了用HPLC-UV法测定血清中3种甘氨胆汁酸和3种牛磺胆汁酸结合物的方法。血清用0.4M碳酸氢钠溶液稀释,通过一个Sep-Pak C_(18)小柱,然后用甲醇洗脱,洗脱液浓缩后将残留物溶于0.5ml流动相中,取一定体积注入HPLC,UV检测器检测,保留值定性,外标法定量。     

反相高效液相色谱法测定血清中胆汁酸结合物

本文叙述了用HPLC-UV法测定血清中3种甘氨胆汁酸和3种牛磺胆汁酸结合物的方法。血清用0.4M碳酸氢钠溶液稀释,通过一个Sep-Pak C_(18)小柱,然后用甲醇洗脱,洗脱液浓缩后将残留物溶于0、5ml流动相中,取一定体积注入HPLC,UV检测器检测,保留值定性,外标法定量。     

高效液相色谱法测定水产品中土霉素、四环素、金霉素

目的：建立高效液相色谱法测定水产品中土霉素、四环素、金霉素.方法：选择乙腈-0.01 mol/L柠檬酸溶液为流动相体系,采用梯度洗脱,流速0～6 min为0.4 ml/min;6～7 min为0.4～0.8 ml/min;7～12 min为0.8 ml/min.结果：当检测波长为355 nm时,土霉素检出限为0.010 mg/kg,四环素为0.008 mg/kg,金霉素为0.035 mg/kg,线性范围为0.04～1.0 mg/kg,相关系数为0.999,相对标准偏差为1.35%,加标回收率为85%～120%.结论：此测定方法简便,结果可靠,灵敏度高.     

反相高效液相色谱法测定车间空气中萘

本文研究了反相高效液相色谱测定车间空气中的萘。其条件为,以异丙醇作吸收液,C_(18)柱,甲醇:水(90:10)为流动相,紫外检测器于220nm 处测定。方法灵敏快速、简单,并具良好的回收率和重现性。     

反相高效液相色谱法直接测定尿中微量酚

介绍使用反相高效液相色谱法将酸解尿样直接进样测定尿中微量酚。色谱柱为杜邦ＺｏｒｂａｘＯＤＳ柱，移动相组分比例为甲醇∶缓冲液＝１５∶８５，流速在０．８ｍｌ／ｍｉｎ，柱温为５５℃时苯酚与尿中共存物分离良好，精密度３．３８％，准确度（回收率）９５．６４％～１００．９８％，实际应用，结果满意。     

液相色谱串联质谱法测定水产品中的孔雀石绿和无色孔雀石绿

利用液相色谱串联质谱(LC/MS/MS)方法测定水产品中孔雀石绿和无色孔雀石绿残留。1设备液相色谱分析柱反相LunaTMC18柱,5μm,15cm×2mm id(OOF-425/-BO,Phenomenex公司提供,Torrance,CA)。液相色谱系统Waters 2695系列,配有四元泵系统、自动进样器及柱加热箱(Waters公司提供,Mil- ford,MA)。     

反相高效液相色谱法测定保健食品中的绿原酸

采用C18液相色谱柱,用0.04％HAC水溶液（三氟乙酸调pH=2.4） 乙睛=85 15做流动相,建立了保健食品中功效成分绿原酸的反相HPLC测定方法。绿原酸的工作曲线范围是20μg/ml-120μg/ml,r=0.997,检出限是1ng,回收率是96.9％,RSD=2.3％,该方法具有灵敏度高、快速和准确的特点。     

反相高效液相色谱法测定血浆中维生素C浓度

维生素Ｃ（抗坏血酸，ＶｉｔａｍｉｎＣ，Ａｓｃｏｒ－ｂｉｃａｃｉｄ）是人体重要的营养物质〔１〕，也是机体主要的抗氧化屏障〔２〕，能改善机体的免疫功能，并参与氨基酸的代谢，在严重创伤、感染、多器官功能障碍、再灌注损伤等方面具有一定的辅助治疗作用。本方法采...     

反相高效液相色谱法检测水产品中甲醛含量的应用

正甲醛是一种防腐剂,它直接作用氨基巯基和羧基生成次甲基衍生物,从而破坏机体蛋白质和酶,对人体细胞功能损害较大。甲醛是致突变和致癌的有毒物质[1],是一种非食品添加剂,国家明令规定在食品中禁止使用的防腐剂[2]。但仍有不法商贩在水产品的储藏加工,水发食品的制作过程中加入甲醛防