人脑胶质瘤浸润淋巴细胞抗肿瘤活性的实验和临床研究

目的检测人脑胶质瘤浸润淋巴细胞（ＧＩＬ）的来源及其抗肿瘤活性。方法把从人脑胶质瘤手术标本中提取的ＧＩＬ，在体外以白细胞介素２（ＩＬ２）刺激后培养扩增，将扩增后的ＧＩＬ注入人脑胶质瘤裸鼠动物模型体内观察其动物体内杀瘤活性。选择１１例术后再次复发的人脑胶质瘤晚期患者进行ＧＩＬ临床治疗。结果经ＩＬ－２刺激培养３周的ＧＩＬ杀瘤活性最强。裸鼠体内试验证实ＧＩＬ肿瘤局部注射能显著抑制肿瘤生长。临床治疗１１例患者随访２年仅１例复发。结论胶质瘤术后将ＧＩＬ培养扩增３周，再回输入肿瘤残腔杀灭残留肿瘤细胞，可能是一种较为理想的人脑胶质瘤综合疗法     

脑胶质瘤的局部控释化疗研究进展

脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的肿瘤,经目前“标准治疗”(即手术 放疗 全身化疗)后,恶性胶质瘤患者的中位生存期仍不足1年。临床及CT观察均证实,几乎所有的恶性胶质瘤术后均要复发,90％以上的复发位于原发灶的2cm以内。虽然目前立体定向放射外科,间质内放疗及超分割放疗等技术相继应用于临床,为胶质瘤的治疗提供了新的手段,但当肿瘤体积较大,界限不清,形状不规则时,仍难以收到满意的效果,同时还有放射性脑损害的可能,加之对技术条件、设备要求高,临床推广应用有一定困难。而常规全身化疗由于血脑屏障的限制,多数化疗药物难以在颅内达到足够浓度,且毒副作用较严重,同时化疗药物     

脑恶性胶质瘤的局部治疗

脑恶性胶质瘤单靠手术无法根治，国内外许多学对其他局部治疗方法进行了广泛研究，包括局部放疗、化疗及免疫治疗等，并取得了一定成果。这些方法具有全身治疗不具备的优点，有着广阔的临床应用前景，但还存在一定的难度和不足，需不断地加以改进。     

神经胶质瘤患者外周血淋巴细胞亚群检测的临床分析

目的：分析神经胶质瘤患者检测其外周血淋巴细胞亚群的临床意义。方法选择2011-12-2013-08在我院接受诊治的神经胶质瘤患者65例作为观察组,选择同期在我院健康体检者43例作为对照组。分析2组患者采用流式细胞术检测CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋、CD4＋/CD8＋、CD3＋ T淋巴细胞及CD4＋CD25＋ T reg水平。结果观察组外周血中CD3＋ CD4＋T细胞与CD4＋/CD8＋比值较对照组显著降低（ P＜0.05）;A组外周血中CD3＋CD4＋百分比、CD4＋/CD8＋比值均较B组显著降低（ P＜0.05）;A组外周血中CD3＋CD8＋百分比较B组显著升高（ P＜0.05）;观察组CD4＋ CD25＋ T reg百分比较对照组显著升高（P＜0.05）;A组CD4＋CD25＋ Treg百分比较B组显著升高（P＜0.05）。结论恶性肿瘤存在免疫功能紊乱,对于神经胶质瘤外周血淋巴细胞的检测,尤其T reg细胞,有利于对神经胶质瘤患者恶性程度及疗效进行判断。     

肿瘤浸润淋巴细胞过继性免疫治疗人脑胶质瘤实验研究

观察了人脑胶质瘤肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）体外抗瘤活性及在人脑胶质瘤裸鼠模型体内，ＴＩＬ的抗瘤作用和瘤内分布。ＴＩＬ体外增殖能力和抗瘤活性均在培养３０天达高峰。肿瘤局部转输ＴＩＬ对肿瘤生长具有明显的抑制作用。ＩＬ－２可以提高ＴＩＬ的抗瘤作用，同时可增进ＴＩＬ向肿瘤内的集聚。     

脑胶质瘤中浸润的淋巴细胞研究

对脑胶质瘤中浸润的淋巴细胞研究是认识浸润的淋巴细胞特性及这些细胞与胶质瘤相互影响,也是判断胶质瘤病人生存、预后和免疫治疗的重要课题。本文概要地介绍这一研究的意义、发展和方法,为临床进一步研究和治疗脑胶质瘤开辟新途径。     

脑胶质瘤浸润性淋巴细胞的研究进展（综述）

应用免疫活性淋巴细胞作过继性免疫治疗(adop-tive immunotherapy)为临床治疗脑胶质瘤开辟了一条崭新的途径。继对 LAK 细胞(lymphokine-activatedkiller)的研究和临床试用性治疗脑胶质瘤之后,又发展到对第二代抗肿瘤效应细胞-TIL(tumor-infiltratinglymphocytes)的研究。随着免疫生物学的发展和免疫     

脑恶性胶质瘤的局部治疗现状

脑恶性胶质瘤是最常见的颅内原发性肿瘤，大多呈浸润性生长，单靠手术难以治愈，术后复发率高，而传统的放疗、化疗副作用较大，所以，国内外许多学者十分重视除手术以外的其他局部治疗措施包括局部放疗、化疗、生物治疗和免疫治疗等，现总结国外文献对胶质瘤的局部治疗作综述。     

脑胶质瘤患者认知功能障碍的研究

目的评价胶质瘤患者认知功能障碍的特点及手术对其的影响。方法对41例脑胶质瘤患者(胶质瘤组)的认知功能(包括注意、记忆、视觉空间、算术、数字符号、填图及相似)进行评估,比较额叶和非额叶肿瘤、左侧和右侧额叶肿瘤、术前和术后的差异,并与20名健康对照者(对照组)进行比较。结果胶质瘤组的注意、记忆、视觉空间、算术、数字符号、填图和相似的评分均明显低于对照组(均P0.01)。额叶肿瘤患者的注意、记忆和算术的评分均明显低于非额叶肿瘤患者(均P0.05)。左侧额叶肿瘤患者的注意、记忆、算术和相似的评分均明显低于右侧额叶肿瘤患者(P0.05~0.01)。胶质瘤组患者手术前后的注意、记忆、视觉空间、算术、数字符号、填图、相似的评分差异均无统计学意义。结论脑胶质瘤患者存在广泛的认知功能损害,额叶和非额叶肿瘤、左侧和右侧额叶肿瘤的认知功能损害各有特点。多模态影像学辅助的显微神经外科手术切除肿瘤没有进一步损害患者的认知功能。     

脑胶质瘤患者T淋巴细胞亚群检测的临床意义

目的 探讨T淋巴细胞亚群与胶质瘤恶性程度及其预后的关系,寻找术前评估胶质瘤恶性程度及其预后的临床免疫学指标. 方法 对中山大学肿瘤防治中心神经外科自2003年1月至2004年12月收治住院的117例脑肿瘤患者[其中胶质瘤共85例,高级别组(WHO Ⅲ～Ⅳ级)45例,低级别组(WHO Ⅰ～Ⅱ级)40例;脑膜瘤32例]术前用流式细胞仪(FACS)测定T淋巴细胞的含量,统计分析不同级别胶质瘤、脑膜瘤之间免疫学指标的差异,并依据术前外周血T淋巴细胞亚群检测结果,把胶质瘤患者分为CIM+/CD8~+比值>1及CD4~+/CD8~+比值<1两组,随访3～5年,作生存分析,比较两组之间的差异. 结果 统计分析结果显示,高级别胶质瘤组较低级别胶质瘤组CD4~+/CD8~+比值下降、CD8~+升高,差异均有统计学意义(P<0.05),其余指标差异无统计学意义.高级别胶质瘤组较脑膜瘤组CD4~+/CD8~+比值下降、CD8~+升高,差异均有统计学意义(P<0.05),其余指标差异尤统计学意义.低级别胶质瘤组较脑膜瘤组CD4~+/CD8~+比值下降,差异有统计学意3L(P<0.05),其余指标差异无统计学意义.胶质瘤组与脑膜瘤组比较,CD4~+、CD4~+/CD8~+值下降、CD8~+升高,差异均有统计学意义(P<0.05),CD3~+差异无统计学意义.CD4~+/CD8~+比值>1组患者48例随访3～5年,死亡21例(43.8%),中位生存期31个月;CD4~+/CD8~+比值<1的患者37例,死亡23例(62.2%),中位生存期16个月.两者行生存分析Kaplan Meier法检验,差异有统计学意SL(P<0.05). 结论 术前外周血T淋巴细胞亚群与胶质瘤的恶性程度相关.CD4~+/CD8~+比值低的患者生存时间较短,预后差.术前外周血T淋巴细胞哑群检测可以作为临床评估胶质瘤恶性程度及预后的参考指标.     

HAUSP在胶质瘤中的表达及其与肿瘤级别的相关性研究简

目的疱疹病毒相关性泛素特异性蛋白酶（herpes associated ubiquitin specific proteas,HAUSP）是泛素特异性修饰酶家族成员之一,能催化水解泛素分子c．末端的肽链连接,起到去泛素化作用。已有研究表明其参与调节多种癌／抑癌蛋白的调控,影响转录活性,与肿瘤的发生发展关系密切,但在胶质瘤组织中的研究国内外均尚未见报道。检测HAUSP在不同级别人脑胶质瘤中的表达及其与肿瘤恶性程度之间的关系,探讨其在胶质瘤发病过程中的作用。方法采用免疫组织化学染色法,免疫印迹法（WB）,实时荧光定量-聚合酶链反应（RT—PCR）方法,从蛋白和mRNA水平检测80例不同病理级别胶质瘤组织和10例正常脑组织标本中HAUSP的表达。结果HAUSP在正常脑组织中低表达,而在胶质瘤组织中的表达随着病理级别的升高而增多,且具有统计学意义。结论HAUSP与胶质瘤级别呈正相关性,HAUSP可作为胶质瘤诊断和治疗的潜在靶点。     

肿瘤干细胞与脑胶质瘤干细胞的研究现状

以往认为，肿瘤是由体细胞突变而成，每个肿瘤细胞都可以无限制地生长。但这无法解释肿瘤细胞似乎具有无限的生命力以及并非所有肿瘤细胞都能无限制生长的现象。肿瘤细胞生长、转移和复发的特点与干细胞的基本特性十分相似，因此，有学者提出肿瘤干细胞的理论，这一理论为我们重新认识肿瘤的起源和本质，以及临床肿瘤治疗提供了新的方向和视觉角度。其中的脑胶质瘤起源于脑胶质瘤干细胞（brain gliomastem cells．BGSCs）的学说对正确认识和理解脑胶质瘤的发生、发展及其生物学行为如侵袭性、转移、肿瘤的耐药性等均具有十分重要的理论意义和潜在的应用价值。[第一段]     

Histopathology,classification, and grading of gliomas

Neoplastic transformation occurs in all glial cell types of the human nervous system, producing a wide variety of clinico-pathological entities and morphological variants. Astrocytomas are most common and span an unusually wide spectrum, ranging from the slowly growing juvenile pilocytic astrocytoma to the highly malignant glioblastoma multiforme. Diffusely infiltrating astrocytomas of the cerebral hemispheres show an inherent tendency for progression towards a more malignant phenotype. This change is morphologically categorized in histologic grading schemes (e.g., WHO Grade II to IV) and is associated with the sequential acquisition of genetic alteration, including mutation in the p53 and homozygous deletion of the p16 tumor suppressor genes. Loss of heterozygosity on chromosomes 10 and 19q as well as amplification of the EGF receptor are largely restricted to malignant gliomas and thus considered late events in astrocytoma progression. Gliomas often show phenotypic expresson of different glial cell lineages (e.g., oligoastrocytoma). Recent studies sugeest that the occurrence of mixed glomas is not indicative of a polyclonal orgin but rather reflects altered gene exprssion leading to a charge in the balance of growth factors influencing glioma defferentiation. © 1995 Wiley-Liss, Inc.     

脑胶质瘤中survivin蛋白表达情况及其与肿瘤恶化程度关系的研究

目的 探讨survivin蛋白在脑胶质瘤的表达情况及其与肿瘤恶性程度之间的关系.方法收集脑胶质瘤患者组织蜡块90例,其中Ⅰ级30例,Ⅱ级30例,Ⅲ级～Ⅳ级30例.另取10例因颅脑创伤行内减压的正常脑组织蜡块作为对照.应用免疫组织化学染色方法检测脑胶质瘤组织survivin蛋白的表达情况. 结果 胶质瘤细胞胞浆中有survivin蛋白的表达,且随着肿瘤级别的增高,survivin蛋白的表达增强.其表达阳性率在Ⅰ级组中为16.67%(6/30),在Ⅱ级组中为46.67%(14/30),在Ⅲ级～Ⅳ级组中为86.67%(26/30),差异有统计学意义(P<0.05).而在正常脑组织中survivin的表达为阴性. 结论 Survivin在脑胶质瘤的恶变过程中起重要作用,针对survivin的靶向治疗有望成为治疗脑胶质瘤的一个新的途径.     

Tumor infiltrating immune cells in gliomas and meningiomas

Tumor-infiltrating immune cells are part of a complex microenvironment that promotes and/or regulates tumor development and growth. Depending on the type of cells and their functional interactions, immune cells may play a key role in suppressing the tumor or in providing support for tumor growth, with relevant effects on patient behavior. In recent years, important advances have been achieved in the characterization of immune cell infiltrates in central nervous system (CNS) tumors, but their role in tumorigenesis and patient behavior still remain poorly understood. Overall, these studies have shown significant but variable levels of infiltration of CNS tumors by macrophage/microglial cells (TAM) and to a less extent also lymphocytes (particularly T-cells and NK cells, and less frequently also B-cells). Of note, TAM infiltrate gliomas at moderate numbers where they frequently show an immune suppressive phenotype and functional behavior; in contrast, infiltration by TAM may be very pronounced in meningiomas, particularly in cases that carry isolated monosomy 22, where the immune infiltrates also contain greater numbers of cytotoxic T and NK-cells associated with an enhanced anti-tumoral immune response. In line with this, the presence of regulatory T cells, is usually limited to a small fraction of all meningiomas, while frequently found in gliomas. Despite these differences between gliomas and meningiomas, both tumors show heterogeneous levels of infiltration by immune cells with variable functionality. In this review we summarize current knowledge about tumor-infiltrating immune cells in the two most common types of CNS tumors–gliomas and meningiomas–, as well as the role that such immune cells may play in the tumor microenvironment in controlling and/or promoting tumor development, growth and control.     

miR-20a/106b调控NKG2D途径介导儿童型脑干胶质瘤免疫逃逸的实验研究

目的探讨miR-20a/106b在儿童脑干胶质瘤(BSG)恶性进展中的作用及其机制。方法回顾性纳入2012年1月至2017年12月天津市环湖医院(天津市脑系科中心医院)神经外科接受手术切除的13例儿童BSG患者和5例成人BSG患者。采用免疫组织化学染色法检测肿瘤组织标本中自然杀伤细胞2家族成员D(NKG2D)配体MICA的表达情况,采用生物信息学方法筛选出调控MICA的miRNA。应用人脑胶质瘤LN229和U251细胞株通过荧光素酶报告基因方法验证筛选出的miRNA与MICA的靶向调控关系,通过蛋白质免疫印迹(WB)实验检测miR-20a/106b转染LN229和U251细胞株后MICA的表达情况,通过乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测免疫细胞对LN229细胞株的毒性能力。通过向去胸腺幼年(3周龄)和成年(10周龄)雄性SD大鼠脑桥区立体定向注射LN229细胞株的方法制备BSG幼鼠(J-rat)和成年鼠(A-rat)模型,并根据注射细胞株不同各分为3组,依次为J-rat组、J-rat-scr组、J-rat-miR-20a/106b-d组和A-rat组、A-rat-scr组、A-rat-miR-20a/106b-u组(每组各3只),通过免疫组织化学染色方法检测MICA的表达情况,采用MCID软件检测肿瘤的侵袭性,采用TUNEL法检测细胞凋亡。结果成人患者的MICA总阳性表达率较儿童患者高(分别为5/5、10/13,P<0.05)。检索结果显示,有23个可能调控MICA的microRNA,其中包括miR-20a和miR-106b。在LN229细胞株中,荧光素酶报告基因结果显示,转染pGL3-MICA-wt(野生型)质粒的荧光强度较对照组和转染pGL3-MICA-mut(突变型)质粒的强(均P<0.05);WB结果显示,与空白对照组和无义序列组比较,AS-miR-20a组、AS-miR-106b组及AS-miR-20a/106b组MICA的表达均增加(均P<0.05)。上述实验在U251细胞株得到相似的结果。不同效靶比(20∶1,10∶1,5∶1)情况下,AS-miR-20a/106b组LDH的活性高于对照组和AS-miR-20a/106b+MICA mAb组(均P<0.05),但后两组的差异无统计学意义(均P>0.05)。术后头颅MRI结果显示,3组幼鼠和3组成年鼠均成功制备脑干胶质瘤模型。MCID软件检测结果显示,J-rat-miR-20a/106b-d组I值较J-rat组、J-rat-scr组均降低(均P<0.05);A-rat-miR-20a/106b-u组I值较A-rat组、A-rat-scr组均增加(均P<0.05)。免疫组织化学染色结果显示,J-rat-miR-20a/106b-d组的MICA染色强度均较J-rat组和J-rat-scr组增加(均P<0.05),A-rat-miR-20a/106b-u组MICA的染色强度均较A-rat组和A-rat-scr组降低(均P<0.05)。体内凋亡实验显示,J-rat-miR-20a/106b-d组的细胞凋亡指数均较J-rat组和J-rat-scr组增加(均P<0.05),A-rat-miR-20a/106b-u组的细胞凋亡指数较A-rat组和A-rat-scr组均降低(均P<0.05)。结论miR-20a/106b通过NKG2D途经达到的免疫逃逸是导致儿童型BSG恶性度高的重要原因。     

镇静清醒麻醉下手术切除语言功能区脑胶质瘤

目的探讨清醒麻醉下手术切除语言功能区胶质瘤并保全其语言功能的可行性及其治疗效果。方法选择位于语言功能区的脑胶质瘤患者10例,实施头皮神经干阻滞麻醉后全程清醒开颅手术,切除肿瘤中维持患者进行出声连续计数的语言功能监测,使尽可能全切肉眼可见肿瘤而保存功能脑区。结果清醒开颅手术全过程中麻醉满意,手术中患者能很好地完成语言监测配合,其中8例患者实现肿瘤的肉眼全切;术后未出现手术相关性语言障碍并发症;随访6～20个月,无肿瘤复发病例。结论局部阻滞麻醉下全程清醒手术能很好保障脑功能区病灶的开颅切除,术中出声连续计数的语言功能监测对安全切除语言功能区肿瘤有重要定位指导意义。     

Expression of tenascin in human gliomas: its relation to histological malignancy,tumor dedifferentiation and angiogenesis

Summary The immunohistochemical distribution of tenascin (TN), fibronectin (FN), and laminin (LN) was investigated in 56 human gliomas (8 astrocytomas, 15 anaplastic astrocytomas, and 33 glioblastomas) with regards to the histological degree of malignancy and the degree of tumor cell differentiation evaluated by the staining of glial fibrillary acidic protein (GFAP). In 8 anaplastic astrocytomas and 28 glioblastomas, TN was predominantly immunolocalized in the basement membrane zone of the proliferating tumor vessels; sections of all astrocytomas were negative for TN staining. FN was localized in the basement membrane zone of the vessels in all astrocytomas, 12 anaplastic astrocytomas, and 22 glioblastomas. In 7 anaplastic astrocytomas and 19 glioblastomas, both TN and FN were expressed to various degrees in the tumor vessels. However, most of the TN-positive vessels did not express FN, and most of the FN-positive vessels were negative for TN staining. Furthermore, in 6 anaplastic astrocytomas and 12 glioblastomas, either TN of FN, but not both, were expressed in any area on serial sections. Most of the tumor cells around TN-positive, FN-negative tumor vessels did not express GFAP. On the other hand, GFAP was present in most tumor cells around TN-negative, FN-positive vessels. LN was detected in all vascular and pial-glial basement membrane zone of the tissues examined. These findings indicate that the degree of histological malignancy and the degree of cell dedifferentiation of human gliomas correlate well with the expression of TN, but are inversely correlated with the expression of FN. We postulate that the expression of TN, but not of FN, plays a role in the promotion of angiogenesis in malignant gliomas.