发育性髋脱位髋关节囊中Ⅰ、Ⅲ型胶原的免疫组化研究

目的 探求发育性髋脱位（developmental dislocation of the hip，DDH）患儿与正常儿关节囊中Ⅰ、Ⅲ型胶原分布与含量的差异。方法对30例发育性髋脱位患儿及对照组12例小儿髋关节囊进行Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫组化研究。并选取9对性别相同年龄相近的发育性髋脱位患儿与对照组配对比较。应用图像分析软件进行量化分析，并经统计学处理。结果 关节囊滑膜层Ⅰ型胶原阳性染色强于纤维层，组间无明显差异；纤维层中Ⅰ型胶原阳性染色的成纤维细胞数占总计数成纤维细胞的百分比及Ⅰ型胶原染色的灰度值在髋脱位组与对照组问存在显著差异（P〈0．05）；全部标本中仅有3例大龄DDH患儿Ⅲ型胶原染色阳性。结论 发育性髋脱位患儿关节囊中Ⅰ型胶原含量及合成能力均较正常同龄儿低，可能是导致髋关节囊松弛的原因。     

转化生长因子β2在发育性髋关节发育不良患儿关节囊的分布和表达

目的：探讨发育性髋关节发育不良（DDH）患儿和非DDH儿童TGF-β2在关节囊的免疫组化分布规律与水平差异,并比较TGF-β2在mRNA水平的表达差异,以探索髋关节松弛的原因。方法：选取性别相同、年龄相近的8对DDH（发育性髋关节脱位）患儿与非DDH儿童进行配对研究,采用S-P法免疫组化技术和半定量RT-PCR技术检测关节囊中TGF-β2的分布规律与水平差异,以及mRNA水平的差异。结果：分泌TGF-β2的成纤维细胞于贴近关节侧的滑膜层呈强阳性表达,内部纤维层阳性表达细胞稀疏,强度减弱。DDH组与对照组配对比较,纤维层中有阳性成纤维细胞百分比及局部染色的灰度值较对照组明显减少,差异有统计学意义,P<0.01。DDH组关节囊TGFβ2 mRNA的表达较对照组减少,差异有统计学意义,P<0.05。结论：DDH患儿的髋关节松弛很可能与关节囊中TGF-β2的分布减少和表达异常有关。［中国当代儿科杂志,2010,12（8）：641-644］     

发育性髋关节脱位关节囊(胶原)组织偏光显微镜观察及临床病理意义

目的 观察发育性髋关节脱位(developmental dislocation of the hip,DDH)与正常儿童的髋关节囊的形态学特点,分析Ⅰ型和Ⅲ型胶原含量及二者比例(Ⅰ/Ⅲ)变化规律.方法 2005年6月～2006年8月第一次手术DDH患儿42例,男8例,女34例,排除胶原代谢疾病及其他畸形.对照组选择因其他疾病第一次行髋关节手术及尸检患儿共20例,男7例,女13例,1.5～14岁,平均7.4岁,无DDH病史,排除胶原代谢疾病及其他畸形.根据术前X线片,按Tonnis分类将DDH患儿分为四组,分别与正常对照组对比分析.关节囊取材于手术或尸检切除标本,行苦味酸-天狼猩红染色,分别在普通显微镜和偏振光显微镜下观察并测量Ⅰ型和Ⅲ型胶原含量及计算比例(Ⅰ/Ⅲ).结果 对照组与Tonnis各组分别进行t检验,差异有统计学意义(P=0.000<0.01);病例组间进行方差分析,差异无统计学意义(0.1250.05);但是其值病例组要明显低于对照组(P<0.05).结论 DDH患儿和对照组间关节囊Ⅰ和Ⅲ型胶原含量及比例(Ⅰ/Ⅲ)有较大差别,但是脱位高患儿并不一定会有明显形态学上改变.     

发育性髋关节发育不良患儿COL1A1基因启动子区突变筛查

目的 检测发育性髋关节发育不良(developmental dysplasia of the hip,DDH)患儿的COL1A1基因启动子区是否存在突变.方法 对COL1A1基因转录起始点上游1060 bp(-1024～+36 bp)的片段设计4对引物,在109例DDH患儿中分别进行PCR扩增,扩增产物直接测序.有基因变异的患儿,对其父母及100例正常儿的该段启动子也进行PCR扩增、测序,以确定变异位点的性质.结果 在2例DDH患儿的第-106位碱基检测到C→T杂合变异,同时对100例正常人进行测序,未发现相同的变异.经网上基因数据库检索,也未发现该位点有已知多态.证实COL1A1基因转录调控区-106位碱基的C→T杂合变异为DDH核心家系中新发现的突变.结论 在部分DDH患儿中,COL1A1基因启动子区的-106位碱基存在C→T杂合突变,该突变可能与DDH患儿关节囊及圆韧带组织中COL1A1表达降低有关.     

血小板源生长因子A(PDGF-A)在发育性髋关节发育不良关节囊的分布和表达

目的 探求发育性髋关节发育不良患儿(development dysplasia of hip,DDH)和对照组儿童血小板源生长因子A(PDGF-A)在关节囊中的免疫组化分布规律与水平差异,并比较PDGF-A 在mRNA水平的表达差异,以探索髋关节松弛的原因.方法 共收集了髋脱位患儿64例和对照组儿童14例,二组之间成功配对8组,进行配对研究,每组配对条件为性别相同、年龄相近,采用S-P法免疫组化技术和半定量RT-PCR技术检测关节囊中PDGF-A的分布规律与水平差异,以及在mRNA水平的差异.运用图像分析软件进行量化分析,并采用SPSS 10.0软件进行统计学分析.结果 可见分泌PDGF-A的成纤维细胞于关节囊内贴近关节侧的滑膜层呈强阳性表达,内部纤维层阳性表达细胞稀疏,强度明显减弱.8例患儿与对照组配对比较,纤维层中有阳性表现的成纤维细胞数占成纤维细胞总数的百分比(配对T检验P＜0.001)和局部染色的灰度值(配对T检验P＜0.05)在二组间差异存在统计学意义,DDH组关节囊PDGF-A mRNA的表达较对照组减少(配对T检验P＜0.01).结论 PDGF-A的分布减少和表达异常很可能与DDH患儿的髋关节松弛有关.

Abstract：

Objective To study the expression of platelet-derived growth factor-A (PDGF-A) in the hip capsule of children with developmental dysplasia of the hip (DDH).Methods The clinical data of 64 patients with DDH and 14 control children were retrospectively analyzed.Among them,8 pairs of DDH patients and their controls were chosen for this study.The tissues were collected during surgery.The PDGF-A in the hip capsule was detected using immunohistochemistry (SP method) staining.RT-PCR was used to study the mRNA expression of PDGF-A.Results High expression of PDGF-A was observed in the synovial layer with fibroblast regularly arranged parallel to the joint surface.PDGF-A expression was decreased in the fibrous layer of the hip capsule.The percentage of positive fibroblast and gray-scale density was significantly different in the fibrous layer of the DDH patients compared to controls (P＜0.05).The mRNA expression of PDGF-A was also decreased in the DDH patients compared to the controls (P＜0.01).Conclusions The decreased expression of PDGFA in the hip capsule may involve in the development of DDH.     

联合应用Graf和Harcke超声技术评价DDH早期诊治的临床效果

目的联合应用Graf和Harcke超声评价发育性髋关节发育不良(developmental dysplasia of the hip,DDH)的早期诊治效果,探讨关节稳定性与发育状况的关系。方法收集2017年6月至2018年5月小儿骨科首诊的存在DDH风险因素的婴儿资料共113例226髋,平均年龄为10周,范围为4～19周。应用Harcke技术评价髋关节外展程度和稳定性,应用Graf技术对髋关节进行分型。其中Graf Ⅰ型髋关节不予治疗,首诊后4～6周复查,若仍为Graf Ⅰ型则终止随访。Graf Ⅱa+型且"外展正常"的髋关节暂不治疗,于婴儿12周龄后复查,若连续2次复查均为Graf Ⅰ型则终止随访;若转为Graf Ⅱb型则予以治疗。"外展受限"的Graf Ⅱa+型和其他分型均予Ottobock支具治疗。经过治疗的患儿均于1岁时复查X线片,测量髋臼指数,应用IHDI分型评价髋关节发育情况,比较首诊时各Graf分型髋关节的稳定性。结果 Graf Ⅱ a+型且"稳定"、"外展受限"2髋,Ⅱa+型且"松弛"、"外展正常"转为Ⅱb型2髋,予以治疗;其余分型53髋均予治疗。共治疗57髋,平均治...     

Salter骨盆截骨术治疗学步期发育性髋关节脱位

目的介绍Salter骨盆截骨术在学步期发育性髋关节脱位（DDH）患儿中的治疗指征和手术要点，探讨Salter骨盆截骨术早期干预“学步期”DDH患儿的重要意义。方法2002年12月-2005年12月，采用Salter骨盆截骨术治疗DDH患儿29例，3例为多关节挛缩。男8例，女21例；年龄12～18个月，平均16．59个月；双侧12例，左侧11例，右侧6例。共计手术31髋，全脱位25髋，半脱位6髋。所有病例完善术前检查后不作牵引直接行Salter骨盆截骨术。术后髋人字石膏固定2个月，双下肢皮肤牵引，床上关节活动1个月后下地负重行走。结果所有病例术后2个月，6个月，1年，之后每年1次连续随访。随访6442个月，平均21．76个月。X线疗效按照Severin分级：Ⅰ级28髋，Ⅱ级3髋，Ⅲ级0髋。临床疗效优28髋，良3髋，可0髋，差0髋。结论根据国外的报道和我们的经验，对12～18个月处于“学步期”年龄段的全脱位和严重半脱位类型的DDH患儿采用Salter骨盆截骨术与保守治疗相比，可以在确保髋关节有效复位的同时，降低股骨头缺血坏死的发生率，避免二次手术，缩短疗程，对多关节挛缩髋脱位也具有良好的疗效，是一种安全、有效的手术方法。     

低浓度紫杉醇对大鼠肺动脉平滑肌细胞外胶原沉积的作用及其机制研究

目的 探讨低浓度紫杉醇（PTX）对转化生长因子β1（TGF-β1）促进大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）外胶原沉积的作用及其机制。方法 原代培养大鼠PASMCs并分为空白对照组、模型组和干预组（n=3）。空白对照组不做任何处理,模型组施加终浓度为10 ng/mL的TGF-β1,干预组在模型组基础上施加终浓度为100 nmol/L的PTX。MTT比色法检测细胞增殖能力;实时荧光定量PCR法检测Ⅰ型胶原（COLⅠ）、Ⅲ型胶原（COLⅢ） mRNA相对表达量;ELISA法检测COLⅠ、COLⅢ蛋白的OD值;Western blot法检测COLⅠ、COLⅢ蛋白,以及TGF-β1/Smad3信号通路关键蛋白Smad3、p-Smad3的相对表达水平。结果 与空白对照组比较,模型组细胞增殖能力、COLⅠ、COLⅢ mRNA及其蛋白、p-Smad3蛋白相对表达水平均明显增高（P < 0.05）;干预组上述指标较模型组均有所下降,但仍高于空白对照组（P < 0.05）;各组Smad3蛋白相对表达水平比较差异均无统计学意义（P > 0.05）。结论 低浓度PTX对TGF-β1促进PASMCs外胶原合成具有明显抑制作用,该作用可能是通过调控Smad3蛋白的磷酸化来实现。     

坐骨重叠征与发育性髋关节脱位手术后再脱位的相关性分析

目的提出坐骨重叠征(ischium overlap sign,IOS)的概念,并分析其与发育性髋关节脱位(developmental dysplasia of the hip,DDH)手术后再脱位的关系。方法回顾性分析2013年9月至2017年5月山东大学附属省立医院治疗的88例(105髋)DDH患儿病例资料,其中男童16例、女童72例;平均年龄12(5~24)个月,平均随访时间34(15~59)个月;双侧17例,左侧63髋,右侧42髋;1髋为髋臼发育不良,11髋半脱位,93髋全脱位。术中行髋关节造影检查,按照Bowen标准选择闭合或切开复位石膏固定术。IOS是指在人类位髋关节造影平片上股骨头软骨内缘与坐骨外缘的重叠关系,二者重叠为Ⅰ度,相接为Ⅱ度,分离为Ⅲ度。将93髋全脱位按照IOS分度进行分组,比较组间再脱位发生率。结果 1髋髋臼发育不良和11髋半脱位者IOS均为Ⅰ度。93髋全脱位中IOSⅠ度14髋,Ⅱ度39髋,此两组均行闭合复位石膏固定,无再脱位病例;Ⅲ度40髋中,闭合复位石膏固定17髋,6髋再脱位;切开复位石膏固定23髋,1髋再脱位。本研究发现Ⅲ度组的再脱位发生率(7/40,17.5%)高于其他两组(P=0.006)。IOS为Ⅲ度的40髋中,闭合复位的再脱位发生率(6/17,35.3%)高于切开复位(1/23,4.4%),差异有统计学意义(X^2=4.518,P=0.034)。结论 IOS与DDH术后再脱位有一定的关系,IOS为Ⅲ度的髋关节如行闭合复位,再脱位的风险较高。     

三维计算机X线断层照像术测量股骨颈前倾角在发育性髋关节脱位治疗中的应用

目的探讨三维CT测量股骨颈前倾角(FNA)在小儿发育性髋关节脱位(DDH)治疗中的应用价值。方法DDH患儿12例,其中双髋脱位4例,单髋脱位8例,均行闭合复位、蛙式石膏外固定术,采用GE公司Hip speed Fi/x双层螺旋CT进行表面遮盖成像、最大密度投影、多平面重建等三维观察和FNA测量,分别在术前对股骨头颈、髋臼及臼头关系行三维重建。结果髋脱侧FNA明显增大,与其同年龄段患儿正常髋关节侧比较差异有显著性(P<0.05)。结论三维CT可直观、全面及分解地显示髋关节结构,更加精确地测量FNA,从而达到对DDH患儿个体化治疗的目的。     

18个月到3岁发育性髋关节脱位患儿初次开放复位股骨截骨与不截骨近期疗效的比较研究

目的 探讨股骨是否截骨对1 8个月～3岁儿童发育性髋关节脱位(developmental dislocation of the hip,DDH)开放复位手术治疗的近期疗效有无影响.方法 回顾性研究2010年1月至2013年12月间在国内8家单位行开放复位手术治疗的18个月～3岁的67例DDH患儿中,股骨截骨组(41例)与股骨不截骨组(26例)的近期疗效有无差异,评估术后髋臼指数(acetabular index,AI)变化,股骨头缺血性坏死(avascular necrosis,AVN)率及髋关节再脱位率有无差异.结果 股骨截骨组41例,平均年龄(2.27±0.46)岁;术后2年内复查X线发生AVN 5例,均为Bucholz-Ogden Ⅰ型,发生髋关节再脱位3例.股骨不截骨组26例,平均年龄(1.99±0.38)岁;术后2年内复查X线发生AVN 3例,均为Bucholz-Ogden Ⅰ型,发生髋关节再脱位1例.其他并发症有医源性骨折1例,为截骨组患儿;髋关节僵硬1例,为股骨不截骨组患儿;跛行6例,股骨截骨组3例、不截骨组3例.两组间术前AI、年龄、性别构成及脱位程度等指标差异均无统计学意义(P＞0.05).股骨截骨组开放复位术后复查AI平均(20.57±6.89)度,股骨不截骨组为(24.21±7.20)度,组间差异有统计学意义(P＜0.05);但两组术后1年及2年AI差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 回顾性研究提示18个月～3岁DDH患儿行开放复位手术时股骨是否截骨对于术后AI的改善情况、近期AVN及髋关节再脱位率没有显著影响.因此,18个月～3岁DDH儿童行开放复位手术时推荐不常规应用股骨截骨术以减少手术创伤,但应综合术中复位难易情况考虑.     

转化生长因子β1对高体积分数氧暴露早产新生大鼠肺纤维化的调控作用

目的 探讨转化生长因子(TGF-β1)对高体积分数氧(高氧)暴露早产新生大鼠肺纤维化的调控作用.方法 将80只早产新生SD大鼠随机分为空气组和高氧组,每组40只;每组又随机分为3、7、14、21 d4个亚组.采用原位杂交法检测各亚组早产大鼠肺组织TGF-β1 mRNA表达与分布;采用免疫组织化学法检测各亚组早产大鼠肺组织TGF-β1蛋白、Ⅰ型与Ⅲ型胶原表达与分布;并用图像分析方法 检测各亚组早产大鼠肺组织TGF-β1 mRNA及其蛋白与Ⅰ型、Ⅲ型胶原阳性表达的PU值.结果 高氧第3天,肺组织TGF-β1mRNA及其蛋白呈现弱阳性表达,第7、14、21天呈强阳性表达,其表达量于第7天开始增高,第14天达高峰;肺组织TGF-β1 mRNA及其蛋白阳性表达的Pu值在第7、14、21天均高于空气组(Pa<0.01).Ⅰ型胶原在第3、7天时呈弱阳性表达,第14、21天时呈强阳性表达,其表达量从第14天开始增加,第21天时达高峰;Ⅲ型胶原表达强度在第3天时呈弱阳性,第7天时开始增强呈中等阳性表达,第14、21天时呈强阳性表达,其表达量在第7天时开始增加,第14天时达高峰,表达量高于Ⅰ型胶原;肺组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原阳性表达的PU值在第14、21天时均明显高于空气组(Pa<0.01).高氧组肺组织TGF-β1 mRNA及其蛋白与Ⅰ型、Ⅲ型胶原阳性表达均分布于支气管和血管周围结缔组织及肺间质中;在第14、21天高氧组肺组织TGF-β1蛋白表达与Ⅰ型胶原呈显著正相关(r=0.881,0.793 P.<0.01),与Ⅲ型胶原亦呈显著正相关(r=0.866,0.891 Pa<0.01).结论 TGF-β1过度表达而介导的细胞外基质(ECM)过度合成是肺纤维化发生的重要机制,在肺纤维化形成过程中TGF-β1对Ⅰ型、Ⅲ型胶原等ECM的沉积发挥重要的调控作用.     

Wnt通路中Wif-1和β-catenin在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达

目的研究Wnt通路中Wnt通路抑制因子1(Wif-1)和β连环蛋白(β-catenin)在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的表达及可能的作用。方法收集初发并且诱导缓解治疗第33天完全缓解的35例ALL患儿的临床资料,以治疗前作为初发组,第33天达完全缓解时作为缓解组,对照组为15例非恶性血液病患儿。RT-PCR方法检测Wif-1和β-cateninm RNA的表达,ELISA法测Wif-1蛋白的表达。结果初发组Wif-1m RNA及蛋白的表达明显低于对照组和缓解组,β-cateninm RNA的表达高于对照组和缓解组(P0.05)。在初发组和缓解组,高危患儿的β-cateninm RNA表达均高于中危和低危患儿,Wif-1m RNA、蛋白表达低于中危和低危患儿(P0.05)。在初发组和缓解组,T-ALL患儿β-cateninm RNA的表达高于B-ALL患儿,Wif-1m RNA、蛋白表达低于B-ALL患儿(P0.05)。各组Wif-1和β-cateninm RNA表达呈负相关(P0.05)。结论 Wif-1表达下降、β-catenin表达增高是儿童急淋发病机制之一,Wif-1下降和/或β-catenin增高的程度可能与预后相关。     

髓样细胞触发受体-1在川崎病发病机制中的作用

目的 探讨髓样细胞触发受体-1(TREM-1)激活在川崎病(KD)发病机制中的作用。方法 45例KD患儿分为有冠脉损害组(CAL组,16例)和无冠脉损害组(NCAL组,29例),同期呼吸道感染患儿作为发热对照组(15例),健康体检儿童作为正常对照组(15例)。采用荧光定量PCR检测外周血单个核细胞(PBMC)中TREM-1 mRNA、DNAX-活化蛋白12 (DAP12) mRNA表达水平,ELISA法检测血清可溶性TREM-1(sTREM-1)、DAP12、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、IL-8的蛋白水平。结果 KD患儿的sTREM-1、DAP12蛋白及TREM-1 mRNA、DAP12 mRNA表达均高于两个对照组 (P < 0.05),且CAL亚组的sTREM-1蛋白及TREM-1 mRNA表达高于NCAL亚组 (P < 0.05)。KD患儿的MCP-1、IL-8高于两对照组 (P < 0.05),且CAL亚组的MCP-1高于NCAL组 (P < 0.05)。KD患儿的sTREM-1与MCP-1呈正相关 (r = 0.523,P < 0.05)。结论 髓样细胞触发受体-1激活可能在KD 发生过程中起重要作用。     

发育性髋关节脱位术后再脱位的三维CT分析

目的 利用3DCT影像,来探讨DDH术后再脱位的髋臼及股骨近端的骨性病理形态改变,以分析术后再脱位的原因,从而指导和改进DDH的手术治疗.方法 对28例(28髋)DDH术后再脱位患儿的3DCT影像资料进行分析,测量其髋臼前外侧缘倾斜角、髋臼后外侧缘倾斜角、侧面髋臼上缘倾斜度、前髋臼指数、后髋臼指数、髋臼前倾角、股骨颈前倾角、颈干角等参数指标,并观察髋臼外上缘(中上缘)的形态及股骨头与髋臼是否为同心圆复位关系等,并与38例(51髋)手术成功患儿术后值以及正常组(健侧组)进行对比分析,来探讨术后再脱位的原因.结果 术后再脱位组患儿的颈干角为(158.4±10.1)°,与正常组的(138.1±7.2)°和手术成功组的(139.0±5.9)°比较,数值明显增大,差异均有统计学意义;术后再脱位组患儿髋臼外上缘重型缺损者所占比例为82.14%与手术成功组的3.92%比较,差异有统计学意义;术后再脱位组所有患儿均未能恢复髋关节的同心圆复位关系,而所有手术成功组患儿的髋关节均恢复或接近恢复了同心圆复位关系.结论 术后再脱位原因与颈干角的角度、髋臼外上缘形态、股骨头与髋臼是否恢复同心圆复位关系等密切相关.     

学龄儿童发育性髋关节脱位术后关节僵硬的前瞻性研究

目的探讨学龄儿童发育性髋关节脱位术后关节僵硬的原因。方法似设手术后创伤性炎症反应是引起学龄儿童发育性髋关节脱位术后关节僵硬的一个重要原因。本院2003年1月至2008年1月收治6岁以上发育性髋关节脱位患儿（Tonnis分级Ⅳ°）41例（64髋）,年龄6～12岁,平均年龄8．2岁。均行髋关节切开复位,股骨、骨盆截骨术。采取前瞻性随机对照方法,分为研究组与对照组,研究组25例（39髋）,其中双侧14例;男4例,女21例;对照组16例（25髋）,其中双侧9例;男3例,女13例。术前均不做牵引,手术由同一主刀医生和相同手术组成员完成。研究组术后应用激素（地塞米松）和布洛芬5d。术后两组均予石膏固定6周,定期检查髋关节活动范围、骨盆及股骨近端截骨愈合速度与质量。结果所有病例均获随访,随访时间10个月至5年,平均32个月。疗效评价采用Mekay临床髋关节功能评定标准。研究组优5例7髋,良15例24髋,可3例5髋,差2例3髋;对照组优2例3髋,良6例10髋,可4例6髋,差4例6髋。两组各有1例1髋出现股骨头坏死。研究组髋关节轻度僵硬5例8髋,中度僵硬2例3髋,重度僵硬1例1髋;对照组髋关节轻度僵硬4例7髋,中度僵硬3例5髋,重度僵硬2例3髋;两组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论手术后创伤性炎症反应是引起学龄儿童发育性髋关节脱位术后关节僵硬的一个重要原因。术中尽量减轻创伤、术后短期使用地塞米松及非甾体抗炎药物能减轻手术后创伤性炎症反应,减少术后髋关节僵硬的发生。