线粒体ATP敏感钾通道介导缺氧预处理期细胞外信号调节蛋白激酶活化的机制

目的探讨线粒体ATP敏感钾通道(mKATP)与细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)在缺氧预处理延迟保护机制中的相互关系. 方法采用SD大鼠心肌细胞培养复制、缺氧/复氧损伤模型及缺氧预处理模型,建立对照组、缺氧/复氧组、缺氧预处理组、二氮嗪组、5-羟基癸酸+二氮嗪组、5-羟基癸酸+缺氧预处理组、二氮嗪+MGP组、缺氧预处理+2-巯基丙酰基甘氨酸(MGP)组、二氮嗪+PD98059组,以细胞存活率等作为反映心肌细胞损伤的指标,并于预处理后不同时间点分别测定细胞内活性氧含量及ERK1/2的活性. 结果缺氧预处理组及二氮嗪组细胞存活率和细胞内超氧化物歧化酶活性[(81.9±11.4)%、(13.6 ± 3.7)U/L,(79.2±12.4)%、(16.5±4.6)U/L]均显著高于缺氧/复氧组[(42.2±7.3)%、(8.8±2.8)U/L],缺氧预处理组及二氮嗪组乳酸脱氢酶释放[(101.9±18.9)U/L、(97.5±17.7)U/L]均显著低于缺氧/复氧组[(250.5±43.6)U/L,均为P＜0.01].缺氧预处理及二氮嗪均可快速诱导细胞内大量的活性氧生成并激活ERK1/2,但这些作用均可被mKATP阻滞剂5-羟基癸酸及氧自由基清除剂MGP所阻断.二氮嗪的细胞保护作用还可被ERK1/2阻滞剂PD98059所抵消. 结论 mKATP可通过诱导活性氧的生成而促进预处理期ERK1/2的激活,从而启动缺氧预处理延迟保护.     

硫化氢对乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤的保护作用

目的:研究不同浓度的硫化氢(H_2S)对缺氧不同时间的乳鼠心肌细胞损伤的直接影响及其对复氧损伤的间接影响,分析其对乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤的保护作用.方法:原代培养的乳鼠心肌细胞随机分为正常对照组、缺氧硫氢化钠(NaHS)0组、缺氧硫氢化钠 100 μmol/L组、缺氧硫氢化钠 200 μmol/L组、缺氧硫氢化钠400 μmol/L组以及缺氧-复氧硫氢化钠0组、缺氧-复氧硫氢化钠100 μmol/L组、缺氧-复氧硫氢化钠 200 μmol/L组、缺氧-复氧硫氢化钠 400 μmol/L组.在缺氧24 h、48 h、72 h后及复氧2 h后均检测细胞存活数量、培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性.结果:缺氧硫氢化钠100 μmol/L组、缺氧硫氢化钠200 μmol/L组和缺氧硫氢化钠 400 μmol/L组缺氧培养24 h、48 h和72 h后与各自时间点缺氧硫氢化钠0组比心肌细胞存活数量升高(P<0.01)、培养液中乳酸脱氢酶活性降低(P<0.01),差异均有统计学意义;缺氧硫氢化钠 200 μmol/L组和缺氧硫氢化钠 400 μmol/L组在缺氧培养24 h后较缺氧硫氢化钠100 μmol/L组心肌细胞存活数量升高(P<0.01)、培养液中乳酸脱氢酶活性降低(P<0.05～0.01),差异均有统计学意义.缺氧-复氧硫氢化钠100 μmol/L组、缺氧-复氧硫氢化钠200 μmol/L组和缺氧缺氧-复氧硫氢化钠400 μmol/L组缺氧培养24 h、48 h、72 h并复氧2 h后较各自时间点缺氧-复氧硫氢化钠0组比心肌细胞存活数量升高(P<0.01)、复氧后心肌细胞乳酸脱氢酶漏出量降低(P<0.01),差异均有统计学意义.结论:100~400 μmol/L 硫氢化钠对缺氧-复氧心肌细胞具有保护效果.200~400 μmol/L 硫氢化钠对缺氧24 h的心肌细胞保护作用较好.     

加味丹参饮预处理对乳鼠缺氧/复氧心肌细胞的延迟保护作用及对蛋白激酶C的影响

目的观察加味丹参饮预处理对乳鼠缺氧/复氧心肌细胞的延迟保护作用及对蛋白激酶C(PKC)的影响。方法将培养72h的乳鼠心肌细胞随机分为6组,空白组正常培养;血清对照组加50%大鼠血清培养;含药血清组加50%含加味丹参饮的药物血清培养;缺氧/复氧组予缺氧再给氧。缺氧预处理组、加味丹参饮预处理组先给予缺氧预处理和加味丹参饮预处理,24h后再予缺氧再给氧。结果加味丹参饮预处理24h后可防止缺氧/复氧心肌细胞存活率的降低,防止乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)活性的升高(P<0.01),提高蛋白激酶C活性(P<0.01)。结论加味丹参饮预处理具有延迟保护作用,其机制与激发细胞内PKC信号转导通路有关。     

苯那普利对乳鼠缺氧复氧心肌细胞肿瘤坏死因子的影响

目的 观察苯那普利对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤时肿瘤坏死因子(TNF-α)的影响和可能机制.方法 采用纯化的乳鼠心肌细胞复制缺血再灌注模型.实验分5组正常对照组、单纯缺氧复氧组(HR)、缺氧复氧+苯那普利低剂量组(1×10-7 mol/L)、缺氧复氧+苯那普利中剂量组(1×10-6 mol/L)和缺氧复氧+苯那普利高剂量组(1×10-5 mol/L).细胞缺氧1 h复氧2 h后取细胞培养液测定TNF-α及乳酸脱氢酶(LDH)的活性,取细胞测定超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.结果 单纯缺氧复氧组与对照组比较,TNF-α(40.32±5.54和5.43±3.32,P＜0.05)、LDH(27.83±2.71和8.0±1.41,P＜0.01)和MDA(0.757±0.036和0.131±0.029,P＜0.01)含量增高,SOD活性明显降低(对照组为36.13±1.43,其他各组为13.20±1.10、8.87±1.43、21.84±1.31、24.34±1.07,分别为P＜0.01和P＜0.05);各组苯那普利均减弱TNF-α的表达,减少MDA的生成和LDH的释放,明显提高SOD活性,并呈剂量依赖趋势.结论 苯那普利可抑制乳鼠缺氧复氧心肌细胞过度分泌TNF-α,具有明显的抗缺氧复氧损伤、保护心肌的作用.     

Janus激酶2/信号转导和转录激活子3信号通路在心肌细胞缺氧损伤中的作用

目的探讨Janus激酶2/信号转导和转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路在心肌细胞缺氧损伤中的作用。方法体外培养的新生大鼠心肌细胞,构建缺氧模型,按随机数字表法分为正常对照组、缺氧组、JAK2抑制剂AG490处理组和STAT3抑制剂Statti c处理组。采用细胞计数试剂盒CCK-8检测心肌细胞活力,采用比色法检测细胞上清液中的乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,并采用缺口末端标记法(TUNEL)检测各组细胞的凋亡率。采用蛋白质印迹(Western blot)检测JAK2及STAT3蛋白表达及磷酸化情况。结果与正常对照组相比,缺氧组心肌细胞成活率明显降低,为对照组的30.14%±6.23%(P<0.01),细胞上清液中LDH、MDA含量升高明显,分别为(50.11±2.58)U/L和(19.55±1.81)mol/L(均为P<0.01),SOD活力则显著降低,为(10.21±0.57)U/ml(P<0.01),缺氧组凋亡率明显升高,为24.24%±4.37%(P<0.01),JAK2、STAT3磷酸化水平上调。AG490及Stattic预处理后,JAK2及STAT3磷酸化水平降低,心肌细胞成活率明显升高(P<0.01),LDH、MDA含量显著低于缺氧组(均为P<0.01),SOD活力则高于缺氧组(P<0.01)。结论 JAK2/STAT3信号通路参与了缺氧所致心肌细胞损伤,抑制JAK/STAT通路有助于减轻缺氧所致心肌损伤。     

胰高血糖素样肽1对乳鼠心肌细胞凋亡的影响及其机制

目的 研究胰高血糖素样肽1(GLP-1)对缺氧复氧诱导的乳鼠心肌细胞损伤的影响及其可能机制.方法 通过给原代培养的乳鼠心室肌细胞缺氧16 h、复氧4 h,建立缺氧复氧(H/R)心室肌细胞损伤模型.于缺氧前随机分为正常对照组,H/R组,GLP-1+H/R组,GLP-1+H/R+U0126组,GLP-1+H/R+LY294002组,H/R+U0126组和H/R+LY294002组.H/R损伤后测定上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、细胞凋亡率和半胱天冬酶-3(Caspase-3)活性.结果 H/R组LDH活性、细胞凋亡率和Caspase-3活性均明显高于正常对照组(P均<0.01).而GLP-1+H/R组LDH活性[(128.47±7.96)U/L比(223.96±22.10)U/L,P<0.01]、细胞凋亡率[(2.84±2.56)%比(12.58±6.69)%,P<0.01]和Caspase-3活性[(36 809±4750)RLU比(57 602±9161)RLU,P<0.01]则明显低于H/R组,但上述指标变化可分别被LY294002(PI3K抑制剂)和UO126(MAPK抑制剂)抑制.结论 GLP-1可以直接作用于心肌细胞,对H/R诱导的心肌细胞损伤产生一定的保护作用,保护作用可能主要是通过抑制心肌细胞的凋亡实现的,并且GLP-1对凋亡的抑制作用可能与PI3K/Akt和MAPK所介导的抗细胞凋亡作用有关.     

一氧化氮对培养乳鼠心肌细胞低氧复氧损伤的影响

目的 :研究 NO对乳鼠心肌细胞低氧 /复氧 （A/R）损伤的影响。方法 :建立心肌细胞 A/R损伤模型 ,随机分为6组 :A组 ,正常对照组 ;B组 ,单纯低氧 /复氧 （A/R低氧 2 h,复氧 1h） ;C组 ,低氧预处理 ,低氧 2 0 m in后复氧 2 0min,然后 A/R;D、E、F组为 NO预处理组 ,加入 S-亚硝基 -已酰青酶胺 （SNAP）分别使其终浓度为 0 .5、1、2 mm ol/L,预处理 4 0 min后 A/R。于复氧后测定各组培养液中肌酸激酶 （CK）、蛋白漏出量的变化及细胞内丙二醛 （MDA）含量和细胞存活率。结果 :单纯低氧 /复氧组和 2 m mol/L SNAP组 CK、蛋白漏出量、MDA水平显著升高 （P<0 .0 1vs正常组 ） ,细胞存活率显著降低 （P<0 .0 1vs正常组 ）。0 .5和 1mmol/L SNAP预处理组和低氧预处理组上述变化明显减轻 （P<0 .0 1vs低氧复氧组 ）。结论 :NO预处理对乳鼠心肌细胞 A/R损伤具有保护作用 ,并具有浓度依赖性。     

卡托普利晚期预处理对缺氧复氧心肌细胞游离钙的影响

目的观察卡托普利晚期预处理对缺氧复氧心肌细胞游离钙的影响,评价其延迟心肌的保护作用。方法建立培养乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤模型。设正常对照组、缺氧复氧组、缺氧预适应组、卡托普利预处理组、蛋白激酶C阻断剂+卡托普利组、一氧化氮合酶阻断剂+卡托普利组和核因子κB阻断剂+卡托普利组。利用分光光度计测定丙二醛和超氧化物岐化酶含量;全自动生物化学分析仪测定乳酸脱氢酶含量。Flou3AM负载染色和流式细胞分析技术测定细胞内钙离子浓度。结果卡托普利预处理和缺氧预处理均可减轻缺氧再灌注时心肌细胞内钙离子浓度增加(594±5nmolL、507±32nmolL比789±9nmolL,P<0.01),抑制乳酸脱氢酶和丙二醛的增加和超氧化物岐化酶含量的降低;但与对照组(414±37nmolL)比较钙内流仍有轻度增加(P<0.05);预先分别加入蛋白激酶C阻断剂、一氧化氮合酶阻断剂、核因子κB阻断剂与卡托普利共同孵育细胞,行缺氧复氧损伤所测得细胞内钙离子浓度分别为676±32nmolL、700±37nmolL和689±11nmolL,与卡托普利预处理组比较有所增加(P<0.05);但与缺氧复氧组比较仍有降低(P<0.05)。结论以上提示,卡托普利预处理可抑制缺氧复氧时的钙超载及其脂质过氧化损伤。其机制可能是通过轻度增加钙内流、启动心肌延迟保护作用;其过程可能涉及蛋白激酶C、一氧化氮合酶和核因子κB信号转导通路中的多个环节。     

倒卵叶五加总皂甙对大鼠心肌缺血/再灌注损伤后细胞凋亡的作用及机制

目的　探讨倒卵叶五加总皂甙 (SAOH)对大鼠缺血心肌再灌注后细胞凋亡的作用。方法　采用结扎左冠状动脉前降支再灌注复制大鼠心肌缺血再灌注损伤 (IRI)的模型 ,结扎前 10 min舌下静脉注射 SAOH,测定心肌缺血3 0 min后再灌注 6h心肌组织丙二醛 (MDA)和血浆超氧化歧化酶 (SOD)的含量 ,并用末端脱氧核苷酸转移酶介导的带生物素的 d UTP缺口末端标记 (TUNEL)的方法及免疫组化观察左心室心肌细胞凋亡及凋亡相关基因 Bcl- 2和 Bax的蛋白表达。结果　再灌注 6h后 ,SAOH1 组 (5 0 mg/ kg)及 SAOH2 组 (10 0 mg/ kg)较 IRI组 ,心肌组织 MDA含量明显减少 [(4.89± 0 .2 6)、(3 .5 7± 0 .2 1) nm ol/ mg· pro vs(6.97± 0 .3 4) nmol/ mg· pro,P值均 <0 .0 1];血浆 SOD活性明显提高 [(9.88± 0 .18)、(11.40± 0 .3 7)μIU / L vs (3 .3 9± 0 .2 4)μIU / L ,P值均 <0 .0 1];心肌细胞凋亡指数 (AI)显著减少 [(14.67± 3 .0 5 ) %、(7.49± 2 .62 ) % vs(2 1.96± 7.68) % ,P值均 <0 .0 1];Bax蛋白表达明显减少 [(7.73± 1.84) %、(5 .0 2± 1.0 1) % vs (18.5 9± 5 .68) % ,P值均 <0 .0 1];而心肌 Bcl- 2蛋白的表达显著增加 [(12 .5 1± 3 .42 ) %、(17.48± 4.72 ) % vs(7.3 2± 2 .0 5 ) % ,P值 <0 .0 5 ,<0     

缺血预适应对缺氧复氧后细胞离子稳态的影响及机制

研究缺血预适应对大鼠心肌细胞缺氧 复氧后离子稳态的影响及可能机制以及探讨缺血预适应抗心律失常的离子基础。采用Langdorff逆行灌流技术分离SD大鼠心肌细胞。按①缺血预适应组、②Glibenclamide干预缺血预适应组、③哇巴因 (OUB)干预缺氧 复氧组、④缺氧 复氧组、⑤Cromakalim(CRK)干预缺血预适应组、⑥OUB和CRK干预缺氧 复氧组、⑦正常对照组 ,分组孵育细胞 ,观察缺血预适应对缺氧 复氧后心肌细胞内钠、钾离子水平 ,细胞膜Na+ K+ ATP酶 (Na+ K+ ATPase)活性的影响。结果 :与单纯缺氧 复氧相比 ,缺血预适应使心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出量下降 (2 1.75± 7.2 9vs 89.6 3± 2 4IU) ;同时维持Na+ K+ ATPase活性在较高水平 (6 .42± 0 .8vs 3 .18±0 .6 2 μmol·mg-1·h-1) ,保持细胞内较高的钾离子水平 (386 .5± 83vs 10 7.5± 2 9.96 μg/mg)和较低的钠离子水平(372 .5± 5 7.2 7vs 5 6 3 .0 7± 94.0 2 μg/mg)。此效应可被OUB及ATP敏感性钾通道阻滞剂Glibendamide所阻断。结论 :缺血预适应促进ATP敏感性钾通道的开放 ,减轻细胞膜损伤 ,维持细胞核Na+ K+ ATPase在较高水平 ,从而减少了缺氧 复氧后钠超载 ,增加了钾离子的再摄取 ,可能是缺血预适应稳定离子稳态的机制。细胞内外离子稳态的形成可?     

p53信号通路在半枝莲总黄酮预处理大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨半枝莲总黄酮(SBF)对心肌缺血/再灌注损伤(MI/RI)模型的保护作用及相关机制.方法 将50只SD雌性大鼠按照随机数表法随机分为5组,每组10只:(1)假手术组;(2)MI/RI组;(3)低剂量组(SBF 30mg/kg);(4)中剂量组(SBF 75mg/kg);(5)高剂量组(SBF 140mg/kg...     

阿托伐他汀在1-磷酸鞘氨醇诱导心肌细胞肥大中的作用

目的研究阿托伐他汀对1-磷酸鞘氨醇(S1P)诱导乳鼠心肌细胞肥大反应中的作用。方法原代培养乳鼠心肌细胞,测定心肌细胞体积和[3H]-亮氨酸掺入量作为心肌细胞肥大的指标。乳鼠心肌细胞使用不同浓度的阿托伐他汀(atorvastatin),加入S1P,[3H]-亮氨酸掺入量作为心肌细胞蛋白摄取量;分别用qPCR和Western blot法检测心肌细胞的β-肌球蛋白(β-MHC)的mRNA和蛋白质表达水平;用qPCR检测心肌细胞的心房利钠肽(ANF)的mRNA表达水平。结果与S1P组比较,阿托伐他汀10μmol/L处理组[3H]-亮氨酸掺入率减少[(234.89%±31.23%)比(342.23%±31.60%),P=0.205],β-MHC的mRNA和蛋白表达水平下降[(0.59±0.14)比(0.84±0.20),P=0.318]和[(0.55±0.09)比(0.98±0.15),P=0.223],ANF的mRNA表达水平降低[(0.51±0.13)比(0.76±0.19),P=0.445];与S1P组比较,阿托伐他汀20μmol/L处理组[3H]-亮氨酸掺入率明显减少[(189.07%±17.69%)比(342.23%±31.60%),P<0.01],β-MHC的mRNA和蛋白表达水平显著下降[(0.50±0.12)比(0.84±0.20),P<0.01]和[(0.35±0.08)比(0.98±0.15),P<0.01],ANF的mRNA水平明显降低[(0.47±0.12)比(0.76±0.19),P<0.01]。结论阿托伐他汀可抑制S1P诱导的心肌细胞肥大,并可减少S1P诱导的β-MHC和ANF表达。     

Tempol对过氧化氢致RAW264.7巨噬细胞氧化损伤的保护作用

目的:研究4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶(Tempol)对过氧化氢(H_2O_2)引起的RAW264.7巨噬细胞氧化损伤的影响。方法:建立H_2O_2诱导的RAW264.7巨噬细胞氧化损伤模型,分为空白对照组、H_2O_2损伤组(0.2 mmol/L H_2O_2)、低剂量Tempol组(0.2 mmol/L H_2O_2+0.4 mmol/L Tempol)和高剂量Tempol组(0.2 mmol/L H_2O_2+0.8mmol/L Tempol),测定每组细胞培养上清液中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果:与空白对照组相比,H_2O_2损伤组培养上清中MDA含量和LDH活性显著升高,SOD活性显著降低(P均0.05)。与H_2O_2损伤组相比,低剂量Tempol组与高剂量Tempol组细胞培养上清中MDA的含量[(7.27±0.35)nmol/mL和(7.27±0.26)nmol/mL对(9.55±0.31)nmol/mL,P均0.05]和LDH的活性[(509.36±38.73)U/L和(492.81±40.36)U/L对(706.24±48.46)U/L,P均0.05]均显著降低,而SOD的活性[(24.84±0.54)U/mL和(24.84±0.28)U/mL对(21.16±0.61)U/mL,P均0.05]均显著升高。低剂量Tempol组和高剂量Tempol组MDA含量、SOD和LDH活性无明显差异,Tempol的作用不呈剂量依赖性。结论:Tempol可能通过调节细胞氧化还原系统,对H_2O_2引起的RAW264.7氧化损伤起到保护作用。     

杏灵分散片对急性冠状动脉综合征患者炎症因子的表达和心功能的影响

目的探讨早期应用杏灵分散片治疗对急性冠状动脉综合征患者血清TNF-α,IL-6及hs-CRP表达及心功能的作用。方法纳入经冠状动脉造影证实的急性冠状动脉综合征患者126例,用随机数字表简单随机化方法分为常规治疗组和杏灵分散片组,常规治疗组口服阿司匹林、β受体阻断剂、单硝酸异山梨醇酯、氯吡咯雷、阿托伐他汀等治疗,杏灵分散片组在常规治疗的基础上给予杏灵分散片1片,每日3次。所有患者行超声心动检查,测定左心室射血分数(LVEF),评价心功能。观察治疗前和治疗后12周,患者血清TNF-α、IL-6、hs-CRP水平和LVEF的变化,结果治疗前两组TNF-α、IL-6、hs-CRP、LVEF水平比较差异无统计学意义。与治疗前相比,杏灵分散片组患者治疗12周后,血清TNF-α[(10.36±3.56)ng/L比(16.21±4.87)ng/L]、IL-6[(70.38±18.23)ng/L比(189.23±95.39)ng/L]及hs-CRP[(1.75±0.86)mg/L比(7.21±3.02)mg/L]的水平都有了进一步的降低(均为P<0.01)。杏灵分散片组患者TNF-α,IL-6及hs-CRP水平较常规治疗组下降明显。患者的超声心动图显示,左室收缩功能(LVEF)有一定的改善。结论杏灵分散片能抑制急性冠状动脉综合征患者的TNF-α,IL-6及hs-CRP表达,并对心功能有一定的改善作用。     

老年糖尿病并发脑梗死与胰岛素抵抗的关系

目的　探讨老年 2型糖尿病合并脑梗死与胰岛素抵抗的关系。方法　检测 35例老年 2型糖尿病无脑梗死患者 ,2 5例 2型糖尿病合并脑梗死患者及 2 2例非糖尿病脑梗死患者的糖化血红蛋白 (HbA1c)、血浆葡萄糖 (PG)、胰岛素 (INS)、C肽 (CP)水平 ,并计算出胰岛素敏感指数 (ISI)、胰岛素曲线下面积 (AUCins)、C肽曲线下面积 (AUCcp)。结果　糖尿病合并脑梗死患者行口服葡萄糖耐量试验 (OGTT)后 1、2、3hINS显著高于糖尿病无脑梗死患者 [分别为(5 4 .77± 17.4 7)mU L (6 4 .86± 19.78)mU L、(74 .89± 2 1.94 )mU L (87.4 1± 2 3.15 )mU L、(44 .2 4± 13.94 )mU L (5 3.84± 19.5 7)mU L ,P <0 .0 5 ];而ISI则显著低于糖尿病无脑梗死患者 (0 .72± 0 .36 0 .93± 0 .4 7,P <0 .0 5 )。非糖尿病脑梗死患者 1、2、3hINS均显著低于糖尿病脑梗死患者 [分别为 (41.2 6± 17.6 7)mU L (6 4 .86± 19.78)mU L、(47.0 1± 18.73)mU L (87.4 1± 2 3.15 )mU L、(35 .4 6± 12 .5 3)mU L (5 3.84± 19.5 7)mU L ,P <0 .0 1];而ISI则显著高于糖尿病脑梗死患者 (1.11± 0 .36 0 .72± 0 .36 ,P <0 .0 5 )。结论　老年 2型糖尿病患者不管是否合并脑梗死 ,均存在胰岛素抵抗 ,合并脑梗死者胰岛素抵抗更为明显     

血管紧张素Ⅱ预处理对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的影响

观察血管紧张素Ⅱ预处理（ＡｎｇⅡ）对乳鼠心肌细胞缺氧复氧（Ａ／Ｒ）损伤的影响,并探讨其作用机理。采用心肌细胞Ａ／Ｒ损伤模型,用血管紧张素Ⅱ进行预处理（ＡⅡＰＣ）。ＡⅡＰＣ能提高Ａ／Ｒ损伤后心肌细胞存活率（７６±３％比５２±２％,Ｐ＜０．０１,减少细胞ＭＤＡ产生（０．９５±０．０６比１．７２±０．０７ｎｍｏｌ／ｍｇｐｒ,Ｐ＜０．０１）,减少乳酸脱氢酶漏出（３６．５±７．１比５６．３±９．３Ｕ／Ｌ,Ｐ＜０．０１）,及蛋白漏出（０．３３±０．０４比０．４３±０．０７ｇ／Ｌ,Ｐ＜０．０１）。蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂Ｈ７完全阻断ＡⅡＰＣ的上述保护作用。结果提示ＡⅡＰＣ对乳鼠心肌细胞具有预处理保护作用,其机理是通过ＰＫＣ介导的。     

奥拉西坦对心肌缺血/再灌注损伤的保护作用

目的 研究奥拉西坦对心肌缺血/再灌注损伤(MI/RI)的保护作用及其机制。方法 32只大鼠依据随机数表法分为4组,每组8只:(1)假手术组;(2)MI/RI组;(3)低剂量组(奥拉西坦30mg/kg);(4)高剂量组(奥拉西坦50mg/kg)。低剂量组和高剂量组的16只大鼠手术前除正常饲养外,通过灌胃方式给予对应剂量的奥拉西坦,1次/d,连续7d。结扎大鼠冠状动脉前降支,建立MI/RI模型。酶联免疫吸附测定大鼠血清中肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、白细胞介素-6(IL-6)和丙二醛(MDA)。测定心肌梗死面积百分比、心肌细胞凋亡率和Bcl-2/Bax比值。采用SPSS 21.0软件进行统计分析。组间比较采用单因素方差分析。结果 与MI/RI组比较,低剂量组和高剂量组大鼠的心肌梗死面积百分比(36.2%和13.6%和22.3%)、心肌细胞凋亡率(45.4%和30.6%和21.3%)、血清中CK-MB[(97.50±8.54)和(75.24±5.62)和(63.10±7.23)U/L]、LDH[(900.02±57.74)和(660.62±49.84)和(577.37±54.09)U/L]、MDA[(88.84±3.26)和(66.47±6.25)和(57.08±4.99)U/L]和IL-6[(186.39±10.18)和(153.34±6.81)和(143.31±9.08)pg/ml]含量均显著降低(P<0.05),而SOD[(15.22±1.24)和(24.80±3.32)和(34.82±3.66)U/ml]和Bcl-2/Bax比值(0.19和0.47和1.16)显著增加(P<0.05)。结论 奥拉西坦可能通过减轻氧化应激反应来抑制线粒体途径的细胞凋亡来保护MI/RI的心肌。     

昆布多糖对大鼠心肌缺血/再灌注模型葡萄糖调节蛋白-78及半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶12蛋白表达含量的影响

目的研究昆布多糖(Lam)对大鼠心肌缺血/再灌注(MI/RI)模型中葡萄糖调节蛋白-78(GRP-78)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶12(Caspase 12)蛋白表达含量的影响,探讨其对大鼠心肌是否有保护作用。方法选取32只雄性SD大鼠,随机分为4组:假手术组(sham组)、MI/RI组、Lam低剂量组、Lam高剂量组。采用左冠状动脉结扎法制作大鼠MI/RI模型。酶联免疫吸附试验(ELISA)测定肌酸激酶同工酶MB(CK-MB),比色法测定髓过氧化物酶(MPO)的表达量。应用蛋白质免疫印迹(Western blotting)检测各组中大鼠心肌GRP-78、Caspase 12、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)蛋白的表达情况。光镜下观察心肌组织的病理形态学改变。伊文思蓝(Evans)、氯化三苯基四氮唑红(TTC)双染色法测定心肌梗死面积。采用SPSS 21.0软件进行统计分析。结果与MI/RI组相比,低、高剂量组的CK-MB[(93.74±5.37)和(72.71±5.63)和(59.79±9.67)U/L]、MPO[(72.66±3.40)和(58.92±4.88)和(46.06±5.74)U/L]、GRP-78[(1.13±0.02)和(0.81±0.01)和(0.66±0.01)]、Caspase 12[(1.45±0.10)和(0.82±0.06)和(0.62±0.02)]表达显著减少(P0.01),Bcl-2[(1.01±0.04)和(1.19±1.10)和(1.41±0.02)]表达显著升高(P0.01)。与MI/RI组相比,Lam各处理组的心肌组织损伤有不同程度的减轻。与MI/RI组比较,Lam各处理组心肌梗死面积显著减少[(55.36±2.47)%和(46.63±2.10)%和(38.40±2.07)%,P0.05]。结论 Lam能减轻大鼠MI/RI,对MI/RI的心肌有保护作用。其机制可能是Lam抑制GRP-78的过度表达,减轻了由内质网应激介导细胞凋亡途径的激活,下调Caspase 12凋亡通路,增强Bcl-2的表达,从而抑制心肌细胞凋亡。     

慢性情绪应激对高脂饮食大鼠炎症反应和主动脉Toll样受体4表达的影响

目的通过观察慢性情绪应激对高脂饮食大鼠脂代谢、炎症反应和主动脉内皮细胞TLR4表达的影响,探讨慢性情绪应激在动脉粥样硬化病变形成中的作用、机制。方法雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组(NC)、无应激组(NS)、生理应激组(PS)和情绪应激组(ES),每组各10只,并制作慢性情绪应激模型。于末次应激结束后采集血标本,全自动生化分析仪检测血清TC、TG、HDL-C、LDL-C和hs-CRP,ELISA法测定血清ox-LDL、放免法检测TNF-α水平;HE染色观察大鼠主动脉形态学变化;免疫组化法(S-P)测定主动脉内皮细胞TLR4表达。结果 (1)ES组大鼠较其他3组出现了明显的脂代谢紊乱和炎症反应。与PS组、NS组、NC组比较,ES组TC、LDL-C、ox-LDL水平明显升高[TC:(5.30±0.69)mmol/L比(3.94±0.42)mmol/L、(3.82±0.48)mmol/L、(2.07±0.26)mmol/L;LDL-C:(1.57±0.22)mmol/L比(1.18±0.13)mmol/L、(1.11±0.11)mmol/L、(0.75±0.11)mmol/L;ox-LDL:(65.18±6.51)μg/dl比(45.65±2.70)μg/dl、(38.35±2.27)μg/dl、(14.99±1.46)μg/dl,均为P<0.01];ES组HDL-C[(0.94±0.14)mmol/L]低于NS组[(1.09±0.14)mmol/L,P<0.05],低于NC组[(1.16±0.18)mmol/L,P<0.01];与PS组、NS组、NC组比较,ES组hs-CRP、TNF-α水平升高[hs-CRP:(1.748±0.082)mg/L比(1.485±0.067)mg/L、(1.381±0.067)mg/L、(0.757±0.069)mg/L;TNF-α:(2.447±0.083)μg/L比(2.189±0.099)μg/L、(2.181±0.085)μg/L、(1.772±0.075)μg/L,均为P<0.01];(2)ES组大鼠主动脉出现早期动脉粥样硬化性改变;(3)ES组大鼠主动脉内皮细胞TLR4表达明显上调,其阳性细胞单位面积平均吸光度值(A)高于PS组、NS组和NC组[(0.334±0.010)比(0.250±0.012)、(0.238±0.015)、(0.082±0.008),均为P<0.01]。结论慢性情绪应激可能在动脉粥样硬化形成的早期,部分通过激活TLR4释放炎性细胞因子引起机体的炎症反应,进而导致动脉粥样硬化病变形成。     

高血压病超重及肥胖患者血清脂联素水平和IL-6含量的变化

目的研究高血压病超重及肥胖患者血清脂素水平、白介素-6(IL-6)含量的变化及其临床意义。方法63名正常非肥胖对照(男31名,女32名)和57名体重指数>25kg/m2的单纯性超重肥胖个体和41名高血压病超重肥胖患者进入研究,测量血压(BP)、体重指数(BMI)、腰围(WC)、腰臀围比(WHR),用ELISA法检测所有研究对象血清脂联素浓度、血清IL-6含量。结果单纯性超重肥胖患者与高血压超重病肥胖患者血清脂联素水平显著低于正常对照者[单纯性超重肥胖男性(7.03±1.67)mg/L,高血压病超重肥胖男性(6.13±1.74)mg/Lvs正常对照男性(8.21±0.93)mg/L,t=3.868,t=5.388,均P<0.01;单纯性超重肥胖女性(7.90±1.35)mg/L,高血压病超重肥胖女性(6.97±1.16)mg/Lvs正常对照女性(9.22±0.68)mg/L,t=4.612,t=7.167,均P<0.01]。高血压病超重肥胖男性血清IL-6含量显著高于正常对照男性[高血压病超重肥胖男性(394.86±353.9)pg/mlvs正常对照男性(248.02±223.2)pg/ml,t=2.368,P<0.05;高血压病超重肥胖女性(303.2±283.6)pg/mlvs正常对照女性(230.5±214.2)pg/ml,t=0.9046,P>0.05]。在高血压病超重肥胖患者中,脂联素与体重指数、腰围、腰臀围比、收缩压之间呈显著负相关;IL-6与收缩压之间呈显著正相关。结论脂联素水平下降与超重肥胖、血压之间存在一定的相关性;IL-6含量升高可能与高血压病有关。