正交试验优选紫草提取工艺

目的以紫草中总萘醌和左旋紫草素的含量为指标，研究超声萃取和索氏提取2种工艺方法在萃取紫草中有效成分的差异。方法通过正交试验安排实验条件，采用分光光度法测定紫草提取液中总萘醌含量，HPLC法测定提取液中左旋紫草素含量，比较超声萃取与索氏提取的提取效率，优选两种工艺方法的最佳工艺条件。结果2种工艺方法中，粒度对总萘醌的提取率均有非常显著影响，粒度较大的提取率高，但对紫草中左旋紫草素的提取率无显著影响；溶剂乙醇在2种工艺方法中表现出不同影响，超声萃取工艺乙醇的提取率较高，呈显著影响，而在索氏提取工艺中提取率较低，也呈显著影响。结论比较2种工艺，超声萃取具有高效、省时、节能的特点，优于索氏提取工艺。     

紫草总萘醌的闪式提取工艺优选

目的:优选紫草中总萘醌的闪式提取工艺.方法:以紫草总萘醌和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁转移率为指标,采用L9(34)正交试验考察溶剂用量、提取时间、提取电压对闪式提取工艺的影响,并与渗漉法进行比较.结果:最佳提取工艺为分别加14,8倍量95％乙醇于140 V电压下提取2次,每次2 min;总萘醌和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁平均转移率分别为90.72％,70.68％.渗漉法中总萘醌和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁平均转移率分别为79.03％,65.43％.结论:闪式提取法优于渗漉法,前者适用于紫草总萘醌的提取,优选的工艺稳定可行,具有良好的应用前景.     

紫草乳膏提取工艺研究

目的:探讨紫草乳膏中药材提取工艺的优选方法。方法:采用分光光度法测定羟基萘醌总色素含量,采用高效液相色谱法(HPLC)测定羟基红花黄素A含量,以此作为评价指标,进行正交试验,优选药材提取工艺。结果:紫草、白芷的提取工艺为饮片粗粉加乙醇4倍量浸渍48 h后开始渗漉,溶剂用量为10倍;红花、当归的提取工艺为饮片用水浸泡0. 5 h后,70℃温浸2次,60 min/次,第1次用水12倍量,第2次用水10倍量。结论:紫草乳膏提取工艺合理可行,为紫草乳膏的成型工艺研究及质量控制奠定基础。     

均匀设计优选玉红膏中紫草油炸提取工艺研究

摘要 目的: 以羟基萘醌总色素得率为指标,优化玉红膏中紫草的油炸提取工艺。方法: 通过单因素试验考察闷润溶剂的种类、闷润溶剂的浓度对羟基萘醌总色素的影响;采用均匀设计法安排试验,紫外分光光度法测定羟基萘醌总色素含量,考察闷润溶剂的浓度、闷润溶剂的用量、油炸温度和油炸时间对提取提取工艺的影响,优选紫草的油炸提取工艺。结果: 最佳油炸提取工艺：采用68.87 %乙醇闷润,用量为紫草的3.20倍,油炸温度为160.15 ℃,提取1.96 min。结论: 采用均匀设计优化紫草的油炸提取工艺可行、稳定,可以为紫草的传统油炸提取工艺提供试验依据。 关键词：玉红膏;紫草;均匀设计;提取工艺;羟基萘醌总色素     

均匀设计优选玉红膏中紫草油炸提取工艺

目的:优选玉红膏中紫草的油炸提取工艺.方法:以羟基萘醌总色素得率为指标,通过单因素试验考察闷润溶剂种类、闷润溶剂浓度对羟基萘醌总色素的影响;紫外分光光度法测定羟基萘醌总色素含量,采用均匀设计法考察闷润溶剂浓度、闷润溶剂用量、油炸温度和油炸时间对提取工艺的影响,优选紫草的油炸提取工艺.结果:最佳油炸提取工艺为加3.20倍量68.87％乙醇闷润,油炸温度160.15℃,提取1.96 min.结论:采用均匀设计法优选的紫草油炸提取工艺稳定可行,为紫草的传统油炸提取工艺提供试验依据.     

闪式提取法用于大蝎子草总黄酮的工艺条件研究

目的探索有效的大蝎子草总黄酮提取方法。方法比较回流提取、闪式提取两种方法,及水和乙醇分别作为溶剂提取大蝎子草总黄酮的效果,并采用正交试验设计,对闪式提取大蝎子草总黄酮工艺条件进行优化。结果闪式提取大蝎子草总黄酮最佳工艺为蒸馏水温度60℃,料液比1∶75,提取时间为4 min,闪提转速4 000 r/min,提取率为9.093 mg/g,优于乙醇为溶剂的回流提取法。结论闪式提取法操作简便、高效经济,与回流提取法相比,采用闪式提取法并用热水作溶剂提取大蝎子草总黄酮取得较好效果。     

麻油提取紫草工艺条件优选

优选麻油提取紫草的工艺参数。以紫草素提取量为指标,应用L9（3^4）正交试验设计,筛选紫草素的最佳制备条件。最佳工艺条件为：麻油浸渍紫草6h,提取温度120℃,提取时间1h。提取温度对紫草素的溶出量影响较大,浸渍时间和提取时间对其影响较小。     

用四川紫草提取紫草素的工艺优化研究

目的 以四川紫草为原料,研究紫草素的提取工艺.方法 采用正交实验,考察提取温度、提取时间、提取的料液比(95%乙醇/四川紫草,ml/g)、提取次数4因素对砂紫草素提取效果的影响.结果 影响紫草素提取效果的因素次序是:提取时间＞提取温度~提取次数＞提取的料液比.结论 提取紫草素的最优工艺条件:温度50℃;时间3 h;料液比为:7 ml 95%乙醇/g四川紫草;提取次数为3次.     

复方紫草油喷雾剂中紫草油提取工艺研究

目的优选复方紫草油喷雾剂中紫草油的最佳提取工艺,为以后制备喷雾剂前的紫草素包合提供条件。方法：用紫外分光光度法测定紫草油中左旋紫草素含量作控制指标,利用spss11．5软件分析L9（34）正交试验优选紫草油的最佳提取方案。结果：最佳工艺为将1cm紫草黝口10倍量麻油浸泡24小时后,加热,油温控制在150℃以内,45分钟,待紫草炸制焦枯,手粘即碎,趁热微孔滤膜过滤,为下一步用环糊精包合提供条件。     

紫草蒽醌类成分的提取及其复合物栓的抗炎活性研究

目的：基于预防和治疗老年性阴道炎及妇科炎症等疾病,从开发绿色天然中药制剂出发,优选紫草复合物栓最佳提取工艺,并以抗炎活性为指标,优化紫草提取物在复合物中配比。方法：采用正交试验设计方法,以出膏率、总萘醌含量及左旋紫草素含量为综合指标进行工艺优选,二甲苯致炎实验优化处方配比。结果：紫草的最佳提取工艺为：浸泡4小时后,8倍量90%的乙醇渗漉。当紫草占处方总量的50%时,其抗炎活性最强。结论：优选的提取工艺,条件稳定,方法简单,可操作性强且成本低,可用于紫草复合物栓的制备。以活性为指标的处方筛选,为紫草复合物栓的有效性开发提供重要依据。     

高效液相色谱法测定新疆紫草毛状根中乙酰紫草素的含量

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定新疆紫草毛状根中乙酰紫草素含量的方法。方法:采用YMC ODS-A C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相为乙腈-水-甲酸(700∶300∶0.5);检测波长275nm;流速1.0mL·min-1;柱温35℃。结果:乙酰紫草素对照品在51.55～1031.0mg·L-1与峰面积线性关系良好,相关系数r=0.9999,平均回收率为99.81%,RSD2.00%(n=9)。结论:高效液相色谱法操作简单快速,重复性好,可用于新疆紫草毛状根中乙酰紫草素含量的测定。     

黄连紫草膏中地黄、紫草的醇提工艺优选

目的:优选黄连紫草膏中地黄、紫草的提取工艺.方法:以梓醇、毛蕊花糖苷、紫草素的含量和干膏得率为指标,考察乙醇体积分数、提取时间、乙醇用量、提取次数对提取工艺的影响,通过层次分析法确定各指标的权重系数,均匀设计优选醇提工艺.结果:最佳提取工艺为12倍量65％乙醇提取2h.结论:该优选工艺稳定可行,可为提取工艺的确定和剂型改革提供依据.     

新疆紫草PAL,HMGR,PGT基因的过表达和RNA干扰载体的构建

新疆紫草Arnebia euchroma是药用紫草的主要来源,其最重要成分紫草素类化合物具有很高的药用和工业价值。研究采用GATEWAY技术,构建新疆紫草次生代谢关键酶基因PAL, HMGR, PGT的过表达载体和RNAi载体,为相关转基因株系的构建搭建好平台。新疆紫草次生代谢关键酶基因过表达和RNA干扰载体的构建,是基于遗传物质的遗传研究平台的搭建,对于次生代谢途径上基因功能验证和功能基因的挖掘提供了极大的便利,同时也填补了新疆紫草在转基因领域研究的空白,对于培育紫草素高产株系具有重要意义。     

新疆紫草AP2/ERF转录因子的电子克隆和生物信息学分析

应用电子克隆技术,以紫草AP2/ERF序列为探针,获得了新疆紫草的1条876 bp AP2/ERF的序列,包含1个1 077 bp的开放阅读框编码205个氨基酸,命名为AeAP2/ERF。采用生物信息学方法,对该基因所编码的蛋白从氨基酸组成、理化性质、亚细胞定位、跨膜结构域、疏水性/亲水性、高级结构及功能域等方面进行预测和分析,结果显示该基因编码蛋白定位于细胞核,为水溶性蛋白,可以调控代谢、转导信号。     

新疆紫草2种悬浮细胞生长及紫草素类化合物积累的动力学研究

通过对新疆紫草Arnebia euchroma红白2种色系悬浮细胞的表型、生长曲线、次生代谢产物积累研究,用数学建模模拟新疆悬浮细胞的增殖和紫草素类化合物积累情况,研究新疆紫草悬浮细胞生长和次生代谢生产的动力学参数,发现红色高产系为针对紫草素类次生代谢产物生产的优良细胞株系,白色低产系可能为突变株系.用Logistic模型对生长函数进行拟合并求导数,得到新疆紫草悬浮细胞的生长速率及生长加速度变化曲线,确定了新疆紫草悬浮细胞继代培养最佳时期为继代到新鲜培养基中的第15天,给诱导处理的最佳时期为继代到新鲜培养基中后第13 ～14天.并且通过比较新疆紫草红色系细胞增长速率的变化趋势与紫草素类化合物积累曲线发现,新疆紫草悬浮7细胞红色系生物量快速增长时不利于紫草素的合成与积累.     

2-氨基磷酸茚处理对新疆紫草悬浮细胞次生代谢物积累的影响

用不同浓度2-氨基磷酸茚(AIP),并结合茉莉酸甲酯(Me JA)处理新疆紫草悬浮细胞,测定不同处理组、不同处理时间细胞中迷迭香酸及乙酰紫草素、脱氧紫草素、β,β'-二甲基丙烯酰紫草素、异戊酰紫草素等次生代谢物的含量,考察AIP抑制苯丙氨酸通路后对紫草悬浮细胞中次生代谢物合成、积累的影响。结果显示Me JA处理能够明显促进新疆紫草细胞中次生代谢物的合成积累;AIP处理能够抑制新疆紫草细胞中上述次生代谢物的积累,并在二者联合处理时能一定程度上抵消Me JA的促进作用,且抑制作用的强弱与处理剂量、处理时间存在正相关性。表明苯丙氨酸途径在紫草素类化合物生物合成中具有重要作用,可为通过细胞培养方式生产紫草素类化合物的代谢调控及紫草素类化合物生物合成等进一步研究提供参考。     

新疆紫草7种萘醌类成分的同时测定

目的:建立同时测定新疆紫草中紫草酸、紫草素、乙酰紫草素、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β-二甲基丙烯酰紫草素、异戊酰紫草素7种成分的HPLC检测方法.方法:选用安捷伦ZORBAX SB-C18(4.6 mm× 250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.03％甲酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长516,254 nm,柱温30℃,进样量6μL,流速1 mL· min-1.结果:7种萘醌类对照品在进样量范围内分别与峰面积呈现的良好线性关系(r＞0.999 1);仪器精密度和稳定性RSD均＜3％;加样回收率在97％～103％ (n=3).结论:该方法快速、准确、重复性好,可同时定量新疆紫草的7种水溶性及脂溶性萘醌类成分,为新疆紫草的质量评价提供了更为全面的科学依据.     

Exploring the wound healing activity of Arnebia densiflora (Nordm.) Ledeb. by in vivo models

Ethnopharmacological relevance

The roots of Arnebia densiflora (Nordm.) Ledeb. (Boraginaceae), which is an endemic plant for Turkey, have been used for healing of wounds in folk medicine. The extract of the roots in olive oil and mostly the root barks was applied onto open wounds for rapid healing.

Aim of the study

To evaluate the wound healing activity of the roots, extracts were prepared with different solvents; hexane, chloroform, ethyl acetate and methanol, respectively from the roots of Arnebia densiflora.

Materials and methods

Incision by using tensiometer and excision models were employed on mice and rats.

Results

Significant wound healing activity was observed with the ointment formulation prepared by using hexane extract at 1% concentration on the mentioned models. The results of histopathological examination supported the outcome of both incision and excision wound models. The wound healing effect was comparatively evaluated with a reference ointment Madecassol^®.

Conclusion

The experimental data demonstrated that Arnebia densiflora displayed remarkable wound healing activity.     

基于网络药理学及实验验证探讨新疆紫草抗肝癌作用机制

目的 运用网络药理学方法探究新疆紫草抗肝癌的物质基础和作用机制,并通过分子对接和实验验证新疆紫草抗肝癌潜在靶点。方法 通过中国知网（CNKI）、中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）等数据库检索文献收集新疆紫草主要活性成分;根据药物的药物动力学（ADME）特性,通过FAFDrug4平台对活性成分进行筛选;利用多个数据库搜集筛选化合物和肝癌作用靶点,并绘制韦恩图分析;借助Cytoscape软件和STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络;用DAVID数据库对关键靶点进行基因本体（GO）富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析;通过Autodock对核心通路上的靶点进行分子对接;细胞增殖与活性检测（CCK-8）实验验证5种萘醌类化合物的活性;根据预测结果在H22荷瘤小鼠模型中,采用苏木素-伊红（HE）染色法、酶联免疫吸附测定法（ELISA）、蛋白免疫印迹法（Western blot）验证异戊酰紫草素抗肝癌关键靶点。结果 共筛选出55个活性成分,有效成分抗肝癌靶点34个;“药物-活性成分-靶点-疾病”中,度值较高的活性分子主要是萘醌类成分;PPI网络得到多个紫草抗肝癌核心靶点,KEGG筛选通路22条,主要作用于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）、血管内皮生长因子（VEGF）、肿瘤坏死因子（TNF）等信号通路,分子对接结果表明,5种紫草萘醌类成分与PI3K/Akt信号通路靶点亲和力良好。CCK-8和动物实验结果说明脂溶性成分异戊酰紫草素有着较好的抗癌潜力,高剂量组可显著降低荷瘤小鼠血清中VEGF、甲胎蛋白（AFP）水平,升高干扰素-γ（IFN-γ）水平（P<0.05,P<0.01）,并显著下调磷酸化（p）-Akt（Ser473）、B细胞淋巴瘤（Bcl）-2蛋白表达,上调Bcl-2家族抗凋亡因子（Bad）蛋白的表达（P<0.01）。结论 新疆紫草可以通过PI3K/Akt信号通路抑制肝癌细胞增殖、肿瘤血管生成并诱导癌细胞凋亡,为后续深入探讨其具体机制提供了思路和线索。