三氧化二砷对肝癌Mahlavu细胞内线粒体跨膜电位的影响

[目的]探讨三氧化二砷（As2O3）作用于肝癌细胞后对其增殖抑制及线粒体跨膜电位（△Ψm）的影响。[方法]用As2O3作用于体外培养人肝癌Mahlavu细胞，用MTT法检测As2O3对人肝癌Mahlavu细胞增殖的影响，并用流式细胞仪观察As2O3对人肝癌Mahlavu细胞△Ψm的影响。[结果]MTT检测显示As2O3能明显抑制人肝癌Mahlavu细胞的增殖，并呈时间和剂量依赖性。流式细胞仪分析显示As2O3作用后的人肝癌Mahlavu细胞内△Ψm明显降低（P〈0．01），并呈时间和剂量依赖性。[结论]As2O3可降低人肝癌Mahlavu细胞△Ψm并可由此诱导细胞凋亡而抑制其增殖。这可能也是As2O3诱导肝癌Mahlavu细胞凋亡的机制之一。     

线粒体在As2O3诱导肿瘤细胞凋亡中的作用

近年来发现三氧化二砷(arsenictrioxide,As2O3)对白血病的治疗很有效,尤其是对急性早幼粒白血病的治疗更有效。As2O3的作用机制不很清楚,但体外及体内实验均已证明诱导细胞分化或促进细胞凋亡是其发挥疗效的两种主要方式[1]。已有的研究表明,As2O3诱导细胞凋亡可能和一些常见的     

全反式维甲酸、三氧化二砷、去甲氧柔红霉素治疗初治成人急性早幼粒细胞白血病的疗效观察

<正>急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)是急性白血病中较常见的一种类型,其早期病死率高达9.6%~10.6%,其中死于出血的患者占早期死亡患者的60.0%~67.0%[1]。自从全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)及三氧化二砷(As2O3)被用于治疗APL后,完全缓解率大大提高[2]。我院用ATRA加As2O3联合去甲氧柔红霉素(idarubicin,IDA)治疗初治APL患者21例,取     

三氧化二砷诱导QT间期延长及其离子靶点的实验研究

目的观察不同给药方法情况下,三氧化二砷(arsenictrioxide,As2O3)对豚鼠心肌QT间期的影响,同时探讨As2O3诱导QT间期延长的离子靶点。方法分别采用静脉一次性注射和缓慢滴注的方法,观察As2O3对豚鼠心肌QTc(校正的QT间期)的影响;应用双微电极电压钳技术探讨As2O3对快速型延迟整流钾电流(IKr/HERG)的作用。结果静脉一次性注射As2O3后,0.8、1.6mg/kgAs2O3可以使QTc明显延长(与对照组相比,t=4.907、P<0.01),并且这种作用具有明显的剂量依赖性。但缓慢静脉滴注As2O3(2mg/kg),与对照组相比,QTc无明显变化。双微电极电压钳结果显示,50、100μmol/LAs2O3可明显抑制IKr/HERG电流,当控制电压为0mV时,分别使IKr/HERG电流值从对照组的(2.4±0.6)μA减少到(1.4±0.2)μA(抑制率为41.7%,t=7.071、P<0.01)和(1.0±0.4)μA(抑制率为58.3%,t=8.682、P<0.01)。结论缓慢静脉滴注As2O3可以减少长QT的产生;抑制IKr/HERG是As2O3诱导QT间期延长的重要离子靶点之一。     

澳洲茄胺盐酸盐在三氧化二砷诱导的HeLa细胞凋亡中的作用及对细胞端粒酶活性的影响

目的 探讨澳洲茄胺盐酸盐(SBHL)在三氧化二砷(As2O3)诱导的HeLa细胞凋亡中的作用及对细胞端粒酶活性的影响.方法 采用细胞培养的方法体外培养宫颈癌HeLa细胞.用四甲基偶氮唑盐(MTT)法在SBHL(0,10,20,40,80,460,320 μmol/L)中筛选出最佳浓度.将HeLa细胞按1640培养液含As2O3和最佳SBHL浓度分为3组:对照组(0 μmol/L As2O3)、As2O3组(5 μmol/L As2O3)、As2O3+SBHL组(5μmoL/L As2O3+40μmol/L SBHL),培养时间分别为24、48、72 h.倒置显微镜下观察的HeLa细胞生长状况;透射电镜下观察HeLa细胞凋亡状况;MTT法检测HeLa细胞存活率;流式细胞术检测HeLa细胞周期和凋亡率;抗酒石酸酸性磷酸酶-酶联免疫(TRAP-ELISA)法检测HeLa细胞端粒酶活性的变化.结果 倒置相差显微镜下,对照组HeLa细胞排列密集,细胞呈圆形;As2O3组细胞数量减少,细胞间距逐渐增大;As2O3+SBHL组细胞收缩明显,细胞核碎裂为花瓣状,细胞间隙变得更大.电镜下,对照组Hela细胞表面有丰富的微绒毛,细胞间隔清晰,可见幼稚连接,连接不紧密,细胞核内多为常染色体,核仁清晰,核浆比约1∶1;As2O3组细胞超微结构呈现典型的凋亡特征,核内异染色质增多,染色质浓缩成块状,边集于核膜;As2O3+SBHL组细胞表面的微绒毛断裂、减少,核致密,呈块状分布,可见到凋亡小体.细胞存活率在24、48、72 h,组间比较差异均有统计学意义(X2分别为10.39、13.88、17.21,P均<0.05);在72 h,As2O3+SBHL组细胞存活率(52.80%)明显低于As2O3组(77.51%,X2=9.29,P<0.05).细胞周期G1期、S期组间比较差异有统计学意义(F值分别为7.46、22.14,P均<0.05);与对照组[(41.57±1.56)%、(50.45±2.37)%]比较,As2O3组[(27.10±5.32)%]和As2O3+SBHL组[(20.06±4.98)%]S期细胞减少(P<0.05或<0.01),G1期细胞增加[(58.70±5.18)%、(69.67±4.17)%,P<0.05或<0.01].细胞凋亡率组间比较差异有统计学意义(F=4.01,P<0.05);与对照组[(1.18±1.40)%]比较,As2O3组[(6.04±2.53)%]和As2O3+SBHL组[(21.08±1.22)%]细胞凋亡率明显升高(P<0.05或<0.01),其中As2O3+SBHL组高于As2O3组(P<0.01).端粒酶活性组间比较差异有统计学意义(F=21.28,P<0.05);与对照组(2.107±0.057)比较,As2O3组(1.214±0.621)和As2O3+SBHL组(0.865±0.284)细胞端粒酶活性降低(P均<0.05),其中As2O3+SBHL组低于As2O3组(P<0.05).结论 SBHL能促进As2O3诱导HeLa细胞凋亡,并能通过抑制端粒酶活性促进As2O3诱导HeLa细胞凋亡.

Abstract：

Objective To study whether solasodine hydrochloride (SBHL) could enhance the effect of arsenic trioxide in inducing apoptosis and affecting telomerase activity in cervical cancer HeLa cells. Methods Using cell culture methods, cervical cancer HeLa cells were cultured in vitro. The optimal concentration of SBHL was determined by MTT method from 0, 10, 20, 40, 80, 160, to 320 μmol/L. HeLa cells were grown in improved RPMI1640 supplemented respectively with arsenic trioxide(5 μmol/L As2O3), As2O3(5 μmol/L)+ SBHL( 40 μmol/L) and none (control group). The growth morphology of HeLa cells was observed under phase contrast microscopy after culture for 24, 48, and 72 h. Apoptosis of HeLa cells was determined under transmission electronic microscopy. The method of MTT was used to study the cell survival percentage. The technique of flow cytometry was used to measure cell cycle and cell apoptosis percentage. The method of tartrate-resistant acid phosphatase-enzyme linked immunosorbent assay (TRAP-ELISA) was used to determine telomerase activity of HeLa cells. Results Under phase contrast microscopy, in control group HeLa cells were round, densely packed; in As2O3 group the numbers of the cells were less, cell spacing increased; in As2O3 + SBHL group the cells shrinked significantly, nuclear fragmented as a petal-like, gap became larger. Under transmission electronic microscopy, there were rich microvillus on the cell surface in control group, cell intervals clear, immature connections, and the intervals did not close. The structure of the mitochondria in the cytoplasm was integrated. Most of the chromatin in the nucleus were, euchromatin and characteristics of apoptosis with heterochromatin increased and the chromatin condensed into masses, on the boundary of nuclear membrane. The microvillud on the cell surface were ruptured and decreased in As2O3 + SBHL group. The chromatin condensed into masses. The formation of apoptotic bodies was observed. The difference was statistically significant between groups in cell survival percentage at 24, 48, 72h(x2 = 10.39 , 13.88 , 17.21,respectively, all P < 0.05). Cell survival percentage in SBHL + As2O3 group (52.80%) was significantly less than that of As2O3 group(77.51%, x2 = 9.29, P < 0.05) at 72 h. In cell cycles, the difference was statistically significant between groups in C1 phase and S phase(F = 7.46,22.14, all P < 0.05), respectively. Compared with , control group[ (41.57 ± 1.56)%, (50.45 ± 2.37)%], cell percentages in S phase in As2O3 + SBHL group[(20.06 ± 4.98)%] and As2O3 group[(27.10 ± 5.32)%] were decreased(P< 0.05 or < 0.01), while cell percentage in C1 phase was increased[(58.70 ± 5.18)%, (69.67 ± 4.17)%, P< 0.05 or < 0.01]. The difference was statistically significant between groups in apoptotic percentage of HeLa cells (F = 4.01, P < 0.05). Compared with control group[ (1.18 ± 1.40)%], apoptosis percentage was significantly increased in As2O3 + SBHL group and As2O3 group [(21.08± 1.22)%, (6.04±2.53)%, P< 0.05 or < 0.01], respectively, and As2O3 + SBHL group was higher than As2O3 group(P < 0.01). The difference was statistically significant between groups in telomerase activity (F = 21.28, P< 0.05). Telomerase activity was inhibited in As2O3 group(1.214 ± 0.621) and As2O3A + SBHL group(0.865 ± 0.284) compared to control group (2.107 ± 0.057, all P < 0.05), and telomerase activity in As2O3 + SBHL group was lower than that of As2O3 group (P < 0.05). Conclusions SBHL enhances the effect of As2O3 in inducing apoptosis in HeLa cells, which is related to its inhibiting telomerase activity in HeLa cells.     

三氧化二砷对裸鼠膀胱癌细胞凋亡的影响

目的探讨三氧化二砷(As2O3)抑制膀胱癌细胞生长的作用。方法体外培养膀胱癌T24细胞,取指数生长期T24细胞裸鼠皮下接种,成瘤后连续7 d尾静脉分别注射As2O3(5、10 mg·kg-1·d-1)、丝裂霉素(MMC)及生理盐水。应用电镜、流式细胞术和免疫组化等方法检测了癌细胞的超微结构变化、细胞的凋亡和Caspase3蛋白的表达。结果电镜下As2O3组可见典型癌细胞凋亡的形态学改变;流式细胞分析,As2O3组可见癌细胞凋亡峰,凋亡率分别为10．67％和23．42％,明显高于对照组(0．83％);免疫组化检测As2O2组Caspase 3蛋白表达(33．54％和56．22％)也明显高于对照组(6．25％)。结论As2O3可以通过诱导膀胱癌细胞凋亡,抑制膀胱癌细胞生长。     

载三氧化二砷纳米微粒对胰腺癌腹水抑制效应的实验研究

目的探讨用纳米载体包裹的三氧化二砷(As2O3)在荷胰腺癌SCID小鼠体内的分布及对腹水生成和存活时间的影响。方法用超声乳化法制备载As2O3乳酸羟基乙酸共聚物纳米微粒(As2O3-NPs),用体外释药方法研究其释放特性。于小鼠右前腋下接种SW1990细胞12d后,静脉给As2O3-NPs5.0mg/kg体重,采用高压液相色谱法(HPLC)测定血浆、正常和肿瘤组织中As2O3含量。观察不同浓度As2O3-NPs对腹水生成的抑制作用。观察10.0mg/kg体重As2O3-NPs处理的胰腺癌小鼠的存活期、体重、腹腔渗透性及腹水中凋亡细胞的变化。结果As2O3-NPs直径为(210±23)nm,含药量为29%(重量比),体外释药速度明显慢于单纯的As2O3。As2O3-NPs在体内呈浓度依赖性抑制腹水形成,减少腹膜的通透性,增加腹水内凋亡细胞量,延长荷瘤小鼠的存活时间。结论As2O3-NPs具有明显的缓释药物功能,能有效积聚在肿瘤组织,并抑制癌性腹水生成,是一种有希望的抗肿瘤药物。     

载三氧化二砷纳米微粒对胰腺癌腹水抑制效应的实验研究

目的 探讨用纳米载体包裹的三氧化二砷(As2O3)在荷胰腺癌SCID小鼠体内的分布及对腹水生成和存活时间的影响.方法 用超声乳化法制备载As2O3乳酸羟基乙酸共聚物纳米微粒(As2O3-NPs),用体外释药方法研究其释放特性.于小鼠右前腋下接种SW1990细胞12 d后,静脉给As2O3-NPs 5.0 mg/kg体重,采用高压液相色谱法(HPLC)测定血浆、正常和肿瘤组织中As2O3含量.观察不同浓度As2O3-NPs对腹水生成的抑制作用.观察10.0 mg/kg体重As2O3-NPs处理的胰腺癌小鼠的存活期、体重、腹腔渗透性及腹水中凋亡细胞的变化.结果 As2O3-NPs直径为(210±23)nm,含药量为29%(重量比),体外释药速度明显慢于单纯的As2O3.As2O3-NPs在体内呈浓度依赖性抑制腹水形成,减少腹膜的通透性,增加腹水内凋亡细胞量,延长荷瘤小鼠的存活时间.结论 As2O3-NPs具有明显的缓释药物功能,能有效积聚在肿瘤组织,并抑制癌性腹水生成,是一种有希望的抗肿瘤药物.     

三氧化二砷治疗急性早幼粒细胞白血病心脏毒性的研究

目的　研究治疗量的三氧化二砷 (As2 O3 )对心脏的毒性。方法　通过对 2 8例急性早幼粒细胞白血病 (APL)患者临床症状、基础心率、心电图的动态观察和As2 O3 作用于豚鼠单个心肌细胞后 ,动作电位、L 型钙电流 (ICa L)、外向整流钾电流 (Ik)的即刻变化 ,分析静脉滴入As2 O3 引起心脏毒性的可能机制。结果　 2 8例APL患者中 ,有 71 4 %的患者产生不同程度的心脏毒性反应 ,表现为心率加快和心电图上QT间期 (QTc)延长。膜片钳显示As2 O3 1μmol/L使豚鼠心肌细胞 90 %动作电位时程从 (5 6 3 0± 5 5 8)ms延长至 (737 7± 131 7)ms(P <0 0 5 )。使ICa L和Ik 增加。结论　As2 O3 可使部分APL患者出现心动过速和QTc延长 ,并随治疗时间的延长逐渐恢复。As2 O3 延长豚鼠心室肌细胞的动作电位时程 ,影响ICa L和Ik 可能是导致QTc延长的原因。     

全反式维甲酸与三氧化二砷治疗急性早幼粒细胞白血病临床分析

目的:观察全反式维甲酸(ATRA)与三氧化二砷(As2O3 )联合治疗初发急性早幼粒细胞白血病(APL)的疗效和不良反应。方法:As2O3 联合ATRA治疗初治APL患者16 例,As2O3 0.1%注射液10 ml加入5%葡萄糖溶液500 ml静脉点滴,持续4~5 h,1 次/d;ATRA 25 mg·m-2·d-1,分3 次口服,观察CR率、获得CR所需时间、不良反应。结果:15例患者获得完全缓解(CR),CR率93.8%,获得缓解时间(27.3±3.6) d,没有发现明显的不良反应。结论:As2O3 联合ATRA治疗初发APL患者疗效好,能缩短CR的时间,长期CR时间需要进一步观察。     

腰穿时机和三氧化二砷给药方法对中枢神经系统白血病发生率的影响

急性非淋巴细胞性白血病(ANLL)的中枢神经系统白血病(CNSL)以M4和M5型的发生率较高，约为8％～24％，M3型的CNSL发生率低于M4和M5。国内一组报道M3型的CNSL5年发生率为33．5％，两组数据差异显著。我们发现，国内以三氧化二砷(As2O3)治疗为主，部分患者在外周血白血病细胞负荷期进行了诊断性腰穿。为弄清CNSL的发生与腰穿时机的关系，对白血病患者腰穿时机进行了调研，比较了高白细胞血症(高白)与非高白对CNSL发生率的影响，又分别对接受两种As2O3给药方法治疗的CNSL患者的血、脑脊液砷浓度进行了同步动态监测。     

小剂量三氧化二砷治疗复发性急性早幼粒细胞白血病18例临床观察

目的应用小剂量As2O3治疗复发性急性早幼粒细胞白血病(APL),研究其临床疗效及毒副反应。方法江苏省沭阳仁慈医院血液科18例复发的APL接受小剂量As2O3治疗,方法为As2O35mg/d(0.08mg/kg)静脉点滴,连续28d为一疗程,如未达完全缓释(CR),中间间歇14d,再进行第二疗程,若病情进展,则停止治疗。结果1～2个疗程后,14例(77.8%)达CR,2例死亡,2例未缓解(NP)。小剂量As2O3毒副反应较小,与传统剂量相比(10mg/d),其毒副反应明显减轻。结论小剂量As2O3是治疗复发APL有效方法,其作用机制主要是诱导分化。     

三氧化二砷对胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的试用三氧化二砷(As2O3)以提高胰腺癌的疗效。方法分别比较对照组和As2O3组裸鼠原位胰腺癌模型肿瘤体积、细胞增殖指数和细胞凋亡率。结果As2O3组肿瘤体积较对照组缩小31.2%。胰腺癌细胞增殖指数对照组为(21.05±2.18)%,As2O3组为(10.03±2.86)%(P<0.05);胰腺癌细胞凋亡率对照组(4.7±1.4)%,As2O3组(13.4±1.8)%(P<0.05)。结论As2O3体内能显著抑制胰腺癌的生长,其机制与抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡有关。     

三氧化二砷对人脐静脉内皮细胞作用的研究

目的 通过观察不同浓度三氧化二砷(As2O3)对内皮细胞形态及增殖活力的影响，从内皮细胞角度评价As2O3防治经皮冠状动脉成形术(PTCA)后再狭窄的作用。方法 以不同浓度As2O3（0.01 μmol/L、0.1 μmol/L、1 μmol/L和10 μmol/L）作用于传代培养的人静脉内皮细胞株（EVC-304），分别培养24 h、48 h和72 h观察细胞形态、绘制细胞生长曲线，并行MTT比色法观察As2O3对内皮细胞增殖活力〔吸光度(A)值〕的影响。结果 10 μmol/L的As2O3使细胞皱缩变圆，甚至浮起、碎裂。≤1 μmol/L的As2O3作用于内皮细胞后，细胞形态无明显变化。细胞计数显示，As2O3浓度高于1 μmol/L时，内皮细胞数明显降低。MTT比色法显示:As2O3浓度低于1 μmol/L，A值与对照组比较无差异，在1~10 μmol/L浓度范围内，A值明显降低（P<0.05），提示细胞增殖活力受到抑制。结论 高浓度As2O3对内皮细胞形态有破坏作用，并显著抑制内皮细胞增殖，且抑制作用具有时间及剂量依赖性。低浓度的As2O3则对内皮细胞形态及增殖活力无影响。     

抗坏血酸联合三氧化二砷对不同髓系白血病细胞凋亡与分化效应的差异化影响

目的 观察抗坏血酸(ascorbic acid,AA)对三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)促进髓系白血病细胞分化和凋亡效应的影响.方法 采用细胞培养的方法,体外培养急性早幼粒细胞白血病(APL)的不同亚型细胞株(NB4、MR2)和红白血病细胞株(K562).根据加入As2O3的剂量不同(0、0.1、0.2、0.5、1.0μmol/L和0、1.0、2.0 μmol/L)分组,再以上述各组为对照组,分别加入113.0 μmoL/L的AA,培养96 h后,光镜下观察NB4、MR2、K562细胞株形态改变,流式细胞仪检测NB4、MR2、K562细胞株凋亡[Annexin V(+)PI(-)、Annexin V(+)/PI(+)]和分化[细胞表面抗原(CD)11b、CD33]改变.结果 ①NB4、MR2、K562细胞株在As2O3联合AA作用后.均可见到明显凋亡的细胞,表现为胞浆中出现空泡,核染色质浓缩,碎裂块弥散于胞浆中.可见凋亡小体;在分化的细胞中,细胞出现胞核凹陷、分叶、核浆比例明显减低.②AA联合As2O3后,细胞凋亡的比例增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05或<0.01).③AA能降低As2O3对NB4、MR2细胞的分化效应,使CD11b减少、CD33增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05或<0.01);AA能显著增强As2O3对K562细胞的部分分化效应,使CD33明显减少,CD11b明显增多(P<0.01).结论 从可增强As2O3对各种髓系白血病的凋亡效应.但对不同的髓系白血病细胞,AA对As2O3的分化效应具有差异化,对NB4、MR2细胞表现为抑制作用,对K562细胞表现为增强作用.     

全反式维甲酸、亚砷酸对白血病NB4细胞CD44变异体表达的影响

目的研究全反式维甲酸(ATRA)和亚砷酸(As2O3)作用于人早幼粒细胞白血病(APL)细胞株NB4细胞后不同CD44v分子和PML/RARα表达的变化及相互关系。方法体外培养NB4细胞,分别用ATRA(1μmol/L)、As2O3(1μmol/L)、ATRA+As2O3(1μmol/L+1μmol/L)进行干预,应用MTT法检测细胞生长;用流式细胞术(FCM)分析以上药物对细胞分化的影响;AnnexinV-FITC/PI双标法检测凋亡;应用RQ-PCR法检测细胞中PML/RARα、CD44v3、CD44v6、CD44v10mRNA表达水平的变化。结果 ATRA、As2O3及二者联用对NB4细胞有增殖抑制作用;ATRA、As2O3、ATRA+As2O3作用于NB4细胞后CD11b抗原表达逐渐升高,ATRA组明显高于其他各组;As2O3、ATRA+As2O3对NB4细胞有促凋亡作用;ATRA、As2O3、ATRA+As2O3作用于NB4细胞后PML/RARα、CD44v3、CD44v6、CD44v10mRNA的表达随时间延长呈递减趋势;经ATRA、As2O3、ATRA+As2O3作用后,PML/RARα与CD44v6的变化趋势呈正相关,相关系数分别为r=0.98(P<0.01)、r=0.951(P<0.01)、r=0.999(P<0.01);As2O3作用后,PML/RARα与CD44v3的变化趋势呈正相关(r=0.965,P<0.01)。结论 ATRA、As2O3、ATRA+As2O3可使NB4细胞PML/RARα、CD44v3、CD44v6、CD44v10mRNA的表达下调,且呈时间依赖性。经ATRA、As2O3、ATRA+As2O3作用后PML/RARα与CD44v6的变化趋势均呈正相关。As2O3作用后PML/RARα与CD44v3的变化趋势呈正相关。     

三氧化二砷-泊洛沙姆407缓释剂治疗裸鼠肝癌移植瘤的作用与机制

目的:对比三氧化二砷(As2O3)-泊洛沙姆407缓释剂(As2O3-P407)与亚砷酸注射液(As2O3溶液)对裸鼠肝癌移植瘤的疗效并探讨可能机制。方法:以人肝癌HepG2细胞为来源建立裸鼠皮下移植瘤模型,实验共分3组,As2O3-P407缓释制剂治疗组(As2O3-P407组),As2O3治疗组(As2O3组)与生理盐水对照组(NS组),于造模后6～8天分别行瘤体注射每4天1次,4次为1个疗程。观察各组裸鼠治疗前后肿瘤体积变化及抑瘤率,各组裸鼠肿瘤组织分别行HE染色、TUNEL法检测、透射电镜观察,对比病理改变及肿瘤细胞的凋亡情况。结果:治疗后As2O3-P407组裸鼠肿瘤体积较As2O3组和NS组明显缩小(P0.05);两治疗组抑瘤率分别为72%和46%;光镜下各治疗组肿瘤组织病理改变有意义;As2O3-P407组肿瘤细胞凋亡率明显高于As2O3组;电镜超微结构同样提示As2O3-P407组肿瘤凋亡细胞增加。结论:As2O3-P407缓释剂瘤内注射,可维持局部有效药物浓度、延长作用时间,疗效优于普通AsO注射液瘤内注射,其作用机制可能与增加肿瘤细胞凋亡有关。     

砷雌激素样效应及对HeLa细胞生长的影响

目的 观察砷雌激素样效应及对HeLa细胞体外生长的影响作用.方法 实验分为8组,RPMI1640培养液分别含雌二醇(E2,1 nmol/L)、三氧化二砷(A82O3,0.5、1.0、5.0 μmol/L)、雌二醇拮抗剂(ICI,500nmol/L)、E2(1 nmoL/L)+ICI(500 nmol/L)、As2O3(1.0μmol/L)+[CI(500 nmol/L)以及对照组,以含有不同处理因素的RPMI 1640培养液培养HeLa细胞24、48、72 h.光镜下观察72 h时HeLa细胞生长状况,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各时间点HeLa细胞存活率,流式细胞计量术检测48 h时HeLa细胞周期.结果 形态学观察E2组和0.5μmol/L As2O3组细胞数量明显多于对照组,长势旺盛.24、48、72 h E2组和0.5μmoL/L As2O3组对HeLa细胞的增殖促进率分别为6.35%、11.56%、38.33%及6.35%、8.50%、20.26%.两组作用效果相似,对细胞生长起到增殖促进作用.与对照组[(41.68±1.05)%]比较,E2组[(55.72±2.31)%]和0.5μmol/L As2O3组[(47.82±1.41)%]S期细胞有增多趋势,其他各组则减少,其中5.0 μmol/L As2O3组[(21.1l±4.99)%]、ICI组[(20.16±4.76)%]明显减少,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 小剂量As2O3具有雌激素样效应,可促进HeLa细胞的生长.     

Effects of sodium arsenite on the expression of microRNA-191 and tissue inhibitor of metalloproteinase 3 in L-02 cells

<正>Objective To investigate the effects of sodium arsenite(NaAsO_2)on the expression of microRNA-191(miR-191)and tissue inhibitor of metalloproteinase 3(TIMP-3)in human normal hepatic cells(L-02 cells).Methods L-02 cells were exposed to different doses of Na2As O2[0(control group),5,25,50 and 75μmol/L]     

TPA增强As2O3诱导HL-60细胞凋亡的实验研究

目的 观察12-氧-十四烷酰醇-13-乙酸酯(TPA)和三氧化二砷(As2O3)联合应用对白血病细胞凋亡有无协同作用,并初步探讨其诱导凋亡的机制,为As2O3和TPA联合用于白血病的治疗提供理论依据.方法 采用不同浓度的As2O3联合TPA作用于人白血病细胞系HL-60,用MTT法检测细胞增殖,用TUNEL法检测细胞凋亡,分析不同浓度的As2O3联合TPA对HL-60细胞增殖和凋亡的影响.c-jun氨基末端激酶(JNK)检测法检测JNK活性.结果 TPA联合2.0×10-6 mol/L的As2O3对HL-60细胞增殖抑制作用明显增强,抑制程度大于单用As2O3组(P<0.05).2.0×10-6 mol/L As2O3组诱导HL-60细胞发生凋亡的比率高于对照组,而TPA联合2.0×10-6 mol/L As2O3组引起的细胞凋亡率高于单用As2O3组(P均<0.05).TPA和As2O3均能激活JNK,且二者有协同作用.结论 TPA增强As2O3抑制HL-60细胞增殖和促进凋亡的作用,以上体外实验结果为TPA和As2O3联合用药治疗难治/复发性白血病提供了理论依据.