二冬膏含药血清对人肺癌A549细胞的抑制效应初探

目的探讨二冬膏含药血清对人肺癌A549细胞的抑制效应。方法采用中药血清药理学方法,选择高、中、低剂量的二冬膏水溶液以灌胃方式给药,获取二冬膏含药血清,以空白血清为对照,干预A549细胞,应用MTT法、划痕实验法及Transwell侵袭实验法检测二冬膏含药血清对A549细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果二冬膏高、中、低剂量组干预A549细胞24 h后均可不同程度抑制肺腺癌A549细胞增殖,差异有统计学意义(P0.05),并呈时间、剂量依赖性,以二冬膏中剂量组抑制作用最明显;二冬膏高、中、低剂量组A549细胞的迁移距离较空白组缩短,差异有统计学意义(P0.05),中剂量组细胞迁移距离最短;二冬膏高、中、低剂量组均能降低A549细胞的侵袭能力,差异有统计学意义(P0.05),中剂量组侵袭过膜的细胞数最少。结论二冬膏含药血清能抑制肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭能力,中剂量抑制作用最明显。     

二冬膏祛痰、抗炎及免疫作用的研究

二冬膏出自明朝洪基《摄生秘剖》[1 ] ,并由清朝张璐收入《张氏医通》[2 ] ,二冬膏从 1 963年新中国第二版药典 ,至2 0 0 0年新版药典中均有收录。按药典方二冬膏由天冬、麦冬组成 ,经水煎、浓缩后与炼蜜混匀成棕黄色稠厚的半流体煎膏剂。功能养阴润肺 ,用于燥咳痰少、痰中带血、鼻干咽痛[3] 。虽然历经六版药典 ,对二冬膏的药理学研究目前还未见文献报道。考虑药典中二冬膏的主要功能 ,本文通过祛痰、抗炎和免疫三个方面的实验对二冬膏的药理作用进行了初步研究。1　实验材料1 .1　药品与试剂天冬 ,麦冬 (均购自上海童涵春堂药店 ,并经上海…     

大孔吸附树脂纯化二冬膏总皂苷工艺研究

目的：筛选大孔吸附树脂纯化二冬膏总皂苷的最佳工艺。方法：以二冬膏总皂苷含量为指标,优选二冬膏总皂苷的纯化工艺条件。结果：D101型树脂纯化效果较好。通过树脂纯化后,二冬膏总皂苷的纯度由26.59%上升为62.07%,平均收率为73.09%。结论：本方法纯化效果好,且优化后的纯化工艺稳定可行。     

二冬膏对乌拉坦诱导肺肿瘤模型鼠TNF-α、IL-10、TGF-β1及肿瘤发生的影响

目的:研究二冬膏对乌拉坦诱导肺肿瘤模型鼠TNF-α、IL-10、TGF-β1及肿瘤发生情况的影响。方法:小鼠随机分为6组,即正常组、模型组、二冬膏2.5g/kg组、二冬膏5g/kg组、二冬膏10g/kg组、六味地黄丸4.6g/kg组。除正常组外,其余各组采用小鼠腹腔注射乌拉坦800mg/kg,每周两次,连续五周,复制肺肿瘤小鼠模型。给药与造模同时进行,1次/d,连续15w。二冬膏10g/kg组、二冬膏5g/kg组、二冬膏2.5g/kg组、六味地黄丸4.6g/kg组分别给予等体积药物,正常组与模型组灌胃给予生理盐水。15w后,取血清和肺脏检测。解剖肺脏,观察肺肿瘤发生率及肿瘤结节数;双抗体夹心-酶联免疫吸附法检测血清TNF-α、IL-10和肺组织TGF-β1的含量;免疫组化检测肺组织TGF-β1活性的表达。结果:二冬膏能使模型鼠肺肿瘤发生率从86.7%降至40.0~66.7%,平均肿瘤结节数从7.32降至3.97~5.53,降低程度明显,并可明显降低血清中TNF-α、IL-10含量,使肺组织中TGF-β1含量和活性的表达也显著下降。结论:二冬膏能通过降低TNF-α、IL-10、TGF-β1的表达来延缓乌拉坦诱发肺肿瘤的发生发展。     

分光光度法测定二冬膏复方中总黄酮的含量

目的:建立二冬膏复方中总黄酮的含量测定方法.方法:采用分光光度法测定总黄酮的含量.结果:二冬膏复方中总黄酮含量为不低于0.003%.平均回收率为95.77%,RSD=1.61%,n=5.结论:本法简便、准确、灵敏、重现性好,为二冬膏复方的质量控制提供了依据.     

二冬膏抗NF-κB抑制介导的人肺癌细胞效应探讨

目的:探讨二冬膏的抗肿瘤效应,并研究核转录因子κB(NF-κB)在二冬膏抗肿瘤效应中的作用。方法:用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测二冬膏对A549细胞的增殖抑制效应(量效和时效关系);逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测二冬膏对A549细胞p65 mRNA表达的影响;采用免疫印迹法(Western blot)检测二冬膏对A549细胞p65蛋白表达的影响。结果:不同剂量组二冬膏含药血清均具有对肺腺癌A549细胞的明显增殖抑制作用(P0.05),且各自表现出一定时间和剂量相关性,给药干预24 h后细胞增殖均出现抑制,其中以二冬膏中剂量组(3.2 g·kg-1,bid)干预48 h后对细胞增殖的抑制作用最明显。二冬膏中剂量组(3.2 g·kg-1,bid)干预A549细胞24 h后明显抑制p65 mRNA的表达;中剂量组(3.2 g·kg-1,bid)干预A549细胞后48 h对p65蛋白有显著抑制效应。结论:二冬膏可显著抑制人肺腺癌细胞系A549的增殖,通过对NF-κB的抑制介导其抗肿瘤活性。     

二冬膏的处方组成研究

目的：确定二冬膏最佳处方组成。方法：以二冬膏多糖得率作为考察指标,采用方差分析法,以麦冬（A）、天冬（B）的产地作为因素。结果：AB因素对多糖含量的影响具有垦著影响。结论：最佳处方组成为A1B1。     

二冬膏延缓胃癌发生的作用机制

目的:通过分析大鼠胃组织细胞凋亡和血浆差异代谢产物,探讨二冬膏延缓胃癌发生的作用机制。方法:大鼠随机分为正常组、模型组、维甲酸(12×10~(-3)g·kg~(-1))组、二冬膏低、高剂量(6,12 g·kg~(-1))组,除正常组外,其余大鼠ig N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)0.2 g·kg~(-1)建立模型,10 d/次,共9次。各组每天ig相应药物,正常组ig等体积生理盐水,治疗3个月后处理动物,苏木素伊红(HE)染色分析胃癌程度及病理变化的改善;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)测定胃组织中凋亡抑制基因B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)mRNA表达;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测胃组织细胞凋亡;血浆代谢组学寻找差异代谢产物。结果:与模型组比较,二冬膏低、高剂量组病变主要在良性的乳头状瘤和乳头状增生,说明二冬膏能够改善胃癌病变程度;低剂量组能明显降低胃组织Bcl-2 mRNA的表达(P0.01),TUNEL显示二冬膏低、高剂量组胃组织细胞凋亡数比模型组高。二冬膏低剂量血浆代谢产物中发现的鞘氨醇-1-磷酸(Sphingosine-1-phosphate),20-羟基-二十烷四烯酸(20-HETE),甘氨胆酸(Glycocholic acid)等与细胞凋亡相关。结论:二冬膏能够促进胃癌变大鼠胃组织发生细胞凋亡,延缓胃癌发生。     

二冬膏对LPS诱导小鼠肺泡巨噬细胞分泌TNF-α、IL-6及AQP1的影响

目的观察二冬膏对脂多糖(LPS)诱导小鼠肺泡巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及水通道蛋白1(AQP1)的影响,并探讨可能的作用机制。方法以二冬膏低、中、高剂量灌胃大鼠,采集二冬膏含药血清。以空白血清为对照,考察二冬膏含药血清对LPS诱导小鼠肺泡巨噬细胞MH-S的影响。MTT法检测MH-S细胞存活率,一氧化氮(NO)测定试剂盒检测NO的含量,ELISA和RT-PCR法检测TNF-α、IL-6及AQP1的水平,Western blotting法检测MH-S细胞中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子(MyD88)、核转录因子κB p65(NF-κB p65)及AQP1的水平。结果二冬膏各剂量组在干预24 h内对MH-S细胞的存活率没有明显差异。与模型组相比,二冬膏含药血清能剂量依赖性地降低NO、TNF-α及IL-6的分泌量,明显抑制TNF-α和IL-6 mRNA的水平(P 0.05或P 0.01),显著促进AQP1 mRNA的表达(P 0.05或P 0.01);能明显下调TLR4、MyD88及NF-κB p65蛋白的水平(P 0.05或P 0.01),上调AQP1蛋白的水平(P 0.01)。结论二冬膏含药血清能够通过上调AQP1,抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,从而抑制炎性因子的表达及释放,发挥抗炎作用。     

二冬膏对LPS致急性肺损伤大鼠肺组织TNF-α、IL-6及AQP-1、AQP-5的影响

目的:研究二冬膏对LPS致急性肺损伤(ALI)模型鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素6(IL-6)含量及水通道蛋白-1(AQP-1)、AQP-5蛋白表达的影响。方法:将清洁级SD大鼠随机分为6组:正常组、模型组、二冬膏10 g/kg组、二冬膏5 g/kg组、二冬膏2.5 g/kg组、地塞米松组。除正常组外,其余各组采用一次性尾静脉iv LPS 6 mg/kg复制急性肺损伤大鼠模型。首次给药在造模后0.5 h,二冬膏分别ig二冬膏生药10、5、2.5 g/kg,正常对照组与模型组ig生理盐水l ml/100g,地塞米松组腹腔ip地塞米松0.01g/kg,1次/d,连续4 d。末次给药后2 h,处死大鼠,取肺组织检测。计算肺系数、肺湿干比(W/D);采用ELISA检测大鼠肺组织TNF-α、IL-6的含量;Real-time PCR检测大鼠肺组织AQP-1、AQP-5 mRNA表达;Western bloting测定大鼠肺组织AQP-1、AQP-5蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠肺系数、肺湿干比(W/D)和肺组织TNF-α、IL-6含量明显升高,肺组织AQP-1、AQP-5 mRNA和AQP-1、AQP-5蛋白表达显著降低。与模型组比较,二冬膏10、5、2.5 g/kg组均能明显降低肺系数、肺湿干比(W/D)和TNF-α、IL-6含量,显著升高肺组织AQP-1、AQP-5 mRNA和AQP-1、AQP-5蛋白的表达。结论:二冬膏通过降低急性肺损伤模型鼠促炎因子TNF-α、IL-6含量,提高肺组织AQP-1、AQP-5蛋白的表达,减轻肺水肿状态,从而有效防治急性肺损伤。     

咳消膏镇咳祛痰平喘实验研究

咳消膏镇咳祛痰平喘实验研究青海省中医药研究所（８１００００）王立义，张光茹，潘利民主题词＠冬果梨／药理学，镇咳剂咳消膏是以青海产冬果梨（Ｐｙｒｕｓｂｒｅｔｓ－ｃｈｎｅｉｄｒｉＲｅｈｄ）为主要原料，辅以柿饼、核桃仁、甘草、冰糖等加工精制而成。梨性甘寒，...     

天灸膏穴位敷贴对100例慢性支气管炎冬病夏治的疗效观察

天灸膏穴位敷贴对１００例慢性支气管炎冬病夏治的疗效观察宋南昌，熊润贤（江西省南昌市中西医结合医院南昌３３０００３）关键词慢性支气管炎，冬病夏治，天灸膏，穴位敷贴１９９０年夏，我们采用天灸膏穴位敷贴防治慢性支气管炎１００例，取得较为满意的疗效，现将临床...     

冬病夏治消喘膏治疗慢性肺系疾病的回顾性研究

目的 观察冬病夏治消喘膏穴位敷贴疗法对成人支气管哮喘、慢性阻塞性肺疾病、变应性鼻炎等慢性肺系疾病治未病的临床疗效.方法 对2007年6-8月在我院呼吸科行冬病夏治消喘膏贴敷的患者资料进行回顾性分析.结果 本疗法对上述3种肺系疾病的总有效率分别为77.10%、70.06%、63.11%,证效关系显示对脾肾阳虚、肺肾气虚等虚寒证有效率最高,且疗效与治疗时间呈正相关趋势.结论 冬病夏治消喘膏防治呼吸系统疾病存在时效正相关性,对慢性阻塞性肺疾病稳定期虚寒证患者疗效最好.     

新型“伏天膏”的研制及其临床应用

目的探究新型＂伏天膏＂在冬病夏治中运用的疗效。方法在每年三伏天用新型＂伏天膏＂结合热灸贴对阳虚寒性类疾病患者进行3次贴敷治疗,3年为1疗程。结果治疗期间贴敷时间减短,皮肤不良反应减少,适宜疾病患者疗效显著。结论新型＂伏天膏＂是对传统的冬病夏治贴敷疗法的改进,为现代人更容易接受的一种养生治未病的方法。     

不同滋阴中药对小鼠诱发性肺肿瘤发生及抗肿瘤免疫功能的影响

目的:研究六味地黄丸和二冬膏对乌拉坦诱发性肺肿瘤小鼠的肿瘤发生情况和抗肿瘤免疫功能的影响.方法:雌性昆明种小鼠33只,使用乌拉坦(1 g·kg-1·d-1)注射诱发小鼠肺肿瘤,随机分为对照组、六味地黄丸组(ig 1.56 g·kg-1·d-1)和二冬膏组(ig 0.78 g·kg-1·d-1),连续给药100 d后肉眼及病理切片和苏木精-伊红染色观察药物对小鼠肺肿瘤发生的影响,测定脾指数、胸腺指数、巨噬细胞吞噬功能以及测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.结果:与对照组比较,六味地黄丸和二冬膏给药组小鼠肺肿瘤诱发率明显降低,诱发率分别是63.6％,18.2％,36.4％.与对照组比较,六味地黄丸和二冬膏给药组小鼠脾指数、巨噬细胞活性明显增高(P ＜0.05或P＜0.01),小鼠血清中TNF-α含量明显降低(P＜0.05或P＜0.01).结论:六味地黄丸和二冬膏均能通过提高小鼠的抗肿瘤免疫功能和减少炎症因子产生来延缓乌拉坦诱发肺肿瘤的发生发展.     

冬病夏治消喘膏穴位贴敷疗法预防儿童哮喘复发的临床研究

目的:验证冬病夏治消喘膏穴位贴敷疗法治疗缓解期儿童哮喘的临床疗效.方法:将90例哮喘患儿随机分为3组,分别予冬病夏治消喘膏贴敷、吸入激素和冬病夏治消喘膏贴敷联合吸入激素治疗,随访1年.观察哮喘的复发情况及肺功能水平.结果:Ⅰ组(冬病夏治治疗组)预防哮喘复发的总有效率为63.3％稍低于Ⅱ组(激素治疗组)69.2％,但无统计学差异,Ⅲ组(冬病夏治联合激素治疗组)总有效率93.1％高于Ⅰ组和Ⅱ组,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗前3组FEV1,FEV1/FVC及PEF比较,无明显差异;3组治疗后与治疗前比较,FEV1,FEV1/FVC,PEF均明显上升,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗后Ⅲ组与Ⅰ组及Ⅱ组FEV1,FEV1/FVC,PEF比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:冬病夏治消喘膏穴位贴敷治疗有预防哮喘复发的作用,与吸入激素联合治疗,效果更佳.     

二冬膏对急性肺损伤模型鼠TNF-α,IL-6含量及AQP-5蛋白表达的影响

目的:研究二冬膏对脂多糖(LPS)致急性肺损伤(ALI)模型鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-6(IL-6)含量及水通道蛋白5(AQP-5)表达的影响。方法:将72只清洁级SD大鼠随机分为6组:正常组、模型组、二冬膏高、中、低剂量组、地塞米松组,每组12只。除正常组外,其余各组采用一次性尾静脉注射LPS 6 mg·kg-1复制ALI大鼠模型。首次给药在造模后0.5 h,1次/d,连续4 d。二冬膏高、中、低剂量组分别ig二冬膏10,5,2.5 g·kg-1;正常组与模型组ig生理盐水10 m L·kg-1,地塞米松组ip地塞米松0.01 g·kg-1。4 d后处死大鼠,取血清和肺组织检测。采用双抗体夹心-酶联免疫吸附(ABC-ELISA)法检测大鼠血清TNF-α,IL-6的含量,Western bloting测定大鼠肺组织AQP-5蛋白的表达,苏木素和伊红(HE)染色观察肺组织病理形态。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清TNF-α,IL-6含量明显升高(P0.01),肺组织AQP-5蛋白表达水平显著降低(P0.01)且肺部病理炎症增加。与模型组比较,二冬膏各组均能明显降低TNF-α,IL-6含量(P0.05,P0.01),显著升高肺组织AQP-5蛋白的表达(P0.05,P0.01)并且减轻肺部病理炎症。结论:二冬膏通过降低ALI模型鼠促炎因子TNF-α,IL-6含量,升高肺组织AQP-5蛋白的表达,改善肺部病理炎症,减轻肺水肿状态,从而有效防治急性肺损伤。     

冬病夏治消喘膏治疗慢性肺系疾病的回顾性研究

目的观察冬病夏治消喘膏穴位敷贴疗法对成人支气管哮喘、慢性阻塞性肺疾病、变应性鼻炎等慢性肺系疾病治未病的临床疗效。方法对2007年6—8月在我院呼吸科行冬病夏治消喘膏贴敷的患者资料进行回顾性分析。结果本疗法对上述3种肺系疾病的总有效率分别为77．10％、70．06％、63．11％，证效关系显示对脾肾阳虚、肺肾气虚等虚寒证有效率最高，且疗效与治疗时间呈正相关趋势。结论冬病夏治消喘膏防治呼吸系统疾病存在时效正相关性，对慢性阻塞性肺疾病稳定期虚寒证患者疗效最好。     

冬病夏治中药贴敷膏治疗哮喘174例临床观察

目的：观察中药贴敷膏治疗哮喘的疗效。方法：用中药贴敷膏伏天贴敷穴位来预防哮喘发作,控制减少哮喘发病机会。结果：治疗174例,总有效率95.7%。结论：冬病夏治中药贴敷膏治疗哮喘确有良效。     

冬病夏治消喘膏穴位贴敷临床应用几点体会

冬病夏治是指冬季寒冷时容易发作或加重的疾病,在夏天进行治疗,从而达到增强抗病能力,预防和减少疾病在冬季发作的一种中医特色疗法。"天人相应"、"春夏养阳"是冬病夏治理论依据。冬病夏治消喘膏来源于清代《张氏医通》,初为哮喘病而设,临床应用行之有效。我院于2000年～2010年间,应用加味消喘膏防治呼吸道疾病610例取得了较好疗效,同时也发现了一些需要注意的问题,与同道加以探讨。