镉饱和法测定大鼠肝脏及血浆金属硫蛋白方法研究

<正>金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是一类广泛存在于生物体内的低分子量(分子质量约为6 000～7 000 u)、富含半胱氨酸、缺少环状氨基酸的金属结合蛋白,每摩尔MT可以结合6～12个锌、镉、铜、汞、银等重金属[1,6]。结合了2价金属镉离子的MT在250 nm处有特殊的光吸收峰[2]。金属硫蛋白参与体     

金属硫蛋白及其在镉接触评价中的应用

金属硫蛋白(MT)是一类低分子量、富含半胱氨酸的金属结合蛋白家族。MT主要与重金属解毒及细胞内微量元素锌、铜的储存、运输和代谢有关。本文主要对MT基因结构、调控、诱导及在镉接触评价中的应用进行综述。     

金属硫蛋白与镉中毒

金属硫蛋白（Metallothion，in，简称MT）是一种低分子量（6000～10000）蛋白质，具有高金属含量（每分子含7～12个金属分子），金属通过硫酯键与蛋白结合。氨基酸组合中约含23％～33％半胱氨酸，通过形成金属硫键选择性的结合半脱氨酸无二硫键及芳香族氨基酸和组氨酸。MT被发现以来，围绕着与镉毒性的关系做了许多研究工作，发现MT的亲金属性使生物体接触铜后引起一系列特殊的生物学效应，如有特定的靶器官，生物半减期长，药物促排困难，干扰体内必需微量元素的平衡等。本文就MT与Cd的吸收、转运、中毒与解毒以及铜与其它微量元素的关…     

金属硫蛋白对镍致小鼠肝损伤的保护作用

目的探讨金属硫蛋白对镍致小鼠肝损伤的保护作用及其机制。方法利用硫酸镍染毒复制小鼠肝损伤的模型,然后腹腔注射不同剂量的金属硫蛋白7 d,检测肝脏器系数、肝功能及肝组织脂质过氧化等指标,并行肝组织病理学观察。结果肝损伤模型组与金属硫蛋白(MT)保护组小鼠肝脏器系数差异有统计学意义(P<0.05),随着MT剂量的增加,肝脏器系数逐渐降低(P<0.05);MT保护组肝细胞炎性浸润、水肿及坏死明显减轻,肝窦结构有恢复;MT保护组小鼠血清AST、ALT、GGT及总胆汁酸均低于损伤模型组(P<0.05),肝组织MDA、GSH低于损伤模型组(P<0.05),而SOD、GSH-Px活性则高于损伤模型组(P<0.05),并均有较强的剂量依赖关系。结论金属硫蛋白对镍致小鼠肝损伤有保护作用,保护机制可能与减轻氧化损伤有关。     

金属硫蛋白的α、β结构域与铅结合形式及稳定性的研究

为研究金属硫蛋白与铅的相互作用 ,从基因工程菌 (BL2 1菌 )中分别提取并纯化结合了镉的金属硫蛋白α和β结构域 ,用酸解的方法脱去蛋白中的金属镉 ,然后用Sephadex G2 5纯化分别得到脱金属的α和 β结构域硫蛋白 (apo α MT和apo β MT)。在apo α MT和apo β MT中分别加入不同比例的铅 ,待反应完全后 ,用紫外吸收光谱法研究它们的巯基金属簇结构。经紫外吸收光谱图研究证明 :α结构域与铅反应可产生两种形式的结合物 ,一种为结合 4个铅的MT(Pb4 α MT) ,另一种则为结合 7个铅的MT(Pb7 α MT) ,而 β结构域与铅反应仅生成一种结合 3个铅的产物 (Pb3 β MT)。同时 ,通过与DTNB反应测定了它们的速率常数 ,结果表明结合了 4个铅的α结构域比另外两个产物的稳定性好。该研究对进一步探讨金属硫蛋白与铅反应的机理及其排铅功能提供了有力的证据。     

人胎肝、正常成人肝、肝癌及鼠肝金属硫蛋白的研究比较

分别从人胎肝、正常成人肝、肝癌及鼠肝分离得到金属硫蛋白两个亚型（MT－1，MT－2），研究发现鼠肝MT含量最高1．1～1.45mg／克肝重，其次人胎肝1．0～1．3mg／克肝重，正常成人肝MT为1．13mg／克肝重，而肝癌含量最低56μg／克肝重。氨基酸成份分析表明，四种不同来源MT分子中半胱氨酸约占1／3，未发现有芳香族氨基酸。人胎肝MT的抗血清与其他三科来源MT均有交叉反应。并对金属结合能力进行测定。     

人的胎盘和胎膜中的类金属硫蛋白

近几年的研究表明,哺乳动物的胎盘中存在金属硫蛋白(MT)。作者应用Cd-放射分析方法测定人的胎盘、绒毛膜和羊膜的MT浓度,并研究了Cd和Zn对绒毛膜滋养层中MT浓度的影响。结果:绒毛膜和羊膜中的MT浓度为8～9μg/g组织,胎盘中的MT浓度约为这个数     

非小细胞肺癌中MT蛋白与P53表达的研究

目的研究金属硫蛋白(metallothionein,MT)、p53蛋白在非小细胞肺癌(non-small-cell-lungcarcinoma,NSCLC)中的表达及其与临床病理的关系。方法选取NSCLC组织73例(鳞癌41例,腺癌32例)及正常肺支气管黏膜组织15例的石蜡标本,用免疫组化技术(S-P法)检测MT及p53蛋白在各组织中的表达。结果MT蛋白和p53蛋白在NSCLC中的阳性表达率分别为54.8%(40/73)、65.8%(48/73),均明显高于在正常肺支气管黏膜组织中的阳性表达率20.0%(3/15)、33.3%(5/15),差异具有统计学意义P<0.05。肺鳞癌和腺癌中MT的阳性表达率分别为56.1%(23/41)和53.1%(17/32),p53蛋白的阳性表达率分别为68.3%(28/41)和62.5%(20/32),其差异均无统计学意义P>0.05。MT蛋白和p53蛋白的阳性表达率均与NSCLC组织的分化程度、淋巴结转移等因素密切相关,差异具有统计学意义(P<0.05)。MT蛋白阳性表达与p53蛋白阳性表达呈正相关(P<0.05)。结论MT蛋白的高表达可能是非小细胞肺癌的发生的一种生物学标志,且与p53蛋白存在协同作用,联合检测两种蛋白的表达水平对判断NSCLC恶性程度、淋巴转移趋势具有重要价值。     

金属硫蛋白的特性及其检测方法

金属硫蛋白(Metallothionein MT)为一组非酶性低分子蛋白,富于硫和重金属,近年来在生物学和毒理学领域中已引起广泛兴趣。此蛋白最早由Margoshes等(1957)在研究镉的生物学作用时从马肾皮质中分离获得,Kgi(1961)等作了详细研究,并归纳有以下特性:①分子量在6,000～7,000含多量重金属。②氨基酸组成中含大量半胱氨酸,无芳香族氨基酸。③具有特异性金属硫胺的紫外吸收光     

家蝇金属硫蛋白的研究进展

金属硫蛋白（MT）是一类广泛存在于生物体内的金属结合蛋白,富含半胱氨酸的小分子蛋白,能螯合多种金属离子,因其功能独特,近年来对MT各方面的研究日益受到重视。该文简述了家蝇MT的结构特点、理化性质和分布情况,以及参与体内解毒、清除自由基和微量元素代谢功能的研究现状及进展。     

MT1、MT2和3-MMP在喉癌中的表达及临床意义

目的 通过检测喉鳞癌组织中膜型基质金属蛋白酶1、2和3(MT1、2和3-MMP)的蛋白表达,探讨其在喉癌浸润转移中的作用及意义.方法 采用免疫组化方法检测70例喉癌和癌旁非癌组织蜡块标本中MT1、2和3-MMP蛋白的表达,观察其表达结果与喉癌临床病理特征的关系.结果 70例喉癌组织中MT1、2和3-MMP的蛋白表达明显高于癌旁正常组织(P<0.01),并与浸润程度和临床分期密切相关(P<0.05),MT1-MMP的表达尚与淋巴结转移有关(P>0.05).结论 MT1、2和3-MMP在喉癌进展过程中可能发挥重要作用,可作为判断喉癌浸润转移潜能的生物学指标.     

Sephadex G-75凝胶柱层析法测定金属硫蛋白

应用Sephadex G-75凝胶柱层祈技术分离出大鼠肝、肾、血液和尿液中金属硫蛋白(MT),通过测定该蛋白质所结合的金属含量来计算MT含量。此法不但能较灵敏地反映镉等重金属中毒情况下MT的体内变化,也能测出正常机体肝、肾等组织中MT含量。若样品加以浓缩亦可检出正常血、尿中MT的含量。     

金属硫蛋白与肿瘤增殖抗原在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及意义

目的:研究金属硫蛋白(MT)和肿瘤增殖抗原(Ki-67)在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及相关性和临床意义。方法:采用免疫组化SP法及半定量分析法,检测105例卵巢上皮性肿瘤病理标本中的MT及Ki-67蛋白表达。结果:MT在卵巢癌及正常组织中表达有差异(P<0.01),Ki-67在不同组织学类型卵巢肿瘤间表达无明显差异(P>0.05);MT与Ki-67的表达强度恶性肿瘤高于正常、良性、交界性肿瘤(P<0.05),临床Ⅲ、Ⅳ期,病理2、3级的恶性肿瘤高于临床Ⅰ、Ⅱ期,病理1级者(P<0.01);MT与Ki-67的表达强度在恶性上皮性卵巢肿瘤中有显著相关性(P<0.05)。结论:组织中MT、Ki-67的表达强度与卵巢肿瘤的性质有关,MT和Ki-67可能作为卵巢肿瘤的预后预测参考指标。     

鲟鱼金属硫蛋白排铅作用及对锌含量影响的研究

目的:探讨鲟鱼金属硫蛋白对铅中毒小鼠的排铅作用及其对锌含量的影响。方法:将昆明种小鼠20只随机分成正常组、铅模型组、阳性药物组(依地酸二钠钙)和金属硫蛋白组(以鲟鱼金属硫蛋白灌胃)。除正常组外,其它三组连续30 d自由饮用1.65%的醋酸铅水溶液。30 d后,测量脾脏系数,血液、股骨、睾丸中的铅和锌含量。结果:MT组小鼠血铅和股骨铅水平均明显低于铅模型组小鼠(P<0.05);MT组小鼠血锌水平均显著高于正常组和铅模型组(P<0.05),股骨锌含量低于正常组(P<0.05)。但未见MT对睾丸的铅、锌水平及氧化损伤保护有明显的影响。结论:鲟鱼MT具有促进排铅和拮抗铅中毒引起的锌含量下降的作用。     

金属硫蛋白医学研究进展

金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在于生物界的金属结合蛋白,因其功能独特,近年来对MT的研究日益受到重视。对MT的分子结构、性质、参与体内微量元素代谢、解除重金属的毒性、清除体内自由基、抗氧化损伤、防止机体衰老、应激能力等生物学功能进行了阐述,并对MT与肿瘤和其它疾病的关系等方面的研究进行了综述,并提出了MT研究中存在的问题及展望。     

燃煤型砷中毒患者金属硫蛋白基因表达

目的比较燃煤型砷中毒患者与正常人群金属硫蛋白(MT)表达,研究金属硫蛋白基因在燃煤型砷中毒患者中的表达及其意义,阐明燃煤型砷中毒分子机制。方法燃煤型砷中毒患者与正常人群各50例,采用Trizol-酚-氯仿一步法提取总RNA。紫外分光光度法测定RNA的量,A260/A280鉴定RNA纯度。采用实时荧光RT-PCR技术测定燃煤型砷中毒MT mRNA的表达,以-βactin作为实时荧光RT-PCR的质控,当P<0.05时认为差异有统计学意义。结果正常组MT mRNA的相对表达水平为6.82±7.80,砷中毒组MT mRNA的相对表达水平为2.02±2.82。燃煤型砷中毒患者MTmRNA表达降低,约为正常对照的30%,二者间差异有统计学意义(P<0.01)。结论金属硫蛋白在燃煤型砷中毒代谢中有重要意义,起重要的调控作用。MT mRNA表达降低可能是砷中毒机制之一。     

金属硫蛋白在子宫内膜癌中的表达及意义

目的:探讨金属硫蛋白(MT)在子宫内膜癌中的表达及与雌孕激素受体(ER、PR)表达的关系。方法:应用免疫组织化学方法检测45例子宫内膜癌中MT及ER、PR的表达。结果:在子宫内膜癌中,MT的表达与手术-病理分期和组织学分级密切相关(P<0·05),但与肌层浸润无明显关系。另外,MT的表达还与ER、PR的表达呈负相关(P<0·05)。结论:联合测定ER、PR和MT含量有助于子宫内膜癌的诊断、治疗及预测预后。     

金属硫蛋白对金属毒性的防护机理

选用对金属硫蛋白(MT)具有高亲和力的Ag、Co、Hg、Ni、Pb和Zn等金属,研究MT与这些金属细胞毒性之间的关系。实验选用体重250～350g的Sprague-Dawley雄性大鼠,在72±2°F温度条件下饲养。取动物肝脏作细胞培养,加ZnCl_2(100μM)于肝细胞培养基中,培养24小时,诱导MT合成。随后做去     

新生大鼠各个器官金属硫蛋白的个体发育情况

本文报道新生大鼠主要器官在不同发育期金属硫蛋白(MT)的水平,并测定经 Cd 和 Zn 处理后时 MT水平的影响。实验采用 Sprague-Dawley 大鼠。大鼠     

金属硫蛋白降低铅致新生仔鼠脑组织的氧化损伤

目的　应用金属硫蛋白基因敲除小鼠模型 ,研究孕鼠铅暴露 ,新生仔鼠脑组织氧化损伤与金属硫蛋白 (MT)间的关系。方法　采用整体动物实验 ,于金属硫蛋白基因敲除小鼠 [MT(- / - ) ]和野生型小鼠[MT(+/ +) ]孕第 0天至妊娠结束进行醋酸铅灌胃染毒 ,仔鼠出生后第 1天处死 ,取脑组织测定丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽 (GSH)含量及超氧化物歧化酶 (SOD)活力 ,同时测定脑组织中MT的含量。结果　宫内铅暴露使MT (+/ +)及MT (- / - )新生仔鼠脑组织MDA含量升高 ,SOD活力降低 ,与染铅剂量间存在明显的剂量 -效应关系 (P <0 0 1)。相同醋酸铅染毒剂量间比较结果显示 ,对照组、低及中剂量染铅组MT (- / - )仔鼠脑组织MDA含量明显高于MT (+/ +)仔鼠 ,差异具有显著性 (P <0 0 1)。随染铅剂量的增加 ,MT (+/ +)仔鼠脑组织GSH含量单向性升高 ;而MT (- / - )仔鼠脑组织GSH含量的变化为非单向性 ,表现为低、中剂量升高 ,高剂量时下降的趋势。高剂量染铅组MT (+/ +)仔鼠脑组织MT含量明显高于对照组 (P <0 0 1)。结论　MT在体内铅的转运、代谢乃至解毒方面具有一定作用 ,MT的缺乏可使铅引起的脑组织脂质过氧化反应增强 ,进一步加重铅的神经发育毒性。