党参总皂苷对大鼠局灶性脑缺血性损伤的保护作用

目的观察党参总皂苷(TSC)对大鼠局灶性脑缺血性损伤的保护作用,并初探其机制。方法 54只SD大鼠随机分为假手术组、假手术给药组、模型组、治疗组。假手术给药组及治疗组每日1次TSC60mg·kg~(-1)灌胃,假手术组及模型组灌胃等体积的生理盐水,7d后建立大鼠右侧大脑中动脉阻塞(MCAO)的局灶性脑缺血模型,24h后观察各组大鼠死亡率、神经功能症状,2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色测量脑梗死体积,real time RT-PCR法测定缺血周边区肿瘤生长因子α(Tnf-α)、白细胞介素1β(Il-1β)、环氧酶2(Cox-2)、内皮型一氧化氨合酶(Nos3)及诱导型一氧化氮合酶(Nos2)的mRNA表达。结果 TSC明显降低MCAO所致的死亡率及神经功能评分,并减少脑梗死体积(均P<0.05)。同时,TSC明显抑制了缺血周边区Tnf-α、Il-1β、Cox-2、Nos3及Nos2的mRNA表达(P<0.05),而对假手术给药组大鼠无明显影响(P>0.05)。结论 TSC对大鼠局灶性脑缺血性损伤有保护作用,其机制与抑制炎症相关基因的mRNA表达有关。     

白藜芦醇减轻慢性神经炎症所致的大鼠空间学习记忆减退

目的:考察白藜芦醇对慢性炎症所致大鼠空间学习记忆减退的保护作用,探讨其作用机制。方法:雄性SD大鼠ip给予脂多糖20 mg·kg-1,每周1次,连续4周制备大鼠慢性神经炎症模型,同时ig给予白藜芦醇10,20,40 mg·kg-1·d-1,阳性组ig给予布洛芬40 mg·kg-1,连续26 d。给药d22行Morris水迷宫测定大鼠的空间学习记忆能力,连续5 d。实时定量PCR法测定大鼠海马组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及环氧合酶-2(COX-2)mRNA的表达。结果:连续4周注射脂多糖(LPS)后,大鼠在定向航行实验中的逃避潜伏期明显增加,空间探索实验中的校正逃避潜伏期明显缩短,且海马组织中TNF-α,IL-1β,NOS2及COX-2基因的mRNA表达水平增加;白藜芦醇和布洛芬组大鼠定向航行实验中的逃避潜伏期明显缩短,空间探索实验中的校正逃避潜伏期延长,海马组织中TNF-α,IL-1β,NOS2及COX-2基因的mRNA表达水平降低。结论:白藜芦醇可减轻慢性神经炎症诱导的大鼠记忆能力减退,其机制可能与降低海马组织中TNF-α,IL-1β,NO...     

罗格列酮抑制糖基化终产物诱导大鼠血管平滑肌细胞钙化机制

目的探讨罗格列酮抑制糖基化终产物(AGEs)诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的可能机制。方法在含10 mmol·L~(-1)β-甘油磷酸培养液中加入200 mg·L~(-1)的AGEs及不同浓度(10~(-7)～10~(-5)mol·L~(-1))的罗格列酮体外培养VSMCs,采用甲-酚酞络合酮方法测定细胞钙含量,real time-PCR检测肿瘤坏死因子α(Tnf-α)、白细胞介素6(Il-6)及糖基化终产物受体(Rage)mRNA表达,Western blotting检测Rage蛋白表达,ELISA法检测细胞上清Tnf-α、Il-6水平。结果 AGEs可使VSMCs钙含量增加,Tnf-α、Il-6及Rage mRNA和蛋白表达增加(P<0.01);罗格列酮组均可降低VSMCs细胞层钙含量,抑制上述影响(P<0.05)。结论罗格列酮可能通过抑制VSMCs Rage表达,降低Tnf-α、Il-6表达和分泌,减轻AGEs诱导的VSMCs钙化。     

金钗石斛生物总碱对脂多糖诱导大鼠学习记忆功能减退的改善作用

目的探讨金钗石斛生物总碱(DNLA)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠学习记忆功能减退的改善作用及可能的作用机制。方法成年雄性SD大鼠经Morris水迷宫训练合格后,随机分为模型组和假手术组。模型组大鼠左侧脑室微量注射LPS(10.gL-1)5μL后分为LPS,LPS+布洛芬(Ibu,40 m.gkg-1),LPS+DNLA(20,40和80 mg.kg-1)组,假手术组左侧脑室注射5μL生理盐水。大鼠清醒后ig给予Ibu或DNLA,每天1次,连续14 d。用Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力;HE染色观察海马神经元形态改变;免疫组织化学法检测海马淀粉样β蛋白片段1-42(Aβ1-42)含量;实时荧光定量PCR检测海马半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)3/8 mRNA表达水平。结果侧脑室注射LPS后,大鼠水迷宫逃避潜伏期及搜索距离明显延长,海马出现神经元凋亡和坏死改变。Ibu和DNLA均能明显缩短模型大鼠水迷宫逃避潜伏期和搜索距离,减轻神经元凋亡和坏死,降低海马Aβ1-42含量和caspase 3/8 mRNA表达水平。结论DNLA可改善LPS诱导的大鼠学习记忆功能减退,其机制可能与降低海马caspase 3/8 mRNA表达、减少Aβ1-42产生有关。     

缬沙坦联合川芎嗪对血管性痴呆模型大鼠空间学习记忆能力的影响

目的比较缬沙坦和川芎嗪单独及联合应用对血管性痴呆(VD)模型大鼠空间学习记忆能力的影响,并探讨其可能的作用机制。方法大鼠ip给予硝普钠2.5mg·kg-1后,夹闭双侧颈总动脉缺血10min,再灌注10min,重复2次,制备VD大鼠模型。VD模型制备后24h,治疗组大鼠于每天上午9:00ig给予缬沙坦8mg·kg-1,川芎嗪25mg·kg-1或缬沙坦+川芎嗪(8+25mg·kg-1),每天1次,连续15d,同时设假手术和模型组。Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力;Morris水迷宫实验结束后第2天取海马,逆转录PCR检测海马组织白细胞介素1β(IL-1β)mRNA表达;免疫组织化学法检测海马肿瘤坏死因子α(TNF-α),Bcl-2和Bax蛋白表达。结果末次给药后连续5d进行大鼠定位航行训练,训练的第3,4和第5天,模型组大鼠逃避潜伏期分别为43±19,22±10和(16±7)s,与假手术组32±15,16±8和(10±6)s比较明显延长(P<0.05);第6天,模型组大鼠在平台象限停留时间为(35.3±10.0)s,跨越虚拟平台(3.4±1.7)次,平台象限游程百分比为(30±6)%,与假手术组(6.3±2.5)s,(51±11)次和(38±8)%比较明显降低(P<0.05);模型组大鼠海马组织IL-1βmRNA和海马CA1区TNF-α,Bcl-2和Bax蛋白表达与假手术组比较明显增加(P<0.05)。与模型组比较,第4和第5天,缬沙坦、川芎嗪单用和联合应用组大鼠逃避潜伏期明显缩短,分别为18±9和(13±7)s,18±9和(14±7)s及17±8和(11±7)s(P<0.05,P<0.01);联用组大鼠跨越平台的次数、在平台象限停留的时间及平台象限游程百分比均明显增加,分别为(5.6±1.9)次,(50±8)s和(37±6)%(P<0.05),缬沙坦和川芎嗪单用组上述指标改变不明显;二者联用组海马IL-1βmRNA,TNF-α和Bax蛋白表达均明显降低,Bcl-2蛋白表达明显增强(P<0.01);缬沙坦和川芎嗪单用组海马CA1区Bcl-2蛋白表达增强,Bax蛋白表达降低(P<0.01),海马组织IL-1βmRNA表达无明显变化;缬沙坦组海马CA1区TNF-α蛋白表达减少(P<0.05);川芎嗪组TNF-α蛋白表达无明显改变。结论缬沙坦及川芎嗪可改善VD大鼠学习记忆功能,二者联用作用更加明显。该作用可能与其抑制炎症反应及抑制海马神经元凋亡有关。     

布托啡诺减轻老年大鼠胫骨骨折术后认知功能障碍的作用机制研究

摘要：目的:探讨布托啡诺通过调节大麻素2型受体（CB2R）表达,减轻大鼠胫骨骨折术后认知功能障碍的作用。方法:48只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、布托啡诺低(50μg·kg-1)、高(100μg·kg-1)剂量组,每组12只。模型组、布托啡诺低、高剂量组大鼠行开放性胫骨骨折手术;布托啡诺低、高剂量组大鼠于术后第1天开始尾静脉注射相应药物（注射体积1 ml/100 g）,正常对照组和模型组大鼠尾静脉注射等体积生理盐水,1次/d,连续给药2周,给药周期结束后检测逃避潜伏期、经过原平台位置的次数、原平台象限停留的时间,TUNEL染色观察大鼠海马组织形态学,实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法测定海马组织CB2R mRNA和蛋白水平;酶联免疫吸附法测定海马组织白细胞介素-2（IL-2）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。结果:正常大鼠海马组织结构正常,神经元排列整齐;模型组大鼠海马组织神经元排列紊乱,可见明显凋亡细胞,炎症细胞浸润;布托啡诺干预后,海马结构趋于正常,神经元凋亡减少,炎症细胞浸润减少。与正常对照组比较,模型组、布托啡诺低、高剂量组大鼠逃避潜伏期、海马组织CB2R mRNA和蛋白水平、IL-2、TNF-α水平升高,经过原平台位置的次数、原平台象限停留的时间降低（P<0.05）;与模型组比较,布托啡诺低、高剂量组大鼠逃避潜伏期、海马组织CB2R mRNA和蛋白水平、IL-2、TNF-α水平降低,经过原平台位置的次数、原平台象限停留的时间升高,且两个剂量组间差异有统计学意义（P<0.05）。结论:布托啡诺可改善胫骨骨折术后认知功能障碍大鼠认知缺陷,其机制可能与布托啡诺降低大鼠海马组织CB2R mRNA和蛋白表达进而抑制CB2R通路的激活有关。     

蛇床子素对AD大鼠海马神经元凋亡的影响

目的 探讨蛇床子素对AD大鼠海马神经元凋亡的影响.方法 采用侧脑室注射Aβ25-35制作AD大鼠模型,并以不同剂量的蛇床子素进行干预,应用HE染色、TUNEL法染色和免疫组化法染色,观察蛇床子素对AD模型大鼠海马神经元凋亡、凋亡相关蛋白表达的影响.结果 对照组极少见凋亡细胞,Bcl-2和Bax蛋白表达极少;模型组视野内凋亡细胞与对照组比较明显增多,Bcl-2和Bax蛋白表达增多,且Bax蛋白表达升高幅度更大;与模型组相比,蛇床子素组凋亡细胞数减少,Bcl-2蛋白表达增多,Bax蛋白表达减少,Bcl-2/Bax比值升高.结论 蛇床子素调节AD大鼠海马凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达,升高Bcl-2/Bax比值,具有抗凋亡、保护海马神经元的作用,这可能是其改善学习记忆障碍作用的机制之一.     

硫化氢对老龄急性脑梗死大鼠海马神经元腺苷酸活化蛋白激酶和星形胶质细胞的影响

目的评价硫化氢(H2S)对老龄急性脑梗死大鼠海马神经元腺苷酸活化蛋白激酶和星形胶质细胞的影响。方法健康雄性老龄SD大鼠96只,体重450⁵50 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组:对照组(C组)、模型组(O组)、生理盐水+模型组(S组)、H2S组+模型组(H组),每组24只。采用线栓法致大鼠大脑中动脉阻塞致急性脑梗死模型。H组于制作模型前25 min给予大鼠腹腔注射H2S外源性供体NaHS(14μmol/kg);S组于制作模型前25 min给予大鼠腹腔注射注入等量的生理盐水;C组不行任何处理。采用Morris水迷宫法记录大鼠逃避潜伏期和游泳路径;采用RT-PCR法和Western-blot法分别测定大鼠海马AMPK mRNA和AMPK、p-AMPK的表达。采用免疫组织化学法计数GFAP阳性细胞总个数。结果与C组比较,O组、S组、H组大鼠逃避潜伏期和游泳路径延长,海马AMPK mRNA、AMPK、p-AMPK表达上调,GFAP表达细胞数量增多(P<0.05);与O组、S组比较,H组大鼠逃避潜伏期和游泳路径缩短,海马AMPK mRNA、AMPK、p-AMPK表达下调,GFAP表达细胞数量减少(P<0.05)。结论 H2S可改善老龄急性脑梗死大鼠认知功能,其机制可能与下调海马神经元腺苷酸活化蛋白激酶和抑制星形胶质细胞激活有关。     

丹参素经PI3K/Akt/Bax信号通路对脓毒症大鼠脑损伤的改善作用

摘要：目的:探讨丹参素经磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（Akt）/促凋亡基因（Bax）信号通路对脓毒症大鼠脑损伤的改善作用。方法:100只SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、乌司他丁组（20 mg·kg-1）、丹参素低、高剂量组（40,80 mg·kg-1）,每组20只。除假手术组外,其余各组建立脓毒症模型。乌司他丁组、丹参素低、高剂量组给予相应药物灌胃,假手术组及模型组给予等体积的生理盐水,1次/d,持续给药7 d。实验结束后,评估大鼠神经功能,观察大鼠海马神经元病理结构,测定大鼠海马组织PI3K、Akt、Bax mRNA和蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组Basso-BeattieBresnahan（BBB）评分、经过原平台位置的次数、原平台象限停留时间、PI3K、Akt mRNA和蛋白表达水平明显降低,逃避潜伏期、Bax mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。与模型组比较,乌司他丁组和丹参素低、高剂量组BBB评分、经过原平台位置的次数、原平台象限停留时间、PI3K、Akt mRNA和蛋白表达水平明显升高,逃避潜伏期、Bax mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。与乌司他丁组比较,丹参素低剂量组各指标差异有统计学意义（P<0.05）,高剂量组与其作用相似（P>0.05）。结论:丹参素可减轻脓毒症大鼠脑损伤,其机制与丹参素激活PI3K/Akt信号通路进而抑制Bax的表达有关。     

Aβ1-42诱导阿尔茨海默病模型大鼠海马内细胞因子表达变化的研究*

目的探讨β淀粉样蛋白（Aβ）1-42诱导的阿尔茨海默病（AD）模型大鼠海马内致炎细胞因子和抗炎细胞因子表达的变化。方法24只SD大鼠随机分为正常对照组（intact组）、PBS对照组和AD模型组。PBS对照组为海马CA1区注射PBS,AD模型组为海马CA1区注射Aβ1-42。应用Morris水迷宫测试大鼠逃避潜伏期;Nissl染色观察海马CA1区神经元的损害情况;Western blot方法检测海马组织中淀粉样前体蛋白（APP）以及蛋白质磷酸酶-2A （PP2A）的表达量;Real-time PCR法检测海马内细胞因子白介素（IL）-1β、肿瘤坏死因子（TNF）-α、干扰素（IFN）-γ、IL-4、IL-10和转化生长因子（TGF）-β的mRNA水平。结果大鼠双侧海马内注射Aβ1-42后,动物的空间学习记忆能力降低、海马CA1区神经元胞体丢失、海马内APP表达上调而PP2A表达下调。AD模型大鼠的海马内,致炎细胞因子IL-1β、TNF-α和IFN-γ的mRNA表达上调,而抗炎细胞因子IL-4、IL-10和TGF-β的mRNA表达下调。结论 AD大鼠脑内存在致炎/抗炎失衡的神经炎症,它参与了AD的发病机制。     

吡格列酮对脂多糖引起的大鼠学习记忆障碍及海马炎症反应的影响

目的研究吡格列酮(pioglitazone,Pio)能否对抗脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)所致的大鼠学习记忆障碍及海马炎症反应。方法取SD大鼠40只,随机分为4组:生理盐水对照组,LPS损伤组,LPS+Pio 40和80 mg.kg-1组。灌胃给予Pio 2 d后,脑室注射LPS 5μl(1.0 mmol·L-1),生理盐水对照组注射等量生理盐水。脑室注射后d 2进行Morris定位航行实验,连续5 d,在d 6进行空间探索实验,训练期间继续给药。d 7,快速取海马CA1区,Western blot方法观察白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β),诱导型一氧化氮合酶(Inducible Nitric Oxide Synthase,iNOS),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)3,caspase-9及多聚ADP-核糖聚合酶(PARP)蛋白表达水平的变化。RT-PCR检测IL-1β和iNOS的mRNA表达水平。结果脑室内注射LPS,大鼠出现明显的空间学习记忆障碍,表现为逃避潜伏期较生理盐水对照组明显延长(P<0.05),在原平台象限游泳时间占总游泳时间的百分比明显降低(P<0.01)。Western蛋白印迹及RT-PCR结果显示注射LPS后,与对照组相比海马CA1区IL-1β、iNOS蛋白及mRNA表达水平明显增加(P<0.01),活化的caspase-3,caspase-9蛋白表达水平明显增高,分子质量116 ku PARP表达明显减少,而分子质量89 ku劈切PARP表达明显增加(P<0.01)。Pio(40和80 mg.kg-1)能改善大鼠学习记忆功能,对抗LPS引起的海马CA1区IL-1β、iN-OS、活化的caspase-3、活化的caspase-9表达增加,也可明显抑制LPS所致的PARP表达的改变(P<0.01)。结论吡格列酮能够改善大鼠学习记忆功能,抑制LPS引起的海马炎症反应。     

加味生脉饮注射液对内毒素休克大鼠肺组织肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-１β和核转录因子-κB 含量的影响

目的:观察加味生脉饮注射液对内毒素休克肺组织TNF-α、IL-1β和NF-κB表达的影响。方法:静脉注射脂多糖(LPS,8.00mg·kg^-1)造成内毒素休克模型,用加味生脉饮注射液作干预治疗,酶联免疫吸附法检测上述因子在假手术组、模型组、加味生脉饮组、阳性对照组等各组大鼠肺组织内的表达。结果:模型组肺损伤较重,TNF-α、IL-1β和NF-κB含量明显升高（P<0.05）;加味生脉饮组和阳性对照组肺损伤较轻,TNF-α、IL-1β和NF-κB含量明显降低（P<0.05）。结论:加味生脉饮注射液能减轻内毒素休克时肺损伤和TNF-α、IL-1β和NF-κB表达,提示该药对内毒素休克肺损伤的保护作用可能是通过调控NF-κB通路过度激活而实现。     

椒苯酮胺对全脑缺血/再灌注损伤大鼠的保护作用

目的:探讨新型钙增敏剂椒苯酮胺(piperphentonamine,PPTA)对全脑缺血/再灌注损伤大鼠的保护作用。方法:采用四血管阻断法建模。造模成功后,SD大鼠随机分为正常组、模型组、低、中和高剂量PPTA组(2.5,5,10 mg.kg-1)。Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力;Nissl染色观察海马神经元丢失情况;LDH试剂盒检测LDH活力;real-time PCR检测海马bax/bcl-2,caspase-3和iNOS mRNA的表达。结果:与模型组比较,5和10 mg.kg-1PPTA组大鼠逃避潜伏期显著缩短;细胞损伤减轻和LDH的释放减少;bax/bcl-2,caspase-3和iNOS基因表达下调。结论:PPTA能显著减轻脑缺血损伤大鼠海马神经元的凋亡和细胞损伤,并能有效改善其学习记忆能力。     

阿魏酸钠对抗Aβ(25-35)致大鼠学习记忆障碍与IL-1β和p38MAPK表达的相关性探讨

目的研究阿魏酸钠(sod ium feru late)对抗Aβ25-35致大鼠学习记忆障碍与白介素-1β(IL-1β)和丝裂原激活的蛋白激酶p38(M itogen-activated prote in k inase,p38MAPK)表达的相关性。方法大鼠脑室内一次性注射Aβ25-35制备AD动物模型,通过大鼠行为学和海马CA1区的病理学改变观察阿魏酸钠的作用。W estern b lot和ELISA方法检测磷酸化p38MAPK和IL-1β蛋白表达量的变化。RT-PCR分析FasLmRNA表达水平。结果脑室内注射Aβ25-35可使大鼠出现明显的学习记忆障碍,即逃避潜伏期明显延长,原平台象限游泳时间占总游泳时间百分比明显降低。这些行为学的改变伴随有海马CA1区星形胶质细胞激活和浸润,IL-1β蛋白表达和FasL mRNA表达水平明显增加,海马CA1区锥体神经元损伤。另外,Aβ25-35也能引起磷酸化的p38MAPK蛋白表达明显增加。阿魏酸钠(50,100,250 mg.kg-1,连续应用4 wk)与阳性对照药布洛芬(15 mg.kg-1)均能明显对抗Aβ25-35所致大鼠学习记忆障碍,抑制Aβ25-35引起的IL-1β、磷酸化p38MAPK和FasL mRNA表达增加,海马CA1区锥体神经元的损伤和星形胶质细胞激活和浸润也被明显减轻。结论阿魏酸钠通过抑制Aβ25-35引起的海马炎症反应和p38MAPK活性,减轻大鼠海马锥体神经元的损伤,改善大鼠的学习记忆功能。     

Phellodendron amurense and Its Major Alkaloid Compound, Berberine Ameliorates Scopolamine-Induced Neuronal Impairment and Memory Dysfunction in Rats

We examine whether Phellodendron amurense (PA) and its major alkaloid compound, berberine (BER), improved memory defects caused by administering scopolamine in rats. Effects of PA and BER on the acetylcholinergic system and pro-inflammatory cytokines in the hippocampus were also investigated. Male rats were administered daily doses for 14 days of PA (100 and 200 mg/kg, i.p.) and BER (20 mg/kg, i.p.) 30 min before scopolamine injection (2 mg/kg, i.p.). Daily administration of PA and BER improved memory impairment as measured by the passive avoidance test and reduced the escape latency for finding the platform in the Morris water maze test. Administration of PA and BER significantly alleviated memory-associated decreases in cholinergic immunoreactivity and restored brain-derived neurotrophic factor and cAMP-response element-binding protein mRNA expression in the hippocampus. PA and BER also decreased significantly the expression of proinflammatory cytokines such as interleukin-1β, tumor necrosis factor-α and cyclooxygenase-2 mRNA in the hippocampus. These results demonstrated that PA and BER had significant neuroprotective effects against neuronal impairment and memory dysfunction caused by scopolamine in rats. These results suggest that PA and BER may be useful as therapeutic agents for improving cognitive functioning by stimulating cholinergic enzyme activity and alleviating inflammatory responses.     

黄芪注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤后JNK3基因表达的影响

目的探讨黄芪注射液对大鼠脑缺血/再灌注损伤后细胞凋亡和c-jun氨基末端激酶(JNK3)表达的影响。方法应用线栓法经左侧颈外-颈内动脉插线建立大鼠大脑中动脉阻塞再灌注(MCAO/R)模型,经腹腔注射黄芪注射液(3 mL/kg)干预治疗。Longa法评分标准评价大鼠神经行为功能,流式细胞术检测海马区神经元凋亡,Western blot检测JNK3蛋白表达,RT-PCR检测JNK3 mRNA表达。结果经黄芪注射液治疗后,大鼠海马区神经元JNK3蛋白和JNK3 mRNA表达较对照组显著减低,凋亡细胞数量显著减少,而动物神经行为功能显著改善。结论黄芪注射液可通过下调神经元JNK3基因表达而抑制细胞凋亡,改善动物的神经行为功能。