三氧化二砷对SPCA/I人肺腺癌细胞株抗增殖及诱导凋亡作用的研究

目的 探讨三氧化二砷( As2 O3)对SPCA/I人肺腺癌细胞株的抗增殖效应及诱导细胞凋亡的作用.方法 将SPCA/I人肺腺癌细胞株培养传代,分别加入不同浓度的三氧化二砷,作用24小时后,分别以酶标仪检测细胞抑制率、FACSAria流式细胞仪检测细胞凋亡率、倒置显微镜观察凋亡细胞形态.结果 不同浓度的三氧化二砷体外对人肺腺癌细胞株SPCA/I均有直接的抑制作用,其抑制率与所用药物浓度呈正相关;二氧化二砷体外对人肺腺癌细胞株SPCA/I有诱导凋亡的作用,细胞凋亡率明显增加.倒置显微镜见细胞由原来贴壁生长而逐渐脱落.外形变圆、体积缩小、折光性增强,核染色质凝集,细胞裂解.结论 三氧化二砷能通过诱导细胞凋亡,直接抑制人肺腺癌细胞株SPCA/I增殖.     

三氧化二砷诱导人肺腺癌细胞凋亡形态学及数量变化

目的观察三氧化二砷（arsenic trioxide,As2O3）诱导人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的形态学改变及计数变化。方法体外培养A549细胞至对数生长期后随机分为实验组和空白对照组。实验组加入As2O3药液,光学显微镜（光镜）和电子显微镜（电镜）扫描观察细胞凋亡情况,使用流式细胞仪定量计数凋亡细胞比例变化,并与空白对照组比较。结果实验组A549细胞光镜下表现为细胞缩小、变圆,透光度降低,胞体呈空泡样改变;经吖啶橙荧光染色后,贴壁细胞荧光强度降低,密度下降,部分细胞破碎、胞核消失,出现凋亡细胞;电镜下可见细胞核固缩、破裂,无核膜包被,核染色质边集胞膜,出现凋亡小体。计数结果表明,实验组凋亡细胞比例（14.497%）明显多于空白对照组（0.027%）,差异有统计学意义（χ2=18.447,P〈0.0001）。结论经As2O3诱导后,A549细胞发生了明确的增殖和凋亡改变,且凋亡细胞计数增加,故As2O3有可能成为临床治疗肺癌的一种新方法。     

三氧化二砷对肝癌细胞株HLE的细胞毒和诱导凋亡作用

目的：研究As2O3对肝癌细胞株HLE细胞毒和诱导凋亡作用。方法：应用MTT染色，流式细胞仪和电子显微镜观察As2O3对HLE细胞株的诱导凋亡作用和形态学改变，应用共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)测试肝癌细胞内[Ca^2 ]i变化。结果：As2O3对肝癌细胞株HLE具有诱导凋亡作用，CLSM检测肝癌细胞内[Ca^2 ]i高浓度As2O3作用下48h达最高峰；在低浓度下96h达高峰。结论：As2O3对肝癌细胞具有较强的细胞毒和诱导细胞凋亡的作用。     

9顺维甲酸、全反式维甲酸诱导肺腺癌细胞株PG分化与凋亡的比较研究

维甲酸类化合物 (retinoids,RA)有调控细胞生长、分化、凋亡的重要作用。RA在体内的生理活性代谢产物包括全反式维甲酸 (ATRA)、1 3 顺维甲酸 (1 3 cis RA)和 9 顺维甲酸 (9 cis RA)。ATRA能抑制支气管上皮细胞的生长和鳞状分化 ,但体外实验表明大多数人肺癌细胞株对ATRA有显著的抗性作用。 9 cis RA比ATRA作用更广泛 ,副作用更小而倍受瞩目[1 3 ] ,为了解ATRA和 9 cis RA对肺癌细胞生长和分化的影响 ,我们比较了 9 cis RA和全反式维甲酸对肺腺癌细胞PG株细胞周期和凋亡的影响。1　材料与方法1 .1　材料　 9 cis RA、胎牛…     

三氧化二砷（As2O3）诱导乳腺癌细胞株MCF-7凋亡的实验研究

目的 观察不同浓度的三氧化二砷（As2O3）作用不同时间段后对乳腺癌细胞MCF-7的诱导凋亡作用和对β3GnT2 及β3GnT8表达的影响,并初步探讨其可能的作用机制.方法 不同浓度As2O3作用于乳腺癌细胞后,观察其对乳腺癌细胞生长状态的影响;用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法观察其对MCF-7细胞凋亡的影响;同时采用RT-PCR 和Western Blot 检测相关基因mRNA及蛋白的表达水平变化.结果 不同浓度的As2O3 均可抑制乳腺癌细胞株MCF-7生长,其抑制作用随剂量增大而加强,呈时间剂量依赖性.RT-PCR 结果显示：β3GnT2、β3GnT8在各个浓度As2O3剂量组作用下,与空白组比较,均有不同程度的变化.1μg/mL和2μg/mL浓度组、4μg/mL和40μg/mL浓度组在相同时间段下分别比较,均有统计学差异（P ＜0.05）.Western Blot 检测相关蛋白结果与mRNA表达水平基本一致.β3GnT2蛋白表达中,4μg/mL（4h）组、40μg/mL（4h） 组分别与4μg/mL（48h）浓度组比较,均有明显差异（P＜0.05）;而在β3GnT8蛋白表达中,40μg/mL（4h）、4μg/mL（48h） 浓度组分别与空白组比较,有显著性差异（P＜0.05）.结论 As2O3对MCF-7细胞有显著的体外生长抑制作用,其抑制作用呈剂量依赖性;As2O3在体外能诱导MCF-7细胞凋亡,凋亡效应与剂量呈正相关;As2O3还能下调β3GnT2和β3GnT8基因的表达.     

三氧化二砷诱导套细胞淋巴瘤细胞株凋亡及机制研究

本研究旨在探讨三氧化二砷(ATO)诱导套细胞淋巴瘤(MCL)细胞株凋亡的效应及其机制。以不同浓度的ATO处理细胞,再通过MTT法检测细胞MCL细胞株(jeko-1,mino,JVM-2)增殖;用AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测jeko-1细胞的凋亡;用DiOC6(3)染色流式细胞术检测jeko-1细胞的线粒体跨膜电位丢失;用Western blot检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)及凋亡相关蛋白MCL-1,BCL-2,PUMA,NOXA,cCaspase-3,cCaspase-9,cPARP在ATO处理前后的表达变化。结果表明:ATO抑制MCL细胞增殖,诱导MCL细胞凋亡,并且引起MCL细胞线粒体跨膜电位丢失,引起MCL-1,PUMA,cyclin D1蛋白表达水平降低,cPARP,cCaspase-3,cCaspase-9表达水平增加,不影响BCL-2,NOXA表达。结论:ATO能有效抑制MCL细胞增殖,诱导MCL细胞株凋亡,其中细胞凋亡的线粒体途径起着重要的作用。     

三氧化二砷对人胃癌细胞株nm23及PCNA基因表达的影响

目的：研究三氧化二砷对人胃癌细胞株nm23及PCNA基因表达的影响。方法：将体外培养的人胃癌细胞株分2组，实验组给予三氧化二砷5μmol／L，对照组未作任何处理，于给药后1、3、5及7d通过免疫组化技术检测nm23及PCNA基因蛋白表达。结果：给药后实验组nm23及PCNA基因蛋白表达明显低于对照组（P〈0．05）。结论：三氧化二砷可下调nm23及PCNA基因蛋白表达，具有抗肿瘤作用。     

三氧化二砷对T3151突变细胞株KBM5R的诱导凋亡作用

本研究旨在探讨三氧化二砷(ATO)对耐伊马替尼(IM)并有T3151点突变的慢性髓系白血病(CML)细胞株KBM5R的诱导凋亡作用.选择T3151点突变的CML细胞KBM5R和野生型细胞KBM5为研究对象,用MTT 法检测KBM5R细胞对IM的耐药性及ATO对KBM5、KBM5R细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测ATO诱导KBM5、KBM5R细胞凋亡;Western blot法检测ATO对KBM5、KBM5R细胞凋亡相关蛋白caspase-3、-8、-9的影响.结果表明,①IM作用于KBM5R细胞的IC50值为12.66±0.565 μmol/L,明显高于对KBM5细胞的IC50值(0.303±0.031)μmol/L,两者比较差异具有显著性(p＜0.01);②不同浓度ATO作用于KBM5、KBM5R细胞24、48、72、96小时均表现出显著的增殖抑制作用,且具有浓度依赖性和时间依赖性;相同的药物浓度和时间点ATO对KBM5R细胞的增殖抑制作用强于对KBM5细胞;③ATO(2、4、8 μmol/L)作用于细胞48小时后KBM5、KBMSR 细胞凋亡率均以药物浓度依赖形式增加,且相同药物浓度时KBM5R细胞凋亡率较KBM5细胞高;④4 μmol/L ATO作用于KBM5、KBMSR细胞24小时后,细胞内cleaved caspase-3、-8、-9蛋白表达明显增加.结论:KBM5R细胞对IM具有显著的耐药性;ATO对KBM5、KBM5R细胞均具有增殖抑制和诱导凋亡作用,与野生型细胞KBM5比较,ATO对13151突变的KBM5R细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用更强;ATO通过活化凋亡相关蛋白caspase-3、-8、-9诱导细胞KBM5和KBM5R的凋亡.     

三氧化二砷体外诱导宫颈癌细胞株凋亡及其机制的研究

目的:研究三氧化二砷体外能否诱导宫颈癌细胞株(HeLa细胞)发生凋亡及其相关机制。方法:采用透射电镜、DNA Ladder、TUNEL的方法进行凋亡检测,用ECL Westernblot的方法检测凋亡过程中相关基因表达的变化。结果:三氧化二砷体外作用于HeLa细胞后,透射电镜观察到了凋亡小体;DNA Ladder法检测到了凋亡时DNA降解形成的梯带;TUNEL法也检测到HeLa细胞有DNA的断裂。在凋亡过程中,凋亡相关基因bcl-2的表达下调,而p53基因的表达没有明显改变。结论:三氧化二砷体外能诱导HeLa细胞发生凋亡,其机制与bcl-2基因的表达下调有关。     

三氧化二砷对白血病细胞株K562的杀伤作用

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对白血病细胞株K562的杀伤作用。方法采用台盼蓝拒染法计数活细胞数，并计算细胞生长率；细胞涂片经Wright—Giemsa染色，光镜下观察细胞的形态。结果As2O3对白血病K562细胞的增殖具有明显的抑制作用。4μmol／L的As2O3能够使K562细胞发生M期阻滞，引起部分细胞发生凋亡。结论As2O3：不但抑制K562细胞的增殖，而且导致K562细胞M期阻滞。     

三氧化二砷对T315I突变细胞株KBM5R的诱导凋亡作用

本研究旨在探讨三氧化二砷(ATO)对耐伊马替尼(IM)并有T315I点突变的慢性髓系白血病(CML)细胞株KBM5R的诱导凋亡作用。选择T315I点突变的CML细胞KBM5R和野生型细胞KBM5为研究对象,用MTT法检测KBM5R细胞对IM的耐药性及ATO对KBM5、KBM5R细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测ATO诱导KBM5、KBM5R细胞凋亡;Western blot法检测ATO对KBM5、KBM5R细胞凋亡相关蛋白caspase-3、-8、-9的影响。结果表明,①IM作用于KBM5R细胞的IC50值为12.66±0.565μmol/L,明显高于对KBM5细胞的IC50值(0.303±0.031)μmol/L,两者比较差异具有显著性(p<0.01);②不同浓度ATO作用于KBM5、KBM5R细胞24、48、72、96小时均表现出显著的增殖抑制作用,且具有浓度依赖性和时间依赖性;相同的药物浓度和时间点ATO对KBM5R细胞的增殖抑制作用强于对KBM5细胞;③ATO(2、4、8μmol/L)作用于细胞48小时后KBM5、KBM5R细胞凋亡率均以药物浓度依赖形式增加,且相同药物浓度时KBM5R细胞凋亡率较KBM5细胞高;④4μmol/LATO作用于KBM5、KBM5R细胞24小时后,细胞内cleaved caspase-3、-8、-9蛋白表达明显增加。结论 :KBM5R细胞对IM具有显著的耐药性;ATO对KBM5、KBM5R细胞均具有增殖抑制和诱导凋亡作用,与野生型细胞KBM5比较,ATO对T315I突变的KBM5R细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用更强;ATO通过活化凋亡相关蛋白caspase-3、-8、-9诱导细胞KBM5和KBM5R的凋亡。     

蛋白磷酸酶2A在三氧化二砷诱导NB4、MR2细胞株凋亡过程中的变化

本研究探讨三氧化二砷（arsenic trioxide，ATO）诱导NB4、MR2细胞凋亡过程中蛋白磷酸酶2A（PP2A）活性与表达的变化．不同浓度ATO单用或与冈田酸（OKA）联合作用于NB4、MR2细胞，然后采用MTT法测定药物对细胞增殖的影响，用瑞氏染色法观察细胞形态学变化，流式细胞术测定细胞凋亡率，丝／苏氨酸磷酸化酶检测试剂盒分析药物对细胞内PP2A活性的影响，Western blot检测细胞内PP2A各亚基表达。结果表明：蛋白磷酸酶抑制剂OKA能明显增强ATO对NB4、MR2细胞的增殖抑制；OKA能促进ATO诱导的NB4、MR2细胞凋亡；ATO诱导NB4、MR2细胞凋亡过程中PP2A活性均下降，且随ATO浓度的增加PP2A活性下降越明显；与OKA连用后PP2A活性下降更加明显；在ATO诱导NB4、MR2细胞凋亡过程中，PP2A／A表达较对照组均明显减少，而B和C亚基表达与对照组比较变化不明显。结论：在ATO诱导的NB4、MR2细胞凋亡过程中，细胞内PP2A／A表达减少，PP2A活性降低．且随ATO浓度增加PP2A活性下降越明显，抑制PP2A活性有助于ATO诱导的NB4、MR2细胞凋亡，     

盐霉素增强吉非替尼诱导人肺腺癌细胞株PC9凋亡作用

目的:探讨盐霉素联合吉非替尼诱导人肺腺癌细胞株PC9凋亡作用.方法:MTT法检测细胞增殖活性;流式细胞仪检测细胞凋亡及线粒体膜电位(MMP);比色法检测Caspase-3、8和9酶活性;Western blot分析细胞色素C、bcl-2、p-EGFR、p-Akt和p-ERK蛋白水平.结果:盐霉素与吉非替尼单用均出现不同程度的细胞增殖抑制作用和诱导细胞凋亡作用;而两者合用则能更显著地抑制细胞增殖,且细胞凋亡显著增加(P＜0.05).盐霉素单独作用,细胞MMP显著下降,细胞内活性氧和Ca2+在短期显著升高,胞浆细胞色素C、Caspase-3、8和9酶活性均显著增加;吉非替尼单用则抑制p-EGFR、p-Akt和p-ERK蛋白表达,而对胞浆细胞色素C、Caspase-3、8和9酶活性影响较少.Western印迹检测发现,联合用药组的Bcl-2、p-EGFR、p-Akt和p-ERK蛋白表达量明显减少.结论:盐霉素与吉非替尼联用具有较好的协同作用,提高PC9细胞对吉非替尼的敏感性.     

三氧化二砷对RAJI细胞的诱导凋亡作用及其作用机制

目的：探讨三氧化二砷对白血病RAJI细胞的诱导凋亡作用及其作用机制。方法：以不同浓度的三氧化二砷作用于体外培养的RAJI细胞，MTT法检测细胞生长抑制率，应用流式细胞仪及瑞氏染色法观察细胞凋亡，TRAP—PCR-ELISA法检测细胞凋亡前后的端粒酶活性。结果：三氧化二砷可显著地降低RAJI细胞端粒酶活性，抑制细胞的生长，诱导细胞发生凋亡。并呈现出明显的量-效与时-效关系。结论：三氧化二砷能抑制RAJI细胞的生长并诱导细胞发生凋亡，降低细胞端粒酶活性可能是其重要作用机制之一。     

丹参酮ⅡA对肺腺癌NCI-H460细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨丹参酮ⅡA对肺癌细胞株NCI-H460的增殖抑制作用与促凋亡的影响。方法:分别以不同浓度的丹参酮ⅡA干预肺腺癌H460细胞,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞的增殖抑制,应用流式细胞仪观察丹参酮ⅡA对NCI-H460肺腺癌细胞的促凋亡作用。结果:丹参酮ⅡA可显著抑制肺腺癌NCI-H460细胞的生长,抑制程度与作用时间和药物浓度成正相关,流式细胞仪结果显示:用0.3125μg/mL的丹参酮ⅡA作用NCI-H460细胞24、48、72h后,细胞凋亡率分别为3.69%、6.67%、12.01%,成时间依赖性。结论:丹参酮ⅡA对NCI-H460细胞的增殖具有明显的抑制以及诱导凋亡的作用。     

草分枝杆菌调节SPCA/Ⅰ人肺腺癌细胞生长周期的研究

目的探讨草分子杆菌对SPCA/Ⅰ人肺腺癌细胞系的抗增殖效应及调节细胞生长周期的作用。方法将SP-CA/Ⅰ人肺腺癌细胞株接种于细胞培养液(RPMI-1640)培养传代,分别加入不同浓度的草分子杆菌,作用36小后,分别以酶标仪检测细胞抑制率,倒置显微镜观察凋亡细胞形态变化,以cycletest plus DNA reagent kit标记,经FACSAria流式细胞仪检测细胞周期改变。结果①不同浓度的草分子杆菌体外对人肺腺癌细胞株SPCA/Ⅰ均有直接的抑制作用,其抑制率与所用药物浓度呈正相关。②倒置显微镜下可见细胞由原来贴壁生长而逐渐脱落、外形变圆、体积缩小、折光性增强,核染色质凝集,细胞裂解。③草分子杆菌体外能改变SPCA/Ⅰ人肺腺癌细胞株的细胞增殖周期,使细胞周期阻滞在G2~M期,细胞凋亡率明显增加。结论草分子杆菌能通过调节细胞增殖周期、诱导细胞凋亡,直接抑制人肺腺癌细胞株SPCA/Ⅰ增殖。     

三氧化二砷诱导人肝癌细胞凋亡的实验研究

[目的]研究三氧化二砷(As2O3)在体外诱导人肝癌细胞BEL—7402凋亡的作用。[方法]用MTT、琼脂糖凝胶电泳、原位末端转移酶技术(TUNEL)、透射电镜及流式细胞仪等方法观察细胞凋亡。[结果]As2O3在体外对BEL—7402细胞生长具有显著抑制作用，随着作用时间的延长和As2O3剂量的增加，抑制作用随之增强。As2O3诱导50％以上BEL—7402细胞发生凋亡的浓度为2μmol/L。经As2O3作用后的BEL—7402细胞，在琼脂糖电泳中出现了典型的DNA凋士条带，用流式细胞仪检测出了典型的凋亡峰，电镜下观察到了典型的凋亡细胞形态学改免令细胞核仁消失，染色质浓缩、碎裂，聚于核膜边缘并形成凋亡小体。[结论]As203在体外能有效诱导人肝癌细胞BEL—7402发生凋亡。     

三氧化二砷诱导类风湿关节炎滑膜细胞凋亡作用的研究

目的 观察三氧化二砷(ATO)对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)凋亡的作用.方法 将HFLS-RA分为单纯培养基空白对照组和0.5、2、8 μmol/L ATO实验组.ATO作用72 h后,电镜下观察细胞的病理改变,采用四唑氮法(MTT)检测ATO对HFLS-RA生长的影响.结果 ATO可以诱导HFLS-RA的凋亡,ATO呈现时间和剂量依赖性抑制HFLS-RA生长的作用.结论 ATO可以抑制HFLS-RA的生长,促进HFLS-RA的凋亡.     

紫杉醇对SHI-1细胞株增殖抑制及诱导凋亡的作用

目的观察紫杉醇体外抑制人白血病细胞SHI-1细胞的增殖活性及诱导细胞分化和凋亡的作用,并探讨其凋亡机制。方法以不同质量浓度（5、0．5、0．05、0．005mg／L）的紫杉醇与SHI-1细胞在体外共同培养,分别作用0、12、24、36、48h,通过细胞计数、台盼蓝染色、细胞形态学、DNA含量测定、AnnexinV／PI、细胞线粒体跨膜电位（△φm）等分析细胞的凋亡。结果紫杉醇能促进SHI-1细胞的凋亡;0．05mg,／L紫杉醇处理对SHI-1细胞株增殖抑制及诱导凋亡作用最为显著。结论紫杉醇能抑制SHI-1细胞增殖活性,诱导细胞分化,促进细胞凋亡,使SHI-1细胞停留在G2／M期。     

拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对L1210/CDDP细胞株杀伤和诱导凋亡作用的研究

目的观察拓扑异构酶Ⅰ抑制剂（拓扑替康,TPT）对L1210／CDDP细胞株杀伤和诱导凋亡作用。方法采用MTT法、AnnexinV染色、梯状DNA电泳与细胞形态学观察等方法分析TPT对L1210／CDDP细胞的杀伤作用、凋亡作用,分析靶细胞杀伤、凋亡作用与Caspase的关系。结果TPT对靶细胞株具有较强的杀伤作用,而且具有明显的时间依赖性,同时,靶细胞出现凋亡表现。Caspase酶特异性抑制剂对凋亡具有一定的影响。结论TPT对L1210／CDDP细胞株具有较强的杀伤和诱导凋亡作用,其机制可能涉及到caspase-8、3的有序性活化。