RP-HPLC法同时测定自制复方雷帕霉素栓剂中雷帕霉素和他克莫司的含量

目的:建立同时测定自制复方雷帕霉素栓剂中雷帕霉素和他克莫司含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为Agilent Eclips XDB-C18,流动相为乙腈-3.3%磷酸溶液(65∶35,V/V),流速为1.0 ml/min,检测波长为210 nm,柱温为50℃,进样量为20μl。结果:雷帕霉素和他克莫司质量浓度在8.0~400.0μg/ml范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤1.18%;平均回收率分别为101.28%、97.99%,RSD分别为2.99%、1.94%(n=3)。结论:该方法操作简便、准确,专属性强、重复性好,可用于自制复方雷帕霉素栓剂中雷帕霉素和他克莫司含量的测定。     

液相色谱串联质谱法测定人血浆中文拉法辛及其代谢物的浓度

目的建立测定血浆中文拉法辛及其代谢物O-去甲基文拉法辛的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)方法。方法血浆样品中加入内标(氘6-文拉法辛和氘6-O-去甲基文拉法辛),直接沉淀法处理样品。色谱柱为CAPCELL PAK C18 MGⅢ分析柱(100 mm×2.0 mm,5μm),流动相为含0.3%甲酸的水溶液-含0.3%甲酸的乙腈溶液(78∶22,V/V),流速为0.3 mL.min-1。正离子多离子反应监测(MRM)扫描分析,离子通道分别为m/z 278→58(文拉法辛)、m/z 264→58(O-去甲基文拉法辛)、m/z 284→58(氘6-文拉法辛)、m/z 270→58(氘6-O-去甲基文拉法辛)。结果文拉法辛和O-去甲基文拉法辛的线性范围均为2～1 000μg.L-1,定量下限均为2μg.L-1,提取回收率在90.14%～97.33%,批内、批间RSD均小于8%。结论本方法操作简便,特异性强,灵敏度高,可用于人血浆内文拉法辛和O-去甲基文拉法辛的含量测定研究。     

超快速液相色谱-质谱联用法测定人血浆中双氯芬酸钠的浓度

目的:建立测定人血浆中双氯芬酸钠含量的超快速液相色谱-质谱联用(UFLC-MS/MS)方法。方法:血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,以乙腈-2 mmol.L-1乙酸铵水溶液(45∶55)为流动相,用Ultimate C18(5μm,2.1 mm×150 mm)色谱柱,通过电喷雾离子化三重四级杆串联质谱,经多反应监测模式检测,监测的离子对为m/z 295.9→m/z 251.8(双氯芬酸钠),m/z250.8→m/z207.9(苯妥英钠,内标)。结果:双氯芬酸钠在1.955～195.5μg.L-1范围内线性关系良好,最低检测浓度为1.955μg.L-1。方法回收率(n=5)分别为73.92%,80.98%,86.28%,日内和日间精密度RSD均小于10%。结论:该法操作简单,灵敏度高,准确,重现性好,适用于该药的临床药代动力学研究。     

高效液相串联质谱法测定大鼠血浆中咪哒唑仑的浓度

目的:建立测定大鼠血浆中咪哒唑仑浓度的液相色谱串联质谱法。方法:以伊曲康唑为内标,色谱柱为XTerra MSC18(150mm×2.1mm,3.5μm);流动相为乙腈-0.02%醋酸铵(75∶25);流速为0.2mL.min-1;质谱仪为电喷雾-三重四极杆质谱,以多反应监测(MRM)方式对咪哒唑仑(m/z326.2→m/z291.2)和伊曲康唑(m/z705.3→m/z392.1)进行测定。结果:咪哒唑仑在125～50 000μg.L-1范围内线性关系良好(r=0.996 8),最低检测限为5.0μg.L-1。低、中、高浓度的平均回收率为97.22%,101.88%,90.57%;日内及日间精密度均小于10%。结论:本方法简单、快速、灵敏,能有效检测大鼠血浆中咪哒唑仑的浓度。     

兔眼结膜中阿奇霉素的浓度测定及其药动学

目的建立兔眼结膜中阿奇霉素的LC-MS/MS检测方法,研究阿奇霉素滴眼液在兔眼结膜中的药动学特征。方法 184只新西兰白兔进行单次以及多次给阿奇霉素滴眼液后,于不同时间点取眼结膜样本匀浆处理后以沉淀法去除匀浆液中蛋白基质,采用LC-MS/MS法测定兔眼结膜中的阿奇霉素。以克拉霉素为内标,采用Ultimate XB-Phenyl(100 mm×3.0 mm,3μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.01 mol.L-1乙酸铵水溶液(含0.1%乙酸)(75∶25,V/V),电喷雾离子源,正离子SRM扫描分析,内标和阿奇霉素离子对分别为:m/z 748→m/z 590和m/z 749→m/z 591。结果阿奇霉素结膜浓度在10.128～8 102.4μg.L-1范围内线性关系良好(r=0.998 7);最低定量限为10.128μg.L-1;批内和批间RSD均小于10%;方法准确度在85%～115%之间。单次给药后参比制剂和受试制剂的药动学参数tmax分别为2 h和2 h,ρmax分别为22.29μg.g-1和21.80μg.g-1,AUC1-192分别为528.0μg.h.g-1和536.5μg.h.g-1,t1/2分别为25.5 h和24.1 h。多次给药后参比制剂和受试制剂的药动学参数tmax分别为8 h和8 h,ρmax分别为53.10μg.g-1和51.62μg.g-1,AUC1-192分别为1 584.9μg.h.g-1和1 379.4μg.h.g-1,t1/2分别为28.8 h和23.7 h。受试制剂和参比制剂药动学行为基本一致。结论建立的检测方法简便、灵敏。多次给药后在兔眼结膜内存在蓄积现象。     

大鼠心肌组织中布比卡因的LC-MS/MS测定

建立了液相色谱-串联质谱法测定大鼠心肌组织中的布比卡因.采用C18色谱柱,甲醇-0.1%甲酸溶液(55:45)为流动相,利多卡因为内标.采用正离子电喷雾离子源,多离子反应监测(MRM)方式,监测质核比m/z 289 →140(布比卡因)和m/z 285→86(内标).布比卡因在0.01～20μg/g浓度范围内线性关系良好,萃取回收率为66.4%～74.57%,日内和日间RSD均小于7%.     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中阿魏酸的血药浓度

目的建立高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定大鼠血浆中阿魏酸的血药质量浓度。方法色谱柱采用Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),仪器采用API 4000三重四极杆串联质谱仪,采用多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)扫描方式检测,采用沉淀蛋白法处理样品,用于定量分析的离子对为m/z 193.1→m/z 134.1(阿魏酸)和m/z 121.2→m/z 77.0(苯甲酸,内标)。结果该方法的线性范围在5.0～2 000.0μg.L-1,定量下限为5.0μg.L-1,且血浆中内源性物质不干扰阿魏酸的测定;日内和日间精密度RSD均小于15%;阿魏酸的平均提取回收率为91.0%～100.5%,基质效应在87.8%～89.7%。结论该方法适用于阿魏酸在大鼠体内的药物动力学研究。     

高效液相色谱-质谱串联法同时测定人血清中拉莫三嗪及卡马西平的含量

目的:建立高效液相色谱-质谱串联(LC-MS/MS)法测定人血清中拉莫三嗪及卡马西平的含量。方法:取人血清经乙腈直接沉淀后进样分析,色谱柱为Diamonsil C18(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇∶0.2%甲酸水溶液,流速为0.4 mL.min-1;流动相采用梯度洗脱。质谱采用ESI离子源,正离子多反应监测扫描分析,拉莫三嗪离子对为m/z 256→145,卡马西平离子对为m/z 237→194。结果:卡马西平和拉莫三嗪血药浓度分别在5～500μg.L-1(r=0.998 9)和5～500μg.L-1(r=0.997 2)范围内线性关系良好,定量下限分别为5μg.L-1。日内、日间RSD均<7.0%;提取回收率均>85%。结论:本方法处理样品简便,适用于临床血药浓度监测及为联合用药的药动学研究奠定基础。     

超快速液相色谱-质谱/质谱联用法测定人血浆中兰索拉唑的浓度

目的 建立测定人血浆中兰索拉唑(抗胃及十二指肠溃疡药)含量的超快速液相色谱-质谱/质谱联用法(UFLC-MS/MS).方法 血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以乙腈-0.1%甲酸(27:73)洗脱,用Ultimate XB-CN(5μm,2.1mm×150mm)色谱柱,通过电喷雾离子化三重四级杆串联质谱,经多反应监测模式检测,m/z370.4→m/z252.2(兰索拉唑),m/z 237.2→m/z 194.3(卡马西平,内标).结果 兰索拉唑在5.01～5007.90μg·L-1内线性关系良好(γ=0.998 5),最低定量浓度为5.01μg·L-1.方法 回收率(n=5)分别为90.21%,89.71%,92.27%,日内和日间精密度均<9%.结论 该法操作简单,灵敏,准确,重现性好,适用于该药的临床药代动力学研究.     

用LC/MS法测定人血浆及尿中对乙酰氨基酚和帕马溴的含量

目的：建立LC/MS法测定人血浆及尿中对乙酰氨基酚和帕马溴含量。方法：采用AgilentSB-C18色谱柱,血浆中测定以咖啡酸为内标,尿中测定以青藤碱为内标,流动相为乙腈：0.05%甲酸溶液（10：90）,流速0.3ml/min。用于定量分析离子对：对乙酰氨基酚质荷比（m/z）152.1,帕马溴m/z259.1,咖啡酸m/z181.1,青藤碱m/z330.9。结果：血浆中对乙酰氨基酚浓度在0.051～20.24μg/ml范围内线性关系良好,帕马溴浓度在0.025～10.10μg/ml范围内线性关系良好,对乙酰氨基酚和帕马溴日内、日间精密度均〈15.0%,对乙酰氨基酚及帕马溴相对回收率分别为86.4%～107.4%和95.7%～107.0%。尿中对乙酰氨基酚浓度在2.825～1415μg/ml范围内线性关系良好,帕马溴浓度在2.65～1325μg/ml范围内线性关系良好,对乙酰氨基酚和帕马溴日内和日间精密度均〈15.0%,对乙酰氨基酚及帕马溴相对回收率分别为85.3%～109.1%和98.3%～101.6%。结论：本研究建立的两个方法快速、灵敏、准确,适用于复方氨酚帕马溴片的药动学研究。     

人血浆中非洛地平的LC-MS测定法及其在药动学研究中的应用

目的建立人血浆中非洛地平浓度的液相色谱-质谱联用的测定方法。方法以尼莫地平为内标,血浆样品经100μL1.0mol·L-1NaOH溶液碱化,采用乙醚-正己烷(4∶1)萃取后进行LC-MS分析。色谱柱为C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸(84∶16),流速为0.8mL·min-1;离子源为电喷雾离子化源(ESI源),正离子方式检测;扫描方式为选择离子监测(SIM),用于定量分析的离子分别为m/z406(非洛地平)和m/z441(尼莫地平)。结果非洛地平在0.2～20.0μg·L-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9948),定量下限为0.2μg·L-1,低、中、高浓度的提取回收率均大于81.9%,日内、日间精密度(RSD)均小于14.9%。结论该方法准确可靠,灵敏度高,适用于血浆中非洛地平浓度的测定及其药动学研究。     

液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中黄芪甲苷及其药动学

目的建立大鼠血浆中黄芪甲苷的测定方法。方法以尼群地平为内标,采用LC-MS/MS方法,以Kiomasil C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱为分析柱,甲醇-0.1%甲酸水(70∶30,V/V)为流动相,梯度洗脱,流速为700μL.min-1,柱温为恒温,进样量为20μL。质谱检测采用多反应监测(MRM)模式,ESI源,分别监测离子反应m/z 785.6m/z 143.1(黄芪甲苷)和m/z 361.3m/z329.2(内标尼群地平)。结果在0.202～202.000μg.L-1浓度范围内具有良好的线性关系,典型回归方程为:Y=0.004 9c+0.070 6,r=0.997 0(n=9)。回收率为(91±8)%(n=9)。准确度、精密度均符合生物样品的测定要求,最低定量浓度为0.202μg.L-1。大鼠尾静脉注射和口服黄芪甲苷(20μg.g-1)体内主要药动学参数:t1/2(1.37±0.02)h、tmax(0.08±0.00)h、AUC0-t(4 717.54±178.20)μg.h.L-1、AUC0-∞(6 444.68±521.25)μg.h.L-1和t1/2(1.84±0.17)h、tmax(1.00±0.00)h、AUC0-t(499.27±10.14)μg.h.L-1、AUC0-∞(1 593.52±217.19)μg.h.L-1。结论该检测方法简便、准确、专属性强,能够满足黄芪甲苷在大鼠体内药动学研究的需要。     

液相色谱-串联质谱法测定健康人体内阿德福韦浓度及其药动学研究(英文)

目的建立人血浆和尿样中阿德福韦浓度的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定方法。方法10名健康受试者单剂量口服阿德福韦10mg。于服药前(0h)和服药后抽取静脉血及留取尿样。采用BDS-Phenyl column(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.35mol·L-1冰醋酸梯度洗脱,流速为0.3mL.min-1;电喷雾离子化正离子选择性反应检测;检测离子为m/z274.1→162.1(阿德福韦),m/z254.1→135.0(喷昔洛韦,内标)。结果LC-MS/MS测定阿德福韦血浆样品线性范围为0.50～200μg.L-1,尿样线性范围为50～20000μg·L-1,线性关系良好。血浆样品分析的回收率、精密度和准确度均良好,定量限为0.50μg·L-1。主要药动学参数为:ρmax(24±s4)μg·L-1,tmax(1.0±0.6)h,AUC0～t(278±45)h.μg·L-1,AUC0～∞(285±45)h.μg·L-1,t1/2(8.8±1.6)h,CL(F)(36±6)L.h-1,Vd(F)(456±136)L,0～48h的尿累计排泄量为(48±12)%。结论建立的LC-MS/MS测定法专属性强、灵敏度适宜,可以用于阿德福韦的药动学研究。     

液相色谱-串联质谱法测定人血清中苯磺酸氨氯地平的浓度

目的:建立测定体内苯磺酸氨氯地平的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法。方法:血清样品中加入内标苯海拉明,直接沉淀蛋白法处理样品。色谱柱为Atlantis C_(18)(100 mm×2.1 mm,3μm),流动相为含0.1%甲酸的乙腈-0.1%甲酸水溶液(42:58,V:V),流速为0.25 mL·min~(-1)。MRM扫描分析,苯磺酸氨氯地平和内标苯海拉明的离子通道分别选择为m/z 409.1→238.1和256.3→167.0。结果:苯磺酸氨氯地平的线性范围为0.2～32μg·L~(-1),最低定量限为0.2μg·L~(-1),提取回收率均大于95%,日内、日间RSD均小于15%。结论:本方法灵敏、准确、专一、操作简便,适用于苯磺酸氨氯地平的体内药动学研究。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中罗格列酮

目的:建立测定人血浆中罗格列酮的液相色谱-质谱-质谱联用法,并用于临床药动学研究。方法: 血浆样品经液-液萃取后,以乙腈-水-甲酸(90:10:0．5)为流动相,采用Zorbax SB—C18柱分离,通过电喷雾离子化四极杆串联质谱,以选择反应监测(SRM)方式进行检测。用于定量分析的离子反应分别为m／z 358→ 135(罗格列酮)和m／z 256→167(内标苯海拉明)。结果:标准曲线线性范围为0．50～1 000μg·L-1,定量下限为0．50μg·L-1,日内、日间精密度(RSD)均小于7．4％。应用此法测试了20名男性健康受试者口服酒石酸罗格列酮片(相当于罗格列酮4 mg)后血浆中罗格列酮的浓度。结论:该法灵敏、快速、准确,操作简便、线性范围宽,适用于罗格列酮的临床药动学研究。     

HPLC-电喷雾串联质谱法快速测定人血浆中喹硫平的浓度

目的:建立测定人血浆中喹硫平浓度的高效液相色谱-电喷雾串联质谱法。方法:血浆样品经醋酸乙酯-二氯甲烷(4∶1)提取后测定,色谱柱为C18,流动相为甲醇-5mmol·L-1甲酸铵(90∶10),流速为1mL.min-1,柱温为25℃。其中,样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四极杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对喹硫平(m/z384.3→253.1)和内标拉莫三嗪(m/z256→145)进行测定。并用此法测定34例精神分裂症患者稳态血药浓度。结果:血浆喹硫平检测浓度在2.5~500μg·L-1范围内线性关系良好;分析方法的最低定量限为2.5μg·L-1。喹硫平高、中、低3种浓度(250、100、5μg·L-1)的平均回收率分别为101.03%、104.21%、97.74%,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于15%。结论:本方法简便、快速、准确、灵敏、重现性好,可用于临床常规喹硫平血药浓度监测和药动学研究。     

RP-HPLC荧光法测定人尿中巴洛沙星的含量

目的建立反相高效液相色谱荧光法测定人尿中巴洛沙星质量浓度。方法采用DiamonsilODS C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),柱温:室温,流动相:乙腈-0.05 mol.L-1KH2PO4缓冲液(体积比为25∶75,三乙胺和H3PO4调pH为3.4),流速:1.0 mL.min-1。尿液样品用0.1 mol.L-1KH2PO4(KOH调pH为7.0)缓冲液稀释100倍,然后与二氯甲烷旋涡混合后,提取有机层,在40℃条件下氮气吹干,残渣用流动相溶解进样,荧光检测器(λex=295 nm,λem=500 nm)检测,以加替沙星作内标,按内标法定量。结果标准曲线在50~6 000μg.L-1内线性良好,最低检测限为10μg.L-1,巴洛沙星及内标的保留时间分别为5.42、4.05 min,日内和日间RSD均小于10.0%,提取回收率和方法回收率分别在93%~96%和98%~108%。结论本法适用于人尿液中巴洛沙星质量浓度测定及药物动力学研究。     

液相色谱串联质谱法测定人血清中硝苯地平的浓度

目的建立液相色谱串联质谱法测定人血清中硝苯地平浓度。方法血清样品用甲醇沉淀蛋白,内标为尼群地平,色谱柱为Kromasil C18(4.6mm×150mm,5μm),柱温为30℃,流动相为甲醇-水(90:10,V/V),流速为0.5ml·min-1。质谱采用ESI离子源负离子检测,定量分析的离子对为:m/z345.1/122.0(硝苯地平),m/z359.2/122.0(内标尼群地平)。结果硝苯地平在0.5μg·L-1～50μg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9987),批内批间RSD均小于15%,提取回收率为64.06%～77.10%。结论该方法快速,灵敏,准确,可用于硝苯地平的临床药动学研究。