通心络对血管成形术后家兔丝裂素活化蛋白激酶表达的影响

目的　观察通心络对血管成形术后家兔丝裂素活化蛋白激酶 (MAPK)表达的影响。方法　家兔 6 0只随机分为三组 (各组 2 0只 ) :A组 :对照组 ;B组 :高脂组 ;C组 :通心络组。采用高胆固醇喂养加两次动脉损伤的方法制作家兔血管成形术模型 ,再进行 4周的通心络治疗观察。测定家兔血脂指标 (TG、TC、LDL C、HDL C)、内皮素 (ET 1)和一氧化氮 (NO) ;HE染色测定管腔面积 (LA)、新生内膜面积 (NIA)和中膜面积 (MA)的变化 ;免疫组化染色定性观察MAPK的表达分布 ;用WesternBlot方法半定量测定MAPK的表达量。结果　通心络组血TC、LDL C低于高脂组 (P <0 .0 5 ) ;ET 1低于高脂组 ,NO高于高脂组 (P <0 .0 5 ) ;其管腔面积高于高脂组和对照组 (P <0 .0 5 ) ;新生内膜面积低于高脂组 ,高于对照组 (P <0 .0 5 )。MAPK阳性细胞面积明显低于高脂组 (P <0 .0 5 )。MAPK(ERK1和ERK2 )的蛋白表达量明显低于高脂组和对照组 (P <0 .0 5 )。结论　通心络通过抑制血管成形术后家兔MAPK的表达 ,从而抑制血管内膜增殖     

通心络对动脉粥样硬化家兔血管成形术后血管内皮功能的保护作用

1　材料与方法日本大耳白兔 6 0只 ,体重 2 .5± 0 .5kg,月龄 6～ 8个月 ,随机分为三组 :对照组喂普通饲料 ,高脂组和通心络组喂普通饲料加胆固醇 [1.5g (kg·d) ],4周后各组家兔经一侧股动脉行腹主动脉内皮剥脱 ,再继续喂养 4周。实验 8周时各组家兔经另一侧股动脉行腹主动脉造影 ,对狭窄超过 5 0 %的部位进行球囊扩张术。术后对照组继续喂普通饲料 ,高脂组停用胆固醇改喂普通饲料 ,通心络组停用胆固醇加用通心络[0 .5g (kg·d) ]。至 12周实验结束 ,共成功建立家兔血管成形术模型 4 5只。分别于实验前、实验 4周、8周和 12周从耳缘静脉采…     

Bcl-2和Bax在多巴胺诱导PC12细胞凋亡中的作用

目的探讨多巴胺诱导PC12细胞凋亡的可能机制。方法流式细胞仪检测PC12细胞的凋亡率及Bcl-2和Bax蛋白的表达率。结果多巴胺诱导PC12细胞凋亡,两者间呈明显的量效和时效关系。0.45mmol/L多巴胺作用24h,细胞的凋亡率为53.3%±3.1%。在凋亡过程中,Bcl-2蛋白表达显著降低,Bax蛋白表达随之增高。诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)抑制剂和半胱氨酸蛋白酶3(CPP32)抑制剂对抗多巴胺诱导PC12细胞的凋亡作用与Bcl-2蛋白增加、Bax蛋白降低有关。结论Bcl-2和Bax蛋白是多巴胺诱导PC12细胞凋亡的重要调节蛋白,iNOS和CPP32在凋亡过程中可能具有重要作用。     

通心络对实验家兔血管球囊损伤后血管重构的抑制作用

以往认为新生内膜过度增生是导致经皮冠状动脉腔内成形术(PTCA)后血管再狭窄形成的根本原因,但近来研究发现血管重构在再狭窄形成中起重要作用。本研究探讨通心络对实验家兔球囊成形术后血管重构及再狭窄的影响及其可能机制。     

通心络对大鼠血管平滑肌细胞BKCa通道的影响及作用机制

目的探讨通心络对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)大电导钙激活钾通道(BKCa)的影响及作用机制。方法将30只10周龄的雄性SD大鼠随机分为大剂量通心络组(1.0 g·kg-1·d-1)、小剂量通心络组(0.5 g·kg-1·d-1)和模型对照组,每组10只,经腹主动脉部分缩窄术制作高血压大鼠模型,另选10只同龄SD大鼠作为正常对照组,采用酶消化法和贴块法分离VSMC,采用膜片钳技术记录各组大鼠VSMC的BKCa通道开放概率(Po)、电流幅度值(Amp)、平均开放时间(To)和平均关闭时间(Tc)的变化。结果不同Ca2+浓度下的正常对照组和模型对照组的BKCa通道活性均明显增强,呈显著的浓度依赖性。Po以及To均随着浴液Ca2+浓度的增加而增加,Tc随着浴液Ca2+浓度的增加而缩短,浴液Ca2+浓度对BKCa通道的Amp影响不大;与正常对照组相比,模型对照组通道活性的改变更显著(P<0.05)。保持浴液游离的Ca2+浓度为10-7mol/L,钳制电压固定在+40 m V时,内面外向式的膜片下,模型对照组的Po水平显著高于正常对照组,Tc显著低于正常对照组;大、小剂量的通心络组的Po及To的水平均显著高于模型对照组,Tc显著低于模型对照组;大剂量通心络组的Po及To的水平比小剂量通心络组更高,Tc的水平更低(均P<0.05)。结论通心络能够激活大鼠VSMC的BKCa通道,能扩张血管。     

通心络胶囊对大鼠血管球囊损伤后胶原增生的影响

目的通过大鼠颈总动脉球囊损伤模型,观察通心络胶囊对大鼠血管球囊损伤后血管内膜胶原增生的影响。方法动物随机分为假手术组、手术组、通心络大剂量组及小剂量组,每组8只。假手术组、手术组均术后6周予蒸馏水3mL/(kg·d)灌胃,通心络大剂量组予通心络1.0g/(kg·d)灌胃,通心络小剂量组予通心络0.5g/(kg·d)灌胃。用ELISA法检测各组术后6周I型前胶原羧基肽(PIP)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)的水平,病理形态学观察细胞增殖情况,计算机图像分析内膜、中膜厚度及其比例。结果动脉球囊损伤后6周,药物治疗组与手术组比较,可抑制内膜增生、降低内膜/中膜厚度、降低PIP、ox-LDL含量(P<0.05)。结论通心络胶囊对大鼠血管球囊损伤后血管内膜胶原增生有一定的抑制作用。     

纯阳子对兔髂动脉球囊成形术后血管局部 c-myc基因表达的影响

目的探讨具有抗氧化作用的纯阳子对兔髂动脉球囊成形术后血管局部c-myc基因表达的影响及c-myc表达的高峰期与血管壁解剖结构之间的关系。方法32只日本大耳白兔分成4组(每组8只)A组左侧髂动脉为假手术组,右侧髂动脉为正常对照组;B组双侧髂动脉球囊成形术组;C组球囊成形术加维生素C和E组;D组球囊成形术加纯阳子治疗组,均于术前用药7d。应用原位杂交的方法,观察纯阳子对球囊损伤后2h血管局部c-myc基因表达的影响及其与血管壁解剖结构的关系。结果A组左、右髂动脉均未见c-myc基因的表达。B组近管腔部可见一层阳性显色,中膜沿平滑肌细胞排列方向可见阳性显色。C组及D组均见近血管腔部有一层阳性显色;中膜沿平滑肌细胞排列方向也见一些散在的表达,两组之间无明显差异;但与B组相比,颜色明显变浅。结论纯阳子能抑制兔髂动脉球囊损伤后c-myc基因的过度表达;球囊损伤后2h(损伤后c-myc基因表达的高峰期),c-myc基因在靠近管腔处表达最显著。     

通心络对家兔主动脉粥样斑块血管内皮生长因子表达影响的实验研究

目的：观察通心络对动脉粥样斑块血管内皮生长因子表达的影响。方法：通过构建实验性家兔主动脉粥样硬化模型，观察通心络对血管形态学的影响，并采用免疫组织化学方法，观察通心络对动脉粥样斑块血管内皮生长因子表达的影响。结果：通心络可一定程度减少动脉粥样斑块血管内皮生长因子表达。结论：通心络可延缓粥样斑块形成的进程，具有一定斑块稳定作用。     

犬冠状动脉支架植入术后细胞凋亡及凋亡相关基因蛋白表达的变化

目的观察犬冠状动脉支架植入术后血管内膜凋亡及凋亡相关基因蛋白表达的动态变化.方法15只犬进行冠状动脉左回旋支支架植入术,前降支相应血管作为对照,分别于术后1周、4周和12周处死,进行病理学检查、TUNEL法和透射电镜检测凋亡细胞、PCNA和Bcl-xl免疫组织化学染色以及Bcl-xl蛋白质印迹杂交.结果支架植入术后1～12周内膜面积持续增加;正常血管未见凋亡细胞和PCNA阳性细胞,术后1周内膜中凋亡细胞阳性率和PCNA阳性细胞率均达高峰,术后4周和12周不断降低,但凋亡细胞阳性率在各时间段均低于PCNA阳性细胞率;Bcl-xl免疫组织化学染色和蛋白印迹杂交均显示正常对照血管偶见表达,术后1周在内膜中表达增加,术后4周在内膜中大量表达,并可维持至12周.结论细胞凋亡相对不足可能是支架植入术后再狭窄形成的一个原因,Bcl-xl在内膜中高表达可能是造成细胞凋亡相对不足的因素之一.     

益气活血中药对糖尿病动脉粥样硬化家兔血管平滑肌细胞凋亡及Bcl-2表达的影响

目的探讨益气活血中药对糖尿病动脉粥样硬化家兔血管平滑肌细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2表达的影响。方法选用新西兰家兔,利用静脉注射胰岛β细胞毒剂四氧嘧啶,继以高糖高脂饲料复制家兔糖尿病动脉粥样硬化模型,随机分为模型组、小剂量中药治疗组、大剂量中药治疗组和正常对照组,实验12周后,处死家兔,观察主动脉内膜的病理形态学改变,采用流式细胞术检测凋亡率以及凋亡相关基因Bcl-2表达。结果模型组与正常对照组比较,动脉内膜出现典型的斑块,动脉管腔极度狭窄,平滑肌细胞凋亡率明显增高(13.89%±1.53%比2.36%±0.76%,P<0.01),Bcl-2表达降低(22.04±1.38比30.48±0.68,P<0.01)。中药治疗组与模型组比较,主动脉斑块缩小,动脉管腔狭窄减轻,平滑肌细胞凋亡率明显降低(P<0.01),Bcl-2表达上调(P<0.05),且大剂量中药治疗组优于小剂量中药治疗组。结论益气活血中药拮抗糖尿病动脉粥样硬化形成的机制可能与上调Bcl-2蛋白的表达,抑制血管平滑肌细胞凋亡有关。     

犬输精管结扎术后前列腺细胞凋亡与Bcl-2 Bax基因表达

目的 观察输精管及其静脉结扎(以下简称"结扎")对老年犬前列腺增生模型组织学、细胞凋亡及Bcl-2、Bax基因表达的影响.方法 12只雄性杂交5～6岁犬用添加甲基睾丸素的犬饲料喂养2年制成前列腺增生动物模型,造模成功后,随机分为结扎组(施行输精管及其静脉结扎术)和假手术组,继续饲养2年后处死犬.取前列腺测量体积并称重,标本分别行HE染色、免疫组化染色检测增殖细胞核抗原(PCNA)及凋亡抑制基因(Bcl-2)、促凋亡基因(Bax)蛋白表达. 结果 结扎后结扎组增生的前列腺体积变小、重量减轻,腺体出现萎缩性变,而假手术组前列腺仍呈增生性改变(P＜0.01);结扎组前列腺腺上皮面积比(0.16±0.05)和腺上皮平均高度[(55.67±8.34)μm]均呈下降趋势,而假手术组上述检测指标分别为(0.24±0.07)、[(108.81±1 5.26)μm],均高于结扎组(P＜0.01),间质面积比结扎组(0.65±0.12)高于假手术组(0.46±0.09)(P＜0.05),结扎后前列腺萎缩主要以腺体和腺上皮为主;免疫组化结果显示,PCNA在结扎组前列腺腺上皮细胞核中表达较弱,在假手术组中表达较强;Bcl-2基因蛋白在结扎组前列腺上皮胞浆中表达较弱,在假手术组中表达较强;Bax基因蛋白在结扎组前列腺上皮胞浆中表达较强,在假手术组中表达较弱;结扎组PCNA和Bcl-2阳性信号的面密度值下调[分别为(0.29±0.05)、(0.18±0.07)],低于假手术组[分别为(0.67±0.12)、(0.27±0.1)],而Bax阳性信号面密度值(0.29±0.07)上调,高于假手术组(0.12±0.02),两组差异有统计学意义(P＜0.01);结扎组增殖指数(0.12±0.01)和假手术组(0.24±0.13)相比,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 前列腺细胞凋亡与Bcl-2、Bax基因调控密切相关,输精管结扎术后局部激素的阻断使老年犬前列腺组织细胞出现萎缩、细胞增殖下降、细胞凋亡增加,通过改变腺体细胞中Bcl-2与Bax基因的表达而实现对增殖与凋亡的调控是输精管结扎后发生凋亡的可能机制之一.     

鼠龄对急性心肌梗死大鼠Bcl-2和Bax表达的影响

目的 建立成年和老年Wistar大鼠急性心肌梗死模型,比较鼠龄对大鼠冠状动脉(冠脉)结扎后不同时间点的凋亡指数及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响.方法 115只6～24月龄大鼠中,95只结扎冠脉左前降支,80只(成年、老年大鼠各40只)术后存活,根据鼠龄分为老年心肌梗死组(40只)和成年心肌梗死组(40只),按结扎前降支后的1 h、3 h、5 h、1 d和7 d各分为5组(每组8只).假手术老年组和假手术成年组各10只.心肌梗死组分别于冠脉结扎后1、3、5 h和1、7d时记录血流动力学参数,包括心率、左室收缩压(LVSP)、左室终末舒张压(LVEDP)和左室内压最大收缩和舒张速率(±dp/dtmax).采用伊文蓝-红四氮唑(TTC)染色和原位末端标记(TUNEL)法检测心肌坏死和凋亡程度.免疫组化染色检测心肌内Bcl-2和Bax的形成.结果 大鼠心肌在冠脉结扎后的1 h内即有凋亡出现,并且凋亡达高峰的时间老年心肌梗死组较成年心肌梗死组早.在冠脉结扎3 h,老年心肌梗死组与成年心肌梗死组的凋亡指数分别为(51.90±23.15)%与(18.67±17.15)%,差异有统计学意义(P<0.01).Bcl-2蛋白的表达值老年假手术组和成年假手术组分别为(2.7±0.9)分和(1.8±0.8)分,差异有统计学意义(P<0.05).Bax蛋白的表达两组分别为(6.2±2.9)分和(4.2±1.5)分,差异有统计学意义(P<0.05).结论 老年大鼠抵抗心肌缺血的能力差,鼠龄可能会改变Bcl-2和Bax蛋白的表达而增加心肌细胞凋亡.     

桥本甲状腺炎甲状腺组织中Fas、Fas配体、Bcl-2、Bax表达及意义

目的　探讨细胞凋亡相关蛋白Fas、Fas配体 (FasL)、Bcl 2、Bax表达与桥本甲状腺炎(HT)发病机制的关系。方法　采用免疫组化S P法检测 41例HT和 10例正常甲状腺组织Fas、FasL、Bcl 2、Bax表达及分布 ,应用Mias99图像分析系统进行定量分析。结果　 (1)HT组甲状腺组织中Fas、FasL、Bcl 2、Bax阳性染色面积、平均光密度和积分光密度均显著高于正常组 (P <0 .0 1) ;(2 )HT组中组织结构破坏较重区域中小滤泡及失去正常滤泡结构的腺上皮Fas、FasL、Bax表达高于其它腺上皮 ,滤泡结构较完整的区域Bcl 2表达较高。结论　Fas、FasL、Bcl 2、Bax的过度表达可能参与HT发病过程 ,其导致的细胞凋亡增高可能是HT甲状腺细胞破坏的重要机制之一 ;Bcl 2在维护HT甲状腺滤泡结构的完整性中起着某种重要作用     

通心络对家兔动脉粥样硬化合并急性心肌梗死的保护作用及其机制

目的研究通心络对家兔实验性动脉粥样硬化合并急性心肌梗死的保护作用,探讨其可能的作用机制。方法采用高脂饮食建立家兔动脉粥样硬化模型。27只造模成功的家兔随机分成3组,每组9只,分别为安慰剂组（A组）、通心络组（B组）和阳性对照组（c组）。A组予以安慰剂,B组予以通心络0．5g-kg-1d。＋阿司匹林10mg·kg-1·d-1＋阿托伐他汀5mg·kg＋d-1;c组予以阿司匹林10mg·kg-1·d-1＋给药期间普通饮食。各组在常规剂量药物干预1周后以3倍常规剂量的负荷剂量药物干预3h,建立急性心肌梗死模型。急性心肌梗死模型造模成功4h后处死家兔,取心脏标本制作病理切片,观察病理形态学改变。应用免疫组化方法检测缺血心肌组织细胞凋亡相关蛋白Bcl一2、Bax的表达水平;应用TUNEL技术检测心肌细胞凋亡指数。结果与A组比较,B组和c组Bax蛋白的表达水平均显著降低（RO．05）,B组Bax蛋白的表达水平最低,Bcl-2蛋白的表达则反之,B组和c组Bcl-2蛋白的表达水平均显著升高（P〈0．05）,B组Bcl-2蛋白的表达水平最高;与A组比较,B组和c组心肌细胞凋亡指数下降,但B组心肌细胞凋亡水平明显减轻（P〈0．05）。结论通心络可以通过调节凋亡相关蛋白Bax及Bcl-2的表达,减少缺血心肌组织心肌细胞凋亡,对心肌梗死有保护作用。     

丙丁酚对兔经皮腔内血管成形术后内膜增生和细胞周期蛋白表达的抑制作用

目的　研究丙丁酚对兔经皮腔内血管成形术 (PTA)后内膜增生及管壁细胞周期蛋白表达的影响。方法　新西兰白兔随机分为假手术对照组 ,PTA术后 2周组及 PTA术加丙丁酚防治 3周组和 5周组。治疗组在 PTA术前1周给药 ,术后继续给药 2周和 4周 ,分别为丙丁酚防治 3周组和 5周组。取各组实验动脉段石蜡切片 ,采用计算机图象分析系统分别测出中膜面积 (MA)、新生内膜面积 (NEA) ,并计算新生内膜面积与中膜面积的比率 (NEA /MA)。用免疫组化测周期素 D1 (cyclin D1 )、周期素依赖激酶 4(cyclin- dependent kinase 4,cdk4)及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达水平。结果　 PTA术后 2周组 ,内膜增生显著 ,cdk4、cyclin D1 和PCNA均在内膜层表达 ,而中膜表达较少或几乎检测不到。与 PTA术后 2周组相比 ,丙丁酚防治 3周组新生内膜减少达 71.3 % (P<0 .0 1) ,cdk4、cyclin D1 和 PCNA阳性表达指数分别低 69.9%、73 .7%和 79.6% (P均 <0 .0 1)。结论　丙丁酚防治 3周对兔血管损伤后内膜增生抑制作用显著 ,同时伴有 cdk4、cyclin D1 和 PCNA阳性表达下降。提示丙丁酚对新生内膜形成的抑制作用可能与细胞周期蛋白表达下降有关     

二黄糖肾康对糖尿病肾病模型大鼠肾脏细胞凋亡及Bax和Bcl-2表达的影响

目的观察二黄糖肾康对糖尿病肾病(DN)模型大鼠肾脏功能、细胞凋亡及Bax和Bcl-2表达的影响。方法SD大鼠单侧肾切除加腹腔注射链脲佐菌素复制DN模型,每日灌胃二黄糖肾康,8w后检测肾功能,流式细胞术检测肾脏细胞周期、凋亡数目及Bax和Bcl-2蛋白表达。结果二黄糖肾康明显改善DN大鼠肾功能,减少肾脏皮质细胞凋亡数目,影响肾脏细胞周期,降低Bax的表达,Bcl-2的表达增加。结论二黄糖肾康能通过降低肾脏凋亡数目,调节Bax和Bcl-2在肾脏细胞凋亡中的表达而保护肾功能。     

实验性急性心肌梗死中Bax和Bcl-2基因对心肌细胞凋亡的调控

目的 探讨急性心肌梗死（AMI）中Bax和Bcl-2基因对心肌细胞凋亡的调控作用。方法 新西兰兔48只，随机分为不结扎冠状动脉的正常对照组及结扎冠脉后1h，2h,3h,4h,6h,8h,12h共7组。TUNEL法检测梗死区心肌细胞凋亡，免疫组化法检测Bax和Bcl-2蛋白在心肌细胞中的表达水平。结果 急性心肌梗死心肌细胞凋亡数在冠脉结扎后1h开始增多，4h达高峰，以后逐渐下降，12h己降至正常。有Bax蛋白表达的阳性心肌细胞数与心肌细胞的凋亡数呈正相关，有Bcl-2蛋白表达的阳性心肌细胞数与心肌细胞的凋亡数呈负相关。结论 AMI免梗死区心肌细胞存在明显的凋亡现象，且受Bax蛋白上调、Bcl-2蛋白质下调，两作用相反，共同调节有着心肌细胞的凋亡。     

骨髓细胞移植对心肌梗死后大鼠心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的调节

目的　观察骨髓单个核细胞 (BM MNCs)移植对心肌梗死 (MI)后恢复期心肌细胞凋亡及心功能的影响 ,并探讨其可能机制。方法　通过结扎左冠状动脉前降支制成MI模型。 2周后第二次开胸在心外膜下梗死区及周边区多点注射BM MNCs混悬液 2 0 0 μl(5× 10 6 个细胞 )。经超声心动图测定左室射血分数 (EF)、短轴缩短率 (FS)等指标。采用DNA缺口末端标记法 (TUNEL)检测心肌细胞凋亡 ,免疫组化法检测Bcl 2、Bax蛋白在心肌细胞中表达水平。结果　术后 4周 ,移植组EF、FS值均高于对照组 (P <0 0 5 ) ;8周时EF、FS值升高达 2 2 4 %、2 8 1% (P <0 0 5 )。TUNEL结果显示心肌细胞凋亡指数在移植组明显低于对照组 (4周 :0 0 94 6± 0 0 17vs 0 173± 0 0 18,P <0 0 5 ;8周 :0 0 916± 0 0 14vs 0 182± 0 0 15 ,P <0 0 5 )。免疫组化结果表明 ,移植组Bcl 2蛋白表达高于对照组 (4周 :12 6 6± 3 37vs 5 6 8± 2 5 3,P <0 0 5 ;8周 :13 0 8± 3 0 87vs 5 0 2± 1 91,P <0 0 5 ) ;Bax蛋白表达则降低 (4周 :11 4 8± 3 134vs 2 0 12± 3 91,P <0 0 5 ;8周 :9 98± 3 0 3vs 2 2 74± 3 12 ,P <0 0 5 )。结论　骨髓单个核细胞移植可抑制MI后心肌细胞凋亡的发生 ,从而保护心功能 ,其机制可能与对Bcl 2、