血管内皮细胞中ABCA1的表达及其在动脉粥样硬化发生中的意义

目的 以人的血管内皮细胞ECV304为靶点,研究Ox-LDL和8-Br-cAMP对ATP-结合盒转运子A1(ABCA1)、细胞间粘附因子-1(ICAM-1)及单核细胞趋化因子-1(MCP-1)基因mRNA和蛋白质表达的影响,阐明ABCA1基因在动脉粥样硬化(AS)形成中的可能机制。方法 复苏培养血管内皮细胞,无血清培养基培养静止12 h后,分别加入Ox-LDL (30 ng/ml)、8-Br-cAMP (0.5 mmol/L)刺激3、6、12、24 h,设未加刺激同时孵育24 h的细胞为阴性对照组,以RT-PCR和Western蛋白印迹法检测ABCA1、ICAM-1及MCP-1 mRNA和蛋白质表达量。结果 血管内皮细胞ECV304在给予Ox-LDL刺激后,ABCA1、ICAM-1、MCP-1的mRNA和蛋白质水平均增高,ICAM-1的高峰时间在12 h,其余高峰时间在6 h;在8-Br-cAMP的刺激下,ABCA1、ICAM-1、MCP-1的mRNA和蛋白质水平也增高,高峰时间均在6 h。结论 公认的致AS因素Ox-LDL可通过引起血管内皮细胞ECV304中炎性细胞因子ICAM-1、MCP-1 mRNA及蛋白质水平增加,参与AS的形成,同时抗AS基因ABCA1在Ox-LDL刺激下代偿增加,具有AS保护作用。cAMP不仅可增加ABCA1的表达,而且可增加ICAM-1、MCP-1表达。     

ABCA1在动脉粥样硬化中的调节及作用的研究进展

三磷酸腺苷结合盒转运蛋白A1（ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1）通过介导胆固醇逆向转运以及抑制炎症等方面,在调节高密度脂蛋白合成及抗动脉粥样硬化过程中均发挥重要作用。同时近期研究表明,多种基因改变、表观遗传学因素及炎症介质等均可通过单独或协同作用影响ABCA1的表达和活性。本文从ABCA1的基本结构、功能、调控及与动脉粥样硬化的关系作一综述,深入地探寻ABCA1代谢通路上可能的调控位点和作用机制,为探索动脉粥样硬化治疗新靶点提供思路。     

巨噬细胞ABCA1对Ox—LDL诱导的炎症因子的调节及其意义

【目的】研究在氧化低密度脂蛋白（Ox—LDL）诱导作用下，ATP结合盒转运子A1（ABCA1）对巨噬细胞中细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、单核细胞化学趋向蛋白-1（MCP-1）mRNA和蛋白质及白介素-1β（IL-1β）蛋白质表达的影响，在细胞水平证实ABCA1对动脉粥样硬化的影响。【方法】用氟波酯（PMA）刺激THP-1细胞使之转变为巨噬细胞，Ox—LDL（30μg／mL）刺激3、6、12、24h后，以荧光定量RT—PCR和Western蛋白印迹法及酶联免疫吸附法（ELISA）检测ABCA1、ICAM-1、MCP-1及IL-1β mRNA和蛋白质表达量；用反义寡核苷酸（100nmol／L）抑制ABCAl的表达，观察Ox-LDL刺激下上述指标的改变。【结果】给予0x—LDL刺激后，巨噬细胞ABCA1、ICAM-1、MCP-1的mRNA和蛋白及IL-1β蛋白质表达均增高；给予反义寡核苷酸转染后Ox-LDL刺激3、6h，上述指标的mRNA表达降低（P〈0．01），12、24h蛋白质表达降低（P〈0．01）。【结论】在巨噬细胞，ABCA1可增加Ox—LDL诱导的炎症因子表达，参与动脉粥样硬化的发生。     

巨噬细胞ABCA1对Ox-LDL诱导的炎症因子的调节及其意义

 【目的】研究在氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导作用下,ATP结合盒转运子A1(ABCA1)对巨噬细胞中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、单核细胞化学趋向蛋白-1(MCP-1)mRNA和蛋白质及白介素-1β(IL-1β)蛋白质表达的影响,在细胞水平证实ABCA1对动脉粥样硬化的影响。【方法】用氟波酯(PMA)刺激THP-1细胞使之转变为巨噬细胞,Ox-LDL(30μg/mL)刺激3、6、12、24h后,以荧光定量RT-PCR和Western蛋白印迹法及酶联免疫吸附法(ELISA)检测ABCA1、ICAM-1、MCP-1及IL-1β mRNA和蛋白质表达量;用反义寡核苷酸(100nmol/L)抑制ABCA1的表达,观察Ox-LDL刺激下上述指标的改变。【结果】给予Ox-LDL刺激后,巨噬细胞ABCA1、ICAM-1、MCP-1的mRNA和蛋白及IL-1β蛋白质表达均增高;给予反义寡核苷酸转染后Ox-LDL刺激3、6h,上述指标的mRNA表达降低(P<0.01),12、24h蛋白质表达降低(P<0.01)。【结论】在巨噬细胞,ABCA1可增加Ox-LDL诱导的炎症因子表达,参与动脉粥样硬化的发生。     

ABCA1基因启动子区-191G/C单核苷酸多态性在冠心病中的意义

目的 研究ABCA1基因启动子区-191G/C单核苷酸多态性(SNP)对血脂的影响及其在冠心病中的意义。方法 用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法(PCR-RFLP)探讨204例冠心病患者和114例正常人的ABCA1基因启动子区-191位点G/CSNP在两组间、冠心病组不同临床表现型之间分布的差异及3种等位基因型与冠心病相关临床指标的关系。结果 冠心病组与正常人组比较,3种等位基因型GG、GC、CC分布频率差异具有显著性,CC基因型在冠心病组中的分布频率明显高于正常人组(P<0.05),C等位基因在冠心病组中的分布频率明显高于正常人组(P<0.01)。在稳定性心绞痛组(SAP)和急性冠脉综合征组(ACS),3种等位基因型GG、GC、CC分布频率差异也具有显著性,ACS组CC基因型明显高于SAP组(P<0.05),C等位基因在ACS组中分布频率明显高于SAP组(P<0.01)。在冠心病组中,3种等位基因型间体重指数、总胆固醇、总甘油三脂、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、极低密度脂蛋白胆固醇等临床指标的比较无显著性差异。结论 ABCA1基因启动子区-191G/CSNP在不影响中国冠心病人群血脂水平的情况下增加冠心病的发生,C等位基因与冠心病的稳定性相关。     

建立一个基于报告基因的靶标筛药系统筛选上调ABCA1基因转录的中药提取物

ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)具有催化外周细胞过量胆固醇和磷脂外向流出的功能。本实验将ABCA1启动子序列克隆到含有荧光素酶报告基因和新霉素抗性基因的pGL3B-neo载体中,并将得到的重组质粒pGL3B-neo/ABCA1转染入人肝癌细胞(hepG2)。通过稀释培养法最终得到含有重组质粒的稳定细胞系SABCA1。利用这个报告基因为基础的药物筛选系统,筛选了100多种中药提取物。通过荧光素酶活性测试,相对活性达到180%以上的有4种中药提取物,并最终挑选能明显激活ABCA1基因启动子的鬼箭羽水提组分进一步研究,得出半数有效浓度(EC50)为48.06 mg/L。此外,利用基于apoA1基因的药物筛选系统验证得出鬼箭羽水提组分也能促进apoA1基因的表达。     

辛伐他汀对人脐静脉内皮细胞ABCA1表达的影响

目的 研究辛伐他汀对人脐静脉内皮细胞的三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达的影响。 方法 体外培养人脐静脉内皮细胞,并分别与0μmol/L、1μmol/L、10μmol/L的辛伐他汀温育24h。采用逆转录聚合酶链反应、流式细胞技术分别检测人脐静脉内皮细胞的ABCA1的mRNA及蛋白表达水平。 结果 随着给药浓度的增加,人脐静脉内皮细胞的ABCA1表达逐步升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 辛伐他汀的调脂途径可能与其上调人脐静脉内皮细胞的ABCA1表达有关。     

过表达KLF4对RAW264.7巨噬细胞ABCA1表达和胆固醇蓄积的影响

目的观察KLF4过表达对小鼠巨噬细胞(RAW264.7)胆固醇蓄积的影响及对ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)表达的影响。方法构建KLF4过表达的RAW264.7细胞株。将细胞分为三组:对照组、ox-LDL组、KLF4过表达+ox-LDL组,后两组加入终浓度为30 μg/mL的ox-LDL处理24 h。分别运用油红O染色观察细胞质脂滴变化,高效液相色谱法（HPLC）检测细胞内总胆固醇(TC)和游离胆固醇(FC)含量,Western blot法检测各组细胞ABCA1及KLF4蛋白表达。结果泡沫细胞模型组的细胞内存在大量的红色脂滴,KLF4及ABCA1蛋白表达及胆固醇含量较对照组升高;KLF4过表达细胞经ox-LDL处理后,细胞内脂滴较模型组明显减少,胆固醇含量下降,ABCA1蛋白表达进一步升高。结论KLF4可上调巨噬细胞ABCA1的表达,抑制ox-LDL诱导的RAW264.7巨噬细胞胆固醇蓄积。     

丹苘软胶囊对NAFLD模型大鼠肝脏ABCA1蛋白表达的影响

目的:观察丹茼软胶囊对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)模型大鼠肝脏ABCA1蛋白表达的影响.方法:采用高脂饲料建立SD大鼠非酒精性脂肪肝模型,并用丹苘软胶囊进行干预治疗28 d,观察该药对大鼠血脂、肝脏脂肪含量的影响,并用Westernblot及免疫组化法观察药物对大鼠肝脏ABCA1蛋白表达的影响.结果:空白组、中药各剂...     

电针丰隆穴对高脂血症患者血脂水平及对巨噬细胞ABCA1表达的影响

目的 探究电针丰隆穴对高脂血症患者的降脂疗效及对巨噬细胞与人血清共培养ATP结合盒转运子A1（ATP binding cassette transporter A1,ABCA1）表达的影响。方法 将120例辨证为痰浊阻遏证高脂血症患者,随机分为电针组、药物组与对照组,每组40例。电针组予以电针针刺丰隆穴治疗;药物组予以口服血脂康治疗;对照组不予以特殊处理。观察治疗前后及治疗后3个月、6个月3组患者总胆固醇（total cholesterol,TC）、三酰甘油（triacylglycerol,TG）、高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C）水平的变化;分别采用RT-PCR法和免疫印迹法检测3组患者巨噬细胞ABCA1 mRNA及其蛋白的表达水平。结果 药物组和电针组总有效率均高于对照组（P＜0.05）。药物组和电针组治疗后TG、TC、LDL-C水平均较治疗前显著下降（P＜0.05）,两组治疗前后TG、TC、LDL-C水平降低程度显著大于对照组（P＜0.05）,两组TG、TC、LDL-C水平差值比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）。电针组治疗后3个月、6个月TC、TG、LDL-C水平与治疗后比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）,药物组治疗后3个月、6个月TC、TG、LDL-C水平均较治疗后显著上升（P＜0.05）;两组治疗后、治疗后3个月、6个月TC、TG、LDL-C水平仍显著低于对照组（P＜0.05）。药物组、电针组ABCA1 mRNA及蛋白表达水平均明显高于对照组（P＜0.05）;两组间ABCA1 mRNA及蛋白表达水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 电针丰隆穴可降低高脂血症患者TC、TG、LDL-C水平,且疗效较药物组稳定,可促进巨噬细胞ABCA1 mRNA和蛋白的表达,促进胆固醇逆转运,降低巨噬细胞胆固醇负荷,减轻炎症反应,从而防治动脉粥样硬化性心脑血管疾病。     

子痫前期患者血清中ABCA1的表达及其对内皮细胞损伤的影响

目的:探讨子痫前期患者外周静脉血清中三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白表达的特点,阐明ABCA1对内皮细胞损伤的影响及可能的机制。方法:选取同期住院、年龄、孕周无明显差异的子痫前期患者40例(按病情轻重分为轻度、重度组)及正常妊娠者20名,采用ELISA试剂盒定量检测3组研究对象外周静脉血清中ABCA1及氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)表达水平的差异。原代分离并培养上述3组研究对象脐静脉内皮细胞 (HUVECs),采用荧光标记的牛血清白蛋白(BSA)检测内皮细胞的单层屏障功能;采用MTT法检测内皮细胞的增殖能力;采用硝酸还原酶法检测内皮细胞的一氧化氮(NO)合成能力;计算OX-LDL/ABCA1比值,并进行相关性分析。结果:与正常妊娠组比较,子痫前期组患者外周静脉血清中ABCA1蛋白表达水平明显降低(P<0.05),而OX-LDL表达水平及OX-LDL/ABCA1比值明显升高(P<0.05);ABCA1与OX-LDL表达水平呈明显负相关关系(r=-0.681,P<0.05)。与正常妊娠组比较,子痫前期组患者通过单层内皮细胞的BSA水平明显升高(P<0.05),内皮细胞增殖能力明显下降(P<0.05);内皮细胞分泌NO水平明显降低(P<0.05)。且病情越严重,上述改变越明显。子痫前期组患者血清中OX-LDL/ABCA1比值与通过内皮细胞的BSA水平呈正相关关系(r=0.791,P<0.05),与内皮细胞的增殖水平呈负相关关系 (r=-0.812,P<0.05),与内皮细胞中NO水平也呈负相关关系 (r=-0.635,P<0.05)。结论:子痫前期患者血清中ABCA1蛋白表达水平明显下降,引起氧化应激,OX-LDL和ABCA1表达失衡,这与全身血管内皮细胞的损伤密切相关,可能是参与子痫前期发生发展的重要机制之一。     

血管内皮生长因子在鼻咽癌中的表达及其临床意义

目的：探讨血管内皮生长因子(VEGF)在鼻咽癌(NPC)中的表达特点及其临床意义。方法：应用免疫组织化学S—P法对47例低分化NPC及10例慢性鼻咽炎患者进行VEGF蛋白产物检到，并进行5年以上随访观察。结果：947例NPC组织中32例(68．0％)VEGF蛋白表达阳性。10例慢性鼻咽炎上皮VEGF表达均为阴性；②伴颈淋巴结转移的NPC组织中VEGF表达阳性率(82．6％)，明显高于不伴颈部淋巴结转移者(54．2％，P＜0．05)；③NPC放疗后局部复发者VEGF阳性表达率(85．0％)，明显高于无局部复发者(55．5％，P＜0．05)；④NPC放疗后＜5年生存期者VEGN日性表达率(84．2％)，明显高于≥5年生存期者(64．3％，P＜0．05)；⑤Ⅲ-Ⅳ期NPC组织中VGEF的表达阳性率(80．0％)明显高于Ⅰ-Ⅱ期表达阳性率(49．0％，P＜0．05)结论：VEGF蛋白过度表达可能在NPC发生、发展过程中起一定作用，检测VEGF在NPC组织中的表达对预测NPC颈淋巴转移和复发、临床分期及评估预后有一定意义。     

血管内皮细胞生长因子在颊癌中的表达及意义

目的：研究血管内皮细胞生长因子在颊癌中的表达,探讨其与颊癌的发生、发展的关系。 方法：采用免疫组织化学S-P法检测40例颊癌组织、30例癌旁组织、10例正常颊黏膜组织中血管内皮细胞生长因子（VEGF）表达水平的变化。 结果：颊癌组织、癌旁组织和正常颊黏膜组织中的VEGF表达率分别为85.0%、26.7%、10.0%,经统计学处理三者表达率比较差异有显著性（χ² =32.26,P<0.01）;随着病理分级的升高,VEGF阳性表达强度增高,与病理分级呈正相关(r_s=0.672, P<0.001）;随着临床分期的升高,VEGF阳性强度增强,与临床分期呈正相关（r_s=0.493, P<0.01）。 结论：VEGF在颊癌发生、发展、浸润及转移中具有重要的作用,可作为一种有价值的标志物。     

肝硬化组织中MMP-1和VEGF的表达及其意义

目的:探讨基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和血管内皮生长因子(VEGF)在肝硬化形成中的作用及其相互关系。方法:用免疫组织化学的方法检测57例肝硬化组织和10例正常肝组织中MMP-1和VEGF的表达。结果:MMP-1和VEGF在肝硬化组织中的表达明显高于正常肝组织中的表达(χ2分别为8.233和10.876,P均<0.05)。MMP-1和VEGF在肝硬化组织中的表达一致(χ2=2.227,P>0.05)。结论:MMP-1和VEGF能促进肝硬化的发展过程。     

血管内皮细胞生长因子在结直肠组织中的表达及其意义

目的　研究血管内皮细胞生长因子 (VEGF)和结直肠癌的关系。方法　应用流式细胞技术 (FCM)对结直肠癌肿瘤组织和癌旁正常粘膜组织标本进行VEGF的测定 ,结果用阳性细胞百分率和平均荧光强度表示。结合临床资料探讨VEGF和结直肠癌的生物学行为以及发生、发展与预后的关系。结果　VEGF在结直肠癌肿瘤组织中阳性细胞表达百分率为 5 7%± 2 9%、阳性细胞平均荧光强度为 2 4 %± 11% ,在癌旁正常粘膜组织标本中的阳性细胞表达百分率为 4 2 %± 2 4 %、阳性细胞平均荧光强度为 16 %± 7% ,两者比较差异具有显著意义 (P <0 0 5 ) ,且VEGF的阳性表达和结直肠癌Dukes分期相关 (P <0 0 1)。结论　血管内皮细胞生长因子 (VEGF)与结直肠癌的发生、发展和预后相关 ,但与结直肠癌生物学分化程度之间的关系还有待进一步验证。     

血管内皮生长因子在急性肝衰竭大鼠中的变化及其意义

目的探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在急性肝衰竭（acute liver failure,ALF）大鼠中的变化及其对肝再生的作用。方法SD大鼠分两组：正常组6只,模型组48只。D-氨基半乳糖（D-Gal）诱发大鼠急性肝衰竭模型,造模后分6、12、24、36、48、72、120、168h8个时间点取大鼠血及肝脏标本,动态观察肝功能的变化。采用免疫组织化学法检测肝组织中VEGF、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）的变化。结果造模后24h,丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TB）等指标显著升高（均P〈0.05）,以48～72h为著。PCNA在正常组表达很少,造模后6h显著升高（P〈0.01）,48h达最高峰,72h则明显下降（P〈0.01）。VEGF在正常大鼠肝组织中表达量很少或不表达,模型组随着时间的推移,VEGF水平逐渐升高,其变化与PCNA一致,48h达高峰,72h开始下降。结论VEGF在急性肝衰竭大鼠中的表达与肝细胞再生程度密切相关,其对肝再生具有重要作用。这可能为急性肝衰竭提供一种新的治疗途径。     

VEGF和受体FLT-1、FLK-1在大肠癌中的表达

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)和其受体(VEGFR:FLT-1、FLK-1)在大肠癌组织中的表达以及与大肠癌临床病理之间的关系。方法应用免疫组织化学SP法,检测82例大肠癌及14例正常大肠组织中VEGF和FLT-1、FLK-1的表达,分析大肠癌组织中VEGF和FLT-1、FLK-1的表达与大肠癌临床病理参数之间的关系。结果大肠癌组织VEGF和受体FLT-1、FLK-1阳性表达率与正常大肠组织比较差异有显著性(P<0.05)。VEGF的表达在有无淋巴结转移组和不同的Duke′s分期中差异亦有显著性(P<0.05)。FLT-1和FLK-1在大肠癌组织的阳性表达呈显著正相关,(rs=0.457,P=0.000)。结论VEGF和受体FLT-1、FLK-1与大肠癌的发生密切相关,VEGF与大肠癌的预后有关。     

人脑胶质瘤血管内皮细胞生长因子的表达及其临床意义

目的　探讨人脑胶质瘤血管内皮细胞生长因子 (VEGF)蛋白和mRNA的表达与微血管密度(MVD)的关系及其临床意义。　方法　 4 5例人脑胶质瘤标本 ,其中星形细胞瘤 (Ⅰ级 )和星形母细胞瘤 (Ⅱ级 )标本 2 5例 ,间变型 (Ⅲ级 )和多形胶母细胞瘤 (Ⅳ级 )标本 2 0例 ,使用LsAB免疫组化方法检测胶质瘤标本的VEGF、内皮细胞相关抗原 (Ⅷ因子 )。使用原位杂交的方法检测VEGFmRNA的表达。　结果　Ⅰ级和Ⅱ级胶质瘤标本VEGF强阳性表达 3例 ,弱阳性表达 2 2例 ,Ⅲ级和Ⅳ级胶质瘤标本VEGF强阳性表达 18例 ,弱阳性表达 2例。Ⅰ级和Ⅱ级胶质瘤标本VEGFmRNA强阳性表达 2例 ,弱阳性表达 2 3例 ,Ⅲ级和Ⅳ级胶质瘤标本VEGFmRNA强阳性表达 17例 ,弱阳性表达 3例。Ⅰ级和Ⅱ级胶质瘤标本MVD平均 ( 7 7± 4 6 )个微血管数 /每平方毫米 ,Ⅲ级和Ⅳ级胶质瘤标本MVD平均 ( 2 3 7± 6 5 )个微血管数 /每平方毫米。Ⅰ级和Ⅱ级胶质瘤与Ⅲ级和Ⅳ级胶质瘤VEGF、VEGFmRNA、MVD之间有非常显著性差异。VEGF和VEGFmRNA与MVD呈正相关。　结论　VEGF与胶质瘤的血管生成密切相关。VEGF是胶质瘤临床和预后的一个有价值的生物学指标     

血管内皮生长因子在脑星形细胞瘤中的表达及其临床意义

脑星形细胞瘤往往伴有血管增生,血管增生程度与其预后密切相关。血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）被认为是促内皮细胞有丝分裂和血管增生的重要血生长因子之一。