白芍总甙对局灶性脑缺血大鼠脑组织炎症信号表达的影响

目的观察白芍总甙对局灶性脑缺血(Focal Cerebral ischemic,FCI)大鼠脑组织Toll样受体4(TLR4)基因表达的作用。方法参照longa等方法制成大鼠局灶性大脑中动脉梗死(MCAO)模型,将80只SD雄性大鼠随机分为假手术组,溶剂组,白芍总甙低、高两个剂量组,采用RT-PCR法检测缺血灶周围脑组织TLR4基因表达水平。结果生理盐水组TLR4基因相对表达均明显高于假手术组(P<0.01);白芍总甙中高剂量组TLR4相对表达量明显低于生理盐水组(P<0.01)。结论生理盐水组大鼠缺血灶周围脑组织TLR4基因高表达,白芍总甙对TLR4表达有抑制作用,这可能是其抗炎作用的机理之一。     

一氧化碳及一氧化氮对局灶性缺血脑组织的影响

目的 研究一氧化碳与一氧化氮对局灶性缺血脑组织脑含水量及血脑屏障通透性的影响。方法 将SD大鼠随机分为4组：为生理盐水组、Hemin组、ZnPP组及Hemin ZnPP组，分别用等量生理盐水、Hemin、ZnPP、Hemin ZnPP腹腔注射，1h后制成MCAO模型。栓塞后24h检测血浆CO及NO浓度、脑组织含水量、血脑屏障通透性。结果 与生理盐水组相比，Hemin组血浆CO浓度明显升高，NO浓度无变化，脑组织含水量下降，血脑屏障通透性减低；ZnPP组血浆CO浓度明显减低，NO浓度上升，脑组织含水量上升，血脑屏障通透性增高；同时注射Hemin ZnPP时CO浓度无变化，NO浓度升高，脑组织含水量上升，血脑屏障通透性增高。结论 NO及CO在缺血早期对脑组织均具有保护作用，两者之间存在着相互作用，CO通过HO影响NOS及NO。     

甘露醇对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织NO及神经细胞凋亡的影响

目的探讨甘露醇对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织NO及神经细胞凋亡的影响.方法SD大鼠48只,随机等分成4组,每组12只.A组:假手术组;B组:模型组,即局灶性脑缺血再灌注组;C组:小剂量甘露醇组;D组:大剂量甘露醇组.采用硝酸还原酶法及TUNEL法分别检测各组大鼠脑组织NO含量及神经细胞凋亡数目.结果 B组脑组织NO含量及神经细胞凋亡数目均明显多于A组(P＜0.01);C组、D组脑组织NO含量及神经细胞凋亡数目均较B组减少(P＜0.05);C组与D组脑组织NO含量及神经细胞凋亡数目比较,无显著差异(P＞0.05).结论甘露醇的脑保护作用不完全与脱水降颅压有关,还可能与下调缺血再灌注后脑组织NO含量、抑制神经细胞凋亡有关.     

芬戈莫德预处理对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织炎症反应的影响

目的 探究芬戈莫德(FTY720)对局灶性脑缺血再灌注大鼠模型炎症)的影响.方法 8周龄(250 g～300 g)SD大鼠雌雄各半,分为假手术组、空白对照组、氯吡格雷组、FTY720组.应用线栓法制作大鼠缺血性卒中模型,不同组别经不同药物处理后进行行为障碍评分,并应用TTC染色观察脑缺血面积及HE染色观察缺血组织神经元...     

尼莫地平对局灶性脑缺血鼠脑血影蛋白的影响

目的 观察大脑中动脉（MCA）缺血后血影蛋白的动态变化,寻找反映脑缺血程度的形态学依据。并评价尼莫地平的脑保护作用。方法 制作大鼠MCA局灶性脑缺血模型。免疫组化法检测血影蛋白含量。缺血后10min,30min,3h,6h和48h观察血影蛋白动态变化。结果 缺血后10min缺血区域血影蛋白表达降低。24h达高峰,尼莫地平可减少缺血区神经元血影蛋白的降解,具有脑保护作用。结论 检测血影蛋白可反映神经元缺血损伤后的早期形态学改变,钙离子拮抗剂一尼莫地平有重要的脑保护作用。     

胰岛素对局灶脑缺血c-jun基因表达的影响

目的观察不同剂量胰岛素对高血压大鼠局灶缺血脑组织ｃｊｕｎ基因表达的影响。方法以肾血管性高血压大鼠（ＲＨＲ）复制大脑中动脉闭塞（ＭＣＡＯ）模型,采用原位杂交技术检测不同剂量胰岛素组和对照组ＭＣＡＯ后３ｈ脑组织ｃｊｕｎ基因的表达。结果与对照组相比,在缺血侧广泛的大脑皮层,低剂量胰岛素组ｃｊｕｎｍＲＡＮ有统计学意义的增加（Ｐ＜００５）,而较高剂量胰岛素组ｃｊｕｎｍＲＮＡ增加更为显著（Ｐ＜００１）。结论胰岛素促进缺血脑组织ｃｊｕｎ基因表达可能是其神经保护作用机制之一,而且这种作用呈剂量依赖性。     

依达拉奉对局灶性脑缺血大鼠脑组织水通道蛋白-9mRNA表达的影响

目的探讨大鼠局灶性脑缺血后脑内水通道蛋白-9（AQP-9mRNA）表达与脑水肿动态变化的关系,评价依达拉奉的干预作用。方法216只雄性Sprague—Dawley（SD）大鼠随机分为3组：假手术组（A组,6只）,生理盐水组（B组,大脑中动脉阻断后6h、12h、24h、48h、72h、5d、7d7个时点,各6只）,依达拉奉处理组（C组,同B组）,术后即刻予以依达拉奉干预。分别测定脑组织含水量;实时荧光定量PCR（realtime quantitative polymerase chain reaction,RT—PCR）法检测mRNA表达;用HE染色方法观察病理形态学改变。结果B组大鼠MCAO后脑组织含水量呈上升趋势,48h达高峰,各时点均高于与A组（P〈0．05）。同时,AQP-9mRNA表达量与脑含水量呈相同趋势改变,相关性分析表明AQP-9mRNA表达量（r=0．788,P〈0．05）与脑组织含水量呈正相关。B组与C组相比,各时点脑组织含水量明显下降（P〈0．05）;AQP-9mRNA表达显著下调（P〈0．05）;组织病理提示脑水肿及神经元损伤程度减轻。结论大鼠脑缺血后脑内AQP-9mRNA表达与脑水肿变化呈正相关,提示AQP-9可能参与大脑中动脉阻断后的脑水肿形成。依达拉奉干预可减少AQP-9mRNA的表达,从而减轻大鼠大脑中动脉阻断后脑水肿,减少神经元坏死,改善神经功能预后。     

金纳多对局灶性脑缺血再灌注大脑皮质神经元凋亡的影响

业已证实,生理性细胞死亡的最终途径均为凋亡,而非坏死,机体正是通过细胞凋亡的方式来清除生理上不需要的细胞,以维持细胞数量的稳定和组织器官正常的生理功能犤1犦。局灶性脑缺血可引起大脑皮质神经元凋亡及Bax与Bcl-2发生相反的变化,这已为诸多的实验研究所证实犤2-4犦,目前,国内外众多学者正在努力探寻能够有效改善局灶性脑缺血的药物。金纳多是从银杏的叶片所提取的化学制剂,有扩张血管及改善血液循环的功效。笔者通过实验研究观察金纳多对局灶性脑缺血再灌注大脑皮质神经元凋亡的影响,从而探讨该药物是否对局灶性脑缺血所致的神经细胞…     

小剂量NOS抑制剂对局灶性脑缺血病理改变影响的研究

目的 研究NO在局灶性脑缺血再灌流过程中对病理改变的影响，并探讨其机制。方法 利用光、电镜及TUNEL法观察了NNLA干预后局灶脑缺血大鼠脑组织的病理学改变。结果 缺血、再灌流1d时光镜下皮质、海马区均可见神经细胞呈坏死样改变；电镜下半影区神经细胞的改变仅见于核染色质凝集(类似凋亡小体)和小胶质细胞核变形，以细胞凋亡为主；小剂量给予NNLA干预后坏死和凋亡的病理改变均较手术对照组轻。TUNEL显示与病理改变结果一致。结论 局灶性脑缺血后，调节NO生成量在适当范围，可以达到保护、防止神经细胞进一步损伤的目的。     

电针对局灶性脑缺血模型大鼠缺血灶周围区突触超微结构的影响

背景：突触是神经系统可塑性最强的部位,脑缺血可导致突触病理性和生理性的可塑性变化。针刺对大脑的功能重组和代偿起着重要作用,针刺对突触重建的促进作用是目前的研究热点。目的：观察电针对局灶性脑缺血大鼠缺血灶周围区皮层突触超微结构的影响,进一步揭示电针治疗脑缺血疾病的可能作用机制。设计、时间和地点：随机对照动物实验,于2008-01/2009-01在广州中医药大学动物实验中心和电镜室完成。材料：雄性Wistar大鼠90只,随机分为3组：假手术组、模型组和电针组,各组又分为术后l h,l,3,7及21 d组5个时间段亚组,6只/亚组。G－6805型电针仪为上海华谊仪器厂生产。JEM-1200EX透射电子显微镜为日本JEOL公司生产。方法：模型组和电针组采用热凝闭大脑中动脉建立局灶性脑缺血模型,假手术组只暴露大鼠大脑中动脉,不予凝闭。电针组术后立即给予电针治疗,取百会（GV20）、大椎（GV14）穴,选用疏密波(疏波: 4 Hz; 密波:20 Hz),电压2.0～3.0 V,电流强度1～3 ｍA,留针30 min,1次/d。其他2组不予针刺处理。主要观察指标：透射电镜观察各组大鼠脑缺血灶周围区皮层突触的超微结构及结构参数（突触后致密物厚度、突触间隙宽度及突触界面曲率）的变化。结果：电镜下可见缺血灶周围区皮层突触结构发生破坏,突触数目明显减少,电针组与模型组比较有显著改善。缺血性脑损伤后PSD厚度、突触间隙宽度及突触界面曲率都明显减小,而电针组的PSD厚度于各时段均明显高于同时段模型组（P﹤0.05,P﹤0.01）,电针组的突触间隙宽度在1d、3d及7d时均明显高于同时段模型组（P﹤0.05）,电针组的突触界面曲率在1d、3d、7d及21d时均明显高于同时段模型组（P﹤0.05,P﹤0.01）。结论：电针从脑缺血早期开始就能明显抑制缺血损伤所致的突触退化、崩解,促进突触结构的修复,提高突触界面结构参数,电针治疗脑缺血的机理可能与其促进突触重建有关。     

电针对局灶性脑缺血大鼠缺血灶周围区星形胶质细胞的影响

BACKGROUND： Astrocytes react sensitively to cerebral ischemia, causing reactive proliferation and activation, which may contribute to their effect in protecting or injuring neuronal regeneration. Whether acupuncture, as a treatment for cerebral ischemia, regulates the activated state of astrocytes has become a focus of recent investigations. OBJECTIVE： To observe the effects of electroacupuncture （EA） on ultrastructure changes and reactive proliferation of astrocytes in the marginal zone of focal cerebral ischemia in rats. DESIGN, TIME AND SETTING： Randomized, controlled animal study. This study was performed at the Experimental Animal Center of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine between December 2007 and July 2008. MATERIALS： A total of 90 male Wistar rats were randomly divided into sham operated, model and EA groups. Each group was subdivided into 1 hour, 1, 3, 7, and 21 days post-cerebral ischemia groups, with six animals for each time point. Rabbit anti-rat glial fibrillary acidic protein （GFAP） and goat anti-rabbit IgG/tetramethylrhodamine isothiocyanate were provided by Beijing Biosynthesis Biotechnology. The G-6805 electric acupuncture apparatus was provided by Shanghai Huayi. METHODS： Heat-coagulation-induced occlusion of the middle cerebral artery was performed to establish a model of focal cerebral ischemia, in the model and EA groups. Middle cerebral arteries were exposed without occlusion in sham operated group. EA was applied immediately after surgery in the EA group, 4/20 Hz, 2.0-3.0 V, 1-3 mA, to Baihui（GV 20） and Dazhui（GV 14）, for 30 minutes. The treatment was performed once a day. The sham operated and model groups did not receive acupuncture. MAIN OUTCOME MEASURES： In the marginal zone of focal cerebral ischemia in rats at different time points after intervention, the ultrastructure changes of astrocytes were observed by using transmission electronic microscopy. GFAP expression in astrocytes was also measured by laser confocal scanning microscopy. RESULTS： Cell swelling and rapid proliferation of astrocytes were observed following cerebral ischemia. In comparison to the model group, the degree of swelling of astrocytes was significantly decreased in the EA group. Compared with the sham operated group at hour 1 post-surgery, there was no significant difference in the expression of average fluorescence intensity of GFAP between the EA and model groups （P 〉 0.05）, while the expression of GFAP in both the EA and model groups increased significantly at days 1, 3, 7 and 21 post-surgery （P 〈 0.01）. The expression of GFAP in EA group was also significantly lower than in the model group （P 〈 0.01, P 〈 0.05）. CONCLUSION： Ultrastructural changes and reactive proliferation of astrocytes appear in the marginal zone of focal cerebral ischemia in rats. EA can relieve the degree of swelling of astrocytes and inhibit GFAP overexpression by activated astrocytes. These effects may be related to its ability to regulate the activated state of astrocytes.     

高热对局灶性脑缺血再灌注大鼠缺血灶5-LO表达的影响

目的观察高热对局灶性脑缺血再灌注大鼠缺血灶5-脂氧酶（5-Lipoxygenase,5-LO）表达的影响,探讨高热对脑缺血再灌注后的影响及机制。方法通过线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,缺血时间为2 h。动物随机分为假手术组（Sham）、缺血再灌注（cerebral ischemic reperfusion,CIR）后正常体温组（normathermia,NT）、缺血再灌注后高热组（hyperthermia,HT）。对大鼠进行神经功能缺损评分和计算梗死体积;使用免疫组化法检测5-LO的表达。结果 （1）大鼠CIR HT组12 h2、4 h、48 h后神经功能缺损评分、梗死体积和缺血灶周边5-LO免疫阳性神经元细胞分别较NT组相应时间点明显增加（P〈0.05）;（2）大鼠CIR后梗死体积与缺血灶周边5-LO免疫阳性神经元细胞数明显相关（r=0.694,P〈0.05）。结论大鼠CIR后48h内高热可加重脑损伤,其机制可能与高热诱发5-LO在缺血灶周边过度表达有关。     

黄芪甲苷对大鼠局灶脑缺血血脑屏障破坏的影响

目的：建立大鼠局灶性脑缺血模型,测定大鼠局灶性脑缺血血脑屏障破坏的程度,并观察黄芪甲苷对局灶性脑缺血后血脑屏障破坏的影响。方法：采用大脑中动脉插线法建立大鼠局灶性脑缺血模型,并采用Evans蓝静脉注射观察其血脑屏障破坏的程度。结果：注射黄芪甲苷组血脑屏障的通透性比单纯的缺血组明显降低。结论：黄芪甲苷是一种脑组织保护剂,可以降低血脑屏障的通透性,保护脑组织。     

海风藤对局灶性脑缺血治疗作用的实验研究

目的 :探讨海风藤提取物对老龄大鼠局灶性脑缺血的治疗作用。方法 :建立光化学诱导的老龄大鼠局灶性脑缺血模型 ,利用TTC染色、HE染色、TUNEL标记、原位分子杂交观察海风藤提取物对缺血灶大小、血脑屏障、缺血灶周围坏死细胞、凋亡细胞及p5 3基因表达变化的影响。结果 :海风藤治疗组大鼠局灶性脑缺血后血脑屏障破坏明显减轻 ,缺血灶周围坏死细胞、凋亡细胞及P5 3阳性细胞的数量较未干预组显著减少 ,梗死灶直径也有减少的趋势。结论 :海风藤具有抵抗缺血后神经细胞DNA损伤、减轻迟发性神经元死亡及神经细胞坏死、发挥缺血性脑保护作用。     

胰岛素对局灶性脑缺血再灌注损伤的作用

目的　观察胰岛素对脑缺血再灌注损伤的治疗作用。方法　制备易卒中型肾血管性高血压大鼠（ Ｒ Ｈ Ｒ Ｓ Ｐ） ,用线栓法复制大脑中动脉阻塞（ Ｍ Ｃ Ａ Ｏ） ,造成缺血６ ｈ 再灌注１８ ｈ ,术后立即及６ 小时后即时使用胰岛素,测定神经功能障碍评分及脑梗死体积的变化。结果　胰岛素可使神经功能障碍评分显著减低,梗死灶体积及其占全大脑体积比值,两半球体积差值显著减小。结论　胰岛素能减轻脑缺血再灌注损伤,早期用药效果更好。     

黄芪甲苷对大鼠局灶脑缺血血脑屏障的破坏的影响

目的：建立大鼠局灶性脑缺血模型,测定大鼠局灶性脑缺血血脑屏障破坏的程度,并观察黄芪甲苷对局灶性脑缺血后血脑屏障破坏的影响。方法：采用大脑中动脉插线法建立大鼠局灶性脑缺血模型,并采用Ｅｖａｎｓ蓝静脉注射观察其血脑屏障破坏的程度。结果：注射黄芪甲苷组血脑屏障的通透性比单纯的缺血组明显降低。结论：黄芪甲苷是一种脑组织保护剂,可以降低血脑屏障的通透性,保护脑组织。     

胰岛素对局灶性脑缺血再灌注大鼠HSP70表达的影响

目的 :探讨胰岛素对脑缺血再灌注损伤的中枢保护机制。方法 :参照ZeaLonga线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型 ,采用免疫组化法检测同一剂量胰岛素 ( 2IU·kg-1)对缺血再灌注不同时限点脑组织HSP70 蛋白的表达情况。结果 :与对照组相比 ,胰岛素能显著上调缺血侧大脑皮质及基底节区HSP70 蛋白的表达 ( χ2 检验 ,P <0 0 0 1) ,表达高峰主要在再灌注后 2 4h。结论 :胰岛素能上调缺血再灌注脑组织HSP70 蛋白的表达 ,这可能是其发挥中枢保护作用的机制之一     

亚低温对局灶性脑缺血大鼠模型C3表达的影响

目的观察亚低温（32～35℃）对局灶性脑缺血后大鼠脑组织C3表达的影响。方法 100只大鼠随机分成假手术组、常温组和亚低温组,各组根据观察时间点分为术后6h、1d、2d、3d、7d五个亚组。建立大鼠左侧大脑中动脉闭塞（MCAO）模型,应用冰袋降温的方法使亚低温组大鼠肛温10min内降至（33℃±1℃）,维持低温6h后复温。假手术组和常温组大鼠保持肛温（37℃±0.5℃）。在各时间点采用神经缺陷评分对各大鼠进行神经功能评分后断头取脑,行苏木素伊红染色观察脑缺血病理学改变,免疫组织化学染色观察不同时间点C3表达情况。结果假手术组大鼠清醒后无神经功能障碍,常温组及亚低温组大鼠清醒后均出现左侧Horner征及不同程度右侧前肢为重的偏瘫,两组大鼠神经功能缺损3d时最明显,7d时均有所减轻。除6h外各时间点亚低温组大鼠神经功能缺损评分均较常温组低（P〈0.05）,各时间点亚低温组大鼠脑组织病理学损伤较常温组轻。在各时间点假手术组大鼠脑组织中C3可见少许表达,各组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。常温组和亚低温组大鼠缺血侧脑组织于缺血后6h补体C3阳性细胞数均开始增加,至3d均达到高峰,到7d时C3阳性细胞数明显减少,与常温组相比,亚低温组各时间点缺血侧脑组织C3表达明显减少（P〈0.05）。结论脑缺血时,缺血侧脑组织C3有表达,亚低温可使C3表达减少。亚低温可能通过降低C3的表达减轻补体级联反应起脑保护作用。     

补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠神经元再生的影响

目的探讨补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠神经元再生的影响。方法Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组，每组32只，模型组、补阳还五汤组采用大脑中动脉阻塞法复制脑缺血模型，假手术组仅切开皮肤、分离右侧颈总动脉即缝合，补阳还五汤组在造模后予以补阳还五汤灌服，每日一次：另设正常对照组8只．不做任何处理。大鼠于实验开始后第一周每日腹腔给予5-溴脱氧核苷一次，此后每周两次。分别于l、7、14、28d时各处死8只大鼠（正常对照组为2只），观察大鼠神经功能，采用免疫组织化学法检测新生神经元数。结果补阳还五汤能显著减轻神经功能缺损；缺血后每组大鼠脑内均有少量新生神经元，补阳还五汤组数量较多，在7、14、28d与模型组比较，差异有显著性（P〈0．05或P〈0．01）。结论缺血后大鼠脑内存在有限的神经再生，补阳还五汤能增强此增生。