重组人促红细胞生成素对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用

目的 制作Sprague-Dawley (SD)大鼠视网膜缺血-再灌注(RIR)损伤模型,探讨腹腔内注射重组人促红细胞生成素(rHuEPO)对急性RIR损伤所致的大鼠视网膜神经元损伤的保护作用及其对热休克蛋白72(HSP72)表达的影响.方法 采用前房灌注的方式建立RIR损伤模型,灌注压110 mm Hg(1 mm Hg=0.133kPa),缺血时间1h;腹腔注射rHuEPO.78只SD大鼠随机分组:正常组6只,EPO组、EPO+槲皮黄酮组、RIR组各24只,均以右眼为实验眼.采用免疫组织化学法和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)分别测定正常对照组和各实验组大鼠再灌注24h、48 h、72 h和1周视网膜中HSP72及凋亡细胞的表达,观察各组大鼠视网膜病理学改变.结果 ①正常组大鼠视网膜中HSP72表达微弱,各实验组大鼠视网膜中HSP72表达自再灌注12 h开始增强,24h达到高峰,随后逐渐减弱,72 h时表达稍高于正常.再灌注后各时间段,EPO组大鼠视网膜中HSP72表达均高于RIR组、EPO+槲皮黄酮组(P＜0.05).②正常大鼠视网膜中几乎没有凋亡细胞.再灌注后12 h,各实验组大鼠视网膜中可见凋亡细胞,24 h达高峰,48 h后凋亡细胞数逐渐减少;再灌注后各组大鼠视网膜中凋亡细胞数比正常组多(P＜0.05).③再灌注后,RIR组,EPO+槲皮黄酮组大鼠内层视网膜明显水肿,炎性细胞侵入,膜结构逐渐破坏;EPO组大鼠视网膜结构保持相对完整,炎性细胞相对较少.结论 ①HSP72在正常大鼠视网膜中表达微弱,RIR损伤后表达增多.腹腔注射EPO可以明显诱导大鼠视网膜中HSP72的表达增多.②EPO可以减少大鼠RIR损伤后视网膜细胞凋亡,减少视网膜内炎性细胞的浸润,保护视网膜结构,对视网膜具有明显的保护作用.其机制可能与使HSP72表达上调有关.(中国眼耳鼻喉科杂志,2012,12:30-35)     

Neuroprotective effect of latanoprost on rat retinal ganglion cells

Background To investigate the neuroprotective effect of intravitreal administration of latanoprost on retinal ganglion cell (RGC) damage induced by N-methyl-D-aspartic acid (NMDA) or optic nerve axotomy.Methods Using Sprague-Dawley rats, retinal ganglion cell damage was induced by either intravitreal administration of NMDA or optic nerve axotomy. Latanoprost at doses of 0.03, 0.3, 3, 30 and 300 pmol was administered intravitreally before NMDA injection or optic nerve axotomy. Retinal damage was evaluated by counting the number of surviving RGCs retrogradely labeled with fluorogold under the microscope.Results Seven days after the NMDA injury, the number of surviving RGCs was significantly increased at doses of more than 30 pmol atanoprost (846±178 cells/mm² P=0.0166) compared with vehicle control (556±122 cells/mm²). Ten days after the optic nerve axotomy, the number of surviving RGC was significantly increased even at a dose of 0.3 pmol (815±239 cells/mm², P=0.0359) compared with control (462±75 cells/mm²).Conclusions Intravitreal administration of latanoprost has a neuroprotective effect on rat RGC damage induced by either NMDA or optic nerve axotomy, while its pharmacological features are different.     

大鼠视网膜缺血再灌注损伤后脑源性神经生长因子对细胞凋亡及caspase-2和caspase-3表达的影响

目的:探讨caspase-2和caspase-3在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的表达与细胞凋亡的关系及脑源性神经生长因子对其的影响及对视网膜的保护作用。方法:实验于2007-02/2007-07在青岛大学医学院附属医院中心实验室完成。前房加压法制作大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型,28只大鼠随机分为正常组和手术组,其中手术组大鼠左眼为缺血再灌注组,右眼为治疗组(BDNF玻璃体腔注射),手术组又按照再灌注后不同时间段分为1,6,12,24,48,72h组。光学显微镜观察并计数视网膜神经节细胞的数量。应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记法(TUNEL)检测视网膜神经节细胞凋亡、免疫组织化学法(SABC)和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测视网膜组织中caspase-2和caspase-3的表达情况。结果:正常视网膜未见凋亡细胞表达,缺血后6～24h可见大量凋亡细胞表达,48h开始下降。凋亡细胞在缺血后24h达到高峰,caspase-2缺血6h后逐渐增加,24h达高峰,然后在48至72h下降。caspase-3表达改变与caspase-2改变基本一致。BDNF治疗组各观察指标表达变化规律与缺血组基本一致,但能明显抑制凋亡细胞的表达,同时使caspase-2和caspase-3的表达降低。结论:视网膜缺血再灌注损伤诱导了神经节细胞的凋亡;BDNF可抑制caspase-2和caspase-3的表达,减少神经节细胞凋亡,对视网膜缺血再灌注损伤有治疗作用。     

小干扰RNA-TLR9对高糖下大鼠视网膜神经节细胞凋亡的抑制作用及其机制

目的探讨Toll样受体9(TLR9)对高糖下大鼠视网膜神经节细胞(RGC)-5凋亡的影响及小干扰RNA-TLR9(si-TLR9)对凋亡的抑制作用。方法将体外培养的RGC-5细胞分为正常对照组、高糖组、高糖+阴性对照组和高糖+si-TLR9组,分别行正常培养、高糖培养、高糖下空质粒转染和高糖下siRNA-TLR9质粒转染细胞。采用实时PCR法检测各组细胞中TLR9 mRNA表达;采用MTT法检测各组细胞存活率;采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;采用caspase-3活性检测试剂盒检测各组细胞中含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase-3)活性;采用Western blot法检测TLR9及B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)和磷酸化(p)-p38MAPK蛋白的表达。结果与高糖+阴性对照组比较,高糖+si-TLR9组细胞中TLR9 mRNA和蛋白的相对表达量明显下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。高糖组和高糖+阴性对照组细胞存活率分别为(78.36±5.13)%和(75.12±4.25)%,较正常对照组的(95.48±7.25)%明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);高糖+si-TLR9组细胞存活率为(86.58±5.32)%,明显高于高糖+阴性对照组的(75.12±4.25)%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。高糖组和高糖+阴性对照组细胞凋亡率分别为(13.23±1.22)%和(12.52±1.38)%,较正常对照组的(2.26±0.15)%明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);高糖+si-TLR9组细胞凋亡率为(7.15±0.24)%,明显低于高糖+阴性对照组的(12.52±1.38)%,差异有统计学意义(P<0.05)。与高糖+阴性对照组比较,高糖+si-TLR9组细胞中bax蛋白表达量明显下降,bcl-2蛋白相对表达量明显增加,差异均有统计学意义(均P<0.05)。高糖+si-TLR9组细胞中caspase-3活性明显低于高糖+阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与高糖+阴性对照组比较,高糖+si-TLR9组细胞中p-p38MAPK蛋白相对表达量明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论下调TLR9表达可抑制高糖诱导的RGC-5细胞凋亡,其作用机制可能与抑制p38MAPK信号通路活化有关。     

视网膜缺血再灌注组织中survivin和caspase-3的表达

目的 研究大鼠视网膜缺血再灌注(RIR)组织中生存素survivin和caspase-3蛋白动态表达的生物学意义.方法 选用SD大鼠42只,随机分为两组:A组为对照组(6只);B组为实验组(每个时间段6只,共6个时间段).B组采用结扎单侧颈总动脉方法 诱导大鼠视网膜缺血60 min,恢复视网膜血供,建立RIR模型.缺血60 min,再灌注1、6、12、24、48、72 h.A组暴露单侧颈总动脉不结扎.按规定时间段(1、6、12、24、48、72 h,)处死动物,取眼球切片行苏木精-伊红染色,survivin原位杂交,caspase-3免疫组织化学观察.结果 实验组survivin表达延迟于caspase-3,再灌注12 h开始增加,24 h达高峰,以后逐渐降低,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01),至72 h survivin表达水平比对照组略微增高.结论 Survivin与caspase蛋白参与大鼠缺血再灌注眼组织细胞的凋亡过程.     

Neuroprotective effect of nipradilol on axotomized rat retinal ganglion cells

PURPOSE: To determine whether nipradilol, a new anti-glaucoma drug, can protect retinal ganglion cells (RGCs) from secondary cell death caused by transection of the optic nerve (ON). METHODS: The ON was transected 0.7 mm from its exit from the eye in Sprague Dawley rats. Nipradilol (1 x 10(-8) - 10(-3) M), timolol, prazosin, or sodium nitroprusside (SNP) (1 x 10(-6) - 10(-4) M) was injected intravitreally fifteen-minutes before the ON transection. Control eyes received the same amount of phosphate buffered (PB). The RGCs were labeled retrogradely by placing gelfoam soaked in fluoro-gold (FG) on the stump of ON. RGCs density was determined by counting the FG-labeled RGCs in flat-mounted retinas 3 to 14 days post-transection. To determine whether the neuroprotective action of nipradilol was due to its NO-donor property, carboxy-PTIO, a NO-scavenger, or KT5832, a protein kinase G inhibitor, was injected with the nipradilol. RESULTS: After ON transection, the number of surviving RGCs after intravitreal injection of 1 x 10(-4) M nipradilol was significantly higher than that following PB injection. This protective activity was dose-dependent. Neither timolol nor prazosin had a neuroprotective effect but SNP protected RGCs in a dose-dependent manner. Carboxy-PTIO and KT5832 decreased the neuroprotective effect of nipradilol. CONCLUSIONS: These results indicate that nipradilol has a possibility of neuroprotective effect on axotomized RGCs, and the effect depended mainly on its NO-donor property.     

MSC移植对视网膜缺血再灌注损伤中p53和caspase-2表达的影响

目的 探讨间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)移植对视网膜缺血再灌注损伤(retinal ischemic-reperfusion injury,RIRI)后凋亡相关基因p53、caspase-2表达的影响.方法 将52只健康SD大鼠随机分为正常组(4只)、模型组(24只)、MSC移植组(24只).前房加压法建立大鼠RIRI模型.贴壁筛选法体外培养SD大鼠MSC,模型组于RIRI后1h予以玻璃体内注射PBS缓冲液,MSC移植组注射MSC.各组SD大鼠分别于RIRI后2h、6h、12 h、24 h、48 h、72 h处死,免疫组织化学染色检测各组SD大鼠RIRI后p53及caspase-2的表达情况.结果 正常组各时间点未见p53及caspase阳性表达.RIRI后2h、6h、12 h、24 h、48h及72 h模型组p53阳性细胞数量分别为(20.50±1.71) mm-2、(26.98±4.23) mm-2、(31.74 ±0.58) mm-2、(50.63±0.67)mm-2、(48.02±0.69)mm-2、(38.90±0.95)mm-2,MSC移植组分别为(14.48±0.47)mm-2、(17.23±0.64) mm-2、(21.64±0.58)mm-2、(28.69 ±1.12) mm-2、(18.73±1.21)mm-2、(17.10 ±0.98)mm-2;模型组caspase-2阳性细胞数量分别为(9.20±0.54)mm-2 、(78.93 ±0.88) mm-2、(391.10±5.62) mm-2、(687.25±6.24) mm-2、(491.75±2.75) mm-2、(153.75±7.63)mm-2,MSC移植组分别为(4.23±0.36) mm-2、(58.03±5.48) mm-2、(282.25±56.82) mm-2、(588.75±9.07) mm-2、(389.75 ±8.18)mm-2、(121.75 ±3.59)mm-2;与各时间点模型组比较,MSC移植组p53及caspase-2的表达均明显减少,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).结论 RIRI后行MSC玻璃体内注射,可抑制p53及caspase-2的表达,减少视网膜神经节细胞的凋亡,对RIRI有一定的保护作用.     

米诺环素对视网膜神经节细胞保护作用的研究进展

视网膜神经节细胞作为中枢神经系统的一部分,是青光眼和视网膜疾病的主要受损细胞。米诺环素是一种半合成的四环素类衍生物,除广谱抗菌功效外,还具有抗氧化、抗凋亡和抑制小胶质细胞活化的作用,对神经元具有一定的保护作用。研究证明米诺环素对视网膜神经节细胞也具有保护作用,在视神经外伤、青光眼和多种视网膜疾病的研究中均显示了不同程度的效果。本文就米诺环素对视网膜神经节细胞的神经保护作用及其作用机制作一综述。     

Neuroprotective and anti-inflammatory effects of eicosane on glutamate and NMDA-induced retinal ganglion cell injury

AIM: To investigate the protective effects, antioxidant potential, and anti-inflammatory mechanisms of eicosane on glutamate-induced cell damage and on N-methyl-D-aspartate (NMDA)-induced retinal ganglion cell (RGC) injury in a mouse model of glaucoma. METHODS: The protective effects of eicosane on the rat R28 retinal precursor cell line were assessed using cell counting kit-8 assays and Hoechst-propidium iodide staining. Intracellular reactive oxygen species (ROS) production was measured using the fluorescent probe 2''-7''-dichlorofluorescin diacetate and flow cytometry. The protective role of eicosane on NMDA-induced RGC injury in a mouse glaucoma model was determined by immunostaining of frozen sections of retina. The effects of eicosane on the metabolome of the retina in mice with NMDA-induced RGC damage were evaluated by liquid chromatography-mass spectroscopy (LC-MS) and untargeted metabolomics analyses. RESULTS: Eicosane treatment significantly attenuated glutamate-induced damage to R28 cells in vitro. Eicosane also protected RGCs against NMDA-induced injury in a mouse glaucoma model. Untargeted metabolomics analyses showed that eicosane increased multiple metabolites, including L-arginine and L-carnitine, in the retina. CONCLUSION: Eicosane has protective effects, antioxidant potential, and anti-inflammatory properties in an in vitro model of glutamate-induced cell damage and in an in vivo model of NMDA-induced RGC injury in mouse glaucoma through modulation of L-arginine and/or L-carnitine metabolism.     

替普瑞酮对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用

背景视网膜缺血-再灌注损伤是眼科常见的病理过程,可引起永久性的视力障碍,严重影响患者的视功能,是目前国内外研究的重点课题之一。目的探讨替普瑞酮对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用。方法44只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组4只、单纯模型组20只和替普瑞酮治疗组20只。单纯模型组及替普瑞酮治疗组造模前分别给予大鼠生理盐水和替普瑞酮灌胃,1周后采用前房加压法制作大鼠视网膜缺血-再灌注损伤模型,并分别于再灌注后6、24、48、72h制备视网膜铺片,经苏木精-伊红染色观察各组大鼠视网膜组织结构的变化,采用免疫组织化学法检测大鼠视网膜中热休克蛋白70（HSP70）和caspase-3的表达。结果视网膜缺血-再灌注后1～6h单纯模型组大鼠角膜及视网膜出现水肿,24h视网膜水肿加重,72h视网膜水肿减轻、结构较紊乱。替普瑞酮治疗组大鼠各时间点视网膜水肿较单纯模型组轻,缺血-再灌注后72h大鼠视网膜结构损害较单纯模型组减轻。正常对照组大鼠视网膜未见HSP70及caspase-3呈阳性表达。单纯模型组大鼠在再灌注后6h可见视网膜神经节细胞（RGCs）中HSP70呈阳性表达,再灌注后24h达高峰,之后逐渐下降。替普瑞酮治疗组各时间点HSP70在大鼠RGCs中的表达较单纯模型组明显增强,差异均有统计学意义（P〈0．05）。再灌注后6h可见单纯模型组大鼠RGCs中caspase-3表达,24h时caspase-3的表达量达高峰,48h后开始下降,72h仅有少量表达,而各时间点替普瑞酮治疗组视网膜中caspase-3的表达较单纯模型组大鼠明显减弱,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论在视网膜缺血-再灌注损伤大鼠模型中,替普瑞酮可通过上调视网膜中HSP70的表达和下调caspase-3的表达对RGCs起保护作用。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对大鼠视神经钳夹伤后视网膜神经节细胞的保护作用

　　目的　观察绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对大鼠视神经钳夹伤视网膜神经节细胞（RGC）是否具有保护作用。方法　72只Wistar大鼠随机分为正常对照组（A组）、假手术+EGCG组（B组）、视神经钳夹+生理盐水组（C组）、视神经钳夹+EGCG组（D组）等4组,每组各18只。B、D组在视神经钳夹或假手术前2 d起给予腹腔注射EGCG  25 mg/（kg·d）,直至手术后2 d,共5 d;随后改为口服2 mg/（kg·d）。C组以生理盐水替代EGCG。每次每组取6只大鼠,采用3%荧光金经上丘逆行标记RGC方法,比较各组视神经钳夹伤后7、14、28 d RGC的存活数量;采用免疫组织化学染色及蛋白免疫印迹方法检测各组视神经组织神经丝蛋白（NF-L）的表达。结果　视神经钳夹伤后7 d,C、D组RGC存活数量分别为（943.61±85.06）、（1 134.45±117.85） 个/mm2;14 d时分别为（812.76±172.07）、（1 021.67±94.02） 个/mm2;28 d时分别为（766.94±171.45）、（1 009.72±126.40）个/mm2。各时间点D组RGC存活数量均显著高于C组（t=3.216,2.609,2.792;P=0.009,0.026,0.019）。各时间点A、B组间RGC存活数量差异无统计学意义（t=0.749,0.403,0.254;P值均＞0.05）;视神经钳夹后7、14、28 d,D组视神经组织NFL表达均高于C组（t=9.847,5.731,2.868;P=0.001,0.005,0.045）。结论　EGCG对大鼠视神经钳夹伤后RGC具有一定的保护作用。      

STAT6基因敲除小鼠视网膜神经损伤的研究

目的研究信号转导与转录因子6（STAT6）基因敲除小鼠在视网膜急性缺血-再灌注损伤后视网膜神经节细胞（RGCs）的损伤情况及视网膜胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达变化。方法野生型C57BL/6小鼠和STAT6基因敲除小鼠各8只,右眼制作急性缺血-再灌注损伤模型,左眼不做任何处理为对照组。急性缺血-再灌注损伤模型采用前房穿刺后生理盐水灌注法,液面高度保持约1.6m相当于眼压120mmHg,维持1h后拔出,再灌注48h后取眼球制作视网膜石蜡切片。TUNEL染色观察2种小鼠RGCs的凋亡,免疫荧光染色法观察视网膜GFAP的表达。结果急性缺血-再灌注损伤48h后,STAT6基因敲除小鼠RGCs的凋亡明显少于野生型C57BL/6小鼠。野生型小鼠损伤后视网膜内GFAP的表达较对照组明显增强,呈纤维样,排列呈栅栏状,由RGCs层贯穿至外核层,而STAT6基因敲除小鼠的GFAP表达增强不明显。结论 STAT6基因敲除对损伤后的RGCs有一定的保护作用,其保护作用有可能是通过降低胶质细胞的反应实现的。     

尼莫地平对兔视网膜缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的　探讨尼莫地平对实验性视网膜缺血再灌注损伤的保护作用及其机理。方法　 72只兔随机分为阴性对照组、模型组、尼莫地平组 ,经前房恒压 ( 110mmHg) ( 1kPa =7.5mmHg)灌注生理盐水 6 0min ,建立视网膜缺血损伤的动物模型。并于造模前 6h及 1h尼莫地平组行尼莫地平溶液灌胃 ,模型组及对照组予等量生理盐水灌胃。观察缺血再灌注损伤后 1、3、7、15d各组视网膜组织学及超微结构变化 ,计数视网膜神经节细胞 (retinalganglioncells,RGC) ,视网膜内层厚度 (thicknessofinnerretinallayers ,TIRL) ,测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶 (superoxidedismutase,SOD)含量。 结果　模型组再灌注后 1d ,视网膜各层结构即有不同程度的损伤 ,3、7、15d出现节细胞数目减少 ,视网膜内层厚度变薄 ,伴随MDA升高和SOD降低 ,上述变化随时间延长而加重。尼莫地平治疗组RGC和TIRL均从第 3天开始较模型组有显著性增加 ,RGC计数 7d时增加最显著 (P <0 .0 1) ;IRL厚度 15d时增加最显著 (P <0 .0 1)。尼莫地平组各时间点MDA含量均低于模型组 ,而SOD活性都高于模型组 ,差异有显著性。各时间点RGC计数减少和IRL厚度降低呈显著正相关 (r =0 .90 5 ,F =2 7.2 7,P <0 .0 1) ;视网膜MDA含量的降低和SOD活性的升高呈显著     

川芎嗪对过氧化氢致大鼠视网膜神经节细胞氧化损伤的抑制作用及机制

目的　探讨川芎嗪对H₂O₂诱导的大鼠视网膜神经节细胞（retinal ganglion cell,RGC）氧化损伤的抑制作用及其机制。方法　在DMEM培养基中培养RGC-5细胞。将细胞分成5组:正常对照组:不做任何处理；阴性对照组:用20 g·L^-1川芎嗪孵育24 h；氧化损伤组:用100 μmol·L^-1的H₂O₂孵育24 h；川芎嗪低浓度组:用20 g·L^-1川芎嗪孵育24 h后加入100 μmol·L^-1的H₂O₂孵育12 h；川芎嗪高浓度组:用40 g·L^-1川芎嗪孵育24 h后加入100 μmol·L^-1 的H₂O₂孵育12 h。通过MTT法测定细胞增殖情况，荧光标记法检测RGC-5细胞内活性氧含量，Hoechst-PI染色观察细胞凋亡情况，使用721D分光光度计测定细胞内超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）及丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量。结果　MTT法测定结果显示，氧化损伤组RGC-5细胞活性明显下降(24.67%±2.90%)，与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。与氧化损伤组比较，川芎嗪低、高浓度组RGC-5细胞活性分别提高到51.33%±4.35%和60.00%±3.65%，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。荧光标记法显示，氧化损伤组DCF荧光信号明显增强，不同浓度川芎嗪干预后，荧光信号强度逐渐减弱。Hoechst-PI染色显示，氧化损伤组凋亡细胞数增多，甚至出现红染的坏死细胞，细胞凋亡率为66.00%±2.98%；川芎嗪干预后，凋亡及坏死细胞逐渐减少，川芎嗪低、高浓度组细胞凋亡率分别为52.33%±4.11%和46.04%±3.52%，两组细胞凋亡率与氧化损伤组比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与阴性对照组比较，氧化损伤组RGC-5细胞内SOD、GSH-PX含量明显下降，MDA含量升高，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。与氧化损伤组比较，川芎嗪高浓度组SOD、GSH-PX含量升高，MDA含量下降，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。与氧化损伤组比较，川芎嗪低浓度组 SOD 与MDA含量变化不大（均为P>0.05），GSH-PX含量升高（P<0.05）。结论　川芎嗪通过改变RGC-5细胞内抗氧化酶表达发挥对氧化损伤的RGC的保护作用。     

Neuroprotective effect of citicoline on retinal cell damage induced by kainic acid in rats

PURPOSE: To examine whether citicoline has a neuroprotective effect on kainic acid (KA)-induced retinal damage. METHODS: KA (6 nmol) was injected into the vitreous of rat eyes. Citicoline (500mg/kg, i.p.) was administered to the rats once before and twice a day after KA-injection for 3- and 7-day intervals. The neuroprotective effects of citicoline were estimated by measuring the thickness of the various retinal layers using hematoxylin-eosin (H&E) staining. In addition, immunohistochemistry was conducted to elucidate the expression of endothelial nitric oxide synthase (eNOS) and neuronal nitric oxide synthase (nNOS). RESULTS: Morphometric analysis of retinal damage in KA-injected eyes showed significant cell loss in the inner nuclear layer (INL) and inner plexiform layer (IPL) of the retinas at 3 and 7 days after KA injection, but not in the outer nuclear layer (ONL). At 3 days after citicoline treatment, no significant changes were detected in the retinal thickness and immunoreactivities of eNOS and nNOS. The immunoreactivities of eNOS and nNOS increased in the retina at 7 days after the KA injection. However, prolonged treatment for 7 days significantly attenuated the immunoreactivities and the reduction of thickness. CONCLUSIONS: The results indicate that citicoline has a neuroprotective effect on KA-induced neurotoxicity in the retina.     

牡荆苷对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤模型中神经节细胞的保护作用

目的:探讨牡荆苷对大鼠视网膜缺血-再灌注(RIR)引起的视网膜神经节细胞(RGCs)氧化应激损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法:将60只SPF级雄性SD大鼠按照随机数字表法随机分为正常对照组、模型组和牡荆苷组,均以右眼为实验眼。模型组和牡荆苷组大鼠采用前房灌注方法建立RIR模型,牡荆苷组大鼠建模后每日按照25 mg...     

AQP-1和VEGF在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的表达

目的:研究大鼠视网膜缺血再灌注损伤后水通道蛋白-1和血管内皮生长因子的表达情况并探讨二者在视网膜缺血再灌注损伤中表达的意义。方法:通过提高眼内压的方法建立大鼠视网膜缺血再灌注模型,于术后6,12,24,48h;3,7d用免疫组化的方法检测水通道蛋白-1和血管内皮生长因子在大鼠视网膜的表达情况,并以正常大鼠视网膜作为对照。结果:正常对照组大鼠视网膜未能检测到血管内皮生长因子的阳性表达,缺血再灌注12h后开始出现表达,48h达高峰,且差异具有统计学意义(P<0.01)。水通道蛋白-1在正常对照组可见到阳性表达,缺血再灌注组随时间增长表达不断增强,7d在外层视网膜也出现表达,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:水通道蛋白-1和血管内皮生长因子在视网膜缺血性疾病中起着重要的作用,二者可能共同影响了视网膜的水代谢过程。