IGF-1在1型糖尿病中的研究进展

1型糖尿病（type 1 diabetes mellitus,T1DM）是一种自身免疫性疾病,由于自身免疫损伤而导致胰岛β细胞功能逐渐丧失。患者一旦发病则表明胰岛β细胞已经破坏殆尽。胰岛素替代治疗虽然能够维持患者生命,但大多数病人会逐渐产生严重的肾脏、血管及神经等并发症。近来发展起来的胰岛细胞移植技术虽然有望成为治疗1型糖尿病的有效手段,但是由于其供体有限以及移植免疫排斥反应,从而限制了它的推广应用。以生物工程技术建立源于β细胞或非β细胞的细胞系作为代理细胞来分泌胰岛素,称得上是一项具有广泛应用前景的方法,然而该技术至今仍停留于临床前阶段,影响它应用的最大障碍是细胞的调控机制尚未最后解决。     

TNF-α通过TNF-R1促进小鼠肾上腺皮质细胞系Y1凋亡

目的:探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)对小鼠肾上腺皮质细胞(Y1细胞)caspase8/3的影响是否主要通过TNF-R1。方法:小RNA干扰法下调Y1细胞中TNF-R1基因的表达,分光光度法分别检测一定浓度TNF-α对Y1细胞及TNF-R1基因干扰抑制后的Y1(miRNA-Y1)细胞caspase8/caspase3影响。结果:miRNA-Y1细胞TNF-R1基因的干扰效率为71.74%;TNF-α处理Y1细胞后,细胞caspase8/3活性明显升高(P<0.05);TNF-α处理miRNA-Y1细胞,细胞caspase8/3活性与未处理组相比无显著差异(P>0.05)。结论:TNF-α对Y1细胞caspase8/3活性的影响主要是通过TNF-R1受体实现的。     

VCAM-1与肿瘤

血管细胞粘附分子-1（vascular cell adhesion molecule 1，VCAM-1）是免疫球蛋白超家族成员之一，是一种重要的细胞粘附分子，广泛表达在活化内皮细胞、平滑肌细胞、骨髓基质细胞（BMSC）、巨噬细胞、树突状细胞及成纤维细胞等表面，其生物学作用十分广泛。VCAM-1可在IL-1，TNF-α等细胞因子作用后表达．所以又称可诱导性细胞粘附分子（INCAM），现命名CD106，内皮细胞表面的VCAM-1可因细胞因子的诱导而高水平的表达。     

细胞凋亡与1型糖尿病

1型糖尿病是一胰岛 β细胞进行性破坏的自身免疫性疾病。β细胞破坏有两种方式 ,即坏死和凋亡。研究表明胰岛β细胞凋亡是 1型糖尿病 β细胞减少和缺失的主要原因[1] 。然而 ,是胰岛 β细胞自身免疫过程导致了 β细胞凋亡 ,还是 β细胞凋亡触发了 β细胞自身免疫反应 ,以及所涉及的主要凋亡信号通路还不甚清楚。1　 细胞凋亡与自身免疫生理条件下 ,细胞凋亡参与中枢和外周自身免疫耐受的形成 ,在Ｔ细胞的发育过程中 ,与自身抗原接触的自身反应性Ｔ细胞克隆通过凋亡被清除。一旦自身反应性Ｔ细胞凋亡障碍 ,就会发生自身免疫性疾病。在 1型糖…     

协同刺激途径PD-1/PD-1 L的研究进展

T细胞的激活是抗原特异性免疫应答的开始,其激活过程需要两个信号:一是由抗原递呈细胞(antigen presentingcells,APCs)呈递的主要组织相容性复合体(major histocompati-bility comples,MHC)结合的抗原肽与T细胞表面的细胞受体1-CD3复合体(TCRs-CD3complex)交联所产生的第一信号     

高温阻滞HeLa细胞于G1期并引起G1期细胞凋亡

目的探讨高温阻滞HeLa细胞周期进程及其与细胞凋亡的关系。方法HeLa细胞经培养增殖后分为37℃、40℃、43℃和45℃共4个温度组。每组分别在0．5、1、2和4h共4个时间点取材，经PI染色在流式细胞仪上检测4种温度条件下，4个时间段时HeLa细胞的凋亡指数和在各细胞周期时相中的指数。结果37℃时，60％的细胞处于G，期，S期及Gz／M期的HeLa细胞分别为17％和18％，约5％细胞凋亡。40℃时，细胞周期受到抑制，G1期的HeLa细胞明显增加，达73％，S及G2／M期的细胞分别为9％和15％，凋亡细胞占3％。43℃时，不但细胞周期受阻，而且凋亡细胞极明显地增加，达19％，G1期细胞为61％，S期细胞为9％，G2／M期细胞为11％。45℃时，细胞凋亡数和在细胞周期各时相的细胞数与40℃时的分布相似。结论温度升至40℃时对HeLa细胞的增殖活动有明显的抑制，使HeLa细胞滞留于G1期。43℃时除了细胞周期受抑制外，凋亡细胞明显增加，这可能是由于细胞周期受阻和高温启动了凋亡机制而诱发了细胞凋亡，凋亡的细胞主要为G1期的细胞。45℃以上的高温对HeLa细胞的杀伤失去对周期时相的选择性，均等地杀伤细胞周期各时相的细胞。     

血管细胞粘附分子-1

粘附分子是指由细胞产生 ,能介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质相互接触和结合的一类分子 ,为具有多种生物活性的跨膜糖蛋白 ,主要位于血管内皮细胞及各种白细胞表面。其种类很多 ,根据结构特点分为 :免疫球蛋白超家族、整合素家族、选择素家族、钙粘附素家族及尚未分类的粘附分子 ,研究较多的是前三种 ,本文对免疫球蛋白超家族成员之一的血管细胞粘附分子的研究进展情况进行综述。1　血管细胞粘附分子 - 1的结构人血管细胞粘附分子 - 1 (vascularcelladhesionmolecule - 1 ,VCAM - 1 )或CD1 0 6为 1 0 0 - 1 1 0KD的跨膜糖蛋白 ,包含 7…     

细胞间粘附分子-1研究进展

细胞粘附分子(Cell adhesion molecles,CAMs)是由细胞产生的介导细胞与细胞间或细胞与细胞外基质之间相互作用的一类膜表面糖蛋白分子.它参与细胞的信号传导与活化,细胞的伸展和移动,细胞的生长及分化,炎症、血栓形成,肿瘤转移及创伤愈合等一系列重要的生理和病理过程[1].迄今已证实了有百余种细胞粘附分子,根据编码粘附分子的基因及其产物的结构功能特点将其分为五大家族,即①钙粘素家族(CF);②免疫球蛋白超家族(IgSF);③整合素家族(IF);④选择素家族(SF);⑤其它尚未分类的粘附分子:如CD44[2].本文对免疫球蛋白超家族成员之一的细胞间粘附分子-1(Intercellularadhesion molecule-1,ICAM-1)的研究进展情况进行综述.     

食道结核1例

患者,男性,23岁,进食梗阻1周,同时伴盗汗、胸痛,自服消炎药后进食梗阻有所好转,停药后复发,再次服药后无效.平素体形消瘦,无肺结核及其他系统结核病史.外院胃镜及病理学活检提示见未分化癌细胞,后再次行胃镜检查,提示黏膜慢性炎伴中度非典型增生,黏膜下见小血管增生,大量细胞浸润,平滑肌细胞、泡沫状细胞及坏死物,其中1粒见成片小细胞,不能除外小细胞癌或间叶源性肿瘤,建议复诊.     

p21Waf1／Cip1甲基化调控细胞衰老

目的：探讨 p21Waf1／Cip1启动子甲基化改变对细胞衰老进程的影响。方法采用克隆、测序的方法定量检测p21Waf1／Cip1启动子在人胚肺二倍体成纤维细胞（2BS）衰老过程中的甲基化改变;RT‐PCR和Western blot检测p21Waf1／Cip1的表达;采用5‐氮杂‐2‐脱氧胞苷去甲基化处理2BS细胞,通过M T T和β‐半乳糖苷酶染色检测细胞衰老。结果 p21Waf1／Cip1启动子在年轻2BS中,CpG甲基化的发生率为1．25％;在中年细胞中为27．27％;在衰老2BS细胞中为0．64％;p21Waf1／Cip1的表达在细胞衰老过程中呈波动性变化,先增加,后降低,到细胞开始衰老时,表达又显著增加;中年2BS细胞经5‐氮杂‐2‐脱氧胞苷处理后,p21Waf1／Cip1表达增加,细胞增殖速率较正常中年细胞显著降低,同时细胞β‐半乳糖苷酶染色阳性率增加。结论 p21Waf1／Cip1去甲基化加速细胞衰老。     

中国Top1与国际Top1的差距——看哈佛大学细胞生物学系

细胞是机体结构和功能的基本单位,细胞生物学以细胞为研究对象,揭示细胞的增殖、分化、遗传、运动、衰老等基本生命活动规律,是生命科学的基石。 细胞生物学是生命科学的基础学科,与医学、药学以及生物学其他学科广泛交叉与融合,成为生命科学的交汇点,并外延至重大疾病的转化医学。     

EB病毒LMP1促进Tet-on-LMP1 HNE2鼻咽癌细胞增殖

目的探讨EB病毒编码的潜伏膜蛋白1（LMP1）对Tet-on-LMP1 HNE2鼻咽癌细胞生物学效应的影响.方法采用Western blot方法、流式细胞术DNA含量分析法、细胞生长曲线、软琼脂集落形成试验和四唑盐（MTT）比色法检测不同剂量的DOX诱导下Tet-on-LMP1 HNE2细胞在不同时间点的增殖效应.结果在LMP1表达逐渐增强的情况下,Tet-on-LMP1 HNE2细胞由G0/G1期加速向S期的行进;细胞生长速度逐渐加快（P〈0.05）;软琼脂集落形成率逐渐上升（P〈0.05）;细胞吸光度值逐渐升高（P〈0.05）.结论EB病毒LMP1促进Tet-on-LMP1 HNE2鼻咽癌细胞增殖.     

PD-L1-PD-1信号通路在肾小管上皮细胞与Jurkat细胞共培养中的作用

目的 了解12-O-十四酰基咐派醇-13-乙酸酯(TPA)对培养的Jurkat细胞表达PD-1的影响以及阻断PD-L1-PD-1信号通路在人近端肾小管上皮细胞株HK2细胞与Jurkat细胞共培养中的作用.方法 RT-PCR、流式细胞计数法检测Jurkat细胞上PD-1的表达,夹心ELISA法检测Jurkat细胞分泌的IL-2. 结果正常培养的Jurkat细胞不表达PD-1 mRNA和蛋白,20 nM的TPA刺激Jurkat细胞24 h后,可见PD-1 mRNA和蛋白表达升高,与对照组比较差异有显著性(P<0.01).HK2细胞与Jurkat细胞共培养上清中IL-2的含量平均为(540±96)pg/mL,当加入抗人PD-L1抗体后,IL-2的平均含量升高为(760±84)pg/mL(P<0.001).结论 TPA刺激Jurkat细胞表达PD-1升高,HK2细胞上的PD-L1可能通过与Jurkat细胞上的PD-1的结合,负调节Jurkat细胞的活性.     

IL-1β及幽门螺杆菌在氧介导GES-1细胞增殖中的作用

目的 研究白细胞介素-1β(IL-1β)及幽门螺杆菌(Hp)对人胃黏膜上皮细胞(GES-1细胞)增殖及超氧自由基阴离子(O2·)的生成和低剂量O2·对GES-1增殖的影响.方法 用3H-TdR掺入法测定cpm值及MTY比色法分析检测总活细胞数来估计GES-1细胞DNA合成及细胞生成,衡量GES-1细胞增殖情况.用细胞色素C还原法测定GES-1细胞、Hp产生O2·水平.检测不同浓度Hp生长曲线及O2·生成情况.结果 IL-1β以剂量依赖性增加GES-1细胞DNA合成及细胞数量.IL-1β增加GES-1细胞产生O2·.GES-1细胞能够自身产生O2·.Hp生长情况与接种的菌量有关,Hp能够自身产生大量O2·,其耐受的O2·浓度明显高于胃黏膜细胞.结论 IL-1β在调节GES-1细胞增殖中有重要作用.IL-1β涉及Hp感染胃黏膜细胞的高增殖反应和胃癌的致癌过程.IL-1β促O2·生成的作用可能在胃相关疾病的防治中具有一定的意义.     

食管癌肉瘤1例

1　病例资料患者男,61岁。以剑突下胀痛月余为主诉入院。查体无阳性体征。食管钡透示胃底贲门部占位性病变待排。于1998年11月25日手术切除食管下段、贲门及部分胃体。病理检查:食管下段距贲门1ｃｍ出现一息肉状肿瘤突向腔内,大小为4ｃｍ×3ｃｍ×3ｃｍ,蒂长1.2ｃｍ,直径0.8ｃｍ,肿物表面可见糜烂。切面灰黄色,质软,未送检淋巴结。镜检:肿瘤由两种瘤细胞构成。一种瘤细胞为梭形细胞,胞核呈卵圆形,空泡状,可见核仁,胞质较丰富,细胞异型性较大,可见瘤巨细胞,梭形细胞主要分布于鳞状细胞癌癌巢之间。另一种瘤细胞为鳞癌细胞,呈巢状分布,分化较…     

CD1d分子研究进展

传统观点认为, 肽类抗原是引起T淋巴细胞免疫反应的唯一物质.然而近年来研究发现,脂类、糖脂类抗原也可通过CD1d介导特异性激活自然杀伤T细胞(NKT细胞).CD1d是CD1家族中的一员,在胸腺细胞、B细胞亚群、表皮朗罕细胞、树突状细胞亚群、肠道上皮细胞中表达,是一类功能类似于MHCⅠ类分子又独立于MHCⅠ分子之外的具有抗原提呈作用的非多肽性跨膜糖蛋白分子.CD1d分子激活NKT细胞后具有抗肿瘤、抗病毒、抗病菌作用.因此,成为国内外学者研究热点.本文拟对CD1d分子的最新研究进展作一综述.     

双特异性磷酸酶1通过视神经萎缩蛋白1抑制血管平滑肌细胞钙化

目的 研究双特异性磷酸酶1(DUSP1)/视神经萎缩蛋白1(OPA1)信号通路对血管平滑肌细胞钙化的作用。方法 采用体外血管钙化模型,β磷酸甘油和氯化钙诱导大鼠主动脉血管平滑肌细胞钙化,茜素红S染色检测细胞钙化,ELISA测定钙含量,TUNEL检测细胞凋亡,Western blot测定DUSP1、OPA1、Runt相关转录因子2(Runx-2)、骨形态发生蛋白2(BMP-2)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达水平。采用细胞转染的方法过表达DUSP1和敲减OPA1表达,观察细胞钙化、钙含量、细胞凋亡率和Runx-2、BMP-2、Caspase-3表达水平。结果 β磷酸甘油和氯化钙诱导血管平滑肌细胞钙化模型中,DUSP1(t=11.951,P<0.001)、OPA1(t=8.487,P<0.001)蛋白表达水平均显著下降。过表达DUSP1能促进OPA1蛋白表达(t=-8.921,P<0.001),减轻血管平滑肌细胞钙化,降低细胞钙含量、细胞凋亡率以及Runx-2、BMP-2、活化的Caspase-3的表达(P均<0.001);而敲减OPA1表达能促进血管平滑肌细胞钙化,增加细胞钙含量、细胞凋亡率以及Runx-2、BMP-2、活化的Caspase-3的表达(P均<0.001)。结论 DUSP1可能通过促进OPA1蛋白表达起到抑制血管平滑肌细胞钙化的作用。     

TGF-β1对白血病KG-1细胞株Gli1表达的影响

目的证明在白血病KG-1细胞株中存在TGF-β信号通路对Gli的调控作用。方法 (1)用0.1、1、10ng/mL TGF-β1分别作用于KG-1细胞,时间分别为6、12、24h。处理结束后收集细胞,提取mRNA,检测Gli1的表达。(2)5ng/mL TGF-β1、5ng/mL TGF-β1联合5μmol SIS3分别作用于KG-1细胞24h。处理结束后收集细胞,提取mRNA,检测Gli1的表达。结果 (1)1～10ng/mL TGF-β1分别作用于KG-1细胞6、12、24h,从12h起并至少持续至24h,其Gli1的mRNA表达较对照组明显减少;(2)5ng/mL TGF-β1、5ng/mL TGF-β1联合5μmol SIS3分别作用于KG-1细胞24h,其Gli1的mRNA表达与对照组比较:5ng/mL TGF-β1组较对照组降低,而5ng/mL TGF-β1联合5μmol SIS3组较对照组明显增高。结论应用TGF-β1可以降低KG-1细胞Gli1的表达,TGF-β1降低KG-1细胞细胞Gli1的表达是通过TGF-β/Smad3途径介导的,可被SIS3所抑制,不依赖于Ptch/Smo途径。     

黄芪建中汤含药血清通过下调Rac1-Pak1/Rock1通路抑制胃癌SNU-1细胞增殖和转移作用机制研究

目的:探讨黄芪建中汤含药血清对胃癌SNU-1细胞的增殖和转移的影响和对Rac1-Pak1/Rock1通路的作用机制。方法:选取状态良好的对数期胃癌SNU-1细胞,分成两组,其中一组用含有黄芪建中汤的血清处理,作为观察组;另一组只用含有血清的细胞培养基处理,作为对照组。CCK8实验检测两组细胞48 h内的体外增殖情况。小动物活体成像检测裸鼠皮下SNU-1细胞的成瘤大小。Transwell实验比较两组细胞的侵袭能力;荧光定量PCR和Western Blot检测细胞中Rac1、Pak1和Rock1基因的表达情况。结果:24 h和48 h,CCK-8结果显示观察组的细胞增殖率均低于对照组(P0.05),观察组裸鼠皮下肿瘤的荧光强度低于对照组(P0.05),肿瘤重量低于对照组(P0.05)。48 h后观察组侵入Transwell下方小室的细胞数量低于对照组(P0.05)。荧光定量PCR和Western Blot的结果均显示与对照组相比,观察组的Rac1、Pak1和Rock1基因的相对表达量均较低(P0.05)。结论:黄芪建中汤能够抑制胃癌SNU-1细胞的增殖和转移能力,其机制可能能够通过调控Rac1-Pak1/Rock1信号通路而发挥作用。     

LIMK1过表达通过LIMK1/cofilin1通路促进人胃癌MGC803细胞增殖与迁移侵袭

目的:探讨LIMK1过表达对人胃癌MGC803细胞增殖与迁移侵袭的影响.方法:真核表达载体转染技术构建过表达LIMK1基因MGC803细胞;RT-PCR和Western blot检测LIMK1、Cofilin1、p-Cofilin1表达;MTT、流式细胞术、细胞划痕和侵袭实验分别检测LIMK1过表达对MGC803细胞增...