一个中国耳聋家系的SLC26A4基因分析

目的 确定一个非综合征型耳聋家系的致病基因。方法 应用聚合酶链反应-直接测序方法，对溶质转运蛋白家族26，成员4（solute carrier family 26，member 4；SLC26A4）基因的所有外显子及其与内含子交界处进行测序寻找突变。结果 在该家系先证者发现SLC26A4基因的N392Y、S448X复合杂合突变，其父亲为S448X的杂合突变，其母亲为N392Y的杂合突变。结论 SLC26A4基因的N392Y、S448X复合杂合突变是导致该先证者耳聋发生的原因。     

非综合性耳聋GLB2与SLC26A4双基因突变分析

报告1例基因遗传检查为GLB235delc杂合同时伴SLC26A41VS7-2A〉G杂合2168A〉G位点杂合突变的耳聋患者。重度耳聋,根据临床床和细胞学研究估计该基因型可能不存在多基因的加性效应。     

变性高效液相色谱法分析非综合征型耳聋人群SLC26A4基因突变

目的 研究非综合征型耳聋(nonsyndromic hearing loss,NSHL)患者SLC26A4基因的突变情况,为临床上NSHL患者基因诊断提供指导.方法 PCR分别扩增SLC26A4基因的21个外显子及其侧翼序列,所得目的 片段用变性高效液相色谱(denaturing high-performance liquid chromatorgraphy,DHPLC)进行突变筛查,有异常峰形的样本进行DNA测序.结果 在所选30例无血缘关系且GJB2基因检测未发现突变的NSHL患者中,共检测出10种SLC26A4基因变异,其中包括7种已知突变,2种未见报道的新突变(F572L和D87Y),及一种已知多态(Ivs11+47T＞C),其中Ivs7-2A＞G是最常见的突变,约占总突变的40%.结论 SLC26A4基因为仅次于GJB2的导致NSHL的相关基因,在(GJB2基因检测未发现突变的NSHL人群中SLC26A4基因的检出率达到23.3%,其中Ivs7-2A＞G是其最常见的突变.     

携带 GJB2或 SLC26A4基因单杂合变异新生儿的Sanger测序分析

目的明确长沙地区GJB2或SLC26A4基因单杂合变异新生儿携带其他变异位点的情况, 探究该地区耳聋基因的变异谱。方法应用Sanger测序技术对462例携带GJB2和(或)SLC26A4基因单杂合变异的新生儿进行耳聋相关基因的外显子测序, 结合数据库和文献检索, 综合分析变异位点的致病性。结果在305例GJB2杂合变异者中, 有143人(46.49%)携带其他变异位点, 其中29人(9.51%)携带c.109G>A可能致病变异, 1人(6.48%)携带c.551G>A致病变异。在153例SLC26A4杂合变异者中, 2人(1.31%)携带c.281C>T变异, 1人(0.65%)携带c.1547₁548ins致病变异。在4例同时携带GJB2和SLC26A4变异的新生儿中, 2人分别携带c.109G>A和c.844T>C(临床意义不明)变异。结论长沙地区携带GJB2和SLC26A4单杂合变异的新生儿中, 其他变异位点的携带率较高, 应用Sanger测序技术对耳聋基因杂合变异进行检测, 能够有效提高耳聋高风险新生儿的检出率, 丰富耳聋基因...     

一个非综合征型耳聋家系的分子病因学分析

目的分析一非综合征型耳聋家系的分子病因,为患病家系遗传咨询和产前诊断提供依据。方法采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)和Sanger测序法对4名耳聋患者进行GJB2和SLC26A4基因编码区及侧翼序列测序。结果先证者GJB2基因序列测定为野生型,检出SLC26A4基因c.240delC和c.2168A>G复合杂合突变。先证者父亲检出SLC26A4基因c.240delC杂合突变,先证者母亲检出SLC26A4基因c.563T>C、c.1746delG和c.2168A>G三个杂合突变,先证者妹妹检出SLC26A4基因c.240delC、c.563T>C和c.1746delG三个杂合突变。其中,SLC26A4c.240delC为未见报道的新发框移突变,其余三个突变均为文献已报道的致病突变。结论该家系先证者、先证者母亲及先证者妹妹均为SLC26A4基因复合杂合突变导致的非综合征型耳聋,先证者父亲仅检出单杂合突变。明确基因突变有助于该家系进行遗传咨询和婚育指导,避免聋儿出生。     

耳聋基因与新生儿听力的同步筛查结果比较

目的了解听力筛查与耳聋基因检测结果的不同意义,为新生儿大规模耳聋基因筛查的可行性和有效性提供理论依据。方法 2013年4月至2013年3月于绍兴市妇幼保健院出生的新生儿,其中有4063名新生儿接受了听力和耳聋基因的同步筛查,并对其结果进行对照和比较。结果 4063例新生儿中840例未通过听力筛查,231例携带耳聋基因。耳聋基因阳性231例中,152例听力筛查通过,听力筛查与耳聋基因阳性率有统计学差异。结论部分迟发型耳聋的儿童可通过新生儿耳聋基因筛查有效地进行基因预警,对新生儿进行听力及基因联合筛查具有临床可行性。     

湖州地区聋哑学校68名聋哑学生耳聋易感基因突变分析研究

目的研究4个耳聋易感基因GJB2、GJB3、SLC26A4、线粒体12SrRNA在湖州市聋哑学校68名聋哑学生中的突变类型分布情况。方法应用飞行时间质谱技术,对68名聋哑学生进行GJB2、GJB3、SLC26A4、线粒体12SrRNA 4个耳聋易感基因检测,检测位点包含以上基因的20个热点突变。结果68名聋哑学生中共检出耳聋基因突变27例,阳性率39.71％,其中GJB2基因突变19例,占70.37％;GJB3基因突变l例,占3.7％;SLC26A4基因突变5例,占18.52％;线粒体12SrRNA基因突变2例,占7.41％。结论在湖州市聋哑学校中,GJB2是最常见的耳聋突变基因,235delC是GJB2基因最常见的突变位点。     

精氨酸转运功能异常相关基因SLC7A2的研究

精氨酸是细胞和有机体生存所必需的,其转运主要依赖于Na+非依赖性、pH不敏感的y+型转运体.其中,SLC7A2基因编码的阳离子氨基酸转运体2(CAT2)是介导精氨酸转运的重要转运体之一.本文就SLC7A2基因及CAT2的功能及此转运体功能异常与疾病的关系作一综述.     

遗传性非综合征型耳聋患者GJB2基因编码序列分析

目的 对6个遗传性非综合征型耳聋家系成员的GJB2基因编码序列进行分析,寻找耳聋患者的致病基因突变,探讨GJB2基因突变致病的遗传模式.方法 提取患者及家系成员的外周血基因组DNA,扩增GJB2基因的编码序列,然后对扩增产物进行DNA测序,对出现重叠峰形的扩增产物进行TA克隆后再测序,确定基因突变是否存在于同一拷贝.结果 6个遗传性非综合征型耳聋家系中,4个家系是GJB2基因突变所致.患者的GJB2基因突变包括235delC、299-300delAT、79G→A+341A→G和109G→A.非致聋突变79G→A与341A→G组合具有致聋效应,109G→A和235delC的杂合突变可能也有致聋效应.结论 GJB2基因突变致聋具有明显异质性,非致聋突变并非完全不致聋,环境因素或其它基因可能参与GJB2基因突变所致耳聋.     

7个非综合征型耳聋家系患者的mtDNA A1555G突变分析

目的探讨非综合征型耳聋家系患者mtDNA A1555G突变及其临床特征。方法应用聚合酶链反应、限制性核酸内切酶酶切和DNA测序技术对7个非综合征型耳聋家系112个成员的mtDNA A1555G突变进行检测，并分析听力临床资料。结果7个家系中所有受检的母系成员mtDNA A1555G突变均为阳性，突变性质含同质性和异质性二种；非母系成员及配偶该突变为阴性。突变的性质与临床表型的有关。结论mtDNA A1555G突变可导致非综合征型耳聋和氨基糖苷类抗生素致聋，其突变性质含均质性和异质性两种，且与临床表型相关。     

山西运城地区新生儿听力与耳聋基因联合筛查结果分析

目的分析山西运城地区6 723例新生儿听力及耳聋基因筛查结果, 了解该地区耳聋基因常见的变异类型。方法回顾性分析2021年1月1日至2021年12月31日在运城地区出生的6 723例新生儿进行听力学检查结果, 包括瞬态诱发耳声发射和自动判别听性脑干诱发电位, 凡其中一项筛查未通过者, 均视为复查未通过。采用遗传性耳聋相关基因检测试剂盒对GJB2、SLC26A4、GJB3和mtDNA12S rRNA等我国常见耳聋变异基因的15个热点变异位点进行检测。听力学复查检查通过组与未通过组组间比较采用χ2检验。结果 6 723例新生儿中, 听力初筛通过6 456例(96.03%), 267例初筛未通过新生儿中有244例接受听力复查(91.38%), 14例未通过听力复查, 听力复查未通过率5.73%(14/244), 听力障碍患者的大概比例为0.21%(14/6 723)。67 23例新生儿中有363例检出耳聋基因变异, 检出率为5.40%(363/6 723)。GJB2基因变异166例, 检出率为2.47%(166/6 723);SLC26A4基因变异136例, 检出率为2.02%(136/6 ...     

榆次地区非综合征性耳聋患者GJB2基因的检测分析

目的通过对榆次地区100q,J非综合征性耳聋患者GJB2基因突变位点的筛查,了解该地区耳聋基因的突变特点,为耳聋的早期诊断提供依据。方法收集榆次地区100例非综合征性耳聋患者的外周血标本,提取全血基因组DNA后,用聚合酶链反应（PCR）对目的片段进行扩增并测序,结果在GenBank上比对分析。结果100例耳聋患者中,检测到90例患者发生基因突变,其中有3,k位点未见报道：c．54C〉A（2．5％）、c．319h〉G（0．5＊／0）、c．512-5l3insAhCG（O．5％）;4个位点突变发生率较高：C．79G〉A（26．50％）、c．235delC（12．00％）、c．341A〉G（20．50％）、c．765T〉C（13．50％）;另外还检测出8个突变发生率较低的位点：c．109G〉A（1．5％）、C．176-19ldell6（1．00％）、C．223C〉T（1．00％）、c．253T〉C（0．50％）、c．299-300delAT（3．50％）、C．328delG（0．50％）、c．368C〉h（0．50％）、C．608T〉C（2．00％）。结论通过对榆次地区耳聋患者GJB2基因的检测分析,可以明确耳聋患者的病因,了解该地区的耳聋基因突变情况,为今后的耳聋患者的病因学诊断提供参考。     

一例新生儿甲状旁腺功能减低-感音神经性耳聋-肾发育不良综合征患儿的临床及遗传学分析CSCD

目的分析甲状旁腺功能减低-感音神经性耳聋-肾发育不良(hypoparathyroidism-sensorineural deafness-renal dysplasia, HDR)综合征的临床表型与基因变异特点。方法对1例HDR综合征新生儿进行全基因组拷贝数变异(copy number variation, CNVs)以及外显子组检测, 并分析其临床资料和相关文献。结果患儿为男性, 新生儿期起病, 表现为特殊面容、通贯掌、骶尾部赘生物。血清学检查提示低钙血症、低甲状旁腺激素。听力检测提示双侧感音神经性耳聋。超声检查提示右肾缺如, CNVs检测提示染色体10p15.3-p13(chr10: 105 001_12 815 001)区存在12.71 Mb的缺失, 全外显子测序提示GATA3基因缺失。患儿经补充钙剂及维生素D治疗, 病情有所好转。结论患儿的10p15.3-p13缺失与甲状旁腺功能减退、感音神经性耳聋和右肾缺如等临床表型相关。HDR综合征是罕见的遗传性疾病, 应提高对其的认识, 减少漏诊。     

直接胆红素增高的黄疸患儿SLC25A13基因热点突变分析

目的建立快速诊断citrin缺陷导致的新生儿肝内胆汁淤积症（NICCD）的方法,初步探讨NICCD在直接胆红素增高的黄疸患儿中所占比例。方法应用聚合酶链反应（PCR）和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）对122例表现为直接胆红素增高的黄疸患儿SLC25A13基因（热点突变分析位点包括：851del4、1638ins23、IVS6＋5G〉A、IVS16ins3kb和IVS11＋1G〉A）进行热点突变分析。结果在122例纳入实验研究的患者中,发现6例患儿为851del4纯合子;2例为1638ins23/IVS6＋5G〉A突变;2例为851del4/IVS16ins3kb突变。还有8例患儿只发现了一个SLC25A13基因突变,其相应等位突变尚不清楚,但是后续的实验证实了这8例患儿为NICCD。暂时未发现有IVS11＋1G〉A突变。在这些热点突变类型中以851del4突变所占比例最高,占了71.4%（20/28）,其次为IVS16ins3kb和1638ins23,各占10.7%。NICCD患儿占总受检人数的14.7%。结论 1.SLC25A13基因热点突变分析能快速准确地诊断NICCD。2.SLC25A13基因突变以851del最为常见。3.NICCD在直接胆红素增高的黄疸患儿中占相当高的比例。     

妊娠相关血浆蛋白A及其基因IVS6＋95（C／G）多态性与急性冠状动脉综合征的相关性研究

目的研究湖北省十堰地区妊娠相关血浆蛋白A（PAPP-A）及其基因IVS6＋95（C／G）多态性与急性冠状动脉综合征（ACS）的相关性。方法随机选择ACS患者219例,其中男性125例。女性94例．平均年龄63．25岁。健康对照者212例,其中男性114例．女性98例,平均年龄59．66岁。取血液标本．应用荧光探针聚合酶链反应和基因芯片技术对其PAP-A基因IVS6＋95（C／G）多态性进行基因分型,用电化学发光法检测PAPP—A浓度。结果ACS组PAPP—A显著高于对照组[（45．92±18．39）pg／mL vs 5（4．11±0．83）pg／mL],差异有显著统计学意义（P〈0．01）;亚组急性心肌梗死（AMI）组[（82．42±26．41）pg／mL]和不稳定心绞痛（UAP）组[（30．52±12．62）pg,mL]血浆PAPP-A都显著高于对照组,差异有显著统计学意义（P〈0．01）．AMI组与UAP组相比差异也有显著统计学意义（P〈0．01）。ACS组GG、GC、CC基因型频率分别为43．38％、41．09％、15．53％,对照组GG、GC、CC基因型频率分别为50．00％、43．40％、6．60％,差异具有统计学意义（P〈0．05）。G、C等位基因频率在ACS组和对照组分别为63．93％、36．07％和71．70％、28．30％,差异也具有统计学意义（P〈0．05）。在ACS组和对照组．各类基因型人群PAPP—A浓度差异无统计学意义（P〉0．05）。结论PAPP-A及其基因IVS6＋95（C／G）多态性与ACS相关．C等位基因和CC基因型是ACS发病的易感危险因素之一。     

河南地区Brugada综合征患者 DSG2、TTN及 GATA4基因的变异分析

目的:探讨河南地区Brugada综合征与DSG2、TTN及GATA4基因变异的相关性。方法:选取100例患者作为研究对象,100名健康体检者作为对照组。检查两组的心电图、超声心动图,留取外周血样,对DSG2、TTN及GATA4基因进行测序,并将结果与标准序列进行对比。结果:研究组心电图检查均发现存在室性心律失常;超声心...     

COL4A5基因新变异所致X连锁显性遗传Alport综合征的临床及遗传学分析

目的:分析一个X连锁显性遗传Alport综合征家系COL4A5基因的移码突变谱及临床表型,为该病的基因诊断和家系咨询提供基础。方法:应用二代测序技术进行基因检测,用Sanger测序对变异位点进行验证。采用病理及免疫荧光方法分别检测患者肾脏基底膜变化及COL4A5蛋白表达情况。结果:患者肾损害逐渐进展,出现肉眼血尿、蛋白...     

一株分离自云南重症手足口病患者的柯萨奇病毒A组4型毒株的全基因组分析

目的:对从云南重症手足口病患者的粪便样品中分离出的1株柯萨奇病毒A组4型(coxsackievirus A4,CV-A4)毒株的全基因组特征和部分区段重组情况进行分析,为深入认识CV-A4的流行和分子进化提供基础数据。方法:分别使用人类横纹肌肉瘤(human rhabdomyosarcoma,RD)细胞、人胚肺二倍体(...     

COL4A5基因剪接变异致Alport综合征患者1例的遗传学分析及体外验证

目的探讨1例Alport综合征(AS)患者的遗传学特征并验证其存在的剪接变异。方法选取2021年1月8日因体检发现尿蛋白3+、尿潜血3+就诊于内蒙古医科大学附属医院肾脏内科的1例AS患者作为研究对象, 收集患者临床资料。抽取患者及其父母的外周血样本, 提取基因组DNA, 利用全外显子组测序及Sanger测序确定基因变异位点, 应用mRNA异常剪接体外验证实验研究变异对转录产物的影响。应用生物学软件分析变异位点的氨基酸保守性并模拟胶原蛋白Ⅳ模型, 分析变异蛋白的三维结果。对患者肾组织进行免疫荧光与免疫组织化学检查, 确认是否存在AS肾脏损伤。结果患者为21岁男性, 门诊尿常规检查显示24 h尿蛋白3.53 g/24 h(大量蛋白尿), 血尿酸491 μmol/L(高尿酸血症)。基因测序结果显示患者COL4A5基因存在剪接变异c.835-9T>A, 患者父母未见该变异。体外实验结果显示c.835-9T>A(p.279₂97del)导致COL4A5基因mRNA的第15外显子缺失57 bp, 造成第279～297位氨基酸残基缺失, 影响COL4A5基因编码...