不同浓度DEET软膏制剂对小鼠日本血吸虫感染防护效果比较

目的探讨不同浓度N,N-二乙基-间-甲苯甲酰胺(DEET)对小鼠感染日本血吸虫的防护效果。方法将昆明鼠随机分为4组,其中3组为实验组,分别涂抹10%、20%、30?ET凡士林软膏;1组为对照组,涂抹不含DEET的凡士林软膏。实验组和对照组小鼠涂药后分别浸泡10min、0.5、1、2、4h,然后感染尾蚴。各组小鼠均经腹部感染尾蚴(50±5)条,于感染后6~7周处死小鼠,经心脏灌注法收集成虫,计数后计算减虫率及进行秩和检验。结果涂药浸泡1、2、4h后感染尾蚴,10%、20%和30?ET凡士林软膏组小鼠获得的减虫率分别为:78.34%、63.15%、40.23%;98.61%、93.37%、75.74%和100.00%、98.61%、93.07%,经统计学分析,3个实验组小鼠体内虫体计数差异均有显著性(H值分别为10.60、10.84和10.80,P均<0.01)。结论DEET凡士林软膏对小鼠感染日本血吸虫的防护效果随DEET浓度的增加而加强。     

不同药物不同途径预防小鼠日本血吸虫感染的效果比较

目的：比较吡喹酮等药物不同途径预防小鼠日本血吸虫感染的效果。方法：将吡喹酮、氯硝柳胺、丙硫咪唑和中药W按一定剂量单独或配伍对小白鼠灌胃给药，进行12h预防日本血吸虫感染试验。同时进行含不同剂量不同透皮促进剂（二甲亚矾、Azone、1，2-丙二醇）吡喹酮霜剂的小鼠12h或24h皮涂防护试验，并用环卵沉淀试验（COPT）检测皮涂小鼠血清抗血吸虫抗体。结果：皮涂各组减虫率均为100%，可达12h或24h完全防护，透皮促进剂中Azone用量少且无臭，COPT灵敏度和特异度均较高。灌胃各组比较，中药W减虫效果明显，但毒性较大；吡喹酮单用及合用效果均好于氯硝柳胺，且吡喹酮与丙硫咪唑合用有一定增效作用，其中吡喹酮140mg/kg合并丙硫咪唑60mg/kg可达12h完全防护。结论：皮涂吡喹酮霜剂效果好于口服预防，透皮剂中Azone较理想，口服预防联合用药可降低剂量和毒性，提高防护效果。     

不同药物不同途径预防小鼠日本血吸虫感染的效果比较

目的　比较吡喹酮等药物不同途径预防小鼠日本血吸虫感染的效果。　方法　将吡喹酮、氯硝柳胺、丙硫咪唑和中药 W按一定剂量单独或配伍对小白鼠灌胃给药 ,进行 12 h预防日本血吸虫感染试验。同时进行含不同剂量不同透皮促进剂 (二甲亚砜、Azone、1,2 -丙二醇 )吡喹酮霜剂的小鼠 12 h或 2 4 h皮涂防护试验 ,并用环卵沉淀试验 (COPT)检测皮涂小鼠血清抗血吸虫抗体。　结果　皮涂各组减虫率均为 10 0 % ,可达 12 h或 2 4 h完全防护 ,透皮促进剂中 Azone用量少且无臭 ,COPT灵敏度和特异度均较高。灌胃各组比较 ,中药 W减虫效果明显 ,但毒性较大 ;吡喹酮单用及合用效果均好于氯硝柳胺 ,且吡喹酮与丙硫咪唑合用有一定增效作用 ,其中吡喹酮 14 0 m g/ kg合并丙硫咪唑 6 0 mg/ kg可达 12 h完全防护。　结论　皮涂吡喹酮霜剂效果好于口服预防 ,透皮剂中 Azone较理想 ,口服预防联合用药可降低剂量和毒性 ,提高防护效果。     

植物防护剂防蚴灵预防日本血吸虫感染的研究

目的　从麻风树籽的提取物中研究开发出一种具有良好防护效果的预防日本血吸虫感染的植物防护剂。方法　防蚴灵防护剂是以麻风树籽为原料 ,采取提取、浓缩和生物技术研制出的新型植物防护剂。并在实验室内进行了防蚴灵直接杀尾蚴试验、防止血吸虫尾蚴感染小白鼠实验与生物毒性试验 ;采用“双盲法”随机选择鄂州市芦洲村第 2组的 3 6人作为实验组 ,第 3组的 2 8人作为对照组 ,观察其现场预防人群感染血吸虫的防护效果。结果　防蚴灵防护剂防止血吸虫尾蚴感染小白鼠保护率为 10 0 % ;对大鼠急性经口、皮 L D50 雌、雄分别均大于 5 0 0 0 m g· kg- 1和 2 0 0 0 m g·kg- 1 。实验组与对照组人群感染率分别为 0、2 1.43 % ,现场预防保护率为 10 0 %。结论　防蚴灵杀血吸虫尾蚴效果好 ,显效时间快 ,持续时间长。防蚴灵的研制成功为控制血吸虫病流行提供了新武器 ,将有着极为现实的防治意义     

日本血吸虫感染对小鼠雄性激素水平的影响

[目的 ]研究日本血吸虫感染对 C5 7BL/ 6小鼠雄性激素的影响。[方法 ]应用放射免疫测定法检测实验感染日本血吸虫动物血清中雄性激素睾酮的水平。 [结果 ]感染日本血吸虫 45 d小鼠血清中睾酮的水平明显低于对照组。 [结论 ]日本血吸虫感染可导致小鼠宿主雄性激素睾酮水平显著降低。     

小鼠感染后不同时间血清对日本血吸虫童虫细胞介导？..

The tests of antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC) were performed to observe the kinetics of in vitro killing of Schistosoma japonicum schistosomula mediated by eosinophils, macrophages or neutrophils with infected mouse sera of different duration. The results showed that when complement was not involved, the killing rates of schistosomula mediated by eosinophils or macrophages began to increase significantly at 4 wk post-infection, reached a plateau in 5-7 wk and 6-8 wk respectively, and then declined to the levels of that at 4 wk till 11 wk. In case of neutrophils, there was no significant cytotoxicity detected. When complement was involved, all the three effector cells could mediate cytotoxicity to schistosomula, with the killing rates higher than those without complement at the correspondent time intervals. These indicate that ADCC appears to be an important ingredient in the acquired resistance to S. japonicum, and demonstrate that eosinophil- and macrophage-mediated cytotoxicity to schistosomula is complement-independent, whereas neutrophil-mediated cytotoxicity to schistosomula is complement-dependent. This method may be of some value for choosing optimal time for vaccination and estimating the effectiveness of a candidate vaccine.     

不同感染度日本血吸虫小鼠的免疫组织化学研究

目的：探讨不同感染度日本血吸虫小鼠肝组织内可溶性虫卵抗原（ＳＥＡ）及其抗体水平和虫卵肉芽肿病变的动态变化与相互关系。方法：免疫组化酶标法和图像分析法。结果：感染后４ｗｋ，３组小鼠肝内均检出ＳＥＡ，此后ＳＥＡ水平逐渐升高，６－９ｗｋ时达高峰，以后逐渐下降。感染后６ｗｋ起，在虫卵周围检出抗ＳＥＡ抗体，８ｗｋ时抗体水平升高，１０ｗｋ后达高峰。３组小鼠在感染后相应时间，肝内ＳＥＡ及抗体水平基本相同。３组小鼠肝内虫卵肉芽肿至感染后５ｗｋ时尚未形成，６－７ｗｋ时虫卵肉芽肿反应最强，其平均直径和面积达最大值，８ｗｋ后逐渐减小。３组小鼠间无显著性差异。结论：肝组织内ＳＥＡ及其抗体水平与虫卵肉芽肿病变密切相关，与感染度无显著关系。     

日本血吸虫与二乙基亚硝胺诱发家兔肝癌的初步实验探讨

本文观察了用日本血吸虫与二乙基亚硝胺诱发家兔肝癌的实验结果。Ａ组每只家兔感染日本血吸虫尾蚴，从感染后６２ｄ开始，每周每兔用１％二乙基亚硝胺水溶液灌胃１次，剂量为２５ｍｇ／ｋｇ，共１５次；结果５只兔中有３只诱发肝癌，诱导时间分别为２７３、３９４和４７６ｄ。Ｂ组每只家兔用Ａ组同法感染尾蚴及投二乙基亚硝胺，但在感染后５５及８０ｄ，分别灌胃给予吡喹酮作２次病原治疗，每次剂量为０．３ｇ／只；７只兔中仅１只发生肝癌，诱导时间为３８５ｄ。Ｃ组５只家兔不感染血吸虫，仅用Ａ组同样方法投二乙基亚硝胺；结果有１只发生肝癌，诱导时间为５７２ｄ。结果表明：家兔灌胃给予二乙基亚硝胺可引起肝细胞肝癌；感染日本血吸虫后，再给予二乙基亚硝胺，不但能增加肝癌发生率，而且也能缩短诱癌的时间；感染日本血吸虫后，用吡喹酮治疗病原体，再给予二乙基亚硝胺则肝癌发生率降低。提示感染日本血吸虫可促进肝癌的发生。     

衰老下调小鼠对日本血吸虫感染的免疫应答

目的研究衰老对小鼠感染日本血吸虫后免疫应答的影响。方法幼龄(2月龄)和老龄(18月龄)雌性BALB/c小鼠各8只,每鼠感染日本血吸虫尾蚴(40±1)条。感染后6周剖杀小鼠,经门静脉灌注收集成虫,计数虫荷;KOH消化法收集肝脏中的虫卵,并计数。制作肝脏连续病理切片,测量两组小鼠肝脏增生期平均单卵肉芽肿的大小,计算单卵肉芽肿体积。常规法制备脾淋巴细胞悬液进行T淋巴细胞增殖实验,计算刺激指数(SI)。ELISA法检测脾淋巴细胞中γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)的表达水平。结果幼龄组小鼠体内的虫荷和每克肝组织虫卵数分别为26.00±2.42和(2.08±0.87)×104,老龄组虫荷和每克肝脏虫卵数分别为19.75±1.95和(1.59±1.05)×104,两组间的差异有统计学意义(P<0.05)。幼龄组肝脏单卵肉芽肿平均体积[(47.02±24.13)×10-3 mm3]明显大于老龄组[(30.13±10.97)×10-3 mm3](P<0.05)。T淋巴细胞增殖实验结果显示,老龄组脾淋巴细胞对ConA的增殖反应(SI:1.08±0.12)低于幼龄组(SI:1.31±0.14),其脾细胞培养上清中I...     

MNNG对日本血吸虫成虫细胞鸟氨酸脱羧酶活性作用的初步研究

目的　观察 N-甲基 - N-硝基 - N-亚硝基胍 MNNG)诱导后日本血吸虫成虫细胞鸟氨酸脱羧酶 ODC)活性的变化。　方法　将日本血吸虫成虫剪碎后 ,收集成虫细胞 ,培养 1wk后依次用 3μg/ ml的 MNNG处理 4 8h,用 RP-MI- 16 4 0加 10 %小牛血清及常量抗生素的培养基清洗数次并继续培养。对照组不用 MNNG处理。分光光度法测定ODC活性。　结果　 MNNG诱导后第 2、3周 ODC活性显著增高。　结论　日本血吸虫成虫细胞内存在 ODC活性 ,MNNG具有增强 ODC活性的作用     

Immunopathology of Schistosoma japonicum infection in athymic mice

Athymic (nu/nu) mice and heterozygous littermate controls (nu/+) were examined 7 and 10 weeks after infection with 10 cercariae of Schistosoma japonicum. Schistosome infection developed normally in both groups of mice and eggs were produced in normal numbers. Nu/nu mice developed small circumoval granulomas with minimal fibrosis while nu/+ mice developed large fibrotic granulomas. Unlike the mononuclear responses to S. mansoni eggs at 7 weeks, those to S. japonicum often were abscess like with narrow rims of liver cell necrosis or microvesicular fatty change. However, evolving granulomas in nu/+ mice were enriched with eosinophils, epithelioid macrophages, immature granulocytes and plasma cells, all scarce in the corresponding nu/nu lesions as were fibroblasts and collagen fibres, thus accounting for their smaller mean size and better healing. Our aggregate evidence shows that normal granuloma formation and cellularity in S. japonicum infection is controlled by T-cells as is the case for S. mansoni, and not by antibodies or immune complexes.     

重组日本血吸虫铁蛋白的表达纯化及诱导小鼠保护性免疫研究

目的　表达、纯化重组日本血吸虫铁蛋白 ,观察其免疫小鼠后抗日本血吸虫的免疫保护作用。方法　用基因重组技术 ,将日本血吸虫铁蛋白基因亚克隆至表达载体 pGMC上 ;在IPTG诱导下 ,重组日本血吸虫铁蛋白得到高效表达 ;用电泳层析法分离纯化日本血吸虫铁蛋白 ;用SDS -PAGE和Western -blot鉴定表达纯化产物 ;用纯化的重组铁蛋白免疫小鼠三次 ,分别在 0、2、4周进行。第 6周每鼠经腹部感染 4 0± 1条日本血吸虫尾蚴。 4 2天后剖杀冲虫 ,计数虫数及肝卵数。结果　纯化的重组铁蛋白分子量为 4 0kD ,具有较好的免疫原性 ,能被日本血吸虫感染兔血清识别。与对照组相比 ,纯化重组铁蛋白免疫小鼠组的减虫率为 2 4 5 % ,减卵率为 4 5 8%。结论　重组日本血吸虫铁蛋白不仅在大肠杆菌中得到高效表达 ,而且纯化的铁蛋白分子能诱导抗日本血吸虫病的保护性免疫。     

芍药苷对感染血吸虫小鼠肝纤维化的影响

目的探讨小鼠感染日本血吸虫后经吡喹酮治疗的不同时期,给予芍药苷对肝组织虫卵肉芽肿和纤维化的影响。方法以日本血吸虫尾蚴感染BALB/c小鼠构建肝纤维化模型,随机分为(Ⅰ)杀虫前给药组、(Ⅱ)杀虫同时给药组及(Ⅲ)杀虫后给药组。除正常组外,杀虫治疗、芍药苷治疗组和对照组小鼠分别于感染后12d、42d和72d给予芍药苷和对照,并于102d、132d和162d处死。检测透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢP)、羟脯氨酸(Hyp)、虫卵肉芽肿大小、肝纤维化分级以及胶原Ⅰ的表达。结果在组Ⅰ和组Ⅲ,芍药苷明显降低血清中HA、PⅢP和肝组织中Hyp的含量,减小虫卵结节并降低肝纤维化严重程度分级,降低胶原Ⅰ的表达(P<0.05或P<0.01);在组Ⅱ,大部分指标没有明显差别(P>0.05)。结论芍药苷无论是早期或延后给药,都具有抑制虫卵肉芽肿,减少胶原的生成从而对抗小鼠血吸虫性肝纤维化的作用。     

吡喹酮透皮给药治疗小鼠日本血吸虫病效果

目的 观察吡喹酮透皮剂对不同发育阶段日本血吸虫感染和再感染早期的治疗效果。方法 各试验组昆明小鼠均感染日本血吸虫尾蚴40±2条, 对一次感染和再感染早期的昆明小鼠进行透皮治疗。各试验均设对照组, 感染后42 d 解剖冲虫, 计算减虫率、 减肝卵率和减毛蚴孵化率, 评价透皮剂的治疗效果。ELISA检测初次感染和再感染不同时期IgG 抗体水平的动态变化。结果 首次感染后1、 7、 14、 21、 28 d减虫率分别为48.9%、 0、 28.8%、 84.3%、 70.2%; 再感染后1 d和 14 d减虫率分别为85.6%和90.8%。首次感染后随感染时间延长, 小鼠体内特异性IgG抗体水平逐渐上升; 再感染后小鼠体内针对小鼠抗虫卵可溶性抗原特异性IgG 阳性和阴性比值明显上升。结论 吡喹酮透皮剂对不同发育阶段的日本血吸虫均有不同程度的杀灭作用, 对再感染早期童虫的减虫效果更好。     

日本血吸虫单性感染虫体与复性感染虫体的比较

目的 对单性感染或复性感染钉螺的日本血吸虫发育结果进行观察。 方法 采用单个毛蚴感染单个钉螺,26 ℃恒温箱中饲养,60 d后逸蚴感染小白鼠（单性感染）,40 d后解剖小白鼠,以检获的成虫性别鉴别各个钉螺中的尾蚴性别。再分别以单性尾蚴和混合双性尾蚴感染鼠、兔,40 d后解剖观察宿主感染情况及虫体。 结果 单性感染小鼠和兔后解剖获得日本血吸虫雄虫或雌虫。复性感染小鼠或兔后检出的虫体主要有3种形态：雌雄合抱、雄虫和雌虫,极少数能看到雄虫合抱未发育成熟雌虫的现象。单性感染的鼠、兔肝脏均未见虫卵,而复性感染的鼠、兔肝脏均查见虫卵。单性感染的雄虫能发育成熟,但体型较合抱成熟的雄虫略小,仅凭肉眼难以与合抱成熟雄虫区分;而单性感染的雌虫则不能发育成熟,镜下卵巢不易见到或仅见到雏形,体型明显细小。 结论 单性感染的雄虫和雌虫体型比复性感染合抱成熟的雄虫和雌虫的体型小,单性感染的雄虫能发育成熟,而雌虫则不能发育成熟。在解剖哨鼠时,即使未查见肝脏虫卵,仍需检查肠粘膜血管中是否有单性感染的血吸虫。     

Immunopathology of Schistosoma japonicum and S. mansoni infection in B cell depleted mice

To investigate the role of antibody in the pathogenesis of hepatic granulomas around schistosome eggs, mice were depleted of B cells by treatment from birth with anti-IgM serum and were subsequently infected with Schistosoma japonicum or S. mansoni. Anti-IgM treatment did not affect the development or fecundity of the worms or the larvae within the egg shells. Normal circumoval granulomas were present in the livers of B cell depleted mice 7 or 8 weeks after infection clearly indicating that antibody and immune complexes have no necessary role in the formation of granulomas. Hepatic fibrosis was also similar in B cell depleted and untreated mice at these times. Ten weeks after infection the size of S. japonicum egg granulomas in untreated mice had decreased but no change in the size of granulomas had occurred in B cell depleted mice, and hepatic fibrosis was more marked in treated than in untreated mice. Similar changes were noted in S. mansoni infected mice, assayed at 8 and at 12-13.5 weeks after infection. The effects of B cell depletion in the more chronic infections may be related to the absence of antibody but could also be caused by an influence on B cell-dependent suppressor T cells.     

维生素E对小鼠日本血吸虫性肝损害保护作用的实验研究

目的探讨维生素E（VitE）对小鼠日本血吸虫性肝损害的保护作用及其机制。方法日本血吸虫尾蚴皮肤敷贴法感染小鼠构建日本血吸虫病模型，随机分5组：正常对照组、模型组及VitE高、中、低剂量组，感染尾蚴同时分别给予高、中、低剂量（150、50、5mg／kg）VitE，灌胃给药，每日1次共8周，8周末处死动物，HE、VG染色及透射电镜对肝组织进行病理学检查，应用分光光度法检测肝组织丙二醛（MDA）、羟脯氨酸（Hyp）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性，采用免疫组织化学SP法检测肝星状细胞（HSC）标记物α-平滑肌动蛋白（aSMA）表达情况，并检测血浆丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平。结果VitE抑制模型组肝脏虫卵肉芽肿反应，减小肉芽肿直径（P〈0．01），减轻炎性细胞浸润和肝细胞变性、坏死程度；降低ALT和AST水平（P〈0．01）；降低肝组织MDA含量（P〈O．01），提高SOD活性（P〈0．01）；减少α—SMA阳性细胞数（P〈0．01），均呈剂量效应关系。VitE对肝脏Hyp含量无明显影响（P〉0．05）。结论VitE对小鼠日本血吸虫性肝损害具有保护作用，其机制与VitE抑制肝脏虫卵肉芽肿和炎症反应、抗脂质过氧化作用、抑制HSC活化和增殖及保护肝脏细胞免受自由基损害有关。     

重组日本血吸虫脂肪酸结合蛋白在不同佐剂条件下的免疫效果观察

目的观察重组日本血吸虫脂肪酸结合蛋白在几种佐剂条件下的免疫预防效果。方法用E.coli表达日本血吸虫脂肪酸结合蛋白基因,制备日本血吸虫脂肪酸结合蛋白与GST的重组融合蛋白(rSj14/GST),分别以福氏完全佐剂(FCA)/福氏不完全佐剂(FIA)、卡介苗(BCG)和免疫刺激复合物(ISCOM)作为佐剂免疫昆明系小鼠,比较攻击感染后的减虫效果。结果以BCG为佐剂皮内免疫和以ISCOM为佐剂皮下免疫分别诱导了34.3%和36.0%的减虫率;而以FCA/FIA为佐剂进行免疫,虽然诱导了较高的抗体反应,但几乎没有产生明显的减虫效果(8.5%)。结论BCG和ISCOM均是rSj14/GST的适宜佐剂。