早期自然流产患者妊娠组织的细胞凋亡与中医辨证分型关系的探讨

目的：从细胞凋亡角度探讨早期自然流产的发生机制及与中医辨证分型的相关性。方法：对10例正常妊娠人工流产病例和20例早期自然流产病例的绒毛与蜕膜组织进行研究，应用原位杂交法检测早期自然流产患者妊娠组织中baxmRNA和bel-2mRNA的表达。结果：早期自然流产组的绒毛与蜕膜细胞凋亡指数（AI）较正常早孕时明显增高（P〈0．01），阴虚血热型早期自然流产组细胞凋亡的表达，高于正常妊娠人工流产对照组。结论：细胞凋亡在孕卵发育过程中起重要作用，绒毛和蜕膜组织中大量的细胞凋亡是其形态学退变的根本原因，进而阻碍孕卵的发育；阴虚血热是导致早期自然流产发生的主要病因。治疗时应以齐阴清热、固肾安胎为大法。     

自然流产绒毛及蜕膜细胞凋亡的基因调控研究

目的应用流式细胞仪和免疫组织化学技术检测自然流产绒毛及蜕膜细胞凋亡及bax、bcl-2基因调控．探讨自然流产发病机制和基因调控机制,为进一步自然流产基因治疗研究提供理论依据。方法对20例自然流产病例和正常早孕吸宫流产病例的绒毛与蜕膜组织进行研究。常规光镜观察细胞形态学变化;DNA倍体分析检测细胞凋亡及其周期变化;免疫组化S-P法检测bcl-2／bax基因蛋白表达率比值。结果自然流产绒毛、蜕膜组织形态学结构均出现不同程度的退形性改变,自然流产中绒毛及蜕膜细胞凋亡率均较正常妊娠明显增高（P〈0．05）。蜕膜凋亡率尤其明显。自然流产的绒毛和蜕膜中抑凋亡基因bcl-2表达也较正常早孕时下降（P〈0．001）,而促凋亡基因bax表达自然流产中显著增高（P〈0．001）,结果与细胞凋亡的发生一致。结论细胞凋亡在胚胎的发育过程中起着重要作用,自然流产绒毛和蜕膜组织中大量的细胞凋亡是其形态学退变的重要原因,并进而阻碍了胚胎的发育。     

Survivin在反复自然流产患者妊娠组织中的表达异常

目的 探讨反复性自然流产(RSA)患者绒毛及蜕膜组织中细胞凋亡抑制蛋白survivin的表达异常,及与反复性自然流产的相关性. 方法 应用免疫组化法检测26例RSA患者和20例正常早孕妇女绒毛及蜕膜组织内survivin在蛋白水平上的表达,并进行图像分析、比较、计算其平均阳性单位值(PU). 结果 Survivin在正常早孕及自然流产绒毛、蜕膜中均有表达,正常早孕组绒毛滋养细胞、蜕膜细胞survivin的表达分别为PU=15.12±2.05、PU=10.81±2.02,RSA组绒毛滋养细胞、蜕膜细胞survivin的表达分别为PU=8.86±2.31、PU=6.93±2.15,正常早孕组survivin的表达明显强于RSA组(P＜0.01),有显著性差异. 结论 凋亡抑制蛋白survivin在妊娠绒毛及蜕膜组织中低水平表达,可能是导致反复性自然流产的一个重要原因.     

组织蛋白酶B和L在早期妊娠绒毛及蜕膜中的表达

目的 观察组织蛋白酶B（cathepsin B，CB）和L（cathepsin L，CL）在人早期妊娠绒毛及蜕膜中的表达．探讨它们在胚胎着床及发育过程中的作用。方法 研究组包括：正常早期妊娠行人工流产者30例、早期自然流产者25例、正常分泌期子宫内膜lO例和葡萄胎15例。应用免疫组织化学法检测CB和CL的表达。结果 CB、CL主要阳性表达于正常早期妊娠滋养层细胞和蜕膜细胞：CB在正常分泌期内膜．正常早期妊娠蜕膜、自然流产蜕膜中的阳性率表达分别为10％（1／10）、83.3％（25／30）、32．0％（8／25）；CL则分别为0、63.3％（19／30）、32．0％（8／25）；CB和CL在3组间的表达有显著性差异（P〈0．05）。CB在早期妊娠绒毛、自然流产绒毛、葡萄胎组织中表达强阳性率分别为10．0％（3／30）、0.66．7％（10／15）；CL则分别为26．7％（8／30）、4．0％（1／25）、80．0％（12／15）。CB和CL在3组间的表达有显著性差异（P〈0．05）。结论 CB和CL在正常和异常妊娠蜕膜和绒毛中的表达差异提示它们胚胎着床过程中可能起着很重要的作用。     

球状C1q受体在自然流产中的表达及生物学意义

目的:探索球状C1q受体（gC1qR）在自然流产中的表达及其生物学意义。方法:收集自然流产和人工流产蜕膜组织各30例,以滋养层细胞系HTR-8/SVneo为研究对象,免疫组织化学SP法检测gC1qR蛋白在蜕膜组织中的表达及定位情况;免疫印迹技术及实时荧光定量聚合酶链反应分别检测gC1qR蛋白及mRNA的相对表达水平;流式细胞技术对滋养层细胞凋亡情况进行评估,透射电镜对滋养层细胞凋亡形态进行观察。结果:gC1qR蛋白及mRNA在自然流产蜕膜组织中的表达明显高于人工流产的蜕膜组织（P<0.01）;过表达gC1qR基因可明显增加滋养层细胞的凋亡率（P<0.01）,且电镜下呈现典型的凋亡形态学改变。结论:gC1qR基因与自然流产的发生紧密相关,有望成为诊断、治疗及预防自然流产的潜在靶点。     

Stathmin在早期自然流产组织中的表达

目的探讨细胞周期调节蛋白Stathmin与早期自然流产发生的相关性。方法选择早期自然流产和早孕人工流产患者的绒毛和蜕膜组织各30例,采用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)和免疫组织化学法检测两组患者绒毛和蜕膜组织中Stathmin的表达。结果 Stathmin主要表达于胎盘绒毛和子宫蜕膜组织的细胞浆中,Stathmin在早期自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的表达均显著低于早孕人工流产患者,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Stathmin可能与早期自然流产的发生相关。     

自然流产病例的绒毛与蜕膜细胞增殖和细胞凋亡的研究

目的　从细胞增殖与细胞凋亡的角度探讨自然流产的发生机制。方法　对 30例正常早孕吸宫流产病例和 30例自然流产病例的绒毛与蜕膜组织进行研究。常规光镜观察细胞形态学变化 ;免疫组织化学S P法检测增殖细胞核抗原 (PCNA)在细胞中的表达 ;用DNA缺口原位未端标记技术 (TUNEL)检测细胞凋亡 ;免疫组化S P法检测bcl 2 bax基因蛋白表达率比值。结果　自然流产绒毛组织形态学结构均出现程度不同的退行性改变 ,绒毛的细胞滋养细胞及蜕膜中增殖指数 (PI)较正常早孕时明显减少 (P <0 0 1) ,而合体滋养细胞中从未发生过增殖 ,PI为 0 ;与此相反自然流产绒毛的细胞滋养细胞、合体滋养细胞及蜕膜中凋亡指数 (AI)较正常早孕时明显增多 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,同时 ,早孕流产的绒毛及蜕膜中促 /抑凋亡基因bcl 2 bax表达率的比值也较正常早孕时下降 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,结果与细胞凋亡的发生一致。结论　细胞增殖和凋亡可能在孕卵发育过程中起着重要作用 ,绒毛和蜕膜组织中大量的细胞凋亡是其形态学退变的根本 ,并进而阻碍了孕卵的发育。     

胚胎停止发育患者绒毛中细胞凋亡的表达意义

目的研究胚胎停止发育患者绒毛及蜕膜组织中细胞凋亡与细胞增殖的表达和临床意义。方法收集孕3个月以内胚胎停止发育患者绒毛、蜕膜组织和正常早孕绒毛、蜕膜组织各30例。用DNA末端缺口标记技术检测绒毛和蜕膜组织中的凋亡细胞,用免疫组织化学SP法检测增殖细胞核抗原。结果①胚胎停止发育患者的绒毛及蜕膜组织中PCNA的阳性表达显著减少,与正常早孕对照组比较有显著性差异（P〈0．01）。②胚胎停止发育患者的绒毛及蜕膜组织内细胞凋亡指数显著增加,与正常早孕对照组比较差异有显著性（P〈0．05）。结论正常早孕和胚胎停止发育患者绒毛、蜕膜组织内均可见到PCNA阳性表达与凋亡细胞,细胞的增殖和凋亡的平衡与维持妊娠密切相关,平衡失调可能是引起胚胎停止发育的主要病理过程。     

胎盘催乳素在米非司酮抗早孕流产后刮出物组织中的分布

对米非司酮抗早孕流产后子宫出血的３０ 例患者的刮出内膜组织,用免疫细胞化学方法显示胎盘催乳素（ｈＰＬ） 。结果：刮出组织含有正常子宫内膜组织、残留蜕膜组织和少量绒毛膜绒毛。ｈＰＬ 阳性物质分布于残留绒毛滋养层细胞、子宫内膜和蜕膜中的滋养层碎片及滋养层细胞芽,在残留蜕膜组织中还可见很多ｈＰＬ 阳性细胞（ 绒毛外滋养层细胞） 。药流后刮出组织ｈＰＬ 阳性细胞的显示有助于及时发现侵入母体组织细胞的增生和癌变。     

凋亡调控因子在早期自然流产患者绒毛滋养层细胞中的表达

目的比较凋亡调控因子Survivin及caspase-3在自然流产及反复自然流产组患者绒毛中的表达,探讨两者在早期自然流产发生中的作用及相关性。方法随机抽取正常早孕组、首次自然流产组及反复自然流产组患者各30例,应用免疫组织化学SP法检测Survivin与caspase-3在绒毛滋养层细胞中的定位和表达。结果首次自然流产组及反复自然流产组患者绒毛中Survivin的表达均低于正常早孕组,而caspase-3则高于正常早孕组,差异均有显著性统计学意义（P〈0.05）。两流产组间患者绒毛中这两者的表达则无统计学意义（P〉0.05）。流产组患者绒毛中Survivin与caspase-3呈负相关。结论早期自然流产的发生可能与Survivin表达减少caspase-3表达增加引起滋养层细胞过度凋亡有关。     

GM-CSF及其受体与早期自然流产的关系研究

目的：探讨母胎界面局部细胞因子GM-CSF及其受体与早期自然流产的发生的关系．方法采集2009年8月至2011年12月间来云南省第三人民医院进行人工流产及自然流产病例的绒毛及脱膜组织各30例,用放射免疫法检测2组外周血中绒毛膜促性腺激素（HCG）含量,利用免疫组织化学和Western blot检测绒毛及脱膜组织中巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）及其受体（GM-CSFR）表达情况．结果自然流产组HCG值与人工流产组相比明显下降（P〈0.05）．绒毛及脱膜组织中GM-CSF和GM-CSFR 2组均有表达．与人工流产组相比,绒毛组织中,自然流产组的 GM-CSFR增加（P〈0.05）,GM-CSF的表达上调,但无统计学意义（＞0.05）．脱膜组织中,自然流产组的GM-CSF和GM-CSFR均增加（P〈0.05）．结论在脱膜组织中,适量的GM-CSF和GM-CSFR浓度维持妊娠的继续,浓度过高则不利于妊娠,可能是自然流产的原因之一．     

巨噬细胞移动抑制因子mRNA在早期自然流产者蜕膜组织中的表达

目的研究巨噬细胞移动抑制因子(MIF)mRNA在早期自然流产者蜕膜组织中的表达,并探讨其与早期自然流产的关系。方法选择2010年11月至2012年1月深圳市罗湖区人民医院收治的自然流产者40例(自然流产组),同期选择要求进行人工流产的健康早孕妇女40例(正常妊娠组)。采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测蜕膜组织中MIF mRNA的表达水平,并进行比较。结果自然流产组蜕膜组织MIF mRNA相对定量表达为1.19±0.25,显著低于正常妊娠组1.33±0.27,两组比较差异有统计学意义(t=2.502,P<0.01)。结论 MIF mRNA在早期自然流产患者蜕膜组织中表达水平下降,说明其可能在早期自然流产的发生、发展中起重要作用。     

IL-17、RANTES及其受体在早期自然流产蜕膜组织中的表达及意义

目的检测IL-17、T细胞激活上调性表达分泌因子s（RANTES）及其受体CCR5在正常早孕及早期自然流产患者蜕膜组织中的表达,并探讨其意义。方法30例早期自然流产患者（流产组）和30例正常早孕妇女（对照组）的蜕膜组织,分别应用RT—PCR、ELISA方法检测蜕膜组织中IL-17、RANTES及CCR5的表达并进行线性相关分析,同时应用免疫组织化学方法染色定位其蛋白的表达。结果①早孕蜕膜组织中均有IL—17mRNA、RANTESmRNA、CCR5mRNA的表达,流产组蜕膜组织中IL-17mRNA、RANTESmRNA、CCR5mRNA的表达水平高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。②ELISA法定量检测结果与PT—PCR结果趋势一致。③IL-17与RANTES的表达呈正相关。④IL-17定位于蜕膜细胞胞质,RANTES定位于蜕膜细胞胞质及胞膜,CCR5定位于蜕膜细胞胞核。结论早期自然流产患者蜕膜组织中IL-17、RANTES及其受体CCR5的表达水平较正常早孕者高,这种改变可能是导致早期自然流产的重要原因。     

基质金属蛋白酶抑制基因RECK在早孕自然流产绒毛组织中的表达及意义

目的观察早期自然流产患者绒毛组织中RECK基因（基质金属蛋白酶（MMP）抑制基因）的表达及其与MMP-2、-9之间的关系。方法采用半定量RT-PCR和Western blotting法检测20例早期自然流产患者和20例正常早期妊娠绒毛组织中RECK、MMP-2和MMP-9基因的表达情况。结果①早期自然流产患者绒毛组织中MMP-2及MMP-9的mRNA表达水平低于正常早期妊娠者,差异有统计学意义（P〈0.05）;RECKmRNA的表达高于正常早期妊娠者,差异有统计学意义（P〈0.05）。②自然流产患者绒毛组织中MMP-2、MMP-9蛋白表达低于正常早期妊娠者,差异有统计学意义（P〈0.05）;RECK蛋白表达高于正常早期妊娠者,差异有统计学意义（P〈0.05）。③RECK蛋白与MMP-2、MMP-9蛋白之间存在明显的负相关。结论RECK表达的增加进而抑制MMP-2、MMP-9的活化,致使滋养细胞侵袭能力下降,可能与孕早期自然流产的发生有关。     

组织蛋白酶B和L在早期妊娠绒毛及蜕膜中的表达

目的 观察组织蛋白酶B(cathepsinB,CB)和L(cathepsinL,CL)在人早期妊娠绒毛及蜕膜中的表达,探讨它们在胚胎着床及发育过程中的作用。方法 研究组包括:正常早期妊娠行人工流产者30例、早期自然流产者25例、正常分泌期子宫内膜10例和葡萄胎15例。应用免疫组织化学法检测CB和CL的表达。结果 CB、CL主要阳性表达于正常早期妊娠滋养层细胞和蜕膜细胞。CB在正常分泌期内膜、正常早期妊娠蜕膜、自然流产蜕膜中的阳性率表达分别为10%(1/10)、83.3%(25/30)、32.0%(8/25);CL则分别为0、63.3%(19/30)、32.0%(8/25);CB和CL在3组间的表达有显著性差异(P<0.05)。CB在早期妊娠绒毛、自然流产绒毛、葡萄胎组织中表达强阳性率分别为10.0%(3/30)、0、66.7%(10/15);CL则分别为26.7%(8/30)、4.0%(1/25)、80.0%(12/15)。CB和CL在3组间的表达有显著性差异(P<0.05)。结论 CB和CL在正常和异常妊娠蜕膜和绒毛中的表达差异提示它们胚胎着床过程中可能起着很重要的作用。     

Expression of Apoptosis and Inducible Nitric Oxide Synthase in Trophoblastic Cells in Early Spontaneous Abortion

The pregnant immune,especially the function of placenta barrier has been thefocus of recent study in this field.Placenta,as an immune organ,produces a lageamountof activated molecule and isregulated by neural- immune- endocrinenetworks.Butwhat is more importantis thatplacenta actas a barrier to protectthe fetus frommaternal infection or immune challenge.Syncytiotrophoblast has been confirmed tobe the key to the barrier' s function.With its dysfunction,the possibility ofpenetration of the barri…     

Ki-67的表达在胎盘绒毛滋养细胞生存活性评价中的作用

目的：探讨Ki-67的表达在胎盘绒毛滋养细胞生存活性评价中的作用.方法：应用免疫组化MaxVision法检测Ki-67在48例自然流产、48例葡萄胎和25例早期正常妊娠（作为对照组）妇女的胎盘绒毛滋养细胞中的表达情况.结果：葡萄胎组中Ki-67强阳性表达显著高于对照组和自然流产组（P＜0.01）.结论：在胎盘绒毛滋养细胞中,Ki-67表达降低可能导致自然流产,过表达则可导致肿瘤的发生.