HPLC法测定蛇足石杉及闽浙马尾杉不同部位的石杉碱甲含量

蛇足石杉Huperzia serrata(Thumb.)Trey.及闽浙马尾杉P.minchegensis Ching同属于石杉科植物,其含有的石杉碱甲(Huperzine A),在临床上用于治疗记忆障碍及老年性痴呆[1-2]。我们采用HPLC法测定蛇足石杉及闽浙马尾杉不同部位的石杉碱甲含量,为石杉碱甲药物资源的开发利用提供实验依据。     

产石杉碱甲新资源研究方法探索

从老年痴呆症药物需求研究到药物生产开发全方位视角对近期治疗老年痴呆症一线药物-石杉碱甲来源及生产的发展与动态进行综述,并对今后产石杉碱甲菌株研发方法进行了展望。源于天然植物的药物开发历史悠久且富有生命力,植物提取获得石杉碱甲为最简便方式,但植物提取获得石杉碱甲已面临植物资源匮乏瓶颈;化学合成生产石杉碱甲仍是研发重要途径之一,但合成步骤繁琐、代价昂贵,很难获得纯光学活性的合成物;利用从野生蛇足石杉内分离获得的内生真菌及其发酵液中提取石杉碱甲正在取得成效;依托生物技术改造菌株获得石杉碱甲将会是工业化生产开发的一个重要方向。     

正交函数分光光度法测定石杉碱甲片剂中石杉碱甲的含量

本文采用正交函数分光光度法，以二次正交多项式，波长点数Ｎ＝６，波长间隔Δλ＝４ｎｍ，中间波长λｍ为３１５ｎｍ，测定石杉碱甲片中石杉碱甲的含量，方法平均回收率为１００．６％，采用该法以消除赋形剂对测定的影响。     

HPLC法测定蛇足石杉中石杉碱甲含量

目的 考察蛇足石杉不同产地、不同部位中石杉碱甲（Hup A）和总碱含量；比较不同提取方法对石杉碱甲含量的影响。方法 采用RP－HPLC法测定Hup A的含量。结果 Hup A在根、茎、叶中的含量煤戏、叶＞根；贵州、广东和安徽产地的Hup A含量分别为0.018%,0.021%,0.020%，提取方法之间差异不显著。结论 Hup A含量在蛇足石杉中的分布为地上部分大于地下部分。不同产地Hup A含量有一定差异。     

石杉碱甲药源植物研究进展

石杉碱甲（Huperzine A）从石杉科（Huperziaceae）石杉属（Huperzia）植物蛇足石杉（Huperzia serrfta（Thunb．ex Murray）Trev．）中分离得到,其临床治疗阿尔茨海默症（Alzheimer’s disease,AD）疗效显著。由于石杉碱甲的化学合成在短时间内难以克服合成步骤繁琐、成本高、活性低等特点,自然资源的挖掘和开发成为解决石杉碱甲短缺的有效途径之一。故对近年来石杉碱甲药源植物研究所取的成果和难点进行总结,以期为今后的研究提供一定参考。     

HPLC法测定6种石杉科植物中石杉碱甲的含量

目的 测定6种石杉科植物中石杉碱甲的含量。方法 用2％酒石酸溶液提取总碱，HPLC法测定，外标法定量。结果 石杉碱甲在所测定的5种石杉科植物蛇足石杉、皱边石杉、四川石杉、金丝条马尾杉、柳杉叶马尾杉中均有较高分布，分别达到0．0481％，0．0579％，0．0706％，0．0345％，0．1961％，在闽浙马尾杉中含量较少，仅为0．0061％。结论 方法简便、准确，可用于石杉碱甲资源的寻找。     

4种石杉科植物中产生石杉碱甲的内生真菌的分离及初步鉴定和HPLC测定石杉碱甲的含量

目的 从4种石杉科植物中得到产生石杉碱甲（Huperzine A）的内生真菌,改进筛选内生真菌的培养条件。方法 消毒后的材料在培养基上培养和分离其内生真菌,HPLC检测代谢产物,显微形态鉴定菌种。结果 从蛇足石杉,长柄石杉,伏贴石杉,柳杉叶马尾杉中分离得到32株内生真菌,其中从柳杉叶马尾杉分离出的2株内生真菌能够产生石杉碱甲,分别是HA15.（芽胞菌属）和HA23.（葡萄孢属）。结论 首次从柳杉叶马尾杉中分离出能产生石杉碱甲的内生真菌。     

蛇足石杉生物碱成分的研究（Ⅱ）

从石杉科植物蛇足石杉中分离出３个生物碱。经光谱分析鉴定，分别为８－ｄｅｏｘｙｓｅｒｒａｔｉｎｉｎｅ（Ⅰ）、ｌｙｃｏｄｉｎｅ（Ⅱ）和ｐｈｌｅｇｍａｒｉｕｒｉｎｅ Ｂ（Ⅲ）。其中Ⅱ和Ⅲ为首次从该植物中分得。     

蛇足石杉生物碱成分的研究(Ⅵ)

蛇足石杉 H uperzia serratum( Thunb.) Trev.为石杉科石杉属植物 ,自从该植物中分得一个强效胆碱酯酶抑制剂福定碱即石杉碱甲 [1,2 ]以来 ,为进一步寻找生物活性成分 ,笔者又从中分得十几个生物碱成分[3～ 5] 。国内外文献报道及初步药理实验表明 ,具明显生理活性的化合物主要集中在类似 Selagine骨架的结构类型中 [6] 。笔者在继续寻找新的生理活性成分中 ,又分得 2个生物碱单体 (碱 和 ) ,经光谱鉴定分别为马尾杉碱 M和异福定碱 ,这两个化合物均为 Selagine型结构生物碱 ,并为首次从该植物中分得。初步药理实验表明 ,碱 也有较好的…     

皱边石杉内生真菌资源遗传多样性的ISSR分析

目的 采用ISSR标记技术从分子水平探讨皱边石杉内生真菌资源的遗传多样性,建立皱边石杉内生真菌资源遗传分化指纹图谱,为筛选可产石杉碱甲的目标菌株提供快捷的判别依据。方法 以从皱边石杉中分离的100株内生真菌为材料,建立其ISSR优化反应体系并分析其遗传多样性;TLC、HPLC检测发酵产物。结果 优化筛选的10条ISSR引物对皱边石杉内生真菌进行遗传多样性分析,共扩增出3 975条清晰条带,多态性条带占100%。遗传相似系数为0.59～0.96,在0.64水平,皱边石杉内生真菌可分为11类;在0.67水平,第I类又可分为5个亚类。采用引物UBC868对13号菌株及皱边石杉基因组DNA扩增,在500、200 bp均具有清晰的扩增条带,发酵产物经TLC和HPLC检测,发现13号菌株与宿主植物皱边石杉同样可产生石杉碱甲。结论 皱边石杉内生真菌资源遗传多样性高,遗传距离较远,遗传基础较宽,与13号菌株同属一类的内生真菌可作为石杉碱甲生产的潜力菌株进行重点筛选和诱变。     

HPLC测定九龙山国家自然保护区石杉科4种植物石杉碱甲的含量

目的：采用HPLC法测定九龙山国家自然保护区石杉科4种植物中石杉碱甲的含量。方泼：以2％酒石酸溶液提取总碱,用高效液相法测定4种植物全草和不同器官石杉碱甲的含量。结果：石杉碱甲在采集的4种植物及其不同器官中均有分布,其中柳杉叶马尾杉的石杉碱甲含量很高,达到1981．27μg/g,远远大于其他植物,石杉碱甲在不同器官中含量不同,总体表现为：叶〉茎〉根。结论：九龙山自然保护区4种石杉植物石杉碱甲含量较高;植物不同器官中石杉碱甲含量存在差异。     

蛇足石杉化学成分和药理作用研究进展

结合国内外文献综述蛇足石杉生物碱和三萜化学成分和药理作用,尤其重点归纳蛇足石杉石松生物碱的结构、类型。石杉碱甲为高选择性的乙酰胆碱酯酶抑制剂,优于国外已上市的老年痴呆症治疗药物,是首先从蛇足石杉中发现的lycodine生物碱类型,从蛇足石杉分离的该类型其他生物碱也具有较强的类似活性,具备进一步研究与开发的潜力。     

石杉碱甲联合尼莫同治疗老年性痴呆的临床观察

目的观察石杉碱甲联合尼莫同治疗老年性痴呆的临床疗效。方法确诊的29例AD患者,随机分成对照组和石杉碱甲联合尼莫同治疗组。治疗8w后应用临床记忆量表,比较两组记忆改善情况。行头部SPECT评价脑血流灌注状况,同时观察不良反应。结果石杉碱甲联合尼莫同治疗组治疗8w后总有效率86.67%,明显优于对照组（P〈0.05）。石杉碱甲联合尼莫同能广泛改善AD患者脑区血流灌注。治疗组患者的大脑各叶局部脑血流灌注明显高于对照组（P〈0.05）。结论石杉碱甲联合尼莫同对治疗老年性痴呆有肯定疗效。     

石杉碱甲治疗老年性痴呆36例疗效观察

观察国内研制的胆碱脂酶抑制剂石杉碱甲的临床疗效，以石杉碱甲治疗老年性痴呆３６例，采用心理测验量表对病人的记忆商，痴呆程度，精神状态，自理生活能力进行积分评估，结果表明，该药显效率６１．１％，总有效率８８．９％，均显著优于脑复康治疗的对照组（Ｐ〈０．０１），治疗中除出现轻度外周胆碱能副作用外，无肝，肾及心血管方面毒性影响，观察认为，石杉碱甲是治疗老年性痴呆认知障碍的较理想药物。     

石杉碱甲治疗阿尔茨海默病的有效性和安全性的多中心双盲随机对照试验

目的：与安慰剂双盲对照评估石杉碱甲治疗轻、中度阿尔茨海默病（AD）患者的临床疗效和安全性。方法：来自全国15个中心202例可能或可能的AD患者随机接受石杉碱甲或安慰剂治疗12周。石杉碱甲组100例,400μg/,安慰剂组102例,每6周评估1次。结果：202例患者进入意向性治疗分析,其中197例患者通过末次观察前推法（LOCF）完成统计。比较石杉碱甲组和安慰剂组各种疗效评估量表的评分自基线水平至治疗6周和12周时评分变化的均值,以及治疗12周时评分和基线相比有改善的患者的比例：治疗12周和基线相比,简易精神状态检查（MMSE）平均改善2．7分;AD评估量表的认知分量表（ADAS－Cog)得分平均改善4．6分,改善至少4分者56．1％;ADAS非认知副表（ADAS－non-Cog)得分平均改善1．5分,临床好转的患者为59．2％;日常生活活动量表（ADL）得分平均改善2．4分,改善至少10％的患者32．7％;印象变化量表（CIBIC plus)获1－3分的患者为70％,1－2分者27．8％。这些指标和安慰剂组比较,两组间的差异有显著意义。总的不良反应率石杉碱甲组为3％,均为轻度、一过性反应。结论：石杉碱甲可显著改善AD患者认知功能、行为和心境障碍、日常生活活动能力和总体功能,具有良好的安全性。     

哈伯因致窦性停搏1例

哈伯因(石杉碱甲，Huperzin eA)是从我国中草药蛇足石杉中提取到的一种高效、高选择性的中枢乙酰胆碱酯酶抑制剂。据文献报道哈伯因有导致心动过缓的可能，但未见导致窦性停搏的报道。本文现报告1例，供同行参考。     

石杉碱甲新型衍生物的合成及其对神经细胞活性的影响

目的：合成石杉碱甲新型衍生物并探索其神经保护作用。方法：石杉碱甲与不同取代基的磺酰氯反应合成一系列新型石杉碱甲衍生物,经熔点、电子自旋共振波谱联合质谱分析(electron spin resonance-mass spectrometry,ESR-MS)和氢核磁共振波谱法(hydrogen nuclear magnetic resonance spectroscopy,¹H-NMR)等方法鉴定结构。运用淀粉样β蛋白片段25-35(β-amyloid peptide 25-35,Aβ_25-35)诱导神经细胞SH-SY5Y损伤,通过四甲基偶氮唑盐比色法测定石杉碱甲新型衍生物对SH-SY5Y细胞的保护作用。结果：合成8个石杉碱磺酰基取代新型衍生物HA-1～HA-8,石杉碱甲、HA-4、HA-6和HA-7可逆转Aβ_25-35对神经细胞SH-SY5Y的损伤,衍生物HA-4和HA-7活性优于石杉碱甲。结论：石杉碱甲新型衍生物HA-4和HA-7的神经保护作用优于母体石杉碱甲。     

石杉碱甲的研究进展

石杉碱甲(huperzine A,HupA)是来源于蕨类植物蛇足石杉的一种倍半萜生物碱,为高效、高选择性、可逆性的乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制剂。HupA在治疗阿尔茨海默病(Alzheimersdisease,AD)方面的显著疗效,近年研究还证明HupA有神经保护和预防化学武器的潜力,引起世界各国药学工作者广泛关注和研究。现系统的综述石杉碱甲在药学研究各领域中的研究进展。     

石杉碱甲对103例精神分裂症患者认知功能障碍的对照研究

目的:探讨益智药石杉碱甲(石杉碱甲)对改善精神分裂症认知功能障碍的疗效。方法:通过对103例精神分裂症使用抗精神病药合并石杉碱甲(研究组)与103例精神分裂症不合并石杉碱甲(对照组)的治疗,比较8周后两组的改善效果。结果:研究组韦氏智力量表和韦氏记忆量表、H-R神经心理测验在治疗前后均有较明显变化,说明石杉碱甲对认知功能障碍有明显改善效果。结论:石杉碱甲能改善慢性精神分裂症认知功能障碍,是当前改善精神分裂症认知功能障碍的一种有效方法。     

石杉碱甲胶囊剂与片剂的溶出度研究

本文目的为测定石杉碱甲胶囊和片剂的体外溶出速率。用中国药典９５版溶出度测定法第三法测定石杉碱甲胶囊与片剂的溶出度，在Ｗｅｉｂｕｌｌ概率纸上求出参数，用ｔ检验法进行比较；建立了ＨＰＬＣ法测定溶出液中石杉碱甲的方法。结果显示片剂开始释放较快，胶囊有一滞后时间，胶囊与片剂的Ｔ５０分别为５．５ｍｉｎ和４．４ｍｉｎ，Ｔ８０分别为１１．６７ｍｉｎ和１１．３３ｍｉｎ，两者在１０分钟后溶出百分数无显著性差异，２０