Ryanodine对离体大鼠心脏缺血—再灌注损伤的影响

了解经典的钙通道阻断剂维拉帕米和调节内钙释放的药物Ｒｙａｎｄｉｎｅ对心肌细胞内钙超载的影响。方法；通过离体大鼠心脏缺血－再灌注方法。结果：发现维拉帕米对钙超载无阻断作用，而高浓度Ｒｙａｎｄｉｎｅ能比较好的地阻断钙超载。     

缺血预处理对离体大鼠心脏缺血再灌注的保护作用

应用Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ灌流模型,研究离体大鼠心肌缺血预处理（ＩＰＣ）对心脏缺血再灌注时心功能指标及乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）和丙二醛（ＭＤＡ）含量的影响。结果：ＩＰＣ可使缺血再灌期心肌收缩和舒张性能显著改善,心肌细胞受损明显减轻,心肌ＭＤＡ含量也明显降低。结果表明：ＩＰＣ对心肌缺血再灌注损伤有良好的保护作用,而减轻氧自由基对细胞的损伤作用可能是其保护机制之一。     

阿魏酸钠对离体大鼠缺血心肌再灌注损伤的影响

为探讨缺血心肌再灌注损伤的防治措施，采用改良的Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ法建立离体大鼠缺血心肌再灌注模型，观察阿魏酸钠在缺血心肌再灌注过程中的作用。结果显示：阿魏酸钠能够抑制丙二醛及血栓素Ｂ２的产生，减轻心肌水肿及乳酸脱氢酶的释放，并能促进６－酮－前列腺素Ｆｌα的产生。结果初步提示：阿魏酸钠具有抗缺血心肌再灌注损伤的作用。     

注射用心肌肽对幼鼠离体心脏缺血 再灌注能量代谢的影响

目的：探讨注射用心肌肽对幼鼠离体心脏缺血再灌注能量代谢的影响及机制。方法：50只SD幼鼠,随机分为5组（n=10）,正常对照组：心脏灌流20 min稳定后,再持续灌注150 min;正常+注射用心肌肽组：同正常对照组,但在灌流液中加入注射用心肌肽50 mg/L;模型对照组：心脏灌流20 min稳定后,停搏液停搏（缺血）90 min,再恢复正常灌流（再灌注）60 min,建立心肌缺血再灌注损伤模型,灌流用K-H缓冲液,停搏用ST.Thomas’II停搏液;注射用心肌肽1组(CMP1组)：停搏液加入注射用心肌肽100 mg/L;CMP2组：灌流液加入注射用心肌肽50 mg/L及停搏液加入注射用心肌肽100 mg/L）。监测不同组离体灌流心脏心率(HR）、收缩力(△T)及最大收缩速度(+dT/dtmax)和最大舒张速度(-dT/dtmax)、冠状动脉流量(CF)、复搏时间,透射电镜观察缺血再灌注损伤模型组中幼鼠心肌组织超微结构改变。进一步检测3个缺血再灌注损伤组冠状动脉流出液中肌酸激酶同工酶（CK-MB）含量的变化,心肌组织能量及氧化抗氧化代谢指标、丙二醛、NO的含量,检测心肌组织NOS、醛糖还原酶的活性,实时荧光定量PCR相对定量检测心肌组织iNOS,eNOS和Akr1b4 mRNA表达。结果：正常对照组离体心脏长时间灌流后心功能无明显变化,注射用心肌肽对正常心脏心功能无明显影响。与模型对照组比较,两个用药组心搏功能下降轻微,冠状动脉流量较好。电镜观察可见模型对照组心肌肌原纤维断裂,线粒体肿胀,而用药组心肌组织结构较完整,线粒体未见明显肿胀变性。再灌注后,模型对照组CK-MB增加。与模型对照组比较, 两个用药组的CK-MB含量低,Na+-K+ ATP酶、Ca2+-Mg2+ ATP酶、心肌总ATP酶活性相对较高,超氧化物歧化酶活性也增高,丙二醛、NO含量低,心肌组织NOS、醛糖还原酶的活性下降,iNOS,Akr1b4 mRNA表达下调,其中CMP2组改变更为明显（P＜0.01或P＜0.05）。此外eNOS mRNA表达在CMP2组升高（P＜0.05）,而在CMP1组中变化无统计学意义（P>0.05）。结论： 注射用心肌肽可改善缺血心脏再灌注后的能量代谢,增加冠状动脉流量,提高心功能,对幼鼠未成熟心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,灌流液及停搏液均加入注射用心肌肽对未成熟心肌缺血再灌注损伤的保护作用效果更佳。其作用机制可能与抑制心肌细胞iNOS, Akr1b4 mRNA表达,减少NO生成,抑制醛糖还原酶的活性有关。     

丹参素对大鼠离体心脏缺血再灌注心肌能量代谢的影响

SD大鼠随机分为正常灌流组和缺血再灌注组,对大鼠离体心脏进行Langendorff灌流。采用高效液相色谱法测定大鼠心肌组织中辅酶A、乙酰辅酶A及高能磷酸化合物含量,心肌组织中乳酸含量和灌流液中脂肪酸的含量采用试剂盒测定,观察给予丹参素和阳性药雷诺嗪后上述各指标的变化情况。结果表明,雷诺嗪能够增加心肌ATP储备,升高腺苷酸能荷值,降低心肌组织乳酸含量及含脂肪酸组乙酰CoA/CoA比值,抑制脂肪酸的氧化从而优化心肌能量代谢。丹参素可以使大鼠离体心脏ATP含量及腺苷酸能荷值升高,乳酸含量降低,对正常灌流组心肌组织乙酰CoA/CoA比值无明显影响,但可以降低添加脂肪酸的缺血再灌注组心肌组织乙酰CoA/CoA比值,提示丹参素对病理状态下心肌脂肪酸的氧化有一定的抑制作用,从而优化病理状态下的心肌能量代谢,发挥对缺血再灌注心肌的保护作用。     

粉防己碱对离体大鼠心脏缺血—再灌注损伤心肌的保护作用

利用大鼠离体工作心研究粉防己碱对缺血－再灌损伤心肌的保护作用，结果表明，Ｔｅｔ能明显改善再灌注损伤心肌的功能，增加心肌灌流量，降低心律失常发生率，降低心肌磷酸肌酸激酶，乳酸脱氢酶，谷草转氨酶的外漏及心肌含水量，并能减少脂质过氧化产物－丙二醛的形成。     

羟丁酸钠对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用

对２０只ＳＤ大鼠离体Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ心脏，行全心缺血３０ｍｉｎ再灌注３０ｍｉｎ的方法，研究羟丁酸钠对心肌缺血再灌注损伤的作用和机制。与对照组（ｎ＝１０）相比，缺血前期用含有羟丁酸钠３００ｍｇ／Ｌ的Ｋ－Ｈ液灌注心脏，于再灌注期的冠脉流量（ＣＦ）显著增加，而左室舒张末期压力（ＬＶＥＤＰ）明显下降，同时冠脉流出液中的乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性和蛋白含量都显著降低；再灌末，心肌组织中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性显著高于对照组。提示：羟丁酸钠对离体心脏的缺血再灌注损伤有保护作用，其机制可能与相对提高了心肌组织内的ＳＯＤ活性有关。     

激活粒细胞对大鼠离体心脏再灌注损伤的实验研究

本实验采用大鼠离体心脏模型，探讨激活粒细胞对大鼠离体心脏再灌注损伤的作用机制。实验过程观察冠状动脉流量，冠状动脉阻力，冠状动脉流出液中乳酸脱氢酶的活性及再二醛的含量。实验完毕后对心肌进行组织学检查及超微结构观察。     

人参总皂甙对心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用

利用体外培养的心肌细胞缺血再灌注损伤的模型。检测其中的细胞损伤及细胞凋亡。并加入不同浓度的人参总皂甙干预。以探讨缺血再灌注损伤与细胞凋亡的关系及不同浓度的人参总皂甙对其保护作用。结果：（1）人参总皂甙对正常培养的心肌细胞无明显影响;（2）单纯缺血损伤中无明显心肌细胞凋亡,而缺血再灌注损伤中有细胞浓度范围（0-160ng/L)内与其浓度呈正相关。     

缺血预调对离体鼠心收缩功能的影响

应用离体灌注的大鼠工作心脏模型，研究常温及低温缺血条件下不同预调方案的心肌保护作用。结果表明，无论在常温或低温缺血条件下，缺血预调均可促进缺血后心肌功能的恢复，诱导心肌保护作用。对常温缺血心肌单次5min缺血再灌注的预调方案产生最佳的保护作用，但在低温缺血心肌，两次5min缺血再灌注才可诱导最佳的保护作用。当最大的保护作用诱导后，进一步预调不再增强保护作用，缺血预调诱导的心肌保护作用具有饱和特性。     

褪黑素对心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

为探讨褪黑素增补于停搏液中对缺血再灌注离体鼠心的影响,将24只Wistar大鼠随机分为褪黑素组和对照组.离体鼠心在改良的Langendorff-Neely灌注模型上30 min预灌注,120 min停搏、30 min再灌注.缺血前及再灌注期间测定血流动力学指标、心肌酶(CPK,LDH),再灌注30 min测心肌超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化脂质(LPO)含量.电镜观察心肌超微结构.再灌注后发现,褪黑素组心功能、心肌超微结构的改善明显优于对照组;心肌酶(CPK,LDH)和LPO含量显著低于对照组(P＜0.01);SOD含量显著高于对照组(P＜0.01).结果表明褪黑素增补于停搏液中可显著减轻心肌缺血再灌注损伤,具有良好的心肌保护作用.     

抑肽酶对心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:研究抑肽酶对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法:SD 大鼠24 只,随机分为3组,每组8 只,采用离体鼠心非工作模型。A、B两组为实验组,灌注液分别含抑肽酶1×106 kIU·L1 和1 ×105 kIU·L1 ;C组为对照组,灌注液中不含抑肽酶。记录稳定期、药物灌注期和再灌注期的心功能、冠脉流量,再灌注第1 分钟测定心肌酶水平,第10 分钟测定氧耗量,实验后制电镜标本并测心肌湿/ 干质量比。结果:(1)在稳定期和药物灌注期,3 组心脏的心功能指标无显著性差异;(2) 再灌注期,A组鼠心的功能恢复、冠脉流量、心肌酶水平、心肌超微结构等方面指标明显优于B、C组。结论:大剂量抑肽酶对大鼠心肌缺血再灌注损伤有明显保护作用     

人参皂甙对缺血再灌注损伤后犬心肌的保护作用

造成犬急性心肌缺血再灌注损伤模型,测定静脉血中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性、脂质过氧化物(LPO)含量、心肌梗塞面积和梗塞程度,以评估人参皂甙对犬急性心肌缺血再灌注损伤后的保护作用.结果发现,人参皂甙能提高SOD、CAT活性(P<0.05),明显降低静脉血中LPO含量(P<0.05),缩小心肌梗塞范围,减轻心肌梗塞程度.提示:人参皂甙对犬心肌缺血再灌注损伤后的心肌具有良好的预防作用.     

大麻素受体激动剂WIN55212-2对体外大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨大麻素受体激动剂WIN55212-2对体外大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法在Lange-ndorff灌流的体外大鼠心脏上,低流速(0.5~0.6 ml/min)灌注以制备全心缺血模型。低流速灌注(缺血)210 min后,开始以正常流速复灌60 min。WIN55212-2组于低流速灌注前15 min持续给予WIN55212-2直至缺血末。WIN55212-2 AM251和WIN55212-2 AM630组分别在低流速灌注前30 min给予AM251、AM630,作用15 min后,再分别给予WIN55212-2直至缺血末。观察复灌后左心室发展压(LVDP)、左心室最大上升、下降速率(±dp/dtmax)。同时,测定复灌末冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)释放量。结果WIN55212-2能显著地恢复缺血再灌注后的心功能,使缺血再灌注末期冠脉流出液中LDH和CK的释放量显著降低。这些作用能被CB1受体阻断剂AM251或CB2受体阻断剂AM630阻断。结论WIN55212-2对体外大鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作用,该作用是通过CB1受体和CB2受体介导的。     

血管紧张素-（1-7）预处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤

 【目的】探讨较大剂量血管紧张素-（1-7）预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其信号机制。【方法】48只SD大鼠随机分为4组，每组12只：缺血再灌注对照组、血管紧张素-（1-7）预处理组、血管紧张素-（1-7）预处理加磷脂酰肌醇-3激酶（P13K）抑制剂Wortmannin处理组、Wortmannin处理对照组，观察较大剂量血管紧张素-（１-7）预处理对大鼠离体缺血再灌注心脏左心室收缩压、冠状动脉流量、肌酸磷酸激酶和乳酸脱氢酶释放、心肌梗死范围以及心肌蛋白激酶B（Akt）、糖原合成酶激酶-313（GSK-3β）磷酸化的影响。【结果】与缺血再灌注对照组相比，血管紧张素-（1-7）预处理组心脏左心室收缩压、冠状动脉流量显著提高，冠状动脉循环流出液中肌酸磷酸激酶、乳酸脱氢酶含量降低，心肌梗死范围减小，心肌磷酸化Akt（Ser473）、磷酸化GSK-3β（Ser9）水平增高，P13K抑制剂Wortmannin能够抑制血管紧张素-（1-7）预处理所致的Akt、GSK-3β磷酸化，但只能部分消除血管紧张素-（1-7）预处理的心脏保护效应。【结论】较大剂量血管紧张素-（1-7）预处理能够减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤，P13K／Akt／GSK-3β信号通路参与介导血管紧张素-（1-7）预处理的心脏保护作用。     

冠脉内皮细胞在离体大鼠心脏再灌注损伤中的作用

在Ｌａｎｇｅｄｏｒｆｆ离体大鼠心脏模型上比较了去冠脉内皮（实验组）和保留冠脉内皮（对照组）的心肌再灌注损伤。结果：实验组的左室峰值和最大升降速度、心肌超氧化物歧化酶及ＡＴＰａｓｅ活性明显高于对照组（Ｐ＜０．０５），而冠脉灌注压和冠脉流出液中乳酸脱氢酶及磷酸肌酸激酶、心肌过氧化产物丙二醛则明显低于对照组（Ｐ＜０．０５）。表明：去冠脉内皮可减轻心肌再灌注损伤。提示：冠脉内皮细胞在心肌再灌注损伤中起重要作用。     

染料木素磺酸钠对离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的：研究染料木素磺酸钠（GSS）对离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法：应用大鼠离体心肌缺血再灌注损伤模型,在灌流液中加入高、中、低剂量的染料木素磺酸钠。测定大鼠心率、左心室收缩压、心肌舒张/收缩速度及心肌组织乳酸脱氢酶（LDH）和心肌肌酸激酶（CK）活性的变化。结果：给药组与模型组相比,缺血再灌后染料木素磺酸钠组心率减慢、左心室收缩压升高、心肌舒张/收缩功能明显改善;心肌LDH及CK的活性更高（P〈0.01或P〈0.001）。结论：染料木素磺酸钠对离体心脏缺血再灌注损伤起保护作用。