杜仲愈伤组织培养及其超低温保存

采用单因子比较、正交设计和均匀设计法，分别考察影响杜仲（ＥｕｃｏｍｍｉａｕｌｍｏｉｄｅｓＯｌｉｖ．）愈伤组织诱导、生长及其超低温保存的因素。研究结果表明：愈伤组织诱导的最适培养基为Ｂ５＋６－ＢＡ１ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ；愈伤组织生长较佳的培养基是ＭＳ＋６－ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋２．４－Ｄ３ｍｇ／Ｌ。超低温保存的最佳材料是２周龄的愈伤组织；较好的冷冻保护剂是１２．５％Ｇｌｙ＋７．５％ＰＥＧ＋２．５ｇ／ＬＬＨ。     

药用植物莪术的组织培养快速繁殖与植株再生的研究

通过茎尖培养实现了中药莪术试管苗的快速繁殖并从试管苗基部诱导出了愈伤组织。实验表明：以ＭＳ培养基为基本培养基。附加ＺＴ４．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．５～１．０ｍｇ／Ｌ适于丛生芽的诱导与增殖;附加２,４－Ｄ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ４．０～６．０ｍｇ／Ｌ适于愈伤组织的诱导;附加２,４－Ｄ１．０～２．０ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ０．２～０．５ｍｇ／Ｌ适于愈伤组织的继代培养;附加ＫＴ４．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ适于愈伤组织的分化。     

朱砂莲的组织培养及培养物HPLC分析

进行朱砂莲幼嫩茎段的愈伤组织诱导及培养，继代培养基采用ＭＳ＋２，４－Ｄ，０．５ｍｇ／Ｌ＋Ｋｔ０．２ｍｇ／Ｌ；（２）ＭＳ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋６ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ培养基１上愈伤组织生长较好，但显微观察表明，细胞形态变异较大，多呈管状，并有巨型细胞产生；用ＨＰＬＣ法对愈伤组织与原植物块茎、茎、叶进行分析和比较。愈伤组织均具有合成马兜铃酸的能力，其ＨＰＬＣ图谱与原植物茎段的图谱较一致，而与叶和块茎有较     

朱砂莲的组织培养及培养物HPLC分析

进行朱砂莲幼嫩茎段的愈伤组织诱导及培养，继代培养基采用①ＭＳ＋２，４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ＋Ｋｔ０．２ｍｇ／Ｌ；②ＭＳ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋６ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ，培养基１上愈伤组织生长较好，但显微观察表明，细胞形态变异较大，多呈管状，并有巨型细胞产生；用ＨＰＬＣ法对愈伤组织与原植物块茎、茎、叶进行分析和比较。愈伤组织均具有合成马兜铃酸的能力，其ＨＰＬＣ图谱与原植物茎段的图谱较一致，而与叶和块茎有较大差异，继代培养基１上的培养物，其马兜铃酸Ａ的含量（０．２７‰）高于原植物茎中的含量（０．１５‰）。     

中华贝母幼茎培养及器官与体细胞胚的发生

以中华贝母（ＦｒｉｔｉｌｌａｒｉａｓｉｎｉｃａＳ．Ｃ．Ｃｈｅｎ）初萌发幼茎为外植体，在ＭＳ培养基上用ＮＡＡ、２，４－Ｄ、６ＢＡ、Ｋｔ等四种植物激素不同组合对其进行诱导，并以ＭＳ＋ＮＡＡ１ｍｇ／Ｌ＋６ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ为继代培养基，进行再生小鳞茎，器官分化及体细胞胚形成的研究。结果表明：组织培养中，中华贝母再生鳞茎可通过三种方式产生。     

三裂叶野葛茎段和叶柄培养成再生植株

三裂叶野葛的叶柄和茎段外植体在含有６－ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上产生愈伤组织,愈伤诱导率分别为１００％和９４％,为进一步分化出芽,芽再生率分别为１００％和３３．３％,而在添加６－ＢＡ３．０ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ１．０ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基中叶柄和茎段外植体的愈伤诱导率分别为１００％和６４．３％,芽再生率分别为５７．１％和２１．４％,茎长成嫩枝后转移至增加０．１ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ的     

重组人血管抑素的纯化和生物活性鉴定

目的：纯化大肠杆菌表达的重组人血管抑素（ｒｈＡＧＮ）并鉴定其抗血管生成生物活性。方法：通过超声破碎、包涵体洗涤、Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００ 凝胶过滤层析等步骤初步纯化ｒｈＡＧＮ,Ｌｏｗｒｙ法测定蛋白浓度,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析观察其纯度;应用 ＭＴＴ法观察在终浓度为 ０．１～３．０ ｍｇ／Ｌ范围内 ｒｈＡＧＮ对 １０ μｇ／Ｌ ＥＧＦ刺激的人真皮微血管内皮细胞系ＨＤＭＥＣ的增殖抑制活性;以ＰＢＳ为对照（ｎ＝５）,应用原位鸡胚绒毛尿囊膜（ＣＡＭ）技术观察１００ μｇ／只（ｎ＝５）和２００ μｇ／只（ｎ＝５）ｒｈＡＧＮ作用７２ ｈ对３０ｎｇ ｂＦＧＦ 诱导的鸡胚ＣＡＭ毛细血管生成的抑制作用。结果：①ｒｈＡＧＮ电泳纯度达到 ９６％,总回收率为 ６１．７％;②ｒｈＡＧＮ对 ＨＤＭＥＣ细胞增殖的最大抑制剂量约为 ２．０ ｍｇ／Ｌ,抑制率约９２．３％．半数最大抑制剂量在１．０ ｍｇ／Ｌ附近;③１００ μｇ／只和２００ μｇ／只ｒｈＡＧＮ组鸡胚ＣＡＭ 载样滤纸片下毛细血管数目分别为７９±２３条和３７±１１条,两组间比较差异显著（Ｐ＜０．０５）;与对照组（１４５±３６条）相比,均有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结论：ｒｈＡＧＮ达到了较高的电泳纯度,     

南方红豆杉组织培养研究

介绍了南方红豆杉植物愈伤组织诱导和继代培养条件,在ＭＳ－培养基上,附加不同种类和浓度配经的激素,在光照条件下对植物愈伤组织的诱导率和生长量等进行了比较。其中当２,４－Ｄ１．２ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ２．８ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ３ｍｇ／Ｌ或４ｍｇ／Ｌ时,愈伤组织诱导率和生长量最高,结果表明,不同激素组合对愈伤组织诱导率,生长量和发生的性状有明显的影响,为南方红豆杉植物细胞悬浮培养建立了基础,为解决红豆杉的资源贫     

正交设计在何首乌组织培养中的应用

用正交设计法考察了４种激素对何首乌嫩茎,叶诱导愈伤组织产生的影响。方差分析结果显示：２,４－Ｄ、ＩＢＡ作用极显著,６－ＢＡ作用显著,ＮＡＡ作用不显著,它们作用大小依次为：２,４－Ｄ〉ＩＢＡ〉６－ＢＡ〉ＮＡＡ,诱导何首乌愈伤组织产生的最佳激素配比为：ＭＳ＋２,４－Ｄ１ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ１＋ＩＢＡ０．５。     

南方红豆杉组织培养研究Ⅰ.愈伤组织诱导和培养条件优化

介绍了南方红豆杉植物愈伤组织诱导和继代培养条件,在ＭＳ－培养基上,附加不同种类和浓度配比的激素,在光照条件下对植物愈伤组织的诱导率和生长量等进行了比较,其中当２,４－Ｄ１．２ ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ ２． ８ ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ３ ｍｇ／Ｌ或 ４ ｍｇ／Ｌ时,愈伤组织诱导率和生长量最高,结果表明,不同激素组合对愈伤组织诱导率、生长量和发生的性状有明显的影响。为南方红豆杉植物细胞悬浮培养建立了基础,为解决红豆杉的资源贫乏提供了新途径。     

老瓜头愈伤组织诱导培养技术的研究

目的为老瓜头Cynanchum komarovii资源利用提供前期的生物技术实验参考。方法以老瓜头的根段、茎段和叶片为外植体,采用正交试验方法,筛选诱导愈伤组织产生的最适培养基;进行愈伤组织增殖培养过程中,测定了不同时间愈伤组织的鲜、干质量,绘制愈伤生长曲线;同时进行了愈伤组织分化培养基的实验筛选。结果不同外植体诱导愈伤产生,其根诱导效果最好,各处理诱导率达90%~100%,茎段和叶片愈伤组织诱导最佳配方分别为MS 2,4-D1.0mg/L 6-BA2.0mg/L NAA0.5mg/L和MS 2,4-D0.5mg/L 6-BA0.5mg/L NAA0.5mg/L,茎段比叶片较容易诱导,各处理诱导出的愈伤组织质地松散,颜色鲜黄,几乎无褐化现象。愈伤组织继代生长在第10天进入对数生长期,愈伤鲜生长量最大达4.961g,干质量0.496g。愈伤组织的分化率很低,很难生芽,易分化出钉状根。结论对于诱导愈伤形成,根段是最佳的外植体,筛选出了茎段和叶片诱导愈伤的最适配方,愈伤组织生长量较大,但分化困难。     

菊三七组织培养的研究

目的　探讨菊三七诱导愈伤组织的过程 ,为快速繁殖幼苗奠定基础。方法　以菊三七的根、茎、叶为外植体 ,采用 MS培养基 ,附加不同的植物激素进行实验。结果　以菊三七的叶片为外植体 ,在培养基 MS 1.0 mg/ LNAA 4 .0 m g/ L 6- BA上 ,愈伤组织诱导率可达 64%。愈伤组织在适宜的分化培养基上 ,成苗率可达 86.7%。结论　通过诱导愈伤组织的途径 ,可以达到快速繁殖菊三七的目的     

北柴胡愈伤组织诱导、分化及不定芽增殖条件研究

目的研究北柴胡叶片、茎段和花芽愈伤组织诱导、分化和不定芽增殖的条件,探讨快速繁殖的新途径。方法选择优良的北柴胡类型,在附加不同种类、不同质量浓度和不同配比外源植物激素的MS培养基中,进行不同外植体愈伤组织的诱导和分化培养以及愈伤组织再生植株的繁殖和生根培养。结果附加2,4-D 1.0 mg/L、KT0.5 mg/L和6-BA 0.5 mg/L的MS培养基最适合于叶片、茎和花芽愈伤组织的诱导,其中以花芽愈伤组织的诱导效果最好;在附加6-BA 1.0 mg/L、NAA 0.03 mg/L和CM 15%、CH500 mg/L的培养基中,愈伤组织的分化率最高;附加6-BA 1.5 mg/L、NAA 0.05 mg/L和CH 250 mg/L的MS培养基为芽苗增殖的适宜培养基;附加NAA0.5 mg/L的1/2 MS培养基是生根的适宜培养基。结论北柴胡的茎段和花芽外植体在适宜的激素组合中均可通过愈伤组织途径分化出不定芽,继而得到正常生长、发育的再生植株。     

贯叶连翘的组织培养和快速繁殖

目的：探索贯叶连翘外植体组织培养的适合培养基配方。方法：将贯叶连翘种子发芽产生的根、带节茎段、叶作为外植体,培养在含不同种类及浓度激素的Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ ａｎｄ Ｓｋｏｏｇ（ＭＳ）基本培养基上,诱导愈伤组织、芽和根的形成,并进行试管苗的移栽。结果：不同激素配比和不同种类外植体对愈伤组织和芽的形成有较大区别。２,４－二氯苯氧乙酸（２,４－Ｄ有利于促进贯叶连翘愈伤组织的形成;在细胞分裂素中,６－苄基氨基嘌呤（６－ＢＡ）促进生芽的作用很明显,而激动素（ＫＴ）、玉米素（ＺＴ）则不明显;α－萘乙酸（ＮＡＡ）１ｍｇ／Ｌ与６－ＢＡ ０．２ｍｇ／Ｌ的组合有利于贯叶连翘的生根。结论：含有２,４－Ｄ的ＭＳ培养基有利于愈伤的诱导,外植体根最适合丛生芽的快速诱导。     

光照对宽叶薰衣草愈伤组织诱导的影响

目的:探讨光照和黑暗培养对宽叶薰衣草(Lavandula latifolia Vill)愈伤组织诱导的影响.方法:本试验以无茵试管苗叶片和茎段为外植体,选用(1) MS+2,4-D 1.0 mg/μL+NAA 0.3 mg/μL+KT 0.2 mg/μL和(2) MS+2,4-D 0.1 mg/μL+6-BA 0.5 ...     

Factors Affecting Embryogenic Callus Production and Plant Regeneration in Anther Culture of Bupleurum chinense

Objective To evaluate the influences of the genotypes, anther developmental stages, and cultural conditions on the efficiency of embryogenic callus induction and plant regeneration in the anthers culture of Bupleurum chinense. Methods The different effects such as four genotypes, plant growth regulators, and temperature condition were compared in the experiments. The histological study was performed with the process of the anther culture. Results The highest inducing rate of embryogenic calli were achieved for the genotypes Zhongcaiyihao (ZCYH), Z4, and Z5 at the early- to middle-uninucleate stages, except for genotype ZPM1 at the tetrad stage. Cold pretreatment increased the production of the embryogenic callus, in which 4-day cold pretreatment improved the production of embryogenic callus from 0% to 2.2% and 5.0% for genotypes ZPM1 and ZCYH, respectively. No embryogenic callus was induced in the medium containing less than 0.75 mg/L 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D). The highest regeneration rate (34.6%) was obtained in 1/2 MS salts regeneration medium supplemented with 0.1 mg/L 6-benzylmaminopurine (BA). The low concentration of BA was able to promote the embryogenic callus formation and subsequent plantlet regeneration via somatic embryogenesis. Chromosome counting of regenerated plantlets showed mostly diploid plant (2n = 12) with only one haploid plant (n = 6). Because of the low rate of microspore embryo formation, we only tracked the process of embryogenesis from the connective tissue, instead of microspore by histological observations. Conclusion This study establishes an efficient system for embryogenic callus induction and plant regeneration system. This is the first report on the haploid plantlet through the anther culture of B. chinense.     

白芨愈伤组织诱导、增殖与分化研究

目的 建立白芨愈伤组织诱导、增殖和分化再生体系。方法 以MS为基本培养基,应用正交试验方法设计植物生长调节剂组合和质量浓度配比,研究不同外植体及植物生长调节剂对白芨愈伤组织形成、增殖和分化的影响。结果 白芨假鳞茎为诱导愈伤组织形成的最佳外植体;1.0 mg/L 6-苄氨基嘌呤（6-BA）与2.0 mg/L 2, 4-二氯苯氧乙酸（2, 4-D）组合不仅可诱导白芨愈伤组织形成,还有利于愈伤组织分化成芽。1.0 mg/L 6-BA与3.0 mg/L 2, 4-D的组合促进愈伤组织增殖,增殖系数为7.8;在分化培养基中附加0.5 mg/L噻二唑苯基脲（TDZ）,可提高愈伤组织分化率。结论 白芨愈伤组织诱导的最佳培养基为MS＋6-BA 1.0 mg/L＋2, 4-D 2.0 mg/L;最佳增殖培养基为MS＋6-BA 1.0 mg/L＋2, 4-D 3.0 mg/L;分化最佳培养基为MS＋6-BA 1.0 mg/L＋2, 4-D 2.0 mg/L＋TDZ 0.5 mg/L。     

白芨愈伤组织诱导、增殖与分化研究

目的 建立白芨愈伤组织诱导、增殖和分化再生体系。方法 以MS为基本培养基,应用正交试验方法设计植物生长调节剂组合和质量浓度配比,研究不同外植体及植物生长调节剂对白芨愈伤组织形成、增殖和分化的影响。结果 白芨假鳞茎为诱导愈伤组织形成的最佳外植体;1.0 mg/L 6-苄氨基嘌呤（6-BA）与2.0 mg/L 2, 4-二氯苯氧乙酸（2, 4-D）组合不仅可诱导白芨愈伤组织形成,还有利于愈伤组织分化成芽。1.0 mg/L 6-BA与3.0 mg/L 2, 4-D的组合促进愈伤组织增殖,增殖系数为7.8;在分化培养基中附加0.5 mg/L噻二唑苯基脲（TDZ）,可提高愈伤组织分化率。结论 白芨愈伤组织诱导的最佳培养基为MS＋6-BA 1.0 mg/L＋2, 4-D 2.0 mg/L;最佳增殖培养基为MS＋6-BA 1.0 mg/L＋2, 4-D 3.0 mg/L;分化最佳培养基为MS＋6-BA 1.0 mg/L＋2, 4-D 2.0 mg/L＋TDZ 0.5 mg/L。     

叶下珠愈伤组织的诱导与培养

目的建立叶下珠愈伤组织培养方法。方法采用组织培养方法,比较不同外植体、蔗糖、植物生长物质及其配比对叶下珠愈伤组织诱导的影响。结果茎段的诱导率最高,为55.56%,叶片诱导不出愈伤组织。6-BA是叶下珠愈伤组织形成的主要影响因素,2,4-D、NAA、蔗糖次之。结论叶下珠愈伤组织诱导及继代的适宜培养基为MS 2,4-D0.5mg/L 6-BA1.0mg/L NAA0.1mg/L 蔗糖10g/L。     

番红花(Crocus sativus L.)组织培养的初步研究

目的:初步探讨番红花组织培养的一些影响因素.方法:采用组织培养技术,以番红花幼嫩的叶片为外植体对其愈伤组织及不定胚的诱导进行了研究:结果:MS BA 0.1 mg/L 2,4-D 2 mg/L为诱导愈伤组织形成的最佳培养基,而诱导不定胚的最佳培养基为MS BA 1.5 mg/L 2,4-D 2 mg/L.结论:基本明确了番红花愈伤组织及不定胚诱导的最佳激素组合.