益气解毒片对EB病毒相关抗体免疫封闭作用的解除效应初探

采用ＭＴＴ（二甲基噻唑二甲基四唑）法检测外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）对Ｒａｊｉ细胞的杀伤作用和免疫酶法测ＥＢ病毒相关抗体（ＥＢＶＶＣＡ－ＩｇＡ）的免疫阻抑作用,研究益气解毒片对该阻抑作用的解除效应,结果表明,益气解毒片方面可以直接杀伤Ｒａｊｉ细胞,另一方面有解除ＥＢＶＶＣＡ－ＩｇＡ的封闭作用,使免疫细胞直接杀伤携带ＥＢ病毒基因的Ｒａｊｉ细胞,提示益气解毒片可能解除ＥＢＶ ＶＣＡ－ＩｇＡ的免疫封闭作     

双氧水诱导淋巴母细胞株产生EB病毒相关抗原的研究

研究了双氧水（Ｈ２Ｏ２）诱导淋巴母细胞株产生ＥＢ病毒相关抗原的作用条件，并观察了Ｈ２Ｏ２与丁酸钠和巴豆油联合作用于上述细胞后对ＥＢ病毒相关抗原的协同激活作用。结果表明，０．２ｍＭ的Ｈ２Ｏ２室温下处理Ｂ９５─８细胞１０分钟，培养５天后，其ＥＢ病毒壳抗原（ＥＢＶ─ＶＣＡ）阳性细胞率分别由４％和１％增至３６％，结果与丁酸钠和巴豆油单独激活时无显著差异。证明Ｈ２Ｏ２可以代替具有致突或促癌的丁酸钠和巴豆油用于激活Ｂ９５─８和Ｐ３ＨＲ─１细胞，但对Ｐ３ＨＲ─１ＥＢ─ＶＣＡ和Ｒａｊｉ细胞ＥＢＶ早期抗原（ＥＢＶ─ＥＡ）的激活不够理想。Ｈ２Ｏ２、丁酸钠和巴豆油联合作用于上述三种细胞可以获得最好的激活效果，Ｂ９５─８和Ｐ３ＨＲ─１的阳性细胞率分别可达８０％和６４％，Ｒａｊｉ细胞的ＥＢＶ─ＥＡ阳性率可达１４％。     

亚硒酸钠对SGC－7901细胞内环核苷酸累积的影响

研究亚硒酸钠对胃癌细胞株ＳＧＣ－７９０１细胞的生长增殖和细胞内环核苷酸累积的影响，结果表明亚硒酸钠显著抑制ＳＧＣ－７９０１细胞的生长增殖，对静息的和肾上腺素刺激的ｃＡＭＰ累积均无显著影响，但可使ｃＧＭＰ累积显著减少，ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值升高，提示亚硒酸钠对肿瘤细胞的抑制作用可能与减少ｃＧＭＰ的合成有关。     

反义基因转移表达及抗乙型肝炎病毒的作用

目的观察重组逆转录病毒载体－包装细胞系统介导反义基因转移表达和抗乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的作用。方法将ＨＢＶａｙｗ１４０２－２９０６片段和２８３９－１９８６片段反向插入重组逆转录病毒载体质粒，分别转染ＰＡ３１７包装细胞，分别感染ＮＩＨ３Ｔ３细胞和２．２．１５细胞。结果转导的ＮＩＨ３Ｔ３细胞内有ＨＢＶ反义ＲＮＡ转录表达。ＨＢＶ反义基因重组逆转录病毒感染２．２．１５细胞后第３天，表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）表达量减少，感染后第５天，ＨＢＶ抗原表达抑制率达高峰。ｐｒｅＳ／Ｓ片段反义基因转移后，ＨＢｓＡｇ表达抑制率为７１％，ＨＢｅＡｇ抑制率为２３％；ｐｒｅＣ／Ｃ片段反义基因转移后，ＨＢ－ｓＡｇ表达抑制率为２３％，ＨＢｅＡｇ抑制率为５９％。结论逆转录病毒载体－包装细胞系统能够介导ＨＢＶ反义基因在真核细胞内转移和表达，并对ＨＢＶ复制和表达均有抑制作用。     

亚硒酸钠对HL—60细胞的分化诱导作用

目的观察亚硒酸钠对人急性髓系白血病ＨＬ－６０细胞系的诱导分化作用。方法ＨＬ－６０细胞在含８×１０－６ｍｏｌ／Ｌ亚硒酸钠的ＲＰＭＩ１６４０培养液中置３７℃、５％ＣＯ２、９５％空气、饱和湿度培养５天，于第５天查细胞形态学及硝基四氮唑蓝（ＮＢＴ）试验。结果硒在上述条件下可使ＨＬ－６０细胞形态学分类中较成熟细胞的比例增高（Ｐ＜０．０５），ＮＢＴ试验阳性率增高（Ｐ＜０．０１）。结论硒在一定条件下可能有潜在的诱导分化作用     

核酶对2.2.15细胞中HBeAg表达抑制作用的初步观察

目的：观察针对Ｈ了Ｃ区双位点核酶对２．２．１５细胞中ＨＢｅＡｇ表达的抑制作用。方法：利用亚克隆技术,从质粒ｐＧＥＭ－Ｒｚ１２３切下ＥｃｏＲ１－ＢａｍＨ１片段克隆于真核表达质料ｐＢＢＳ２１２中,将该质料转染２．２．１５细胞,用ＥＬＩＳＡ及免疫组化方法观察该核酶对ＨＢｅＡｇ合成的抑制作用。结果：细胞表达出针对ＨＢＶ Ｃ区核酶,该核酶对ＨＢｅＡｇ的抑制制达４８．６％。结论：该双位点核酶可能通过针对ＨＢＶ     

人源性抗EB病毒IgG／VCA抗体在SCID小鼠中的诱导

将人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）和腹腔淋巴细胞（ＰＬＮＬ）移植入严重联合免疫缺陷疾病（ＳＣＩＤ）小鼠腹腔，２个月后，小鼠血清内产生了源性ＩｇＧ和抗ＥＢ病毒壳抗原ＩｇＧ抗体（ＩｇＧ／ＶＣＡ），比较结果显示，用ＥＢ９５－８细胞作为ＶＣＡ来源实验组１０只小鼠，ＩｇＧ／ＶＣＡ阳性率为７０％（７／１０），对照组为１７％（２／１２），ＩｇＧ／ＶＣＡ的几何平均滴度（ＧＭＴ）和血清ＩｇＧ浓度，在１４只ＳＣＩＤ－ＰＬＮ     

柯萨奇B组病毒感染患儿细胞免疫状态及对干扰素疗效的影响

系统探讨柯萨奇病毒Ｂ感染血症的机体免疫特征及干扰素应用的评价。采用ＥＬＩＳＡ法测定ＣＶＢ－Ａｇ和ＣＶＢ－ＩｇＭ，采用单克隆抗体标记的间接ＡＢＣ免疫组化法测定Ｔ细胞亚群；＾３Ｈ－ＴｄＲ标记法测定，ＮＫ细胞和ＬＡＫ细胞活性。结果：１．ＣＶＢ感染机体ＮＫ细胞活性。ＬＡＫ细胞活性和ＣＤ４／ＣＤ８比值明显低于对照组；２．机体ＮＫ和ＬＡＫ细胞活性轻中度降低，ＣＶＢ－Ａｇ可自然清除或应用α干扰素清除．若ＮＫ和Ｌ     

硒多糖与亚硒酸钠的抗突变性研究

采用Ａｍｅｓ试验方法，对硒多糖和亚硒酸钠的抗突变作用进行了研究。试验结果：硒我糖和亚硒酸钠在以硒浓度为０．０３３６－１０５μｇ／皿时，对道诺霉素致突变性的抑制率分别为２７．０％－９６．３％和２０．１－９０．０％；对间接致突物环磷酰胺的抑制率分别为１５．４－５１．１％和１７．０－４７．６％，硒 叠氮钠致突变的抑制剂为１．７－１５．５％。表明硒多糖和亚硒酸钠对道 诺霉素致突性有明显的抑制作用。，对环磷     

HBV—DNA阳性者TNF—α,T细胞亚群检测及意义

采用ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ,对４０例ＨＢＶＤΝＡ阳性,２０例ＨＢＶＤＮＡ阴性者进行ＴＮＦα及Ｔ细胞亚群的检测,结果表明：ＨＢＶＤＮＡ阳性者,ＴＮＦα、ＣＤ８Ｔ细胞显著升高,ＣＤ４细胞及ＣＤ４／ＣＤ８的比值下降,ＴＮＦα与ＣＤ８Ｔ细胞有直接量的关系,即ＣＤ８Ｔ细胞增高,ＴＮＦα亦增高。由此可见,ＴＮＦ－α、Ｔ细胞亚群的检测对ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者的发病机理的探讨有一定意义。     

抗EB病毒口服液对EB病毒抗原表达的抑制作用及其细胞毒作用

目的 观察抗EB(Epstein-Barr)病毒口服液对EB病毒抗原表达的影响及对鼻咽癌CNE2细胞的细胞毒作用。方法 用间接荧光法测定抗EB病毒口服液对Raji细胞早期抗原(early antigen，EA)表达及B95-8细胞病毒壳抗原(virus capsid antigen，VCA)表达的影响；用MTT法测定其对鼻咽癌CNE2细胞的细胞毒作用。结果 抗EB病毒口服液在无毒的浓度下，对Raji细胞EB病毒EA抗原表达有较强的抑制作用，其IC50值为0．667mg／mL：对B95-8细胞EB病毒VCA抗原表达有较强的抑制作用。其IC50值为0．89mg／mL；对正丁酸钠激发的B95-8细胞EB病毒VCA抗原表达亦有较强的抑制作用，其IC50为1．1mg/mL。抗EB病毒口服液对人鼻咽癌细胞CNE2的IC50为7．57mg／mL。结论 抗EB病毒口服液能抑制EB病毒抗原的表达,在较高的浓度下对鼻咽癌细胞CNE2具细胞毒作用。     

中草药石上柏阻断促癌物激活Epstein—Barr病毒抗原表达研究

目的;研究中草药石上柏对促癌物激活EB病毒VCA,EA抗原表达的影响,方法：应用免疫酶法检测石上柏水提取液对促癌物正丁酸巴豆油联合作用激活EB病毒VCA,EA抗原的表达,计算出阻断率,结果：发现中草药石上柏药物浓度1mg/ml时阻断Raji细胞表达EA,阻断率为51．98％,阻断B95－8细胞VCA表达,最高达72．04％,结论：实验表明,石上柏水提取液有阻断EB病毒在细胞内抗原的表达作用,为临床使EB病毒抗体阳性者转阴,阻断EB病毒与鼻咽癌的关联提供理论和实验依据。     

一种激活B95—8细胞增加EBV抗原表达的新方法

为获取良好的免疫原,以制备抗EBV的单克隆抗体,本文研究了用H_2O_2诱导B95—8细胞增加EBV抗原表达的实验方法及结果。实验证实用0.2 mMH_2O_2与B95—8细胞作用30分钟,再培养5天,可诱导大量EBV抗原合成。对所得结果进行统计学处理表明经H_2O_2激活的B95—8细胞,EBV抗原阳性细胞的百分率非常显著地高于未经H_20O_2处理的B95—8细胞(P<0.001)。该结果提示经H_2O_2激活的B95—8细胞可作为一种良好的免疫原,用于诊断NPC或制备抗EBV的特异性抗体。同时,鉴于H_2O_2能诱导EBV基因合成EBV抗原,而这些抗原一旦合成,瘤细胞即死亡,故H_2O_2亦可用于治疗NPC。     

黄芪抑制EB病毒壳抗原在体外细胞中表达的作用

目的：探讨黄芪抑制EB病毒（EBV）壳抗原在体外细胞中表达的作用。方法：采用间接免疫酶法研究黄芪提取液对B95－8细胞壳抗原表达的抑制作用。结果：无毒性浓度的黄芪提取液对巴豆油。正丁酸联合激发的EB病毒壳抗原表达有明显抑制作用。抑制率随药物浓度增加而提高,结论：黄芪抑制EBV壳抗原表达效果好,有望在鼻咽癌预防方面起一定作用。     

EB病毒体外感染NPC病人及IgA/VCA~+者的PBMC上清的作用

本文用EB病毒体外感染鼻咽癌病人,IgA/VCA~+,IgA/VCA~-者和新生儿的外周血单个核细胞,观察其上清对CNE-2Z和Raji细胞生长的影响。结果表明,鼻咽癌病人对CNE-2Z有明显抑制作用,生长指数为0.67～0.74,IgA/VCA阳性者和阴性者对CNE-2Z无明显作用。上述感染组对Raji细胞则均有抑制作用,生长指数为0.49～0.69。未经EBV诱导的5天上清对Raji细胞生长呈促进作用。生长指数为1.31～1.44,但对CNE-2Z细胞无明显作用。经EBV和未经EBV感染的新生儿对两种细胞均呈促进生长的作用。     

Lytic, nontransforming Epstein-Barr virus (EBV) from a patient with chronic active EBV infection.

A new wild-type isolate of Epstein-Barr virus (EBV) was identified in follow-up studies of a case of chronic active EBV infection in an 8-year-old girl who had high titres of antibody to viral capsid antigen and early antigen (EA) (greater than 20 480 and 2560 respectively), persistent splenomegaly and abnormal immunologic features. More than 10 throat washings from this patient failed to transform cord blood lymphocytes (CBL), but at least 7 were able to induce EA in Raji cells. Supernatants from cultures of the lymphoblastoid cell line obtained by in-vitro infection of this patient's leukocytes with the B95-8 strain of EBV revealed a herpesvirus particle when examined by electron microscopy. The same supernatants were unable to transform CBL but could induce EA in Raji cells upon superinfection. In 30 or more trials the patient's lymphocytes never transformed spontaneously but did become positive for EBV nuclear antigen and EA in the first week of culture at least twice. Parallel studies performed on the father of the patient yielded similar results. This, then, is the first report documenting lytic activity associated with a wild-type EBV isolate.     

8-O-乙酰哈巴苷防治EB病毒感染的体内外药效学研究

目的通过体内外试验对8-O-乙酰哈巴苷防治Epstein-Barr病毒(EBV)感染的药效作用进行评价。方法采用实时荧光定量PCR(Real-time RT-PCR)技术观察8-O-乙酰哈巴苷对B95-8细胞内EBV衣壳抗原(VCA)的抑制作用;采用腹腔注射醋酸(HAc)所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高模型检测8-O-乙酰哈巴苷对炎症早期的毛细血管通透性亢进和渗出的抑制作用。结果 8-O-乙酰哈巴苷大、中、小剂量组对B95-8细胞内EBV衣壳抗原均具有明显的抑制作用(P<0.01);8-O-乙酰哈巴苷大、中两个剂量组显著抑制醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性增高(P<0.01)。结论 8-O-乙酰哈巴苷对EBV感染具有明显的抑制作用。其不仅对EBV衣壳抗原具有明显的抑制作用,并且可以减轻炎症早期的毛细血管通透性亢进和渗出现象。     

亚硒酸钠对SGC-7901细胞增殖的影响

目的：研究亚硒酸钠对SGC-7901增殖的影响.方法： 应用集落形成试验研究了亚硒酸钠对SGC-7901细胞集落形成的影响;应用流式细胞仪检测了亚硒酸钠对SGC-7901细胞生长周期的影响;应用电镜及流式细胞仪观察了亚硒酸钠诱导SGC-7901细胞凋亡的作用.结果： 亚硒酸钠对SGC-7901细胞的集落形成有明显的抑制作用,其抑制作用与其作用浓度和作用时间呈正相关.流式细胞仪检测显示亚硒酸钠作用SGC-7901细胞24 h后,细胞周期发生改变,G1期细胞百分率减少,S期细胞百分率增加,DNA直方图上出现典型的亚二倍体细胞的“凋亡峰”;电镜下可见细胞核固缩,染色质凝集呈新月形紧贴于核膜周边,核膜扭曲等特征.结论： 亚硒酸钠对SGC-7901细胞的增殖具有抑制作用,抑制作用程度与作用浓度和时间呈正相关;亚硒酸钠抑制SGC-7901细胞生长的机理之一是诱导细胞凋亡.     

A familial syndrome of susceptibility to chronic active Epstein-Barr virus infection.

In two members of a family (daughter and father) active Epstein-Barr virus (EBV) infections persisted over periods of 4 and 3 years respectively (possibly 10 years in the father). Both had persistent splenomegaly and occasional bouts of unexplained fever but lived otherwise normal lives. The other members of the family (mother and son) were healthy. The titres of antibody to the EBV viral capsid antigen (VCA) and early antigen (EA) were extremely high in the daughter's blood, whereas the titres of antibody to the Epstein-Barr nuclear antigen were low in the daughter's blood and undetectable in the father's. Target cells of the EBV infection that were obtained from the daughter's blood were established in culture with great difficulty and showed increased expression of VCA and EA. Other immunologic investigations in the two patients revealed that the ratio of helper to suppressor T lymphocytes was inverted, natural killer-cell activity was abnormally low, lymphocyte responses to certain mitogens were depressed and there was a serum factor blocking mitogen-induced transformation. The possibility that the patients' unusual susceptibility to EBV infection represented an inherited syndrome (perhaps X-linked) is discussed.     

抗EB病毒膜抗原单克隆抗体的制备及鉴定

本文将sp_2/o细胞与经脾内注射用0.2mMH2O2激活的B95—8全细胞免疫的BALB/C小鼠脾细胞,用50％PEG4000进行融合,其平均融合率为51.79%,抗体分泌为43.48％。经亚克隆后获得一株能持续分泌抗EB病毒脱抗原的单克隆抗体(以下简称抗EBV—MA单抗)的杂交瘤细胞—B3B7,该细胞的染色体数为111.7±4.76。经ELISA法,间接免疫酶法和间接免疫荧光法证实该单抗不能与EBV—MA(一)的人Rajì细胞发生特异性免疫反应,只能与EBV—MA(+)的人P3HR—1和绒猴的B95—8细胞的反应,而且与H_2O_2激活的B95—8和P_3HX—1细胞的反应强度非常显著地高于与未经H_2O_2激活的B95—8和P_3HR—1细胞的反应强度(P<0.001),同时亦证实特异性荧光主要集中在EBV—MA(+)细胞的细胞膜上,从而表明B_3B_7确实是能分泌抗EBV—MA单抗的杂交瘤细胞。