贾第虫纯培养的建立

从腹泻患儿新鲜粪便内,浓集、纯化贾第虫包囊。用生理盐水制成悬液,感染长爪沙鼠(Meriones unguiculatus)乳鼠。接种后第8d将受染鼠处死。用无菌术从上段小肠分离滋养体,接种于改良TYI-S-33培养基内,于37℃培养。培养后第14d,生长旺盛的虫体在培养管壁内面形成密集的细胞单层。生长高峰期和倍增时间分别在培养后的第120和15±2h。各批虫体经液氮冷冻复苏后,虫体复活率为53～80％。复苏虫体生长良好。本纯培养已维持9月余,传代100多次。     

犬贾第虫纯培养的建立

将取自一1岁自然感染犬贾第虫的雌性、德国牧羊犬的包囊利用蔗糖密度梯度离心-G1耐酸漏斗滤过法进行分离和纯化,经口感染给10日龄的沙鼠幼鼠,8d后无菌取其小肠上段,分离出滋养体,转入改良TYS-I-33培养基中进行培养,在驯化5个月之后,虫体逐渐适应了培养环境,在管壁上形成了细胞单层并进行传代,每隔48~72h传代1次,共传18代。将培养物置肉汤及血琼脂平板培养,未见细菌及霉菌污染,为纯培养。     

蓝氏贾第鞭毛虫染色体核型初步观察

目的初步观察蓝氏贾第鞭毛虫细胞分裂过程中典型凝集染色体的形成及其数目。方法用改良TYI-S-33培养基培养贾第虫滋养体。在结束培养前4h弃去旧培养基,加入事先预热的含有秋水仙素(终浓度为0.2μg/ml)的新鲜培养液。低渗处理55min,用甲醇∶冰醋酸(体积比=3∶1)固定液固定。收集细胞、滴片、Giemsa染液染色,光学显微镜观察结果。结果获得了较好的染色体分裂相。贾第虫染色体的数目多数为2n=8条。50个细胞分裂相中,有35个为8条染色体,10个为9条染色体,5个为10条染色体。染色体微小呈小杆状,有时成对,形态相同。结论蓝氏贾第鞭毛虫在分裂过程中形成典型的凝集染色体,染色体数目为2n=10条。     

体外纯培养的蓝氏贾第鞭毛虫滋养体异常形态观察

目的观察体外纯培养的蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的异常形态。方法用改良TYI-S-33培养基培养贾第虫,在接种后不同时间取培养管底部虫体涂片,Giemsa’s染色,在显微镜下观察虫体形态并照相。结果除观察到典型的营二分裂法繁殖的贾第虫滋养体外,还可见到多种形态异常的虫体,包括虫体呈非典型二分裂;滋养体胀大,胞质中有团块状和(或)不规则形状的嗜酸性物质;在胀大的贾第虫细胞内含有团块状和(或)不规则形状的嗜酸性物质以及鞭毛;在胀大的贾第虫细胞内含有6或8个核状物以及鞭毛;在一个母体细胞中含有3或4个子体细胞的雏形;胞质互相融合的4个滋养体的雏形;胞质互相融合的3个滋养体;胞质互相融合的4个滋养体;1对营二分裂的滋养体与另一个滋养体互相融合;2对营二分裂的滋养体互相融合;仅有1个细胞核的滋养体。结论在体外纯培养的贾第虫滋养体中发现一些异常形态的虫体,造成这种现象的原因尚不清楚,其发育过程有待进一步研究。     

犬贾第虫携病毒株体外纯培养的建立

目的 培养一携带犬贾第虫病毒的犬贾第虫（Giardia canis）细胞株。 方法 用蔗糖密度梯度离心-G1耐酸漏斗过滤法纯化犬贾第虫包囊，经口接种5日龄长爪沙鼠（Meriones unguiculata），8 d后于其十二指肠无菌收集犬贾第虫滋养体，置改良的 TYI-S-33 培养基中培养，待滋养体在培养管壁上形成细胞单层后进行传代。同时进行冻存和复苏实验，以及纯度、稳定性、细胞生物学特性、微生物污染等4项指标检测。滋养体经液氮冻融3次后3 000 × g离心15 min，取上清，用磷钨酸负染，透射电镜观察病毒粒子。 结果 犬贾第虫滋养体接种14 d 后虫体逐渐适应了培养环境，在培养管壁上形成细胞单层，经上述4项指标检测，证明形成了稳定的犬贾第虫细胞株。电镜观察，见滋养体内有外观球形呈20面体结构、直径约为36 nm的病毒样粒子。 结论 建立了携带GCV的犬贾第虫细胞株的体外纯培养。     

蓝氏贾第鞭毛虫特异性细胞骨架蛋白——贾第素研究进展

蓝氏贾第鞭毛虫具有由微管、微丝和骨架蛋白构成的高度发达的细胞骨架系统.近年来,贾第虫的细胞骨架与其致病力的密切关系已经得到证实.在参与细胞骨架构成的众多蛋白质中,特异性细胞骨架蛋白——贾第素是其中重要的成分之一.对贾第素的研究不仅可为贾第虫细胞骨架的研究增添新的知识和研究资料,还可为贾第虫病的致病机制及抗贾第虫药物靶点的选择提供实验依据.     

蓝氏贾第鞭毛虫的细胞骨架蛋白

蓝氏贾第鞭毛虫是一种重要的肠道致病性原虫,其致病力与细胞骨架密切相关。贾第虫具有高度发达的细胞骨架系统,包括8根鞭毛、1个腹吸盘、中体和funis等,主要由微管蛋白、肌动蛋白、动力蛋白、贾第素及其相关蛋白组成。该文就贾第虫细胞骨架及相关蛋白的结构和功能作一综述。     

蓝氏贾第鞭毛虫基因表达调控的研究进展

蓝氏贾第鞭毛虫是一种重要的致病性寄生虫,人体感染后主要引起腹泻和营养不良等症状。作为一种源真核生物,其基因表达调控机制可能与其他真核生物有较大的区别。本文从蓝氏贾第虫鞭毛虫启动子、转录因子、转录后调节、翻译起始和表观遗传学等方面,对贾第虫基因表达调控的研究进展进行综述。     

抗蓝氏贾第鞭毛虫单克隆抗体的制备和特性研究

用体外培养的四川株蓝氏贾第鞭毛虫滋养休免疫BAIB/c小鼠,以免疫脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,共获得3个分泌抗蓝氏贾第鞭毛虫单克隆抗体的杂交瘤细胞株。这些McAb经鉴定均属lgG_1亚类。选取活性最强的1E_2株McAb对不同贾第虫株进行抗原定位的测定,由IFA显示,该McAb与四川株和山东株滋养休的后1/3表面呈现荧光反应,但与澳大利亚株滋养体表面不显荧光,表明国内株与国外澳大利亚株滋养体表膜抗原存在株间差异。     

双氢青蒿素对体外蓝氏贾第鞭毛虫的损伤

目的 探讨双氢青蒿素（DHA）对蓝氏贾第鞭毛虫的损伤作用。 方法 用含不同浓度DHA的TYI-S-33培养基培养蓝氏贾第鞭毛虫滋养体。分别在光镜和电镜下观察药物作用后虫体的形态结构变化。 结果 随着药物作用时间延长和浓度的增加，虫体死亡率增高。在同一时间内随着药物浓度的增高，虫体死亡率升高(P<0.01)。DHA浓度为100 μg/ml, 作用12 h，虫体死亡率为46.6%，浓度增至200 μg/ml时, 虫体死亡率为100%；同一药物浓度随着作用时间延长, 虫体死亡率也升高（P<0.05），当浓度为100 μg/ml,作用12 h，虫体死亡率为46.6%，作用24 h死亡率增至100%。药物作用后24、48和72 h光镜下观察结果显示，虫体变形、肿胀、出现空泡、失去正常的瓢形运动能力；鞭毛摆动迟缓或停止运动。电镜下观察，见虫体变形、肿胀、细胞膜崩解、脱落，表面出现胞质突起；细胞质内核糖体溶解，出现空泡；吸器失去凹状结构，隆起变成大泡；核染色质稀疏，核周间隙变宽，并出现异形核。 结论 DHA对蓝氏贾第鞭毛虫的质膜及细胞骨架有较强的损伤作用。     

青海省人体蓝氏贾第鞭毛虫流行病学调查分析

本文应用分导整群随机抽样法在全省选定３２个调查点，对１６０７９人蓝氏贾第鞭毛虫流行病学调查结果进行了分析，结果表明，我省人群贾第虫流行特征为：（１）人群感染率高，平均为４．６３％。（２）男性高于女性，（３）少数民族感染率高；（４）以牧民的感染为重，（５）小于１５岁的少年儿童感染率高，并有随年龄增长感染率逐渐的趋势。     

蓝氏贾第鞭毛虫致腹泻46例分析

蓝氏贾第鞭毛虫简称贾第虫,寄生人体小肠、胆囊(主要在十二指肠),可引起腹痛、腹泻和吸收不良等症状.本虫分布于世界各地,一般在卫生条件差的地区尤为常见.污染的水和食物经口传播是贾第鞭毛虫的传播途径.新疆医科大学第二附属医院检验科自1997～2004年检测出68例贾第鞭毛虫阳性标本,现统计分析报告如下.     

蓝氏贾第鞭毛虫潜在致病机制初探

蓝氏贾第鞭毛虫(简称贾第虫)是一种常见的人兽共患寄生性原虫,由其导致的贾第虫病已被世界卫生组织列为危害人类健康的10种主要寄生虫病之一。近年来,贾第虫病的危害日益受到重视,然而贾第虫导致腹泻的致病机制尚不明确,可能与其细胞骨架蛋白、虫体分泌物、L-精氨酸代谢以及表面抗原变异、免疫学改变等多种因素有关,该文对与贾第虫致病机理相关的研究作一综述。     

蓝氏贾第鞭毛虫感染的免疫学诊断方法

蓝氏贾第鞭毛虫感染可引起人及其他哺乳动物腹泻.近年来,贾第虫病的严重性和危害性日益受到重视.本文对蓝氏贾第鞭毛虫感染的免疫学诊断方法研究进行了综述,比较了各种方法的优缺点,简要介绍了一些商品化试剂盒的使用情况.贾第虫病免疫学诊断方法的应用,对贾第虫病的临床诊断、治疗、预后将带来极大的方便.     

蓝氏贾第鞭毛虫感染致脓胸一例

患者,男,58岁。因咳嗽、发热一周,呕吐一天,左侧胸痛5小时,呕吐一次,于2005年10月14日收入我院呼吸科。有支气管哮喘病史10余年,平均每年发作一次。入院前一周出现咳嗽、咳少量白色黏痰,发热,体温波动于38~39℃,入院前一天进食后呕吐一次,呛咳后出现喘气,在当地医院给予平喘治疗后,喘气好转,但觉左胸部侧壁及后壁疼痛明显。急诊胸片提示:左下肺纹理增粗模糊,左侧肋膈角消失。血常规检查:WBC10.3×109/L,中性粒细胞分类90%。以胸腔积液入院。入院查体:体温37.7℃,呼吸22次/分钟,左肺肩胛下线第9肋间以下叩诊呈浊音,呼吸音减弱,双肺未闻及干…     

蓝氏贾第鞭毛虫滋养体有丝分裂的初步观察

目的观察体外培养的蓝氏贾第鞭毛虫滋养体有丝分裂。方法用改良的TYI-S-33培养基培养贾第虫。从培养第6h开始,每间隔2h取分裂的细胞直至第24h,制备涂片,Giemsa染液染色,用光镜和透射电镜观察细胞分裂状况。结果有丝分裂前期:染色质凝集形成细长的染色质丝;中期:形成大小约1μm的棒状染色体,且全部排列在细胞核中央,或分散在核内;后期:姐妹染色单体分开,向细胞核两极移动,核膜拉长;末期:核膜中间向内缢束呈葫芦状,细胞核缢裂成两个子核,随即进行胞质分裂。结论蓝氏贾第鞭毛虫滋养体有丝分裂与典型真核细胞相似,但分裂期核膜始终存在,为半开放式分裂。