大鼠足垫皮肤石蜡切片制作体会

大鼠足垫皮肤存在角质层厚、组织层次复杂等特点,给石蜡切片的制作增加了很大的难度.我们利用大鼠足垫为毛囊诱导的对象,制作了大量的大鼠足垫石蜡切片,并进行相应的免疫组化实验,摸索出许多制作大鼠足垫石蜡切片的经验,藉此介绍以期作为相关研究者的参考.     

兔肌腱组织石蜡切片的制备

目的探索在动物实验条件下一种兔肌腱的石蜡制片方法。方法经手术分别获取新西兰大白兔1cm长左右侧后爪2-3趾的趾深屈肌腱。左侧后肢为正常组,切取后立即投入改良的4%多聚甲醛中室温固定1d;右侧后肢为实验组,暴露后爪趾深屈肌腱后,注射10μl腺病毒载体,术后第3天于注射点切取,并立即投入改良4%多聚甲醛,室温固定1d。流水冲洗过夜后用酒精正丁醇混合液进行梯度脱水,二甲苯透明,浸蜡、包埋并切片。烤片后常规脱蜡至水,HE染色。结果光镜下,正常组肌腱的胶原纤维束平行而整齐紧密地排列,束间有沿其长轴成行平行排列的肌腱细胞,肌腱外膜可见成排的腱细胞。实验组肌腱外膜有炎性反应性增生,组织结构完整,染色鲜艳。结论为肌腱形态学方面的实验研究提供了一条新的便捷途径。     

快速石蜡切片与冷冻切片在供器官组织病理学评估中的比较研究

目的探究快速石蜡切片较之冷冻切片在器官捐献供器官的组织病理学评估中的优劣。方法收集2017年至2021年间华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所的5例供肝标本和8例弃用供肾标本, 对供器官活检组织分别采用冷冻切片、快速石蜡切片和常规石蜡切片方法制片, 经苏木精-伊红染色后, 从供肾和供肝镜下的基本形态以及相关供器官评分的差异方面进行比较。结果快速石蜡切片在反映肾小球硬化比例(18.6%±22.3%)、小动脉透明样变(43.7%±23.8%)和小动脉狭窄(47.9%±29%)方面与常规石蜡切片相似。冰冻切片中观察到的肾小球硬化比例(0.8%±2.2%)、小动脉透明样变比例(4.9%±7.4%)和小动脉狭窄(5.3%±7.5%)比例均低于快速石蜡切片。另外快速石蜡切片对肝细胞坏死和水变性的判断也更为准确。结论快速石蜡切片较冷冻切片镜下组织结构更清晰、完整。在评分方面能更准确地反映供器官的组织病理学改变。     

外科病理诊断冷冻切片制作技术应用及其研究

目的探讨冷冻切片的制作技术和固定染色方法,以规范提高冷冻切片诊断水平。方法回顾国内八种冷冻切片方法和常用制片技术,实验对照观察其切片质量。结果恒冷切片机为首选病理医疗设备,可以保证符合诊断要求的冷冻切片,为术中良恶性肿瘤的鉴别提供帮助。结论优良的冷冻切片是正确诊断的前提,各项操作技术则应该不断完善、创新提高。     

肾穿刺活检石蜡组织切片DNA的提取和PCR扩增

目的建立从肾穿刺活检石蜡组织切片提取DNA并进行PCR扩增的方法。方法肾脏病理诊断为乙肝病毒相关性肾小球肾炎、原发性IgA肾病和膜性肾病各2例的肾活检组织蜡块，包埋时间1个月-5年。提取方法包括清洁切片、融蜡、消化及DNA的提取。紫外分光光度计测定DNA浓度。应用聚合酶链反应（PCR）扩增血管紧张素转换酶（ACE）和乙型肝炎病毒核心抗原（HBcAg）基因片段。结果2张2Ixm厚石蜡切片获取的DNA总量为10-30μg。ACE基因的PCR扩增结果显示，6例标本均在490bp和（或）190bp处显示清晰条带。HBcAg的PCR扩增结果显示，2例乙肝病毒相关性肾小球肾炎标本在132bp处显示清晰条带，其余4例阴性。结论本方法可以从肾穿刺活检石蜡切片中获取足够高质量DNA并进行PCR扩增，方法简便，结果稳定，不受包埋时间长短的限制，为肾脏疾病的辅助诊断、肾活检组织的大宗遗传学分析提供了可能。     

微波石蜡切片免疫荧光双重染色在肾脏病理研究中的应用

我们尝试用石蜡切片进行免疫荧光双重染色，目的是希望它既有冰冻切片免疫荧光染色抗原特异性高，敏感性强，能同时显示表达于同一部位的两种抗原的特点，又具有石蜡切片免疫组化染色组织细胞结构清晰，抗原定位准确的优点。     

印片细胞学检查在肿瘤术中的快速应用

目的探讨组织印片细胞学检查方法在肿瘤的术中快速病理诊断的应用价值。方法对200例肿瘤术中快速检查标本分别进行印片细胞检查和快速石蜡切片检查,两者的诊断结果分别与常规石蜡切片诊断结果进行比较分析。结果组织印片细胞学检查和快速石蜡切片诊断准确性相近,分别为95%和99%,两者结合后对肿瘤的术中快速病理诊断的定性准确性可达到100%。结论印片细胞学诊断明显缩短诊断时间且准确、简便,但有一定局限性,需要与快速石蜡切片诊断相互配合。     

微波石蜡切片免疫荧光染色在肾活检病理诊断中的应用

冰冻切片免疫荧光染色在肾活检病理诊断中起着重要作用.由于冰冻切片需要价格昂贵的冷冻切片机,在很大程度上限制了该技术的广泛应用,我们利用微波抗原修复技术,对肾活检组织石蜡切片进行免疫荧光染色,取得了良好的效果.     

双重修复石蜡切片免疫荧光染色在肾活检组织中的应用

目的：探讨常规10%福尔马林固定的肾穿刺活检组织进行石蜡切片免疫荧光染色在病理诊断中应用的可行性。方法：采用隔水微波修复及胰蛋白酶双重修复抗原。结果：经过双重修复的石蜡切片免疫荧光染色与冰冻切片免疫荧光染色结果基本一致。结论：双重修复石蜡切片免疫荧光染色为病理诊断提供了多一种方法,且为使用石蜡切片进行回顾性免疫荧光诊断和研究提供了技术保障。     

微波石蜡切片免疫荧光多重标记技术在肾活检病理诊断中的应用

目的：肾活检组织免疫荧光检查常规是在冰冻切片上进行。本研究探讨了甲醛固定的肾活检组织进行石蜡切片免疫荧光多重染色在病理诊断中应用的可行性。方法：采用微波修复抗原法,对5例膜性肾病、5例狼疮性肾炎、5例IgA肾病和5例乙型肝炎病毒相关性肾炎患者肾组织石蜡切片分别进行IgG/Fn/Hoechst、C3/Fn/Hoechst、IgA/Fn/Hoechst、HBsAg/Fn/Hoechst免疫荧光多重染色。利用免疫荧光显微镜观察并照相。结果：微波修复抗原的石蜡切片进行免疫荧光多重染色,显示IgG、C3、IgA与HBsAg染为绿色,FN为红色,两者共表达的部位为橙黄色,细胞核为蓝色。石蜡切片的免疫荧光染色与用于病理诊断的冰冻切片免疫荧光染色结果一致。且石蜡切片较冰冻切片薄,结构清楚,免疫沉积物定位更准确,易判断结果。结论：微波石蜡切片免疫荧光多重染色,能在一张切片上同时显示两种以上抗原的共表达,为病理诊断提供更加直观详实的依据,可用于肾组织分子免疫病理检查,为使用石蜡切片进行回顾性免疫荧光诊断和研究提供了技术保障。     

冰冻切片与石蜡切片病理分析的差异对于分期翻修术治疗人工膝关节感染疗效影响不大

人工膝关节翻修术中常采用冰冻组织切片病理检查排除感染,但是这一检查的准确性与可靠性尚未确定。作者对76例人工膝关节感染翻修术患者进行分期翻修术,全部做术中冰冻切片和常规蜡块切片病理检查,分析两者结果的     

肾组织石蜡切片免疫荧光技术中抗原修复方法的探讨

目的 比较多种抗原修复方法在肾组织石蜡切片免疫荧光技术中的应用,探讨最佳抗原修复法.方法 选取2018年6月至2019年6月期间郑州大学第一附属医院肾脏病理中心的45例肾活检组织标本为研究对象,其中狼疮肾炎、膜性肾病、IgA肾病各10例及淀粉样变性肾病15例.分别用5种抗原修复法处理各组肾组织石蜡切片.按照标本来源和抗原修复方法分为6组:对照组(冰冻切片标本)、高压热修复联合胰蛋白酶消化双修复(高压热联合胰酶)组、微波热修复联合胰蛋白酶消化双修复(微波热联合胰酶)组、高压热修复(高压热)组、微波热修复(微波热)组、胃蛋白酶消化(胃蛋白酶)组.分析和比较5种热修复抗原方法的石蜡切片与冰冻切片免疫荧光染色和半定量评分的差异.结果 高压热联合胰酶、微波热联合胰酶组肾组织石蜡切片的免疫荧光染色结果与对照组一致,与对照组比较,两组免疫荧光半定量评分的差异无统计学意义(均P> 0.05).高压热组、微波热组和胃蛋白酶组石蜡切片免疫荧光染色结果较对照组假阴性率高,免疫荧光半定量评分的差异有统计学意义(均P< 0.05).结论 高压热修复联合胰蛋白酶消化双修复法与微波热修复联合胰蛋白酶消化双修复法为石蜡切片的最佳抗原修复方法.     

影响冷冻切片质量的原因及对策

冷冻切片是一项特殊的病理制片技术，冷冻切片的质量直接关系到手术中能否迅速作出正确的病理诊断。采用SHANDON．As620型冷冻机，它的速冻装置可以在几分钟之内下降至-50℃～-60℃之间，不仅缩短了制作时间，而且可以有效地保证良好的切片质量，从而提高了病理诊断的准确率，笔者从数千例的恒冷切片制作中，总结了一些影响冷冻切片质量的因素及处理方法。现介绍如下。     

快速冷冻切片在尿道端端吻合术中的应用价值

目的：探讨快速冷冻切片在后尿道端端吻合术中的应用价值。方法：对102例临床确诊为后尿道闭锁的患者随机分成两组进行后尿道端端吻合术。A组46例，将瘢痕组织切除，依据术者经验判断为尿道黏膜组织后行后尿道端端吻合术；B组56例，吻合前用快速冷冻切片证实为尿道黏膜后行后尿道端端吻合术。两组患者均于术后3周拔除导尿管，并比较两组患者的术后疗效。结果：A组患者的手术成功率为74％（34／46），B组患者的手术成功率为93％（52／56）。结论：快速冷冻切片可避免因术者经验所致的手术缺陷，科学准确的指导操作，提高手术成功率。     

200例痰液沉积物切片病理结果分析

目的 探讨痰液沉积物切片在肺癌诊断中的意义.方法 对200例痰液沉积物进行传统涂片和石蜡包埋连续切片,常规HE染色后镜检.结果 在组织证实的46例肺癌中,痰液涂片加连续切片的联合检查阳性者40例,阳性率86.96%,假阳性6例.切片和涂片检查之间差异显著（P＜0.01）.结论 痰液沉积物切片检查细胞集中,易于观察组织形态,可提高脱落细胞的阳性率,具有较高的临床使用价值.     

关于“红曲对去卵巢大鼠BMP-2表达及成骨细胞增殖影响的实验研究”一文制作脱钙骨石蜡切片过程的质疑

近读卢建华等所撰《红曲对去卵巢大鼠BMP-2表达及成骨细胞增殖影响的实验研究》[中国骨伤，2005，18(1)：25—27]，感觉他们在制作脱钙骨石蜡切片过程中，有两点操作与现行常规不同。     

前列腺癌根治性手术是否需要行淋巴结冷冻切片快速病检

前列腺癌患者行根治性前列腺切除术时是否需要进行淋巴结冷冻切片快速病检？其意义何在？目前很多医师对此问题尚缺乏足够清晰的概念和认识。2010年4月在北京召开的第五届全国泌尿男生殖系统肿瘤学术会议上,与会代表们就这一问题进行了简短而深入的探讨,现整理如下。     

假体周围组织冰冻切片对诊断髋关节假体无菌性松动的特异性分析

[目的]评价冰冻切片对诊断髋关节假体无菌性松动的作用.[方法]回顾分析了57例(63髋)因髋关节无菌性松动行髋关节翻修的病例,将冰冻切片和石蜡切片结果进行病理学分级,将至少5个高倍镜视野、每个高倍镜视野的中性粒细胞数≥5个视为切片结果阳性；以之前文献报道的无菌性松动的诊断标准为参照标准,计算冰冻切片的特异性、符合率.[结果]冰冻切片的特异性为96.8％,冰冻切片和石蜡切片诊断假体无菌性松动时符合率为96.8％.[结论]在全髋关节翻修术中利用组织冰冻切片进行诊断性检查来确定是否存在感染时要注意冰冻切片和石蜡切片的偏差.     

冰冻切片识别早期肺腺癌准确性的研究进展

冰冻切片技术现已广泛用于各种临床外科手术,其报告速度明显优于传统石蜡切片,在指导手术切除范围及初步病理诊断中有重要意义,但现阶段对冰冻切片识别早期肺腺癌的准确性仍有争议。本文旨在总结冰冻切片对早期肺腺癌识别的准确性,分析其干扰因素,对比冰冻切片与最终石蜡切片的结果异同,探讨冰冻切片能否对外科手术切除早期肺腺癌起到准确的提示和指导作用。