国人膀胱癌乙酰肝素酶基因和蛋白表达的研究

目的 探讨国人膀胱癌乙酰肝素酶基因和蛋白表达水平及其与膀胱癌发生、发展和转移的关系.方法 应用荧光定量逆转录聚合酶链式反应和免疫组化EnVision二步法分别检测28例新鲜膀胱癌和癌旁正常组织中乙酰肝素酶mRNA的表达水平及58例石蜡包埋膀胱癌组织中乙酰肝素酶蛋白的表达水平.结果 乙酰肝素酶mRNA在膀胱癌中阳性表达13例(46.4%),乙酰肝素酶蛋白在膀胱癌中阳性表达22例(37.9%),其表达率与肿瘤的病理分级、临床分期和淋巴结转移有相关性( p<0.05).结论 乙酰肝素酶基因和蛋白的异常表达能成为国人膀胱癌发生和发展的预后参数.     

膀胱癌中乙酰肝素酶的表达和临床意义

目的探讨国人膀胱癌乙酰肝素酶的表达水平及其与膀胱癌发生、发展、转移和复发的关系。方法应用免疫组化EnVisionZ．步法研究58例膀胱癌患者中乙酰肝素酶蛋白的表达水平，10例正常膀胱黏膜为对照组。结果乙酰肝素酶在膀胱癌中阳性表达22例（37．9％），其表达率与肿瘤的病理分级、临床分期、复发和淋巴结转移有相关性（P〈0．05）。结论乙酰肝素酶蛋白的异常表达可作为膀胱癌患者发生和发展的预后参数。     

乙酰肝素酶、CD222在膀胱癌中的表达及其临床意义

目的探讨膀胱癌中乙酰肝素酶和CD222的表达水平及其与膀胱癌发生、发展、转移及预后的关系。方法应用免疫组化SP法研究95例膀胱癌标本中乙酰肝素酶和CD222的表达水平。采用x2检验、Kaplan-Meier法、Logrank检验等统计学方法分析乙酰肝素酶、CD222的表达水平与膀胱癌临床病理特征及5年生存率的关系。结果乙酰肝素酶在膀胱癌中阳性表达65例（68．42％）,其表达率与膀胱癌患者的肿瘤直径、病理分级、病理学分期、淋巴结转移等情况明显相关（P〈0．05）。CD222在膀胱癌中阳性表达58例（61．05％）,其表达率与膀胱癌患者的肿瘤病理分级、病理学分期、淋巴结转移等情况明显相关（P〈0．05）。乙酰肝素酶和CD222的表达呈正相关（P〈0．05）。生存曲线分析显示乙酰肝素酶阳性表达组患者的5年生存率明显低于阴性表达组。CD222阳性表达组患者与其阴性组相比5年生存率无明显差异（P〉0．05）。乙酰肝素酶、CD222共表达阳性组与其阴性组比较,5年生存率有统计学意义（P〈0．05）。结论乙酰肝素酶及CD222在膀胱尿路上皮癌中的表达与肿瘤的发生、发展、转移和预后相关。其中乙酰肝素酶及CD222的共表达对膀胱癌生存预后的预测更具参考价值。     

CD138和乙酰肝素酶在膀胱癌中的表达和临床意义

目的：探讨膀胱癌中CD138和乙酰盯素酶的表达水平及其与膀胱癌发生、发展、复发和转移的关系。方法：应用免疫组化Envision二步法研究58例膀胱中CD138和乙酰肝素酶的表达水平。结果：CD138在膀胱癌中的阳性表达35例（60.3％）,其表达率与肿瘤的病理分级、临床分期、复发和淋巴结转移无相关性（P〉0.05）。乙酰肝素酶在膀胱癌中阳性表达22例（37.9％）,其表达率与肿瘤的病理分级、临床分期、复发和淋巴结转移有相关性（P〈O.01）。CD138和乙酰肝素酶表达呈正相关（P〈0.01）,其共同表达与肿瘤的病理分级、临床分期、复发和淋巴结转移有相关性（P〈0.05）。结论：CD138和乙酰肝素酶蛋白的共同表达能成为膀胱癌发生和发展的预后参数。     

Syndecan-1和乙酰肝素酶mRNA表达与胃癌转移和预后的关系

目的探讨syndecan-1和乙酰肝素酶（heparanase）mRNA在胃癌组织中的表达及其与胃癌转移和预后的关系。方法采用原位杂交方法,检测118例胃癌组织中syndecan-1和乙酰肝素酶mRNA的表达水平。结果118例胃癌组织中syndecan-1mRNA及乙酰肝素酶mRNA的阳性率分别为42．4％和55．9％;syndecan-1 mRNA及乙酰肝素酶mRNA阳性表达率与肿瘤浸润深度（X^2=32．95,P=0．001;X^2=23．19,P=0．001）、脉管侵犯（X^2=46．22,P=0．001;X^2=33．78,P=0．001）、淋巴结转移（X^2=28．62,P=0．001;X^2=25．43,P=0．001）和远处转移（X^2=63．30,P=0．001;X^2=65．76,P=0．001）密切相关;而syndecan-1 mRNA的表达还与肿瘤大小有相关性（X^2=6．25,P=0．012）。Syndecan-1 mRNA表达水平与乙酰肝素酶mRNA表达呈负相关（r=-0．844,P=0．001）;Syndecan-1 mRNA低表达病例平均生存时间和5年生存率低于高表达组,乙酰肝素酶mRNA阳性表达病例的平均生存时间和5年生存率均明显低于阴性表达的病例。结论Syndecan-1 mRNA低表达和乙酰肝素酶mRNA高表达参与胃癌的浸润和转移过程,是指导临床治疗及估计预后的有意义指标。     

结肠癌组织中Cyr61和HPA-1的表达水平及其在侵袭转移中的作用

目的：检测富含半胱氨酸61（Cyr61）蛋白、乙酰肝素酶（HPA－1）蛋白及Cyr61基因、HPA－1基因在结肠癌组织中的表达水平,探讨二者在结肠癌中侵袭转移的机制及关系。方法：用westernblot方法检测结肠癌组织Cyr61和HPA－1的蛋白表达水平,用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）方法检测结肠癌Cyr61和HPA－1的基因表达水平,分析二者与结肠癌的临床病理特征的关系。结果：结肠癌中Cyr61蛋白及HPA－1蛋白的表达水平高于癌旁组织和正常组织,癌旁组织高于正常组织（户均〈O．001）;结肠癌中Cyr61mRNA及HPA－1mRNA的表达水平高于癌旁组织和正常组织,癌旁组织高于正常组织（P均〈0．001）。Cyr61蛋白及基因和HPA－1蛋白及基因表达的增强与肿瘤的分化程度、淋巴转移及TNM分期等相关（P均〈0．05）。结论：Cyr61蛋白、HPA－1蛋白及Cyr61mRNA、HPA－1mRNA在结肠癌组织中呈高表达,可促进结肠癌的侵袭转移。     

肾癌中原癌基因EphB4及其蛋白表达的研究

目的：研究人肾癌组织中EphB4基因及其蛋白的表达及其在肾癌发生、发展中的作用和临床意义。方法：取液氮保存的原发性肾癌新鲜标本40例,相应癌旁组织（阴性切缘）40例,正常肾脏组织30例,采用半定量逆转录PCR（RTPCR）和免疫组化SP法检测EphB4基因及其蛋白表达水平,并结合临床病理资料进行分析。结果：EphB4基因在肾癌组织和癌旁组织中都表达,且癌旁表达低于肿瘤表达,差异有统计意义（P〈0．05）;正常肾脏组织不表达（P〈0．01）;40例肾癌标本中,25例EphB4蛋白表达阳性,阳性率为62．5％,40癌旁组织中,10例EphB4蛋白表达阳性,阳性率为25．0％;两者有显著差异性（P〈0．05）。EphB4蛋白的表达与患者的性别、年龄无关（P〉0．05）,但与肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度、淋巴结转移密切相关（P〈0．05）。结论：原癌基因EphB4及其蛋白在人肾癌组织中过度表达,且与肾癌的发生,发展相关,可能成为肾癌预后的侯选标志物之一。     

肾母细胞瘤过表达基因和WT1基因在肾癌组织中转录水平的定量研究

目的 研究肾癌组织中肾母细胞瘤过表达基因（NOV）及WT1基因mRNA定量表达水平及意义。方法 肾癌组织标本57例。男40例，女17例，平均年龄65岁。T139例、T213例、T3a5例；G114例、G223例、G320例。应用实时RT—PCR方法定量检测癌组织及36例癌旁正常肾组织中NOV和WT1的mRNA表达，并对2种基因表达水平进行相关性分析。结果 肾癌组织NOVmRNA表达水平中位值（1．17）显著低于癌旁正常组织（4．32，P〈0．05），乳头状肾癌组织表达量（2．67）显著高于透明细胞癌（1．06，P〈0．05），G．肿瘤表达量（4．61）显著高于G2～G3肿瘤（1．11，P〈0．05）。NOV表达与肿瘤分期、大小等无显著相关。WT1mRNA在肾癌组织中的表达水平中位值（0．13）显著低于癌旁正常组织（1．93，P〈0．05），WT1表达与肿瘤分期、分级、组织类型等均无关。NOVmRNA与WT1mRNA表达水平无明显相关。结论 NOV基因与肾癌的发生和分化相关。WT1在肾癌组织中表现为低表达。NOV表达是否受WT1的调节尚需进一步研究。     

肾癌患者外周血中碳酸酐酶9 mRNA表达的临床意义

目的：探讨肾细胞癌患者外周血中碳酸酐酶9（MN）mRNA表达的临床意义。方法：应用RT－PCR技术，对30例肾细胞癌患者及30例非肾细胞癌患者外周血中肾癌细胞标志物MN mRNA进行检测。结果：非肾癌组外周血中均不表达MN mRNA。肾癌患者外周血MN mRNA阳性表达13例（43％），其中肾癌转移8例，局限性肾癌5例；肾透明细胞癌12例，混合型癌1例。外周血MN mRNA表达与肾癌的临床分期无相关性（P＞0．05）；而肾透明细胞癌阳性率（12／22）明显高于其他组织类型（P＜0．05）。结论：RT－PCR技术可较敏感地检测到血液中肾癌细胞，有助于早期诊断肾癌微小转移。MN可被视为透明细胞癌特异的相关蛋白。     

PTEN基因mRNA在肾癌中的表达研究

第10号染色体同源丢失性磷酸酶—张力蛋白基因(PTEN)是1997年克隆出的一个新的抑癌基因，PTEN基因与肾癌的关系报道尚少。为探讨PTEN基因在肾癌组织中的表达状况，我们采用逆转录—多聚酶链反应(RT—PCR)方法检测23例肾癌及癌周组织中PTEN mRNA的表达，并探讨PTEN mRNA表达与肾癌浸润转移的关系。     

胃癌组织乙酰肝素酶mRNA表达及其意义

目的　探讨胃癌组织中乙酰肝素酶mRNA表达状况与其病理特征的关系。方法　应用原位杂交技术 ,检测正常胃黏膜 11例、萎缩性胃炎伴肠上皮化生组织 10例和 5 2例胃癌组织中乙酰肝素酶mRNA的表达 ,分析其表达状况与胃癌组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移和器官转移的关系。结果　乙酰肝素酶mRNA阳性表达在胃癌组高于正常胃黏膜和萎缩性胃炎伴肠上皮化生组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。乙酰肝素酶mRNA阳性率在胃癌浸润浆膜层组与无浆膜层浸润组分别为 5 8.1%和 0 ,两组间差异有非常显著性 (P <0 .0 0 5 ) ;在胃癌有淋巴结转移组与无淋巴结转移组分别为 5 8.5 %和 9.1% ,两组间差异有非常显著性 (P <0 .0 0 5 )。结论　乙酰肝素酶mRNA阳性表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移有关 ,乙酰肝素酶可作为反映胃癌生物学行为的客观指标     

乙酰肝素酶与头颈部鳞状细胞癌侵袭、转移和血管生成的关系

目的 探讨乙酰肝素酶(HPA)mRNA与头颈部鳞状细胞癌(HNSCCs)侵袭、转移和血管生成之间的关系.方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测HPA mRNA在70例HNSCCs组织、20例癌旁黏膜组织中的表达情况,免疫组织化学染色(SP法)检测70例HNSCCs组织中CD34的表达情况,并结合HNSCCs临床病理特征,分析HPA mRNA与HNSCCs侵袭,转移和肿瘤微血管密度(MVD)之间的关系.结果 70例HNSCCs组织中HPA mRNA阳性表达41例,30例癌旁组织中仅3例HPA mRNA呈微弱表达,不同组织中HPA的表达差异有统计学意义(P＜0.05).HPA mRNA阳性表达与HNSCCs病理分级、侵袭程度和颈淋巴结转移有关(P＜0.05),即原发肿瘤分化程度越差、侵袭程度越深,HPA阳性表达率就越高;有颈淋巴结转移者HPA阳性表达率显著高于无颈淋巴结转移者.HPA mRNA阳性者的MVD值(57.65±4.46)显著高于阴性者(35.23±4.16,P＜0.05).结论 HPA促进HNSCCs的侵袭、转移和血管生成,可作为反应HNSCC生物学行为的客观指标.     

nucleostemin基因在肾癌中的表达及其意义

目的 观察nucleostemin基因在肾癌组织和正常肾组织中的表达,探讨其在肾癌发生中的意义.方法 收集肾癌组织标本62例,透明细胞型50例,颗粒细胞型12例.同时取10例癌旁非癌肾组织和10例非瘤正常肾组织作对照组.应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,以GAPDH为内参照,检测上述组织nucleostemin基因mRNA的表达,统计学分析实验结果.结果 肾癌组织中,nucleostemin基因47例显示阳性表达,阳性率为75.81%.正常肾组织未见有nucleostemin基因阳性表达.nucleostemin基因在肾癌组织中的阳性表达显著高于正常肾组织(P<0.01).nucleostemin基因在透明细胞癌中阳性表达率为74.00%;颗粒细胞癌阳性表达率为83.33%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 nucleostemin基因在肾癌组织中呈高表达,而在正常肾组织中无表达;nucleostemin基因的表达可能与病理类型无关.提示nucleostemin基因的表达与肾癌的发生密切相关.     

Fas mRNA在泌尿系肿瘤组织中的表达

目的 了解Ｆａｓ ｍＲＮＡ在泌尿系肿瘤组织中的表达情况。方法 采用逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测３７例泌尿系恶性肿瘤组织中Ｆａｓ ｍＲＮＡ的表达，其中肾癌２１例，膀胱癌１１例、肾盂癌４例，前列腺肉瘤１例；原位杂交法检测３４例肾癌和１９例癌旁正常肾组织中Ｆａｓ ｍＲＮＡ的表达。结果 ３７例肿瘤组织中检出Ｆａｓ ｍＲＮＡ阳性表达共２０例，阳性率为５４％，阳性表达组织中未发现有缺失突变的存在。其中肾     

EphrinA1在原发性肝细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨原发性肝细胞癌中EphrinA1的mRNA和蛋白表达水平及其临床意义。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）及免疫组织化学方法检测EphrinA1的mRNA及蛋白在40例肝癌及相应的癌旁肝组织和10例正常肝组织中的表达水平,并分析其与临床病理学特点之间的关系。结果40例肝癌组织及相应的癌旁肝组织和10例正常肝组织中均有EphrinA1 mRNA的表达。RT-PCR分析显示EphrinA1mRNA在肝癌组织（0．5413±0．1527）中的表达显著高于癌旁肝组织（0．3895±0．0549,P〈0．05）和正常肝组织（0．3770±0．1055,P〈0．05）,而在癌旁肝组织（0．3895±0．0549）和正常肝组织（0．3770±0．1055）中的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。从正常肝组织、癌旁肝组织到肝癌组织,EphrinA1蛋白的阳性表达率分别为20％（2／10）、35％（14／40）和62％（25／40）,呈递增趋势（x^2=14．762,P〈0．05）。EphrinA1蛋白的过表达与肝癌细胞的分化程度、门静脉癌栓的形成及淋巴结转移等临床病理因素有关（P〈0．05）。结论EphrinA1蛋白的过表达与肝癌细胞的分化程度、淋巴结转移和门静脉癌栓有密切联系,提示其可能在肝癌的恶性转化、侵袭和转移过程中发挥重要作用。     

肉瘤样肾细胞癌组织中P53基因突变

为了明确Ｐ５３基因突变与肾癌发生发展的关系，采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法和免疫组织化学方法对３７例肾癌新鲜标本进行Ｐ５３基因检测。结果显示：７例Ｐ５３ｍＲＮＡ表达明显高于正常对照，９例（２４．３％）Ｐ５３蛋白过表达；３７例肾癌组织中３例为肉瘤样肾细胞癌或组织中含肉瘤样癌细胞成分，此３例（１００．０％）均有Ｐ５３ｍＲＮＡ和Ｐ５３蛋白过表达，都有肾门或腹膜后淋巴结转移；３４例透明细胞和颗粒细胞癌中４例（１１．８％）Ｐ５３ｍＲＮＡ高表达，６例（１７．６％）Ｐ５３蛋白过表达，其中１例有肾静脉癌栓，１例有肾门淋巴结转移，另１例取自切口转移癌组织。结果表明：肉瘤样肾细胞癌中有频繁的Ｐ５３基因突变，可能是肾癌细胞向肉瘤样癌细胞转化的关键因素之一。