3，6—[二甲氨基]—二苯骈碘杂六环葡萄糖酸盐对家兔主动脉条收缩的影响

目的：观察3,6－[二甲氨基]-二苯骈碘杂六环葡萄糖酸盐（1－93）对家兔主动脉条收缩的影响,方法：采用离体血管张力实验法,观察1－93的扩血管作用。结果：I－93 10－30umol/L能剂量依赖性抑制KCI,CaCl2和NE引起的家兔主动脉条的收缩,使量效曲线右移,最大收缩反应降低,属非竞争性拮抗：在NE引起的家兔主动脉条收缩两相反应中,I－93 10umol/L明显抑制E依赖细胞内Ca^2 释放的快相收缩反应,对依赖细胞外Ca^2 内流的慢性收缩反应无明显影响。结论 ：1－93呈剂量依赖性,非竞争性拮抗KCl,CaCl2和NE引起的家兔主动脉条的收缩,I－93既能抑制肌膜电压依赖性Ca^2 通道,又能抑制肌浆网的Ca^2 释放。     

3，6—[二甲氨基]—二苯骈碘杂六环葡萄糖酸盐对豚鼠心肌电生理特性的影响

目的：研究3,6－[二甲氨基]－二苯骈碘杂六环葡萄糖酸盐对豚鼠乳头肌动作电位的影响。方法：采用玻璃微电极细胞内记录技术。结果：IHC－93低度（≤30μmol/L)时对快反应动作电位的动作电位幅度（APA）,0相最大除极速率（Vmax)无影响,但可缩短动作电位时程（APD）;高浓度（90μmol/L)时使快反应动作电位的APA,Vmax降低,PAD进一步缩短,三相时程APD50－90（APD50－90＝APD90－APD50）在用药前后变化不大。IHC－93对异丙肾上腺素诱发的豚鼠左心房早期后除极有明显抑制作用,可完全或部分消除哇巴因诱发的延迟后除极和触发激动。结论：IHC－93为一钙通道阻滞剂,具有IV类抗心律失常药物的特性。     

3,6-[二甲氨基]-二苯骈碘杂六环枸橼酸盐对家兔血液流变学的影响

作者在乌拉坦麻醉家兔上用3.6-〔二甲氨基〕-二苯骈碘杂六环枸橼酸盐4mg/kgiv 10 min后,能使血液高切粘度(9.04±9.34vs 8.23±0.59mPa·s)低切粘度(18.17±4.12vs 19.39±3.64mPa·s,P<0.05),血浆粘度下降(1.39±0.06 vs 1.36±0.O6 mPa·s,P<0.05),电泳时间缩短(41.98±7.03 vs 30.33±2.89s,P<0.05);40min后,仍有高切粘度及低切粘度的降低(P<0.05)。     

3,6-[二甲氨基]-二苯骈碘杂环枸橼酸盐(I-65)对实验性大鼠脑缺血再灌流损伤的保护作用

作者通过记录大脑皮质体感诱发电位(SEP,)、光镜和电镜观察,研究了I-65对实验性鼠脑缺血和缺血后再灌流脑损伤的保护作用,结果显示:①对照组大鼠脑缺血再灌流时大脑皮质体感诱发电位明显抑制或完全抑制,光镜下皮质神经元胞体明显肿胀,细胞间隙增宽,尼氏体减少;电镜下神经细胞浆内粗面内质网(RER)明显减少.RER膜间隙扩张,严重者呈空泡状,线粒体肿胀明显,部分组粒体结构断裂,嵴消失,形成空泡.②给药组经I-65处理的大鼠脑缺血再灌流时大脑皮质体感诱发电位抑制程度较对照组明显减轻;光镜下神经细胞轻度肿胀,尼氏体减少不明显;电镜下神经细胞浆内RER丰富,排列整齐,线粒体轻度肿胀和嵴皱缩,未见明显的断裂现象.表明1-65对实验性鼠脑缺血和再灌流后的脑细胞机能与形态的完整性有明显的保护作用.     

eNOS对大鼠颈动脉球囊损伤后平滑肌细胞增殖的影响

目的研究内皮型一氧化氮合酶(eNOS)对大鼠球囊损伤后平滑肌细胞增殖的影响。方法构建腺病毒-eNOS(AdCMV-eNOS)质粒,以脂质体介导转染293细胞,扩增后转染SD大鼠球囊损伤后平滑肌细胞(实验组),以转染Ad-LacZ重组质粒的平滑肌细胞作为对照组。RT-PCR技术观察转染后平滑肌细胞eNOS mRNA的表达;细胞计数法分别检测实验组、对照组、正常组和单纯球囊损伤组平滑肌细胞的增殖能力。。结果RT-PCR检测发现实验组平滑肌细胞表达eNOS mRNA,而对照组无表达。各时间点细胞计数结果显示,正常组均明显少于单纯球囊损伤组(P<0.05),而实验组均明显少于单纯球囊损伤组和对照组(P<0.05)。结论重组腺病毒表达载体构建正确;eNOS可以抑制平滑肌细胞增殖。为eNOS预防经皮腔内冠状动脉成形术术后再狭窄基因转染奠定了基础。     

Effect of Nitric Oxide on Potassium Channels of Rat Airway Smooth Muscle Cells

Summary: The effect of nitric oxide donor sodium nitroprusside (SNP) on resting membrane potential (Em) and potassium currents of the bronchial smooth muscle cells from rats was investigated. All experiments were conducted in conventional whole-cell configuration. The changes of Em and potassium currents after addition of 0. 1 mmol/L SNP were measured under the current-clamp mode and the voltage-clamp mode respectively. Results showed that (1) SNP could decrease the Em from --33. 8±7.4 mV to -43. 7±6. 7mV (n=10, P＜0. 01); (2) SNP could increase the Ca2+-activated K+ channel peak currents under ramp protocol from 466.9±180. 1 pA to 597. 7±237. 6 pA (n= 7, P＜0. 01), and the currents under pulse protocol at +50 mV were increased from 544.2±145.4 pA to 678.1±206. 2 pA (n=6, P＜0.05); (3) SNP also could increase voltage-gated K+ channel peak currents under ramp protocol from 389. 6±84. 1 pA to 526. 7±98. 7 pA (n=7, P＜0. 01), the currents under pulse protocol at +50 mV were increased from 275.7±85.2 pA to 444.3±128.5 pA(n=6,P＜0. 01). It was concluded that SNP increases the activities of Ca2+-activated K+ channels and voltage-gated K+ channels and leads to K+ efflux and hyperpolarization of the cell membrane, resulting in a decrease of the cell excitement.     

血管外膜源一氧化氮对尾加压素Ⅱ诱导的血管平滑肌增殖的抑制作用

目的观察血管外膜生成的一氧化氮(NO)对尾加压素Ⅱ(UrotensionⅡ,UⅡ)刺激的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响及机制。方法取大鼠胸主动脉,去除内皮,分以下几组进行组织孵育10h①完整外膜血管组;②单纯中膜组;③中膜与剥离的外膜共育组;④中膜与用L-N-硝基精氨酸(L-NNA)预处理的外膜共育组。每例胸主动脉剪为二段,分两个亚组UⅡ(10-7mol/L)组和对照组。3H-胸腺嘧啶(3H-TdR)掺入法检测各组VSMC的细胞增殖。另取大鼠腹主动脉外膜,用10-8和10-7mol/LUⅡ刺激4h。Griess法测血管外膜生成的亚硝酸盐(NO2-)含量,3H-L-精氨酸(3H-L-Arg)标记的同位素法测定外膜一氧化氮合酶(NOS)活性。结果①各UⅡ亚组3H-TdR掺入比相应对照组分别增加62.9%～98.3%(均P<0.01)。②在10-7mol/LUⅡ刺激下,完整外膜组及中膜+外膜组的3H-TdR掺入分别比单纯中膜组低20.5%和20.3%(P<0.01);中膜+L-NNA预处理的外膜组3H-TdR掺入分别比中膜+外膜组及完整外膜组高27.1%和27.3%(P<0.01),而与单纯中膜组差异无显著性(P>0.05)。③与对照组相比,10-8和10-7mol/L的UⅡ使外膜NOS活性分别增加92.1%和177%(P<0.01);使外膜生成的NO2-含量分别增加88.7%和178%(P<0.01)。结论血管外膜生成的NO可抑制UⅡ刺激的VSMC的增殖,其抑制作用为UⅡ激活的血管外膜NOS/     

硝苯地平对内皮细胞和平滑肌细胞一氧化氮生成的影响

钙离子通道拮抗药能够有效治疗某些心血管系统疾病。本实验研究了钙拮抗药硝苯地平对离体培养的内皮细胞及平滑肌细胞一氧化氮生成的影响。结果表明硝苯地平能够有效抑制上述细胞一氧化氮的释放,且抑的帽效应呈剂量依赖关系。提示钙拮抗药的治疗作用可能与其抑制一氧化氮的释放有关。     

晚期糖化终产物对离体血管平滑肌细胞的影响

探讨晚期糖化终产物对离体新生牛胸主动脉血管平滑肌细胞的影响及机制。方法：观察ＶＳＭＣ受ＡＧＥｓ刺激后其生长,超微结构和血小板源生长因子－Ａ（ＰＤＧＦ－Ａ）的变化以及维生素Ｅ对上述变化的影响。结果：ＡＧＥｓ促进ＶＳＭＣ生长,细胞内ＡＧＥｓ和ＰＤＧＦ－Ａ的免疫反应呈阳性,线粒体和粗面内质网增多。     

一氧化氮对肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡作用的研究

目的：研究一氧化氮（NO）对肺动脉平滑肌细胞（PASMC）增殖和凋亡的作用。方法：通过非核素标记细胞增殖检测试剂盒、^H-TdR掺入、形态学、流式细胞术等方法研究NO与PASMC增殖和凋亡的关系。结果：25－500μmol/L的NO供体S－亚硝基乙酰青霉胺（SNAP）呈剂量依赖性地减少PASMC的细胞和DNA合成，500μmol/L的SNAP显著减少S期和G2／M期的细胞比例，增加G0／G1期的细胞比例。100－500μmol/L的SNAP呈剂量依赖性地增加PASMC的凋亡率。结论：NO可抑制PASMC增殖并促进其凋亡。早期给予NO对肺动脉高压血管重建可能有一定的预防作用。     

高度糖基化终产物对大鼠主动脉平滑肌细胞G-蛋白亚基基因表达的影响

目的：研究高度糖基化终产物(ACEs)对G-蛋白亚基基因表达的影响，了解G-蛋白在AGEs介导的胞内信号转导途径中的作用。方法：利用半定量RT-PCR技术分析大鼠主动脉平滑肌细胞受AGEs作用后G-蛋白亚基Goa、GsamRNA的改变。结果：AGEs在大鼠主动脉平滑肌细胞中上调Gsa的表达，但却使Goa mRNA水平显著下降。结论：G-蛋白或其某些亚基在AGEs介导的胞内信号转导途径和病理过程中可能起一定作用。     

Nitric oxide production and inducible nitric oxide synthase protein expression in human abdominal aortic aneurysms and cultured aneurismal smooth muscle cells

Objective：To investigate the production of nitric oxide（NO） and the expression of inducible nitric oxide synthase （iNOS）, and their possible role in abdominal aortic aneurysm （AAA）. Methods： A total of 28 patients with AAA, 10 healthy controls, and 8 patients with arterial occlusive disease were enrolled into this study. Standard colorimetric assay was used to examine NO concentration in plasma from patients with AAA and normal controls, and in cultured smooth muscle cells （SMCs）. Expression of iNOS in aortas and cultured SMCs were detected by immunochemistry. The correlation of iNOS expression with age of the patient, size of aneurysm, and degree of inflammation was also investigated by Cochran-Mantel-Haenszel χ^2 test and Kendall correlation. Results ： Expression of iNOS increased significantly in the wall of aneurism in the patients with AAA compared to the healthy controls （P〈0.05） and the patients with occlusive arteries （P〈0.05）. iNOS protein and media NOx （nitrite＋nitrate） also increased in cultured SMCs from human AAA （n=4, P〈0.05）, while plasma NOx decreased in patients with AAA （n= 25） compared to the healthy controls （n=20）. There was a positive correlation between iNOS protein and the degree of inflammation in aneurismal wall （Kendall coefficient = 0. 5032, P= 0. 0029）. Conclusion： SMCs and inflammatory cells are main cellular sources of increased iNOS in AAA, and NO may play a part in pathogenesis in AAA through inflammation, SMCs and oxidative stress.     

胃促生长素对人主动脉平滑肌细胞增殖及线粒体融合蛋白2表达的影响

目的 通过体外培养人主动脉平滑肌细胞(HASMCs),研究胃促生长素(ghrelin)对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及线粒体融合蛋白2(Mfn-2)表达的影响.方法 体外培养HASMCs,第4～6代细胞用于试验.给予不同浓度(10-9、10-8、10-7、10-6、10-5 mol/L)的ghrelin 或10-6 mol/L ghrelin不同时间(0、6、12、18、24 h)处理,用四甲基偶氮唑蓝比色(MMT)法观察其对HASMC增殖的影响.RT-PCR,Western blot方法检测不同处理方法对Mfn-2表达的影响.结果 10-7～10-5 mol/L的ghrelin可明显抑制HASMC增殖,浓度为10-6 mol/L抑制作用最为明显(P<0.01).ghrelin在6～24 h内均能明显抑制HASMC增殖,在24 h达最高峰(P<0.01).10-6 mol/L ghrelin能明显上调Mfn-2 mRNA和蛋白的表达(P<0.01).10-6 mol/L ghrelin在18 h上调Mfn-2 mRNA和蛋白表达的作用最为明显(P<0.01).结论 ghrelin可能通过上调Mfn-2的表达来抑制HASMC增殖.