弥漫增生型狼疮肾炎和膜型狼疮肾炎的不同细胞因子表达谱提示不同的免疫学发病机制

目的 从系统生物学角度全面研究弥漫增生型狼疮肾炎(Ⅳ型LN)和膜型狼疮肾炎(Ⅴ型LN)患者血清细胞因子表达谱.方法 分离静脉血清,通过抗体芯片技术同时检测4种Th1和5种Th2细胞因子表达.结果 ①细胞因子表达谱:在检测的9种细胞因子中,Ⅳ型LN患者有7种明显升高,包括3种Th1细胞因子[干扰素(INF)-γ、白细胞介素(IL)-2、肿瘤坏死因子(TNF)-α)]和4种Th2细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10、IL-13);而Ⅴ型LN仅有4种细胞因子表达上调(IL-2、IL-4、IL-10和IL-13).②相关性分析:Ⅳ型LN患者细胞因子与临床表现之间相关性较强,如IL-5与抗dsDNA抗体滴度及血肌酐呈正相关、与C3呈负相关;IL-10与系统性红斑狼疮(SLE)疾病活动指数(SLEDA1)呈正相关、与尿蛋白及血红蛋白浓度均呈负相关;IL-13与尿蛋白浓度呈负相关,IL-1与SLEDAI呈正相关、与血红蛋白浓度呈负相关.Ⅴ型LN患者仅IL-1与血肌酐之间呈正相关,IL-4与尿蛋白之间呈负相关.结论 不同病理分型的LN患者体内细胞因子表达谱不同,提示不同病理分型的LN其内在的免疫学发病机制存在差异,也提示不同的细胞因子表达可能代表不同类型的LN.     

狼疮肾炎肾组织核转录因子-κB单核细胞趋化因子-1与CD68的表达及相关分析

目的 对狼疮肾炎(LN)肾组织进行核转录因子-κB(NF-κB)、单核细胞趋化因子(MCP-1)及巨噬细胞特异性抗体(CD68)检测,探讨其与LN肾脏病理及临床指标的关系.方法 应用免疫组织化学二步法检测49例LN肾组织NF-κB、MCP-1及CD68,原位杂交法检测49例LN肾组织NF-κB,并与肾脏病理及临床指标进行分析.结果 ①LN肾组织中NF-κB、MCP-1及CD68表达均比对照组显著升高(P＜0.01);其中Ⅳ型LN肾组织中NF-κB、MCP-1及CD68的表达比非Ⅳ型LN及对照组明显增加(P＜0.01,P＜0.05).原位杂交与免疫组织化学法检测NF-κB差异无统计学意义(P＞0.05).②LN肾组织中,NF-κB的表达与肾组织活动性指数、尿蛋白定量(24 h)及血清肌酐均高于对照组,且三者之间差异有统计学意义(P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05);MCP-1与CD68的表达在肾小球和肾小管中仅与肾组织活动性指数(r=0.447,0.532,P＜0.05)、尿蛋白定量(24 h)(r=0.357,0.368,P＜0.05)呈正相关,而与血肌酐之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 NF-κB通过活化MCP-1进一步诱导巨噬细胞可能是LN肾脏损害的原因之一,NF-κB信号途径有望成为抑制巨噬细胞在肾脏局部浸润和增生的一个新的治疗靶点.     

明胶酶在弥漫增殖型狼疮肾炎中的表达及临床意义

目的 明确明胶酶在弥漫增殖型狼疮肾炎中表达的变化及意义。方法 经过肾活检确诊的弥漫增殖型狼疮肾炎17例，分别进行基质金属蛋白酶（MMP）-2与MMP-9的免疫组织化学染色，并进行MMP-2与膜型基质金属蛋白酶（MT1-MMP）、MMP-9与CD68的免疫组织化学双重染色，平均治疗2．5年后行重复肾活检。观察其表达变化与疾病活动度、临床指标以及转归的关系。结果 正常对照组可有MMP-2的表达，但是少有MMP-9的表达。弥漫增殖型狼疮肾炎肾组织中MMP-2与MMP-9的表达明显增高，其中MMP-9的表达变化更为显著。MMP-2与MT1-MMP、MMP-9与CD68的表达密切相关。重复肾活检显示10例病情改善者MMP-2与MMP-9的表达分别下降了70％和62％。7例病情未缓解者表达仅下降了27％和32％。MMP-2与MMP-9的表达水平与狼疮肾炎病理活动性指数呈正相关。结论 明胶酶的表达与狼疮肾炎病理的活动性密切相关。     

人趋化因子样因子-1的体内表达对BXSB狼疮鼠发病影响的研究

目的 初步探讨人趋化因子样因子－1（human chemokine-like factor-1,hCKLF-1）在系统性红斑狼疮BXSB小鼠发病中的作用。方法 利用肌肉介导的电脉冲转基因技术,便重组的真核表达质粒pCDI-hCKLF－1在BXSB小鼠体内表达,并检测血清中IgM和IgG型抗DNA抗体的水平,尿蛋白浓度和血清尿素氮（BUN）浓度。结果 hCKLF-1的体内表达对雌雄BXSB小鼠IgM和IgG型抗DNA抗体的产生无明显影响,但在短时间内显著地促进雄性BXSB小鼠尿蛋白浓度的异常升高,加重其肾脏炎症。结论 hCKLF－1可能是参与狼疮肾炎的介质之一,其效应细胞可能是单核巨噬细胞。     

弥漫增生型狼疮肾炎的远期预后及影响因素分析

目的调查研究弥漫增生性狼疮肾炎(DPLN)的远期预后及影响因素。方法回顾性观察2000年1月至2014年12月在温州医科大学附属第一医院住院的所有DPLN患者的长期随访终点并分析预后影响因素。将病例按入院时估算肾小球滤过率(eGFR)分为3组:eGFR≥60 ml·min^-1·1.73 m^-2为普通组;15 ml·min^-1·1.73 m^-2≤eGFR<60 ml·min^-1·1.73 m^-2为重症组;eGFR<15 ml·min^-1·1.73 m^-2或需透析患者为危重组。分析3组患者临床,病理和预后的差异。统计学方法采用单因素方差分析、χ^2检验和Kaplan-Meier生存曲线和Cox回归分析。结果167例患者符合纳入标准,女性155例,平均年龄(30±10)岁,平均随访(61±45)个月。所有患者5年和10年累计人肾存活率分别为86%和79%。Kaplan-Meier生存分析显示普通组、重症组和危重组10年累计人肾存活率分别为91%,70%和8%,3组间差异有统计学意义(χ^2=121.93,P<0.01);普通组和重症组(χ^2=4.05,P<0.05)、普通组和危重组(χ^2=97.05,P<0.01)、重症组和危重组(χ^2=52.28,P<0.01)相比,差异均具有统计学意义。多因素Cox回归分析显示:血红蛋白<80 g/L[HR=2.7,95%CI(1.2,6.3),P=0.019],eGFR<60 ml·min^-1·1.73 m^-2[HR=4.1,95%CI(2.0,8.2),P<0.01]和大新月体比率≥30%[HR=1.8,95%CI(1.1,2.9),P=0.021]是ESRD的主要影响因素。结论DPLN伴基线肾功能正常或轻度下降的患者长期预后较好,基线中重度肾功能损害,贫血和大新月体比率高是预后不良的预测因素。     

狼疮肾炎患者外周血单核细胞载脂蛋白EmRNA表达及意义

目的研究外周血单核细胞载脂蛋白E（apoE）mRNA表达，初步探讨apoE在狼疮肾炎（LN）中的作用和意义。方法系统性红斑狼疮（SLE）患者19例，其中LN患者13例：LN-Ⅳ型（弥漫性LN）8例、LN-Ⅱ型（系膜增生性LN）5例，非LN的SLE患者组6例，健康对照组8名。通过密度梯度离心法分离外周血单核细胞，反转录-聚合酶链反应检测单核细胞apoEmRNA表达量。结果LN-Ⅳ型组apoEmRNA表达量明显高于LN-Ⅱ型组（脚．006）和其他两组（均为P=O．000）。与正常对照组和非LN的SLE组比较，LN-Ⅱ型组表达也上调，P值分别为0．018和0．031，正常对照组和非LN的SLE组之间差异无统计学意义，P=O．276。19例患者apoEmRNA表达量与外周血总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）水平之间无直线相关关系，P值分别为0．697，0．647。LN-Ⅳ型组、LN-Ⅱ型组、非LN的SLE组血清总胆固醇水平无差异，P=0．764，3组TG差异也无统计学意义，P=0．525。LN-Ⅳ型组肾脏病变活动指数高于LN-Ⅱ型组，P=0．006。结论LN患者单核细胞apoE表达水平可能与体内免疫反应和活动性炎症病变有关。     

PPARγ在狼疮肾炎患者肾组织中的表达及其意义

目的观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)在狼疮肾炎(LN)不同病变类型肾组织中的表达及其与肾脏病理改变之间的关系,探讨PPARγ在LN发病机制中的可能作用。方法根据临床及肾活检病理诊断,选择LN不同病变类型患者作为研究对象,其中Ⅱ型(6例),Ⅳ型(8例),Ⅴ型(7例)。以肾脏肿瘤切除术中远离肿瘤部位的正常肾组织(6例)为对照。光镜下观察并计数肾脏病变活动指数、间质病变指数；用免疫组织化学方法对各例肾组织PPARγ的表达进行检测,并对其与肾脏病变的相关性进行分析。结果LN患者肾组织。肾小管、肾小球及间质浸润细胞中PPARγ脚表达较正常对照组均显著上调,其中Ⅳ型LN肾组织肾小管、肾小球及间质浸润细胞PPARγ表达显著高于Ⅱ型、Ⅴ型；肾小球PPARγ染色阳性细胞数目与肾脏病理活动积分及间质病变指数之间呈显著正相关(r=0．94；P＜0．01)。结论PPARγ在LN肾组织肾小管、肾小球及间质浸润细胞高表达对于限制LN肾脏病变发展可能具有重要作用     

Toll样受体9在狼疮肾炎患者外周血B淋巴细胞和肾组织中的表达及临床意义

目的 探讨Toll样受体9(TLR9)在狼疮肾炎(LN)患者外周血B淋巴细胞和肾组织的表达及其临床意义.方法 分别采用细胞内流式细胞术和免疫组织化学方法对对照组和LN患者外周血B淋巴细胞及肾组织中TLR9表达情况进行比较,并对TLR9表达与临床指标相关性进行分析.结果 活动期LN患者外周血CD19+B淋巴细胞TLR9的表达率高于非活动期LN患者及对照组(P＜0.01),且其表达率与SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分、抗双链DNA(dsDNA)抗体滴度呈正相关(P＜0.01).LN患者肾组织中肾小球、肾小管间质TLR9表达均较健康组织增高(P＜0.01),其中国际肾脏病学会/肾脏病理学会(ISN/RPS)的Ⅳ型LN肾组织TLR9表达水平较Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ型升高(P＜0.01),且肾小球TLR9表达水平与肾小球细胞增殖程度、肾脏病理活动指数、尿蛋白定量(24 h)呈正相关(P＜0.01).与估计的肾小球滤过率(eGFR)呈负相关(P＜0.01);肾小管间质TLR9表达水平与肾脏病理活动指数、肾小管问质损害程度、尿蛋白定量(24 h)也呈正相关(P＜0.01),与eGFR呈负相关(P＜0.01).结论 TLR9参与了LN患者B淋巴细胞的异常活化及肾脏病理损伤过程.     

RANTES在狼疮肾炎吕的表达及其意义

目的：了解狼疮肾炎（LN）肾组织中化学趋化因子激活正常T细胞表达和分泌因子（RANTES）的表达并探讨其与LN肾脏病理改变和肾功能损害的关系。方法：采用微波免疫组织化学染色（SP法）和原位分子杂交技术检测LN肾脏RANTS的表达，并进一步分析其与LN活动指数、肾脏病理和功能损害的关系。结果：狼疮肾炎组织中RANTES表达显著增高，以WHOⅣ型为显著。RANTES在肾小球和肾小管均有表达，但肾小管表达更显著。LN肾组织RANTES表达与肾组织活动指数、肾脏病理改变和肾功能损害显著相关。结论：RANTES可能参与了LN的发病机制，肾组织中RANTES的表达可作为反映狼疮肾组织活动病变和进行性肾损害的参考指标。     

转化生长因子βⅡ型受体在狼疮肾炎患者外周血单个核细胞表达的意义

目的 探讨狼疮肾炎(LN)患者外周血单个核细胞(PBMCs)转化生长因子βⅡ型受体(TβR Ⅱ) mRNA表达水平及其与疾病活动性的关系.方法 应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测44=例LN患者(均为活动期患者)、21例其他非LN患者和40名健康对照组PBMCs中TβRⅡ mRNA的表达水平,LN患者中未使用与使用激素和(或)免疫抑制剂患者分别为16例和28例.结果 LN患者PBMC中T13R H mRNA水平1.7±1.0显著低于非LN组4.0±3.1及健康对照组4.1±2.5(P<0.01);LN患者中未使用激素和(或)免疫抑制剂组T13R H mRNA的表达水平1.3±1.0低于用药组2.0+0.9(P<0.05);LN患者PBMCs中的T13RII mRNA表达水平与系统性红斑狼疮疾病活动指数(SLEDAI)评分标准(r-0.309,P<0.05)及抗双链DNA抗体(r-0.401,P<0.01)呈显著负相关,与补体C3呈显著正相关(r=0.621,P<0.01).结论 LN患者PBMCs中的TβRⅡmRNA表达水平降低,TβRⅡ参与了LN的发病过程,并与疾病的活动性显著相关;应用激素和(或)免疫抑制剂可以提高TTβRⅡ mRNA的表达,减轻炎症损害.     

狼疮肾炎危险因素分析

目的探讨狼疮肾炎(LN)病变的危险因素。方法对79例LN患者进行回顾性分析,并与同期住院的91例无肾炎病变的SLE患者作对照。所有实验室检查均采用标准方法。结果LN患者占同期住院患者的40.3%。与无肾炎病变的SLE患者作对照,其发病年龄明显小于对照组(P<0.001),两组性别和病程方面差异无显著性(P>0.05)。实验室指标对比显示,抗dsDNA抗体、抗Sm抗体、抗心磷脂抗体(aCL)和抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)在LN组有较高的阳性率,与对照组相比差异有显著性(P<0.05)。结论发病年龄小,存在抗dsDNA抗体、抗Sm抗体、aCL和ANCA阳性是SLE易并发肾炎的危险因素。     

非清髓性环磷酰胺治疗难治性狼疮肾炎的初步研究

目的 探讨非清髓性环磷酰胺(CTX)冲击治疗难治性狼疮肾炎(LN)的疗效及安全性.方法 对6例难治性LN患者进行非清髓性CTX 20～40 mg/kg冲击治疗,比较CTX治疗前后2周血、尿检测指标、肾小球滤过率(GFR)、尿蛋白定量(24 h)、系统性红斑狼疮活动指数(SLEDA1)评分的变化.结果 治疗后2周尿蛋白定量(24 h)显著降低[(1904±904)和(319±97)mg,P＜0.05],尿白细胞计数[(2.7±2.8)和(0.5±1.0)个/μP＜0.05]和SLEDAI评分[(17±5)和(6±5)]治疗前后差异均有统计学意义(P＜0.05),而血清补体C3水平显著升高[(0.60±0.17)和(0.94±0.78)g/L,P=0.017],差异均有统计学意义.白细胞达谷值距CTX末次冲击时间平均为11.2 d.1例出现鼻窦炎,1例脱发,2例胃肠道反应.结论 非清髓性CTX冲击治疗难治性LN安全有效.这一初步研究结果有待大样本的临床双盲试验证实.     

Bcl-2、Bax在狼疮肾炎患者肾组织中的表达及意义

目的研究细胞凋亡调节蛋白(Bcl-2及Bax)在狼疮肾炎(LN)患者肾组织的表达情况及与LN肾脏病理改变的关系。方法2003-012003-04对广西医科大学第一附属医院的44例活动期LN患者用免疫组化方法检测肾组织中Bcl-2、Bax的表达,观察它们与LN肾脏病理改变的关系。结果(1)LN肾小球Bcl-2及Bax表达均增高,与肾小球细胞增殖程度及增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞数呈正相关。(2)LN肾间质Bcl-2表达增高,与间质炎症细胞浸润程度正相关。(3)LN肾小管Bax表达增高,与肾小管间质病变呈正相关。结论LN肾组织存在Bcl-2、Bax蛋白异常表达。Bcl-2高表达在LN肾小球细胞增殖及肾间质炎症细胞浸润过程中可能起重要作用。Bax在肾小管过度表达与肾小管间质病变有关。     

狼疮肾炎并发感染的临床研究

目的探讨狼疮肾炎(LN)患者并发感染的临床特点及相关因素。方法对住院治疗的586例LN患者进行回顾性分析。结果240例LN患者并发感染,发生率41%,总感染例次327次(医院感染167次)。其中23例(9.6%)患者发生2个或以上部位感染,71例(29.6%)发生至少2种病原体的混合感染。呼吸道是本组LN患者最常见感染部位。感染类型包括细菌感染173次(52.9%),病毒感染65次(19.9%),真菌感染48次(14.7%),寄生虫感染6次(1.8%),其它病原体感染6次(1.8%),未明确病原体感染29次(8.9%)。尿蛋白水平、血白蛋白、血肌酐、血白细胞数、补体C3水平、皮质类固醇激素用量以及联合应用细胞毒免疫抑制剂与感染显著相关(P<0.01)。结论LN患者易并发感染,而且重症感染多,严重影响预后,须针对各种易感因素采取综合防治措施。     

系统性红斑狼疮患者血浆巨噬细胞衍生趋化因子水平及临床意义

目的测定比较系统性红斑狼疮(SLE)患者[尤其是不同病理类型狼疮肾炎(LN)患者]血浆中巨噬细胞衍生趋化因子(MDC)的水平，探讨其作为Th2型免疫反应标志物的变化及意义。方法利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测SLE患者46例(其中经。肾活检确定病理分型的LN患者15例)以及类风湿关节炎(RA)患者16例和正常对照16名血浆MDC含量。结果未经治疗的SLE患者与经治患者、RA患者和正常对照组血浆巾的MDC含量差异有统计学意义，SLE患者血浆MDC水平与系统性红斑狼疮疾病活动指数(SLEDAI)呈正相关。LN患者血浆中MDC含量与其病理类型存在明显的联系：Ⅱ型和Ⅲ型LN组高于Ⅳ型组。结论MCD可能在估计SLE的活动度和判断LN的类型上具有一定意义。SLE疾病进程与血浆中MDC水平密切相关。     

狼疮肾炎患者继发真菌感染的危险因素分析

目的　了解狼疮肾炎 (LN)继发真菌感染情况及其危险因素。方法　通过 93例LN继发感染现状调查 ,发现 4 5例即 4 8 4 %发生了不同程度的多种医院感染 ,其中真菌感染为 2 2 6 % ,2例直接死于真菌感染。感染的病源谱除有真菌外 ,同时还有病毒、细菌 ,但以真菌和细菌为主 ,侵犯部位主要为泌尿道、胃肠道和呼吸道。结果　致感染因素与使用激素、免疫抑制剂、抗生素、介入性操作、肾功能不全、住院时间长等密切相关。结论　加强狼疮性肾炎继发感染的防治是提高LN存活率的重要突破口。     

男女系统性红斑狼疮肾炎49例临床分析

目的探讨男、女系统性红斑狼疮（SLE）的临床表现和狼疮肾炎（LN）及病理分型的异同。方法分析49例男、女SLE（其中男性13例，女性36例）的临床资料及LN肾活检病理类型。结果在男、女性SLE的初发症状中，蛋白尿、浮肿的发生率差异有统计学意义。同时初发症状包括两项或两项以上临床表现者男性与女性患者相比差异有统计学意义，提示男性狼疮患者起病较重，并以蛋白尿、浮肿为初发症状多见。而且男性SLE平均发病年龄较女性患者小（P〈0．05）。男、女LN的病理表现与性别无显著相关性（P〉0．05）。结论男性SLE患者平均发病年龄早，起病常较重，但男、女性SLE具体临床表现与LN的病理改变差异无统计学意义。     

狼疮性肾炎患者白细胞介素-13的表达及其临床意义

目的 探讨狼疮性肾炎(LN)患者血浆及肾组织白细胞介素-13(IL-13)的表达及其临床意义。方法 采用ELISA法检测血浆IL-13水平，采用免疫组化ABC法检测肾组织IL-13的表达。结果 LN患者血浆IL-13水平、肾小球及肾小管间质区IL-13表达较对照组和非LN肾脏病对照组增高，以Ⅳ型LN患者肾小球区IL-13表达最高，而不同病理类型的LN肾小管间质区IL-13表达无显著性差异。LN患者血浆及肾小管间质区IL-13表达与Ccr和血清C3呈负相关，与肾小管间质病变活动指数和肾小球病变活动指数呈正相关。结论 IL-13参与LN的分子病理机制，血浆及肾组织IL-13水平可能有助于判断狼疮活动程度。     

狼疮肾炎患者肾组织中载脂蛋白E的表达及意义

目的 了解狼疮肾炎(LN)肾组织中载脂蛋白E(APOE)的表达,并探讨其与LN肾脏病理改变和肾功能损害的关系.方法 用免疫组织化学方法对40例LN患者.肾组织APOE的表达进行检测,并对其与LN的肾脏病理改变和肾功能损害的相关性进行分析.结果 健康肾脏组织有较弱的ApoE表达;LN肾组织APOE的表达较健康肾组织明显增高[肾小球(31.2±11.0)与(3.0±1.6);肾小管(71.64±8.90)与(0.60±0.06)],并且Ⅳ型LN患者肾组织APOE表达量高于非Ⅳ型LN患者[肾小球(38.4±4.5)与(18.0±4.6);肾小管间质(77.6±2.5)与(60.0±3.2)];Spearman相关分析显示LN肾组织ApoE的表达与LN肾脏病理活动指数和肾功能呈显著相关(P＜0.01).结论 LN患者肾脏组织中ApoE的表达增高,尤以Ⅳ型LN为著,其表达量可反映LN肾脏活动性病变及肾脏损害情况.     

狼疮肾炎患者肾组织细胞凋亡的研究

目的 寻找狼疮肾炎中细胞凋亡的新证据,探讨其在狼疮肾炎发病机制中的作用及其临床意义。方法 用电镜和ＴＵＮＥＬ原位末端标记法对１４例狼疮肾炎、３２例原发性肾小球肾炎和５例正常肾组织细胞进行细胞凋亡检测。结果 狼疮肾炎组织细胞平均凋亡积分较原发性肾小球肾炎及正常肾组织明显增高。并发现有巨噬细胞吞噬凋亡细胞和凋亡小体现象。结论 细胞凋亡异常在狼疮肾炎的发生、发展中起一定作用