血小板生成素及其它调节血小板生成的细胞因子研究进展

血小板生成素及其它调节血小板生成的细胞因子研究进展田生礼，刘丽临床实验科主题词血小板生成素，巨核细胞，白细胞介素类，红细胞生成素１血小板生成素血小板生成素［Ｔｈｒｏｍｂｏｐｏｉｅｔｉｎ，ＴＰＯ］，又称巨核细胞发育形成因子（Ｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｅｇ...     

血小板生成素研究进展

血小板生成素研究进展临床实验科李文，朱美财主题词：血小板生成素血小板生成素（Ｔｈｒｏｍｂｏｐｏｉｅｔｉｎ，ＴＰＯ）是一种刺激巨核细胞增殖、分化和成熟，并影响血小板生成的重要细胞因子，是维持循环血小板水平恒定的主要生理调节剂。五十年代，人们在探讨体液因...     

人血小板生成素基因cDNA克隆及分析

人血小板生成素基因ｃＤＮＡ克隆及分析李文，朱美财，蔡庆，陈友纯临床实验科孙曼霁军事医学科学院主题词血小板生成素，聚合酶链反应，ＤＮＡ，重组，碱基序列血小板生成素（ｔｈｒｏｍｂｏｐｏｉｅｔｉｎ，ＴＰＯ）是一种在细胞多层次水平上调节巨核细胞增殖、分化和成...     

血小板生成素的研究进展

巨核细胞、血小板系统是骨髓造血系统的重要组成部分。来自骨髓造血干细胞的巨核系相细胞经增殖分化为成熟的巨核细胞，并生成血小板。对于这一过程调控的研究已经进行了数十年。1961年，人们发现血小板减少的动物体液有巨核细胞刺激活性，提出了巨核细胞发育和血小板的生成是由两个不同的细胞因子在不同的阶段调节的假设；巨核细胞刺激因子（Meg-CSF）刺激巨核细胞的增殖与分化，血小板生成素TPO）则刺激巨核细胞的成熟和血小板的生成。基于这样一种认识，许多研究者都致力于从不同的生物来源中分离、纯化这两种因子，并已有一些部分分…     

人血小板生成素在CHO细胞中的稳定表达及其产物鉴定

目前，血小板生成素（ＴＰＯ）的基因工程研究是继促红细胞生成素（ＥＰＯ）之后的又一个热点。由于对ＴＰＯ结构与功能的关系了解不够，其基因工程方面的研究在表达系统的选择和分子结构的设计上均存在很大的盲目性。针对这一问题，作者欲对ＴＰＯ的糖基化程度与其生物学...     

促血小板生成素与辐射损伤

ＴＰＯ（促血小板生成素）是巨核系造血的主要刺激因子，近年的研究表明，ＴＰＯ与造血干细胞之间存在密切联系。ＴＰＯ可促进辐射损伤后的造血重建，有可能解决急性放射病中血小板恢复滞后的问题。ＴＰＯ在造血干细胞移植、血小板采集与分离等领域也不广阔的应用前景。     

稳定,高效表达血小板生成素的真核细胞株的构建

目的：血小板生成素（ＴＰＯ）在治疗血小板减少症方面具有潜在的应用前景，为构建体外稳定表达ＴＰＯ的真核细胞株，进行了ＴＰＯ的稳定表达研究。方法：采用逆转录－ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，从水囊引产的胎儿肝组织中得到ＴＰＯ ｃＤＮＡ并进行表达。结果：经过序列分析证明获得了没有错义突变的ＴＰＯ全长ｃＤＮＡ（约１ｋｂ）。在此基础上构建的ＴＰＯ的真核表达质粒在ＣＯＳ－７细胞中瞬时表达的产物能够维持并刺激ＴＰＯ     

血小板生成素受体信号转导通路研究进展

血小板生成素（11PO）是一种重要的细胞因子，不仅在巨核细胞增殖、成熟和血小板产生中发挥主要的调控作用，而且参与造血干细胞自我更新和分化的调节。TPO与其受体c-Mpl结合后，c-Mpl形成同源二聚体，激活JAK／STAT、Shc／Ras／MAPK、PI3K／Akt等信号通路，引发一系列生理效应。本文主要对TPO、TPO受体蛋白的结构及其介导的信号转导通路等方面的研究进展作一综述。     

高原红细胞增多症患者骨髓红系祖细胞体外培养观察

目的：观察高原红细胞增多症患者骨髓红系祖细胞体外增殖情况。方法：采用微量甲基纤维素培养法对１０例高原红细胞增多症（高红组）及１０例高原健康人（对照组）的骨髓细胞进行体外培养。结果：在无促红细胞生成素刺激时,高红组及对照组皆无ＣＦＵ－Ｅ及ＢＦＵ－Ｅ集落形成。高红组的ＣＦＵ－Ｅ及ＢＦＵ－Ｅ集落数随促红细胞生成素的浓度增加而增加（Ｐ＜０．０１）,当促红细胞生成素浓度达到８ｕ／ｍｌ时,ＣＦＵ－Ｅ及ＢＦＵ－Ｅ的集落数不再明显增加（Ｐ＞０．０５）,对照组对促红细胞生成素的刺激时反应与高红组相一致。在同一浓度促红细胞生成素刺激时,两组ＣＦＵ－Ｅ及ＢＦＵ－Ｅ集落数无明显差别（Ｐ＞０．０５）。结论：高原红细胞增多症患者骨髓红系祖细胞自身无增殖能力,其增殖必须有促红细胞生成素的刺激,促红细胞生成素的增高是高原红细胞增多症发病的一个因素,但其发病还存在其他机制。     

血小板生成素基因治疗的研究

血小板生成素（Ｔｈｒｏｍｂｏｐｏｉｅｔｉｎ，ＴＰＯ），又称巨核细胞生长发育因子，能特异性地作用于巨核细胞增殖和分化阶段［１］。研究表明，当向正常动物供以重组蛋白ＴＰＯ时，能明显提高动物体内血小板计数［２］。这一发现为治疗那些由于接受高剂量化疗和放疗而遭受生命危险的血小板减少症病人提供了可能性。鉴于重组ＴＰＯ对病人来说属外源蛋白，具有不同程度的副作用，本文以基因治疗技术探索一条新的ＴＰＯ给药途径，即把基因导入动物体内，使动物自身表达ＴＰＯ，维持高水平血小板。１　材料与方法１．１　质粒　本室利用ＲＴ…     

慢性重复低氧小鼠的红细胞生成

小鼠暴露于低压舱（０．４２ａｔｍ，２２ｈ／ｄａｙ）连续９天。结果表明，慢性重复低氧后，血清促红细胞生成素（ＥＰＯ）浓度迅速增高，第３天达峰值，其后迅速递减，但直至低氧后９天，ＥＰＯ仍高于低氧前水平（Ｐ＜０．０１）。低氧期间，小鼠红细胞比容持续递增（Ｐ＜０．０１），而血浆容量无明显改变（Ｐ＞０．０５）。伴随红细胞生成的增加，ＥＰＯ生成存在反馈性抑制现象。     

中国人血小板生成素cDNA的克隆及测序

中国人血小板生成素ｃＤＮＡ的克隆及测序卢柏松，黄培堂（北京军事医学科学院生物工程研究所北京１００８５０）调控血小板生成的血小板生成素（ｔｈｒｏｍｂｏｐｏｉｅｔｉｎ，ＴＰＯ）基因序列最近被阐明，这为人们了解血小板的发育调节打开了缺口，同时也为临床治疗血...     

人血小板生成素在大肠杆菌中的高效表达

目的：人血小板生成素（ＴＰＯ）在大肠杆菌中的高效表达。方法：利用ＰＣＲ技术,扩增出了（１－１７４个氨基酸的）人血小板生成素ｃＤＮＡ,并将其克隆到ｐＧＥＸ－１λＴ载体中,构建了融合蛋白表达质粒。重组子用限制性内切酶酶切鉴定。表达产物ＳＤＳ－聚丙烯胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）。结果：限制性内切酶酶切鉴定表明重组子含有正确的（１－１７４氨基酸）ＴＰＯｃＤＮＡ片段;表达产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ相对分子质量     

用三步法纯化重组人促红细胞生成素

用生物反应器培养中国仓鼠卵巢细胞促红细胞生成素（ＣＨＯＥＰＯ）Ｃ２细胞株，培养上清液中重组人促红细胞生成素（ｒＨｕＥＰＯ）表达水平达２×１０６～３×１０６Ｕ／Ｌ。培养上清液经过三步纯化：第一步为反相色谱，可将样品体积浓缩约９６．７％，其收集液经充分透析后进行第二步的ＤＥＡＥ离子交换色谱，最后进行分子筛色谱，总回收率为３０％以上。经纯化的ｒＨｕＥＰＯ比活性为１．５×１０８Ｕ／ｇ蛋白，ＳＤＳＰＡＧＥ为一条带，扫描测试纯度达９８％以上。     

血小板生成素的研究进展

根据近年来的文献报道，概述了血小板生成素（ＴＰＯ）的研究进展。人ＴＰＯ基因长度约为６．２ｋｂ，含有６个外显子和个内含子。所有外显子－内含子的连接符合ＧＴ／ＡＧ规则。其ｃＤＮＡ克隆由１７７４个核苷酸附加一个多聚腺苷酸尾巴构成，它是一个１０５９个核苷酸的可译框架，是一种单拷贝基因。转录起始位点位于其ＤＮＡ－１９４９位的胞嘧啶外，在转录起始位占上游１．４ｋｂ的序列中没有通常哺乳动物启动子的基序和ＴＡＴＡ     

血小板生成素N端结构或全长分子的生物学活性分析

以构建的人血小板生成素（ＴＰＯ）真核和原核表达质粒为基础，对其表达产物即ＴＰＯ全长分子及以融合蛋白形式表达的ＴＰＯＮ端结构域，通过给Ｂａｂｌ／ｃ小鼠腹腔注射进行了生物活学性分析，结果表明，两种蛋白均具有明显促进血小板生成的作用，为进一步研究ＴＰＯ的糖基化与其生物学活性及半衰期关系打下基础。     

血小板生成素基因注射促血小板生成作用的实验研究

本文研究了 ＴＰＯ 基因注射法对健康小鼠血小板的促生成效果。将带有 ＴＰＯ ｃＤＮＡ 的ｐｃＤＮＡ３ 质粒按６０μｇ／只剂量注射到昆明小鼠后肢内侧肌肉内，每天断尾采血，对白细胞和血小板计数。一定时间内采股骨骨髓推片，计数单位面积内的巨核细胞数。以同期未注射的小鼠作为对照组。结果显示，在基因注入后的第三天起即出现血小板和巨核细胞增多。在所观察的三周内，血小板有一可持续一周的高水平期，平均约为同期对照的１８４％ ，最高可达三倍以上。计数高峰后血小板计数在高于对照水平上呈波动状态。小鼠脾脏出现以巨细胞增生和内皮细胞活化为特点的组织学变化，提示ＴＰＯ 具有刺激免疫功能的作用     

血小板生成素N端结构域及全长分子的生物学活性分析

以构建的人血小板生成素（ＴＰＯ）真核和原核表达质粒为基础，对其表达产物即ＴＰＯ全长分子及以融合蛋白形式表达的人ＴＰＯＮ端结构域，通过给Ｂａｂｌ／ｃ小鼠腹腔注射进行了生物活学性分析。结果表明，两种蛋白均具有明显促进血小板生成的作用。为进一步研究ＴＰＯ的糖基化与其生物学活性及半衰期关系打下基础。     

奥扎格雷钠联合马来酸桂哌齐特治疗难治性不稳定型心绞痛的疗效观察

实验研究显示血小板聚集会释放更多的缩血管物质血栓素A2（TXA2），使冠状动脉内微血栓形成，从而导致管腔阻塞和心肌缺血，引起不稳定型心绞痛（UAP）的发生。因此对一部分不稳定型心绞痛患者采用常规的扩张冠状动脉和降低心肌需氧量的药物并不能减少心绞痛的发作及稳定病情。我们在常规抗心绞痛治疗的基础上，利用新型抗血栓药奥扎格雷钠及改善心肌血液供应和微循环的药物马来酸桂哌齐特联合治疗难治性不稳定型心绞痛取得较好疗效，现报道如下。     

红细胞生成素对放射治疗病人的保护与增敏作用

放射治疗是肿瘤治疗的主要方法之一,而其疗效则与放疗时肿瘤组织氧合度密切相关,因此,贫血与放射治疗疗效之间的关系一直是肿瘤放射治疗学者关注的焦点之一［１,２］。红细胞生长因子—红细胞生成素（ＥＰＯ）及重组人红细胞生成素（ｒＨｕＥＰＯ）可以调控血红蛋白（Ｈｂ）水平,并于近几年相继应用于临床,而且已经证明其可以改善放疗病人的生活质量,提高放疗疗效。本文就ＥＰＯ／ｒＨｕＥＰＯ对放疗病人的保护和增敏作用及其他相关的方面予以综述。一、肿瘤病人贫血的机理贫血是肿瘤病人常见的症状,而导致肿瘤病人贫血的原因则是…