自然流产中外周血和蜕膜组织自然杀伤细胞亚群的比例变化

目的和方法:采用流式细胞仪检测淋巴细胞亚群法探讨自然流产与正常早孕之间外周血和蜕膜自然杀伤细胞亚群的差异。结果:外周血中自然流产组的CD56⁺的百分率较早孕组有减少的趋势,而CD56⁺CD16⁺的百分率则较早孕组显著减少,CD16⁺的百分率两组间无差异。自然流产组的蜕膜CD56⁺、CD56⁺CD16⁺、CD16⁺的百分率均明显低于早孕组。结论:蜕膜中CD56⁺NK细胞的减少可能是自然流产的原因之一,外周血中CD56⁺和CD56⁺CD16⁺NK细胞的丢失可能对自然流产的发生具有诊断价值。     

血管内皮祖细胞的体外扩增特性研究

目的:探讨血管内皮祖细胞(EPCs)在体外扩增特性。方法:利用磁性活化细胞分选系统(MACS)系统富集CD34⁺细胞,在相同条件下与同批的单个核细胞(MNC)、CD34⁺和CD34^-混和细胞进行对照培养,比较EPCs体外扩增效果。另外研究血管内皮生长因子(VEGF)和传代培养对细胞分化、扩增动力学和细胞凋亡的影响。应用细胞免疫化学和流式细胞术对细胞定性定量分析。结果:MNC培养、CD34⁺和CD34^-细胞混和培养明显高于CD34⁺细胞单独培养EPCs扩增率(P＜0.05),一旦细胞形成线索样结构行传代培养明显低于未传代的细胞凋亡(P＜0.05)。VEGF对细胞凋亡(P＞0.05)无明显影响,这些分化的EPCs免疫细胞化学染色CD34、vWF、KDR、CD31阳性,并且吞噬乙酰化低密度脂蛋白(Ac-LDL)。培养7d流式细胞检查CD34⁺、AC133^＋分别占贴壁(AT)细胞的68.2%±6.3%(n=6)、57.2%±9.8%(n=6)。结论:MNC培养、CD34⁺和CD34^-细胞混和培养提高了EPCs扩增率,早传代使凋亡率明显降低。VEGF对EPCs体外扩增无明显影响。     

镁对哮喘患者外周血CD4+ CD25+调节性T细胞凋亡及Foxp3表达的影响

目的:观察镁对分离培养的健康人和哮喘患者外周血CD4⁺CD25⁺调节性T细胞凋亡及叉头框蛋白3(Foxp3)表达的影响。方法:经磁珠分离法分离出健康人和哮喘患者外周血CD4⁺CD25⁺T细胞,分镁剂干预组(10 mmol/L)及空白组培养72 h后,用流式细胞仪检测CD4⁺CD25⁺T细胞的凋亡率及Foxp3表达情况。结果:(1)健康人外周血CD4⁺CD25⁺T细胞的纯度为77.4％~92.3%,哮喘患者CD4⁺CD25⁺T细胞的纯度为75.2％~93.8％。(2)CD4⁺CD25⁺T细胞占外周血CD4⁺T细胞的比例在健康组为4.12%~7.98%,在哮喘组为4.51%~8.68%,两者没有显著差异(P＞0.05)。(3)镁(10mmol/L)可以诱导健康组及哮喘组外周血CD4⁺CD25⁺T细胞凋亡率增加(P＜0.05),但对Foxp3的表达无影响(P＞0.05)。结论:镁促进CD4⁺CD25⁺T调节细胞凋亡增加可能为其治疗支气管哮喘的作用机制之一。     

Th17细胞联合CD3+CD8-IL-21+T细胞升高与宫颈癌发生发展的关系

目的: Th17细胞在免疫调节中起重要作用,而IL-21与Th17在分化调节和功能行使上密切相关。本研究旨在探讨Th17在宫颈癌发生发展中的作用。方法: 选取37例宫颈癌患者、25例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者和18例健康志愿者作为研究对象,用流式细胞分析术检测外周血中Th17细胞及CD3⁺CD8^-IL-21⁺T细胞的比例。分析两者与临床病理指标之间的关系。结果: 与健康对照组相比,Th17细胞及CD3⁺CD8^-IL-21⁺ T细胞比例(占淋巴细胞百分比)在CIN组(P<0.01,P<0.05)及宫颈癌组(P<0.01,P<0.05)均明显升高。此外,2种细胞的比例都与临床分期有关,在晚期宫颈癌组明显升高(均P<0.05),并且有淋巴结转移组或脉管浸润组都明显高于相对应的无转移组(P<0.01, P<0.05)或无浸润组(均P<0.01)。此外,在健康对照组和宫颈癌组,Th17与CD3⁺CD8^-IL-21⁺ T细胞呈正相关,CD3⁺CD8^-IL-21⁺ T细胞的比例还与肿瘤大小有关(P<0.01)。结论: Th17和CD3⁺CD8^-IL-21⁺ T细胞在宫颈癌患者外周血中的比例上调,在宫颈癌的发生发展中可能起着重要作用。     

小儿哮喘病人外周血单核细胞表型的变化

目的: 探讨小儿哮喘病人外周血中单核细胞表型特征, 以了解它与气管中巨噬细胞之间的相互关系和作用。方法: 采用全血单克隆抗体(CD14、CD16、HLA-DR、CD44、CD69)三色或双色荧光标记方法, 利用流式细胞仪检测细胞的阳性百分比和平均荧光强度。结果: 哮喘病人CD14和CD14⁺/CD16⁺中的CD16细胞的平均荧光强度、CD14⁺/CD16⁺和CD16^-粒细胞的百分率都明显高于健康对照组。结论: 哮喘病人外周血中的单核细胞具有组织中巨噬细胞的特征。     

人外周血CD8+T细胞CD28、CD56及CD57表达水平的老年性改变

目的:通过对健康老年人与青年人外周血CD8⁺T细胞CD28、CD56及CD57表达水平的比较性研究,探讨免疫衰老的细胞学机制。方法:采用三色免疫荧光标记流式细胞术分析青年组(20-35岁)与老年组(60-75岁)外周血CD8⁺CD28⁺、CD8⁺CD56⁺及CD8⁺CD57⁺T细胞水平。结果:老年组外周血CD8⁺CD28⁺T细胞明显低于青年组,阳性百分率分别为34.07±5.29和49.84±7.43(P＜0.05);而老年组CD8⁺CD56⁺T细胞及CD8⁺CD57⁺T细胞均明显高于青年组,前者阳性百分率分别为6.60±2.40和2.10±0.35,后者阳性百分率分别为41.82±6.01和22.89±2.80(P＜0.05)。结论:老年人CD8⁺T细胞CD28、CD56及CD57的表达率均随年龄增长有明显改变;CD28表达下降可能是引起免疫系统功能降低的重要原因,而CD56、CD57表达水平的增加则可能是机体对细胞免疫功能下降的一种代偿性适应。     

EPCAM、CD44和CD24在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的: 联合检测95例胃癌组织中上皮细胞黏附分子(EPCAM)、白细胞分化抗原 44(CD44)和白细胞分化抗原 24(CD24)的表达情况,分析这3种蛋白与胃癌临床病理资料及预后之间的关系。方法: 应用免疫组织化学法检测95例经手术切除并有明确病理诊断为胃癌的标本中EPCAM、CD44和CD24的表达。分析95例胃癌临床病理资料与这3种蛋白阳性表达之间的关系。结果: (1) EPCAM阳性56例(58.95%),CD44阳性41例(43.16%),CD24阳性56例(58.95%)。其中EPCAM⁺CD44⁺30例(31.58%),EPCAM⁺CD24⁺45例(47.37%),CD44⁺CD24⁺32例(33.68%),EPCAM⁺CD44⁺CD24⁺25例(26.32%)。(2)EPCAM与年龄、肿瘤浸润深度、WHO组织学分型有关;CD44与BORRMANN分型、WHO组织学分型、CEA值有关;CD24与浸润深度、肿瘤位置、WHO组织学分型、脏器侵犯有关;三者阳性与浸润深度、肿瘤位置、WHO组织学分型有关(P<0.05)。(3)EPCAM、CD44阳性组的生存率与阴性组比较差异有统计学意义(P<0.05及P<0.01);EPCAM⁺CD44⁺CD24⁺与EPCAM^-CD44^-CD24^-的生存率比较差异有统计学意义(P<0.05); EPCAM^-CD44⁺CD24⁺与EPCAM^-CD44^-CD24^-的生存率比较有统计学意义(P<0.05)。结论: EPCAM、CD44和CD24在胃癌组织中表达阳性率高,可作为胃癌诊断的初筛实验。     

细胞因子诱导的杀伤细胞的生物学特性研究

目的:探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)的生物学特性。方法:健康人非贴壁单个核细胞用含IFN-γ、IL-1β、IL-2、CD3单抗诱导CIK细胞。以LAK细胞作为对照。流式细胞仪和免疫细胞化学染色检测细胞表型特征;乳酸脱氢酶释放法分析细胞毒活性。结果:诱导2周后,CIK细胞的增殖率达到高峰,CD3⁺细胞占95％以上;第3周细胞生长进入平台期。诱导15d时,CD3⁺CD56⁺NKT亚群占16.5％,比例在2-4周区间内无明显变化。LAK细胞增殖缓慢,显著低于同期CIK细胞增殖率(P＜0.01)。不同效:靶比例CIK细胞对肝癌细胞BeL-7402的特异性溶解率显著高于LAK细胞(P＜0.01)。免疫细胞化学染色结果显示,CIK细胞高度表达HLA-DR和CD54抗原,NKT细胞体积较CD3⁺CD56^-细胞略大,细胞表面有大量伪足。结论:CIK细胞具有高度增殖能力,其体外杀瘤活性明显优于LAK细胞。诱导14-21d,CIK细胞增殖率和CD3⁺CD56⁺阳性细胞率均达到高峰,此时期的CIK细胞适合临床应用。     

α1胸腺肽对胸腺细胞发育和成熟的影响

目的:探讨α₁胸腺肽对胸腺细胞发育的影响。方法:测定CD4⁺CD8⁺胸腺细胞群的比例及 5-FU和胸腺肽处理组在CD4^-CD8^-胸腺细胞群上Hh信号的Smo分子(增生反应的潜在阴性调节者)的表达效果来估价胸腺肽对胸腺细胞成熟和发育的影响。结果:发现α₁胸腺肽在30μg/kg的低剂量下显示活性。流式细胞仪分析根据CD4^-CD8^-胸腺细胞上Hh信号的Smo分子的表达确定α₁胸腺肽在此剂量加快了胸腺细胞的成熟。结论:α₁胸腺肽能加快CD4^-CD8^-胸腺细胞向CD4⁺ CD8⁺阶段的发展。     

母胎界面树突状细胞CCL17和CCL22表达在母胎免疫耐受中的作用

目的: 检测非孕期子宫内膜和正常妊娠早期及复发性自然流产患者蜕膜中树突状细胞(DC)CCL17和CCL22的表达差异,探讨母胎界面DC在CD4⁺CD25⁺调节性T细胞(Treg)的募集及母胎免疫耐受微环境形成中的作用。方法: 正常早孕组人工流产时、复发性流产组清宫时取其蜕膜,正常未孕组行子宫切除时取其内膜组织。分离蜕膜或子宫内膜单个核细胞,体外诱导培养DC,用real-time PCR法分析3组DC CCL17和CCL22 mRNA的表达水平,ELISA法检测3组DC培养上清液中CCL17和CCL22蛋白的表达。结果: 正常早孕组蜕膜DC CCL17和CCL22 mRNA的表达分别为3.04±0.40和1.83±0.24,均高于正常未孕组(0.85±0.24和0.31±0.08,P<0.01)和复发性流产组(1.65±0.14和0.96±0.09,P<0.01)。正常早孕组蜕膜DC能够持续旺盛分泌趋化因子CCL17和CCL22,在培养的12~96 h内CCL17和CCL22的分泌量逐渐增多。同一时点早孕组DC分泌的CCL17和CCL22均明显高于未孕组和复发性流产组DC分泌的CCL17和CCL22(P<0.01)。结论: 正常妊娠后蜕膜DC表达CCL17和CCL22增强,DC可能通过高表达CCL17和CCL22而增强对CD4⁺CD25⁺Treg的趋化作用,从而在母胎界面的免疫耐受中发挥重要作用,蜕膜DC表达CCL17和CCL22下降可能与复发性自然流产的发病有关。     

剖宫产率增高的相关因素分析

目的 探索剖宫产手术适应证的变化趋势。方法 对2001年1月至2002年1月对在我院行剖宫产的886例病例进行回顾性分析。结果 胎儿因素664例，其中胎位异常(臀位、枕横位)129例(14％)，胎儿窘迫56例(6．32％)，羊水过少52例(5．86％)，脐带绕颈48例(5．14％)，巨大胎儿41例(4．51％)，前置胎盘35例(4．06％)，双胎9(1．14％)；骨盆狭窄67例(11．88％)；孕妇因素168例，其中妊娠胆汁淤积50例(5．64％)，妊高症43例(4．85％)，高龄初产34例(3．83％)，疤痕子宫25例(2．82％)，过期孕16例(1．85％)；社会性因素共58例(6．5％)。结论 胎儿临产异常及孕妇合并疾病仍是剖宫产手术的主要手术指征，但来自孕产妇及医生的主观意愿也影响着对分娩方式的选择。     

分娩方式对妊娠合并重型肝炎产妇预后的影响

目的 探讨不同分娩方式对妊娠合并重型肝炎产妇预后的影响。方法 回顾1994—2007年间60例妊娠合并重型肝炎病例的资料，按分娩方式分为阴道分娩组、剖宫产组以及剖宫产加子宫切除组，其中阴道分娩组22例，剖宫产组20例，剖宫产加子宫切除组18例，对比三组患者分娩前、分娩后的情况及病死率。统计方法采用方差分析，卡方检验、Fisher’s精确概率法和秩和检验。结果 三组患者分娩前血清胆红素、血清胆固醇、凝血酶原活动度、血清肌酐、血清胆碱酯酶、肝性脑病及肝肾综合征发生情况差别无显著性；分娩后血清胆固醇、血清胆碱酯酶及肝性脑病在各组间差别无显著性；分娩后阴道分娩组与剖宫产组的血清胆红素、凝血酶原活动度、血清肌酐、肝肾综合征、产后出血、产褥感染、病死率差异无显著性，而阴道分娩组或剖宫产组与剖宫产加子宫切除组相比，上述指标差异均有显著性。结论 妊娠合并重型肝炎产妇采用剖宫产加子宫切除预后较好。     

Prostaglandin E2 gel In ripening of cervix in induction of labour

A study was done in 75 patients who underwent induction of labour with Prostaglandin E2 gel. All these patients had an unripe cervix. The commonest indications were post-datism, intrauterine growth retardation and pregnancy-induced hypertension. All patients were primigravidas with singleton pregnancy and beyond 35 weeks of pregnancy. The mean Bishop score at the time of instillation was less than three. The improvement of another 2-3 points within six hours and by 7-8 points within 12 hours was found after instillation of the gel. 92% of the patients went into spontaneous labour and 8% required reinstillation. The incidence of failed induction was 1.33%. The mean duration of latent phase was 10.34 hours. Induction delivery time was 16.43 hours. 68.1% patients required augmentation of labour and 31.9% did not require augmentation of labour with oxytocin drip. The incidence of vaginal delivery was 81.33% and that of caesarean section was 17.33%. The commonest indication of caesarean section was foetal distress.     

高危人群子宫动脉血流预测妊娠期高血压疾病的研究

目的探讨中期妊娠高危人群子宫动脉血流与妊娠期高血压疾病(hyperten sive disorders complicating pregnan-cy,HDCP)发病的相关性,为HDCP的预测探讨新的途径。方法采用前瞻性的研究方法,对中期妊娠孕妇进行Olson婚姻质量问卷(ENRIC)调查,筛查高危人群,选择高危人群56例为观察组,同期非高危人群45例为对照组,以彩色多普勒同时监测胎儿情况和双侧子宫动脉血流,观察两组间子宫动脉血流各项指标,追踪两组HDCP的发病率。结果观察组子宫动脉血流各项指标和HDCP的发病率明显高于对照组,两组比较有统计学意义(P<0.001)。结论中期妊娠高危人群子宫动脉血流与HDCP的发生有显著的相关性,子宫动脉血流监测可做为早期预测HDCP的客观指标之一。     

妊娠期高血压疾病患者血浆Pro BNP水平及其临床意义

目的 观察妊娠期高血压疾病患者Pro BNP水平及临床意义。方法 选择在我院行剖宫产术的妊娠期高血压疾病患者89例为HDCP组,包括妊娠高血压24例,轻度子痫前期21例,重度子痫前期44例;同期在我院行剖宫产术的妊娠晚期健康妇女88例为对照组,采用电化学发光法检测各组Pro BNP并对比。结果 HDCP组Pro BNP为（844.02±788.74）pg/ml,显著高于对照组的（142.90±187.20）pg/ml,差异有统计学意义（P＜0.05）。与对照组相比,轻度子痫前期组和重度子痫前期组Pro BNP均显著增高,差异有统计学意义（P＜0.05）。与妊娠高血压组相比,轻度子痫前期组和重度子痫前期组Pro BNP显著增高,差异有统计学意义（P＜0.05）。重度子痫前期组Pro BNP显著高于轻度子痫前期组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 妊娠期高血压疾病患者血浆Pro BNP水平高于妊娠晚期健康妇女,检测妊娠期高血压疾病患者血浆Pro BNP水平可及时了解早期心肌细胞损害及心脏功能情况,对了解病情、观察疗效和预后判断具有重要价值。     

妊娠期高血压疾病患者孕中期血管内皮功能变化

目的探讨妊娠期高血压疾病患者在孕中期临床发病前的血管内皮功能的变化。方法对340例孕中期孕妇用超声行肱动脉血流介导的舒张功能（FMD）,血清内皮素（ET）、一氧化氮（NO）测定,并根据其随访的妊娠结局分为妊娠期高血压疾病组（妊高征组）和正常组,比较两组的FMD,ET,NO结果。结果 340例中有41例孕晚期发生妊娠期高血压疾病（妊高征组）,而其余299例未发生妊娠期高血压疾病（正常组）。孕中期妊高征组FMD、血清NO显著低于正常组,而血清ET显著高于正常组,差异均有显著性（P〈0.05）。在妊高征组内,重度子痫前期组FMD、血清NO显著低于轻度子痫前期组,而血清ET显著高于轻度子痫前期,差异有显著性（P〈0.05）。结论孕中期妊娠期高血压疾病潜在患者虽然血压正常,但已存在血管内皮损伤,可被超声、实验室等检出。     

血清CysC、Hcy、及β-HCG检测与妊娠期高血压疾病的相关性研究

目的探讨孕妇血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cystatin C）、同型半胱氨酸（Hcy）、及β-HCG联合检测与妊娠期高血压疾病的相关性。方法选择健康晚孕妇女60例及妊娠期高血压疾病（hypertensive disorder complicating preg-nancy,HDCP）患者肾病组18例和妊娠期高血压疾病患者无肾病组35例,对其血清分别进行Cys C、Hcy、β-HCG的检测。结果妊娠期高血压疾病肾病组血清Cys C、Hcy水平明显高于无肾病组（P〈0.01）,两组均明显高于健康晚孕组（P〈0.01）;妊娠期高血压疾病肾病组及无肾病组β-HCG水平无明显差别（P〉0.05）,与健康晚孕组比较结果有统计学意义（P〈0.05）。结论血清Cys C、Hcy与β-HCG联合检测对了解妊娠期高血压疾病的病情具有重要意义。Cys C及Hcy与β-HCG比较在反映HDCP患者的肾损害及肾功能恢复方面更敏感,是反映HDCP病情及预后的良好指标。联合检测可作为了解HDCP的发生、发展及预后判断的指标。     

1021例体外受精-胚胎移植妊娠结局

目的探讨辅助生殖技术（assisted reproductive technology，ART）后的妊娠结局。方法对1021例通过ART获得的临床妊娠者，通过直接询问或电话随访对其妊娠结局进行回顾性分析。结果1021例妊娠者中，分娩838例（82．08％），单胎642例（76．61％），多胎196例（23．39％），流产132例（12．93％），异位妊娠41例（4．02％），分娩情况失随访10例（0．98％），畸形儿10例（1．19％），分娩男婴540个、女婴495个，新鲜胚胎移植后早期流产率为10．76％，明显高于冻融胚胎移植（FET）后的5．08％（P〈0．01），多胎的早产率、剖宫产率、低体重儿发生率均明显高于单胎（P〈0．01）。结论重视ART技术带来的多胎、早产、流产及异位妊娠等并发症．密切关注ART后代的出生缺陷。     

妊娠期高血压疾病与血钙水平的相关性研究

目的探讨妊娠期高血压疾病与母体血清钙水平的关系。方法检测102例妊娠期高血压疾病患者产前外周血清钙含量,将100例正常晚期妊娠妇女及100例非妊娠健康妇女作为对照组进行比较。结果妊娠期高血压疾病组低钙例数为89例,占87.25%,与妊娠对照组及非妊娠对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。妊娠对照组的血钙水平为（2.14±0.30）mmol/L,与非妊娠对照组相比降低,但差异无统计学意义（P〉0.05）;而妊娠期高血压疾病组的血钙水平为（1.87±0.28）mmol/L,与妊娠对照组及非妊娠对照组相比显著降低,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论母体血清钙含量降低可能在妊娠期高血压疾病病理生理变化中起重要作用,在监测血钙水平的同时,可进行有针对性的钙剂治疗。     

早产对早产儿的影响

目的探讨早产对早产儿的影响.方法回顾性分析570例早产的主要高危因素,将其分为阴式分娩组和剖宫产组,对不同原因所致早产儿的预后作分析比较.结果胎膜早破、多胎妊娠及妊高征是引起早产的主要因素;胎龄小死亡率明显增高,特别是胎龄＜32w者;剖宫产组和阴式分娩组中早产儿的存活率及发病率(尤其是颅内出血)有显著性差异(P＜0.05).结论早产是新生儿发病和死亡的主要原因,窒息及颅内出血是早产儿死亡的主要原因,早产不是剖宫产的禁忌证.